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EphA2、EphrinA1表达与脑胶质瘤恶性表型的关系

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中华神经医学杂志 2011年第3期10卷 217-222页

作者：李侠王莉李兵林伟张丽甄海宁胡世颉章翔费舟第四军医大学第一附属医院神经外科西安710032 第四军医大学第一附属医院药剂科西安710032

目的探讨酪氨酸激酶受体EphA2和其配体EphrinAl表达与脑胶质瘤恶性表型的关系，为发现恶性脑胶质瘤治疗新靶点提供理论依据。方法构建针对EphA2的RNAi载体pSilencer－EphA2－SR质粒并转染U251、U87和SHG44细胞，应用Westem blotting... 详细信息

目的探讨酪氨酸激酶受体EphA2和其配体EphrinAl表达与脑胶质瘤恶性表型的关系，为发现恶性脑胶质瘤治疗新靶点提供理论依据。方法构建针对EphA2的RNAi载体pSilencer－EphA2－SR质粒并转染U251、U87和SHG44细胞，应用Westem blotting检测转染后细胞EphA2、EphrinAl的表达，MTT法和软琼脂克隆形成实验检测细胞增殖能力的变化，体外侵袭实验和流式细胞仪分别检测细胞侵袭和凋亡的变化；建立U251、U87和SHG44细胞的裸鼠胶质瘤移植模型，分别于瘤内注射脂质体＋pSilencer空载体或脂质体＋pSilencer-EphA2－SR质粒，30d后比较移植瘤的平均体积和质量，免疫组化染色检测移植瘤组织EphA2和EphrinAl的表达。结果成功构建EphA2 RNAi载体pSilencer－EphA2－SR质粒。转染pSilencer－EphA2－SR后48h Western blotting结果显示3种细胞EphA2表达水平均降低，而EphrinAl表达水平升高；MTT、软琼脂克隆形成实验、体外侵袭实验结果显示3种细胞的4值、克隆形成率、侵袭率均低于转染pSilencer空载体者。差异有统计学意义（P＜0．05）；而流式细胞仪检测显示3种细胞的凋亡率均高于转染pSilencer空载体者，差异有统计学意义（P＜0．05）。瘤内注射脂质体＋pSilencer—EphA2－SR质粒后移植瘤的体积和重量均低于注射脂质体＋pSilencer空载体者，差异有统计学意义（P＜0．05）。免疫组化染色显示瘤内注射脂质体＋pSilencer-EphA2－SR质粒后EphA2表达降低，EphrinAl表达水平升高，瘤内注射脂质体＋pSilencer空载体后二者的表达无明显变化。结论 EphA2、EphrinAl是脑胶质瘤恶性表型的重要调控分子，干扰EphA2分子可显著上调EphrinAl表达、部分逆转胶质瘤细胞恶性表型，提示EphA2、EphrinAl有望成为脑胶质瘤治疗新靶点。

关键词：神经胶质瘤细胞凋亡侵袭性 EphA2 EphrinA1

肠内营养联合合生元制剂预防危重症病人呼吸机相关肺炎的前瞻性随机对照研究

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肠外与肠内营养 2019年第3期26卷 150-155页

作者：孙丽娟赵长海第四军医大学第一附属医院营养科

目的:观察肠内营养联合合生元制剂对危重症病人呼吸机相关性肺炎(VAP)的预防效果。方法:本试验为前瞻、随机、对照、单盲研究,将符合入组条件的行机械通气的病人共121 例纳入研究,共计86 例病人完成试验,其中试验组45 例,对照组41 例。... 详细信息

目的:观察肠内营养联合合生元制剂对危重症病人呼吸机相关性肺炎(VAP)的预防效果。方法:本试验为前瞻、随机、对照、单盲研究,将符合入组条件的行机械通气的病人共121 例纳入研究,共计86 例病人完成试验,其中试验组45 例,对照组41 例。对照组给予均衡营养素,试验组在给予均衡营养素的基础上,另外添加经肠内补充益生菌与益生元联用的合生元制剂。比较两组病人VAP的发生率及营养指标、抗生素使用、ICU住院天数、机械通气时间等。结果:对照组与试验组VAP的发生率分别为56.1%和37.8%,试验组明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);前白蛋白、转铁蛋白及视黄醇结合蛋白在两组均有明显升高,但组间差异不显著;试验组的抗生素使用、ICU住院天数、机械通气时间明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:肠内营养联合合生元制剂能够显著降低危重症病人VAP的发生率,并能够改善病人的营养状况,减少机械通气时间、ICU住院天数和抗生素使用,具有临床推广使用的价值。

关键词：微生态制剂呼吸机相关性肺炎肠内营养

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一氧化氮合酶的若干研究进展

生物化学与生物物理进展 1996年第4期23卷 293-297页

作者：陈晋文孙长凯黄远桂第四军医大学西京医院

一氧化氮合酶（ＮＯＳ）是一氧化氮（ＮＯ）生物学与医学研究的重要内容近年来，对ＮＯＳ酶本质及其生化与分子生物学特性甚至某些分子遗传学方面的认识都在迅速发展和深化研究表明，干预ＮＯＳ－ＮＯ途径的某些环节，如酶激活、ＮＯ合... 详细信息

一氧化氮合酶（ＮＯＳ）是一氧化氮（ＮＯ）生物学与医学研究的重要内容近年来，对ＮＯＳ酶本质及其生化与分子生物学特性甚至某些分子遗传学方面的认识都在迅速发展和深化研究表明，干预ＮＯＳ－ＮＯ途径的某些环节，如酶激活、ＮＯ合成、释放与转运甚至有关酶的编码基因及其表达，将为某些临床问题的解决提供新的思路和手段．

关键词：一氧化氮合酶一氧化氮生物化学

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墨旱莲化学成分的研究

中国药学杂志 2002年第1期37卷 17-19页

作者：赵越平汤海峰蒋永培王忠壮易杨华雷其云第四军医大学西京医院药剂科陕西西安710032 第二军医大学药学院上海200433

目的　研究中药墨旱莲的化学成分。方法　采用硅胶柱色谱和HPLC进行分离 ,根据IR ,MS ,1H NMR ,13 C NMR等光谱技术和水解等方法鉴定化合物的结构。结果　鉴定了 4个化合物 ,分别为刺囊酸 (Ⅰ )、刺囊酸 3 O β D 吡喃葡萄糖醛酸甲酯... 详细信息

目的　研究中药墨旱莲的化学成分。方法　采用硅胶柱色谱和HPLC进行分离 ,根据IR ,MS ,1H NMR ,13 C NMR等光谱技术和水解等方法鉴定化合物的结构。结果　鉴定了 4个化合物 ,分别为刺囊酸 (Ⅰ )、刺囊酸 3 O β D 吡喃葡萄糖醛酸甲酯苷 (Ⅱ )、豆甾醇 3 O β D 吡喃葡萄糖苷 (Ⅲ )和槲皮素 (Ⅳ )。结论　Ⅱ为新化合物 ,命名为eclalbasaponinXⅢ。

关键词：墨旱莲 eclalbasaponinXⅢ 甾醇槲皮素中药化学成分

携载microRNA-140外泌体/海藻酸钠/胶原水凝胶修复关节软骨损伤

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中国组织工程研究 2025年第16期29卷 3326-3334页

作者：陈明伟余雯莉夏苏杭陈宾陈文忠李锋侦周宇司文腾郑州市骨科医院(河南大学附属郑州市骨科医院)关节病科Ⅰ 河南省郑州市450000 郑州大学第一附属医院静脉用药调配中心河南省郑州市450000

背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microR... 详细信息

背景:研究已证实,上调microRNA-140表达可部分抑制膝关节软骨组织与细胞的骨关节炎样改变,延缓骨关节炎进程,提示microRNA-140参与了骨关节炎的发病机制。目的:采用海藻酸钠/胶原水凝胶负载过表达microRNA-140的外泌体,进一步分析microRNA-140参与骨关节炎的相关机制。方法:利用慢病毒感染大鼠骨髓间充质干细胞使其过表达microRNA-140,随后分离提取外泌体,得到过表达microRNA-140的外泌体。制备负载外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。采用随机数字表法将32只SD大鼠随机分为4组,每组8只:正常对照组不进行任何处理,骨关节炎组、未转染外泌体组、转染外泌体组均通过膝关节腔内注射碘乙酸钠的方式建立骨关节炎模型,造模2周后,骨关节炎组膝关节腔内注射PBS,未转染外泌体组、转染外泌体组膝关节腔内分别注射负载未过表达microRNA-140与过表达microRNA-140外泌体的海藻酸钠/胶原水凝胶。造模后第6周,检测大鼠机械刺激缩足反应阈值、滑膜液炎症因子浓度、软骨相关基因表达、膝关节软骨组织的组织学变化与焦亡相关蛋白表达。结果与结论:①与正常对照组比较,骨关节炎组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均减少(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平增加(P<0.05),基质金属蛋白酶13、血小板反应蛋白解整合素金属肽酶5(ADAMTS5)mRNA表达增加(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18蛋白表达均增加(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1免疫荧光强度增强(P<0.05),软骨组织损伤严重。②与骨关节炎组比较,两外泌体组机械刺激缩足反应阈值、Ⅱ型胶原及SOX9 mRNA表达、Ⅱ型胶原免疫荧光强度均增加(P<0.05),滑膜液中促炎症因子水平减少(P<0.05),基质金属蛋白酶13 mRNA表达减少(P<0.05),NLRP3、ASC、GSDMD p30、caspase-1 p20、白细胞介素1β、白细胞介素18的蛋白表达均减少(P<0.05),GSDMD、cleaved caspase-1的免疫荧光强度减弱(P<0.05),软骨组织损伤减轻(P<0.05),并且转染外泌体组的作用更强。③结果表明,microRNA-140可通过抑制炎症、维持软骨稳态、抑制软骨焦亡来减轻骨关节炎大鼠的疼痛反应,降低软骨损伤,发挥骨关节炎治疗作用。

关键词：骨关节炎软骨损伤外泌体 microRNA-140 海藻酸钠/胶原水凝胶焦亡

代谢组学在中药治疗冠心病的药效物质及作用机制研究中的应用

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中国新药杂志 2015年第19期24卷 2197-2202页

作者：牟菲段佳林文爱东奚苗苗第四军医大学西京医院药剂科西安710032

代谢组学在中药药效物质及作用机制研究中具有独特优势,现已成为国内外研究的新热点。本文主要综述了近年来代谢组学技术在中药治疗冠心病的药效物质及作用机制研究中的应用,并对其存在的问题进行讨论与展望。

关键词：代谢组学中药冠心病药效物质作用机制

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不孕症子宫内膜类器官建立与验证

海军军医大学学报 2024年第10期45卷 1211-1217页

作者：陈美琪范淑盼陈缘静杨云云王卓海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院药剂科上海200433

目的构建非免疫因素致不孕症和免疫因素致不孕症子宫内膜类器官培养体系,并比较两者免疫细胞因子的差异。方法标本采自海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院生殖医学中心行宫腔镜检查的不孕症患者,获取非免疫因素致不孕症患者(n=3... 详细信息

目的构建非免疫因素致不孕症和免疫因素致不孕症子宫内膜类器官培养体系,并比较两者免疫细胞因子的差异。方法标本采自海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院生殖医学中心行宫腔镜检查的不孕症患者,获取非免疫因素致不孕症患者(n=3)与反复着床失败(RIF)患者(n=5)子宫内膜组织,通过洗涤、消化、重悬及接板,将组织嵌入基质胶中进行3D培养;在倒置显微镜下观察两组子宫内膜类器官生长情况;利用免疫荧光染色技术检测子宫内膜特异性标志物雌激素受体(ER)、角蛋白和上皮钙黏蛋白表达情况;利用ELISA法测定两组细胞因子水平,并比较两组细胞因子的差异。结果在子宫内膜类器官体外培养过程中,类器官体积逐渐增大、细胞数量逐渐增多,培养7~10 d的类器官体积达到稳定状态且形状逐渐趋于圆形。在相同时间内,非免疫因素致不孕症子宫内膜类器官数量较RIF子宫内膜类器官多。免疫荧光染色显示类器官中子宫内膜相关标志蛋白ER、角蛋白和上皮钙黏蛋白均表达,提示子宫内膜类器官构建成功。ELISA检测结果显示,两组间干扰素γ、IL-10、TNF-α、IL-4水平和TNF-α/IL-4比值的差异均有统计学意义(P0.05)。结论在体外成功培养获得了具有增殖能力的非免疫因素致不孕症与RIF子宫内膜类器官,为免疫性不孕症的基础研究提供了新模型。

关键词：子宫内膜类器官不孕症反复着床失败免疫细胞因子

阿莫西林克拉维酸钾分散片的人体生物等效性研究

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中国新药杂志 2014年第21期23卷 2530-2535页

作者：周伦杨静宋薇葛洁冯智军王茂湖宋颖文爱东第四军医大学西京医院药剂科西安710032

目的：研究阿莫西林克拉维酸钾分散片在健康人体的相对生物利用度,并与阿莫西林克拉维酸钾片比较,评价两者生物等效性。方法：20例健康男性志愿者随机交叉单剂量口服阿莫西林克拉维酸钾分散片（受试制剂）或阿莫西林克拉维酸钾片（参比... 详细信息

目的：研究阿莫西林克拉维酸钾分散片在健康人体的相对生物利用度,并与阿莫西林克拉维酸钾片比较,评价两者生物等效性。方法：20例健康男性志愿者随机交叉单剂量口服阿莫西林克拉维酸钾分散片（受试制剂）或阿莫西林克拉维酸钾片（参比制剂）625 mg后,采用液相色谱串联质谱法测定血浆中阿莫西林及克拉维酸钾的血药浓度,用Win Nonlin 6.2软件计算药动学参数,并评价生物等效性。结果：阿莫西林药动学参数为：Cmax为（8.95±1.55）和（8.52±1.94）μg·m L-1;Tmax为（1.11±0.36）和（1.36±0.51）h;t1/2为（1.55±0.44）和（1.41±0.29）h;AUC0~t为（19.43±3.18）和（20.12±3.93）μg·h·m L-1。克拉维酸钾药动学参数：Cmax为（3.14±0.39）和（3.14±0.55）μg·m L-1;Tmax为（1.41±0.59）和（1.43±0.68）h;t1/2为（1.23±0.31）和（1.23±0.37）h;AUC0~t为（7.14±1.62）和（7.34±1.45）μg·h·m L-1;阿莫西林克拉维酸钾分散片单次给药后的相对生物利用度为97.3%（阿莫西林）和96.6%（克拉维酸钾）。结论：阿莫西林克拉维酸钾分散片与阿莫西林克拉维酸钾片具人体生物等效性。

关键词：阿莫西林克拉维酸钾高效液相色谱串联质谱法生物等效性药动学

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国产与进口班布特罗片的人体生物等效性研究

中国新药杂志 2012年第23期21卷 2785-2789,2793页

作者：宋薇杨静周伦冯智军杨林鹿成韬宋颖文爱东第四军医大学西京医院药剂科西安710032

目的:研究国产班布特罗口腔崩解片在人体的相对生物利用度,并与进口片比较,评价两者生物等效性。方法:20例健康男性志愿者随机交叉单剂量口服国产盐酸班布特罗口腔崩解片(受试制剂)或进口盐酸班布特罗片(参比制剂)20 mg后,采用液相色谱... 详细信息

目的:研究国产班布特罗口腔崩解片在人体的相对生物利用度,并与进口片比较,评价两者生物等效性。方法:20例健康男性志愿者随机交叉单剂量口服国产盐酸班布特罗口腔崩解片(受试制剂)或进口盐酸班布特罗片(参比制剂)20 mg后,采用液相色谱串联质谱法测定血浆中班布特罗及其代谢产物特布他林的血药浓度,用DAS 2.0软件计算药代动力学参数,并评价其生物等效性。结果:受试制剂和参比制剂药代动力学参数为:Cmax(6.22±1.51)和(5.96±1.39)***-1;Tmax(2.52±0.72)和(2.70±0.86)h;t1/2(11.06±3.60)和(10.64±2.24)h;AUC0～72 h(56.69±16.82)和(52.86±14.57)***-1。特布他林药代动力学参数:Cmax(10.04±2.92)和(9.38±2.87)***-1;Tmax(4.35±1.04)和(4.60±1.14)h;t1/2(19.60±4.26)和(18.27±4.22)h;AUC0～72 h(199.60±68.89)和(179.55±50.18)***-1。国产盐酸班布特罗口腔崩解片单次给药后的相对生物利用度为(107.4±16.9)%(班布特罗),(110.9±18.6)%(特布他林)。结论:国产班布特罗口腔崩解片与进口班布特罗片在人体内生物等效。

关键词：班布特罗特布他林液-质联用生物等效性药代动力学