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胆道生态系统：全局视角下的胆道外科关键科学问题

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中华外科杂志 2025年第1期63卷 39-44页

作者：王向付静海军军医大学第三附属医院胆道二科上海海军军医大学国家肝癌科学中心上海

随着胆道外科现代诊疗体系的建立与科学研究范式的转变, 无论是良性还是恶性胆道疾病, 均已进入精准化、个体化、全程化及多学科协作的诊疗和研究阶段。然而胆道外科医师仍面临着两大困境:(1)外科技术在降低良性胆道疾病致残率、提高胆... 详细信息

随着胆道外科现代诊疗体系的建立与科学研究范式的转变, 无论是良性还是恶性胆道疾病, 均已进入精准化、个体化、全程化及多学科协作的诊疗和研究阶段。然而胆道外科医师仍面临着两大困境:(1)外科技术在降低良性胆道疾病致残率、提高胆道肿瘤患者生存率方面进入了瓶颈期;(2)对于"切胆保胆""如何减黄"等临床争议, 传统的临床研究似乎难以给出确切答案。借鉴系统生物学的理念, 作者提出了"胆道生态系统"的概念框架:胆管是丛林, 血管、淋巴管、神经和免疫系统是土壤, 干细胞是种子, 胆汁是河流, 肝细胞是河流的发源地。良恶性疾病具有动态转化的特征;不同部位的胆管构成"大"环境, 胆汁形成"小"环境, 不同细胞组成"微"环境;细胞亚群具有不同状态及多样性, 并受复杂分子信号网络的调控。作者据此进一步凝练了胆道外科的若干关键科学问题, 提出了优化研究范式的建议, 旨在从全局视角推动学科交叉融合, 推动胆道外科临床及转化研究。

关键词：胆道疾病胆道肿瘤胆道生态系统普通外科学范式转变多组学技术

苹果酸林格加温液体复苏改善严重创伤致死三联征的机制研究

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陆军军医大学学报 2025年

作者：吴银雨佘汉杜云霞张玉玺周孝伟李清晖李涛胡弋毛庆祥王亚玲陆军特色医学中心(第三军医大学大坪医院)麻醉科陆军特色医学中心(第三军医大学大坪医院)野战外科研究部战伤休克与输血研究室陆军特色医学中心(第三军医大学大坪医院)护理部

目的探讨苹果酸林格加温液体复苏改善严重创伤致死三联征的作用及机制。方法 SPF级SD大鼠216只，雌雄各半，体质量200～220 g。采用多发伤联合失血性休克构建严重创伤模型，以随机数字表法分为10组（n=8）：假手术（Sham）组，仅动静... 详细信息

目的探讨苹果酸林格加温液体复苏改善严重创伤致死三联征的作用及机制。方法 SPF级SD大鼠216只，雌雄各半，体质量200～220 g。采用多发伤联合失血性休克构建严重创伤模型，以随机数字表法分为10组（n=8）：假手术（Sham）组，仅动静脉置管。严重创伤（Trauma，Tra）不同时间点（10、30、60、90、120、180 min）组及严重创伤（Tra）组，于模型建立后不做任何处理放置180 min。苹果酸林格（malate ringer’s solution，MR）常温液体复苏（Tra180 min+MR）组，于创伤后60 min时使用医用加温输血输液器常温输注苹果酸林格液进行液体复苏。苹果酸林格加温液体复苏（Tra180 min+MR+37 ℃）组，于创伤后60 min时使用医用加温输血输液器37 ℃加温输注苹果酸林格液进行液体复苏。血栓弹力图检测各组大鼠活化凝血时间（activated clotting time，ACT）、凝血反应时间（reaction time，R）、血栓最大振幅（maximum amplitude，MA）和血凝块形成速度（angle，Angle）指标变化，尾部出血实验检测尾部出血时间，颈动脉植入温度探头持续监测核心体温变化，抽取腹主动脉血检测动脉血气变化和血浆血管性血友病因子（von Willebrand Factor，vWF）浓度变化，提取肺静脉血管总蛋白检测血管内皮钙黏蛋白（vascular endothelial cadherin，VE-Cadherin）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α?（peroxisome proliferator activating receptor gamma coactivator 1α?，PGC1α）、线粒体磷酸化动力相关蛋白1（phospho-dynamin-related protein 1，p-Drp1）、线粒体动力相关蛋白1（dynamin-related protein 1，Drp1）及线粒体融合蛋白（mitofusin 2，Mfn2）蛋白的表达变化，检测肺静脉内皮线粒体呼吸控制率变化。结果与Sham组比较，Tra180 min组大鼠ACT值和R值延长（P＜0.05），MA值和Angle值缩短（P＜0.05），且尾部出血时间延长（P＜0.05）。Tra180 min组大鼠二氧化碳分压( partial pressure of carbon dioxide，PCO2)、HCO3-、剩余碱（ base excess，BE）仍显著低于Sham组（P＜0.05），K+持续升高（P＜0.05），Na+持续下降（P＜0.05），Ca2+显著降低（P＜0.05）。此外，与Sham组比较，Tra180 min组大鼠血浆vWF水平显著降低（P＜0.05），肺静脉内皮VE-Cadherin、PGC1α、Mfn2蛋白表达量显著降低（P＜0.05），p-Drp1蛋白表达量显著升高（P＜0.05），肺静脉内皮线粒体呼吸控制率显著下降（P＜0.05）。给予苹果酸林格液体复苏，与Tra180 min组比较，Tra180 min+MR组和Tra180 min+MR+37 ℃组均能缩短大鼠尾部出血时间（P＜0.05），升高核心体温（P＜0.05）和血浆vWF水平（P＜0.05），肺静脉内皮VE-Cadherin、PGC1α、Mfn2蛋白表达量显著升高（P＜0.05），p-Drp1蛋白表达量显著降低（P＜0.05），且与Tra180 min+MR组相比，Tra180 min+MR+37 ℃组效果更显著。结论苹果酸林格液加温液体复苏可明显改善严重创伤大鼠致死三联征，推测其机制可能与改善血管内皮细胞线粒体功能减轻血管内皮损伤有关。

关键词：创伤苹果酸林格液加温液体复苏致死三联征血管内皮细胞

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菟丝子有效部位筛选与抗乳腺癌作用机制研究

海南医学院学报 2025年

作者：宋辉王玉涵黄晓俏孙向明郎朗单文猜汤静于蕾汲晨锋哈尔滨商业大学药学院(药物工程技术研究中心) 抗肿瘤天然药物教育部工程研究中心

目的：探讨菟丝子抗乳腺癌的有效部位，研究其作用机制。方法：采用不同极性的有机溶剂提取菟丝子，并在药效指导下进行抗肿瘤有效部位筛选。采用噻唑蓝（MTT）比色法检测菟丝子不同提取部位对5种肿瘤细胞株增殖的影响，筛选最佳提取部... 详细信息

目的：探讨菟丝子抗乳腺癌的有效部位，研究其作用机制。方法：采用不同极性的有机溶剂提取菟丝子，并在药效指导下进行抗肿瘤有效部位筛选。采用噻唑蓝（MTT）比色法检测菟丝子不同提取部位对5种肿瘤细胞株增殖的影响，筛选最佳提取部位以及肿瘤敏感株；倒置显微镜观察、划痕实验、Transwell实验、Annexin V-FITC/PI双染法分别检测菟丝子95%醇提物对MCF-7细胞形态变化、迁移、侵袭及凋亡的影响；Western blotting检测MCF-7细胞内PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果：菟丝子各提取部位均能抑制MCF-7、SGC-7901、HepG-2、Hela和A549细胞增殖。其中，菟丝子氯仿、95%乙醇提取部位对MCF-7细胞株增殖抑制效果优于其他部位，半数抑制浓度(IC50)分别为14.3、738.0 μg/mL。菟丝子95%醇提物400、800、1 200 μg/mL作用于MCF-7后，与空白对照组相比，细胞变圆、固缩，细胞团内相邻细胞间隙加大，迁移和侵袭能力逐渐减弱、细胞凋亡率升高（P细胞内p-PI3K、p-AKT、Bcl-2蛋白表达，上调Bax蛋白，升高Bax/Bcl-2比值（P细胞增殖均有抑制作用，其中，菟丝子氯仿、95%醇提物对MCF-7细胞增值抑制效果较好；菟丝子95%醇提物抗乳腺癌作用机制可能与调控PI3K/AKT通路，调控下游Bcl-2、Bax蛋白表达，参与线粒体凋亡途径有关。

关键词：菟丝子乳腺癌 PI3K/AKT信号通路细胞凋亡

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不同胚层来源成体干细胞修复周围神经损伤

中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4102-4110页

作者：郑家晨杨恩同朱弈舟刘芳海军军医大学基础医学院上海市200433 海军军医大学人体解剖学教研室上海市200433

背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一。中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能。而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研... 详细信息

背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一。中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能。而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研究人员的关注。目的:对来自外胚层和中胚层的多功能成体干细胞在周围神经损伤修复与再生中的作用及机制进行简要综述,探究不同来源成体干细胞的研究进展与应用前景,并结合临床研究,探讨成体干细胞疗法潜在的应用价值以及亟待解决的问题。方法:第一作者于2024年2月应用计算机在PubMed和SinoMed数据库检索2001年12月至2024年2月相关文献,以“ectodermal stem cells,mesenchymal stem cells,peripheral nerve injury,repair,regeneration”为英文检索词,以“外胚层干细胞、间充质干细胞、周围神经损伤、修复、再生”为中文检索词,最终纳入69篇文献进行分析论述。结果与结论:①外胚层来源成体干细胞具有优异的分化和再生潜能,尤其是毛囊神经嵴干细胞、嗅干细胞、牙外胚层干细胞等,具有神经源性,可在体外表达神经特异性标志物,但目前缺少临床试验研究。②中胚层来源成体干细胞种类多、易获得及纯化,其中骨髓间充质干细胞和脐带间充质干细胞在周围神经损伤修复的应用疗效及安全性方面有相关临床试验支持,能改善感觉及运动神经传导,且在随访中未出现并发症和明显不良反应。骨髓间充质干细胞的获取需行侵入性外科手术且要求患者与捐赠者骨髓配型吻合,应用受到一定限制;而脐带间充质干细胞虽无需侵入性获取,但分离较困难且表型不稳定。③内胚层来源成体干细胞常难以在体外生长,应用受限,目前应用于临床的可能性低。④综合来看,骨髓间充质干细胞仍为周围神经损伤干细胞治疗的首选细胞,适用于无外科手术禁忌且符合配型要求的情况,其次为脐带间充质干细胞,辅以分离方法的改进和表型稳定性的提高策略。⑤牙外胚层干细胞以及脂肪间充质干细胞具有较高应用潜能,有待进一步临床试验,其他外胚层、中胚层来源成体干细胞各以其优异特性在动物及细胞实验研究中具有显著优势。

关键词：成体干细胞周围神经损伤毛囊神经嵴干细胞嗅干细胞牙外胚层干细胞骨髓间充质干细胞脐带间充质干细胞羊水间充质干细胞皮肤干细胞肌肉间充质干细胞

胃印戒细胞癌的H3K27me3沉默子重塑特征及转录调控功能

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陆军军医大学学报 2025年

作者：杜艾贝任原锋储召乐刘碧颖李先锋向俊宇陈东风王涛王斌郭海英张璇李玉红陆军军医大学基础医学院细胞生物学教研室陆军特色医学中心(第三军医大学大坪医院)消化内科消化系统肿瘤精准防治重庆市重点实验室重庆市中医院肿瘤科

目的本研究旨在通过表观遗传组学技术，解析胃印戒细胞癌（Signet-Ring Cell Carcinoma of the stomach，SRCC）的H3K27me3沉默子的全基因组特征及其对基因转录的调控作用，以阐明SRCC恶性进展的表观调控机制。方法本研究收集2021年1... 详细信息

目的本研究旨在通过表观遗传组学技术，解析胃印戒细胞癌（Signet-Ring Cell Carcinoma of the stomach，SRCC）的H3K27me3沉默子的全基因组特征及其对基因转录的调控作用，以阐明SRCC恶性进展的表观调控机制。方法本研究收集2021年1月至2023年12月期间就诊于陆军特色医学中心消化内科患者内镜下获得的15例正常胃窦/胃体样本和20例SRCC样本，进行染色质可及性测序（Assay for Transposase-Accessible Chromatin with high-throughput Sequencing，ATAC-seq），H3K27me3沉默子的染色质靶向捕获测序（Cleavage Under Targets and Tagmentation，CUT&Tag）以及RNA测序，并联合分析。筛选受沉默子调控的候选差异表达基因，利用GO和KEGG分析其潜在肿瘤生物学功能。富集SRCC特征性沉默子的关键转录因子调控基序，构建转录因子调控网络，探讨其调控机制。结果 SRCC沉默子主要分布于基因组远端基因间区（占37.06%）。与正常组织相比，SRCC中H3K27me3沉默子信号显著降低（P＜0.01），共鉴定出6 257个丢失位点。CUT&Tag和RNA-seq整合分析显示，380个因沉默子丢失而上调的基因显著富集于免疫相关通路，如T细胞受体信号通路（P＜0.01）。免疫组化验证表明转录因子EHF表达显著升高（P＜0.05）。结论本研究揭示SRCC中H3K27me3沉默子的重塑现象及其转录调控关键作用，为SRCC的防治提供了干预新思路。

关键词：胃印戒细胞癌表观遗传组蛋白修饰沉默子

结核分枝杆菌c-di-AMP磷酸二酯酶的重组腺病毒的构建及其诱导的体液免疫应答

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中国人兽共患病学报 2025年

作者：胡家豪宁唤唤董梦娟路延之代婷张从玥徐子晴王姝予周正言柏银兰空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学基础医学院学员队空军军医大学军事医学创新中心宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系延安大学生命科学学院

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达... 详细信息

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达。重组pcADV-CnpB与骨架质粒共转染HEK293T细胞包装获得重组腺病毒rAd-CnpB，以HEK293T细胞扩增rAd-CnpB，Westernblot和免疫荧光检测rAd-CnpB表达目的蛋白。以rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，收集小鼠血清与肺泡灌洗液（BALF），ELISA检测抗原特异性抗体水平。结果酶切和测序鉴定表明重组质粒pcADV-CnpB构建成功，该质粒能够在真核细胞中表达。在HEK293T细胞内包装并获得rAd-CnpB，大量扩增并纯化获得滴度为5.53×1010PFU/mL的rAd-CnpB。rAd-CnpB可在HEK293T细胞中表达目的蛋白CnpB。rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，可诱导BALF中CnpB特异性IgG与分泌型IgA水平的增加，同时诱导血清中产生高水平的CnpB特异性IgG。结论成功构建表达Mtb c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒rAd-CnpB，并且rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导抗原特异性体液免疫与黏膜免疫应答，可用于结核病新疫苗策略的研究。

关键词：结核分枝杆菌重组腺病毒 c-di-AMP 磷酸二酯酶黏膜免疫

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系统医学生物学在生物医学领域的交叉与融合

中国药学杂志 2013年第23期48卷 1977-1980页

作者：郭婷唐娟边惠洁陈志南第四军医大学细胞工程研究中心西安710032

目的系统医学生物学以系统、整体、相互联系以及发展的观点看待人体,笔者将探讨该学科在生物医学领域的交叉与融合。方法采用全景式分析方法,将不同层次的实验数据结合起来,以探索人体健康各个层次之间的关系。结果医学系统生物学发展迅... 详细信息

目的系统医学生物学以系统、整体、相互联系以及发展的观点看待人体,笔者将探讨该学科在生物医学领域的交叉与融合。方法采用全景式分析方法,将不同层次的实验数据结合起来,以探索人体健康各个层次之间的关系。结果医学系统生物学发展迅速,已成为生物领域中交叉与融合的一门新型学科,在医学细胞生物学、医学分子生物学、医学免疫生物学、医学生物信息学和转化医学等领域都取得快速的进展。结论开展系统医学生物学研究和实践,可更好地为人类健康服务,具有重要的现实和应用意义。

关键词：系统医学生物学医学细胞生物学医学分子生物学医学免疫生物学生物信息学转化医学

Ca^(2+)信号对肝癌细胞基质金属蛋白酶分泌与活化的影响

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中华肿瘤杂志 2004年第9期26卷 525-527页

作者：蒋建利姚西英周筠黄勇陈志南第四军医大学细胞工程研究中心西安710032

目的　探讨Ca2 + 信号调节对肝癌细胞基质金属蛋白酶 (MMPs)分泌与活化的影响。方法　在体外人SMMC 772 1肝癌细胞培养体系中 ,引入Ca2 + 及其激动剂和抑制剂。应用SDS 聚丙烯酰胺 (SDS PAGE)蛋白电泳和明胶酶谱电泳分析方法 ,观察肝癌... 详细信息

目的　探讨Ca2 + 信号调节对肝癌细胞基质金属蛋白酶 (MMPs)分泌与活化的影响。方法　在体外人SMMC 772 1肝癌细胞培养体系中 ,引入Ca2 + 及其激动剂和抑制剂。应用SDS 聚丙烯酰胺 (SDS PAGE)蛋白电泳和明胶酶谱电泳分析方法 ,观察肝癌细胞培养上清中MMPs的分泌与活化水平的变化。结果　人SMMC 772 1肝癌细胞MMP 2和MMP 9的分泌和活化随着培养体系中Ca2 + 浓度升高而升高 ,在 0 .8mmol/LCa2 + 浓度时 ,达稳定水平 ,其中以MMP 2的分泌和活化最明显 ,较 0mmol/LCa2 + 组升高 (10 9.71± 2 7.93) % (P 细胞分泌蛋白经电泳鉴定结果提示主要为MMPs。细胞内Ca2 + 库释放诱导剂毒胡萝卜内酯 (Tg ,4 μmol/L)可明显诱导MMP 2和MMP 9的分泌和活化 ,MMPs的分泌和活化总量较对照组升高 (5 8.6 3± 31.0 4 ) % (P 细胞内Ca2 +

关键词：肝癌细胞酶分泌 MMP-2 细胞内Ca^2+ 升高基质金属蛋白酶 SMMC-7721 培养体系电泳分析 SDS-PAGE

HAb18G/CD147拮抗肽的筛选及对肝癌细胞侵袭力的抑制

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中华肿瘤杂志 2003年第2期25卷 111-114页

作者：黄宝成商澎骞爱荣王贤辉施光华陈志南第四军医大学细胞工程研究中心西安710032

目的　筛选能与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,从中寻找该因子的肽类拮抗剂 ,抑制肝癌的恶性转移。方法　利用亲和层析法获得HAb18G/CD14 7抗原 ,在此基础上通过筛选噬菌体 12肽库得到与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,以固相法合成这些多肽... 详细信息

目的　筛选能与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,从中寻找该因子的肽类拮抗剂 ,抑制肝癌的恶性转移。方法　利用亲和层析法获得HAb18G/CD14 7抗原 ,在此基础上通过筛选噬菌体 12肽库得到与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,以固相法合成这些多肽并用质谱仪进行鉴定。最后利用侵袭力抑制实验从中筛选拮抗肝癌细胞转移的功能多肽。结果　经纯化的HAb18G/CD14 7分子量为6 5 0 0 0 ,Westernblot验证结果阳性。用此纯化分子筛选噬菌体肽库 ,得到 9条多肽。经体外功能验证 ,9条肽抑制肝癌细胞侵袭力的活性不一 ,其中 3条有显著活性 (P 细胞数量较对照减少 90 .1%。结论　以亲和层析法和噬菌体随机肽库法相结合 ,筛选获得了有抗肝癌细胞侵袭力功能的多肽 ,此结果为抗肝癌转移肽类药物的研制奠定了基础。

关键词：肝癌肿瘤转移抑制 HAbl8G/CD147拮抗肽亲和层析法噬菌体随机肽库法