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肝细胞癌仑伐替尼耐药的分子机制

临床肝胆病杂志 2025年第12期40卷 2524-2530页

作者：姚晓萌孙可可林云凯汪慧董立巍陈磊胡和平海军军医大学第三附属医院肝胆内科上海 200438 海军军医大学第三附属医院国家肝癌科学中心上海 200438

肝细胞癌是肝脏最常见的恶性肿瘤，给中国乃至全球带来了严重的卫生负担。然而，大部分肝细胞癌患者就诊时已处于晚期阶段，手术机会较少，治疗选择有限。近年来，分子靶向治疗的进展为晚期肝细胞癌患者提供了新的希望。其中，仑伐替尼... 详细信息

肝细胞癌是肝脏最常见的恶性肿瘤，给中国乃至全球带来了严重的卫生负担。然而，大部分肝细胞癌患者就诊时已处于晚期阶段，手术机会较少，治疗选择有限。近年来，分子靶向治疗的进展为晚期肝细胞癌患者提供了新的希望。其中，仑伐替尼是美国食品药品监督管理局继索拉非尼之后批准的第二个用于晚期肝细胞癌治疗的一线药物，因其强大的抗肿瘤特性获得广泛关注。然而，仑伐替尼的疗效受到其耐药性的严重限制。本文主要针对仑伐替尼在肝细胞癌中耐药的分子机制研究进展进行综述，讨论可能改善仑伐替尼耐药的方法，以期能提高其疗效。

关键词：癌, 肝细胞仑伐替尼抗药性, 肿瘤

兔Perthes病模型的建立及VEGF表达的实验研究

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中国修复重建外科杂志 2008年第7期22卷 814-819页

作者：李伟范清宇马保安任民李航苟永胜钱济先第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所暨全军骨科中心西安710038 第四军医大学病理教研室

目的建立兔Perthes病模型并探讨Perthes病程中股骨头局部VEGF表达的变化及意义。方法3月龄新西兰大白兔24只,体重1.6～1.8kg。取16只兔作为实验组,手术切断左侧圆韧带和股骨头支持带血供,建立兔Perthes病模型;剩余8只作为对照组,按照上... 详细信息

目的建立兔Perthes病模型并探讨Perthes病程中股骨头局部VEGF表达的变化及意义。方法3月龄新西兰大白兔24只,体重1.6～1.8kg。取16只兔作为实验组,手术切断左侧圆韧带和股骨头支持带血供,建立兔Perthes病模型;剩余8只作为对照组,按照上述程序左侧股骨头进行手术,但不打开关节囊,保持股骨头正常血供。于术后1、2、4、8周分别处死动物,取出股骨头,行大体观察、X线片、组织学、VEGF免疫组织化学染色和VEGF mRNA原位杂交观察。结果实验组动物模型均制备成功,术后5d感染1例,退出实验。大体观察:对照组各时间点股骨头未见坏死改变;实验组股骨头随时间延长逐渐粗糙、失去光泽,变小,可见塌陷。X线片观察:术后1、2周,两组股骨头无明显差异;4、8周,实验组股骨头较对照组密度增高。对照组各时间点HE染色均未见股骨头坏死及修复改变;实验组术后4、8周可见血管及肉芽组织侵入,新骨形成,参与修复。免疫组织化学:对照组股骨头骺软骨中,肥大区表现出较高的VEGF免疫反应性(VEGF immunoreactivity,VEGF-IR),而增殖区VEGF-IR却表现较低水平。术后1周,实验组股骨头增殖区VEGF阳性细胞率开始高于对照组,实验组股骨头肥大区VEGF阳性细胞率明显减少。术后8周,实验组股骨头整个骺软骨区均表现VEGF-IR,增殖区VEGF阳性细胞率较对照组明显增加;坏死股骨头软骨内骨化中心修复重建,肥大区VEGF阳性细胞率较正常接近。术后1、2、4、8周,实验组骺软骨增殖区VEGF阳性细胞率与对照组比较均有统计学意义(P中心修复重建后,实验组可见新形成的肥大区重新表达VEGF mRNA。结论VEGF在坏死股骨头骺软骨促进血管发生、软骨内骨化中心的修复重建方面起关键的调节作用。

关键词： Perthes病动物模型 VEGF 兔

microRNA-192抑制物对骨肉瘤细胞系SOSP_9607增殖和凋亡的影响

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中国肿瘤临床 2010年第7期37卷 365-368页

作者：赵广义赵健李伟高杰杨彤涛裘秀春范清宇马保安第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所西安市710038

目的:探讨miR-192抑制物对于骨肉瘤细胞系SOSP_9607细胞增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡和周期。将SOSP_9607细胞分为对照组和实验组,对照组分为阴性对照和正常细胞对照组。实... 详细信息

目的:探讨miR-192抑制物对于骨肉瘤细胞系SOSP_9607细胞增殖和凋亡的影响。方法:四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡和周期。将SOSP_9607细胞分为对照组和实验组,对照组分为阴性对照和正常细胞对照组。实验组采用miR-192抑制物(hsa-miR-192inhibitors)抑制SOSP_9607细胞内miR-192的活性。结果:与对照组相比,实验组显著抑制SOSP_9607细胞的增殖,有明显的剂量依赖性(P<0.01)。随着浓度从50nmol/L逐渐增加至200nmol/L,抑制率逐渐增高(P<0.01)。与对照组相比,实验组细胞周期G_0/G_1细胞比例显著增加,G_2/M期细胞比例显著减少,S期细胞比例显著减少(P<0.01)。实验组凋亡率(13.6±2.1)%与阴性对照组凋亡率(7.1±0.5)%相比明显增高(P<0.01)。结论:miR-192抑制物通过抑制SOSP_9607细胞中miR-192的活性对SOSP_9607细胞的增殖和凋亡发挥重要作用,可能成为骨肉瘤生物治疗的新靶点。

关键词：骨肉瘤成骨肉瘤细胞系SOSP_9607 miRNA-192 细胞增殖细胞凋亡

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骨盆肿瘤的手术治疗

中华骨科杂志 2002年第8期22卷 482-487页

作者：范清宇马保安周勇张明华沈万安李钊第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所西安710038

目的回顾性总结骨盆肿瘤的外科治疗经验,重点介绍“原位分离+高温灭活”的保肢技术。方法自1992年1月～2000年3月共治疗骨盆肿瘤133例,其中外半骨盆截除术50例,内半骨盆切除后体外灭活再植或旷置术10例,高温灭活保肢术73例。高温灭活... 详细信息

目的回顾性总结骨盆肿瘤的外科治疗经验,重点介绍“原位分离+高温灭活”的保肢技术。方法自1992年1月～2000年3月共治疗骨盆肿瘤133例,其中外半骨盆截除术50例,内半骨盆切除后体外灭活再植或旷置术10例,高温灭活保肢术73例。高温灭活保肢组中IB期肿瘤21例,ⅡB期24例,ⅢB期2例,界限性或高度侵袭性肿瘤19例,另有Ewing肉瘤2例,转移癌5例。结果外半骨盆截除组多为晚期病变而无法单独切除者,截止至2000年3月最后随访时,除7例失访外,存活1～8年者22例,死亡21例。内半骨盆切除组存活7例,但并发症高,功能差。高温灭活保肢组中IB期或骨巨细胞瘤共40例均得到局部控制,ⅡB期控制率70.8％（17/24）,2例Ewing肉瘤得到局部和全身控制,ⅢB期或转移癌7例中2例无瘤存活两年以上。与目前常用的其它类型的保肢手术相比,髋关节功能优良率明显提高。结论除晚期肿瘤病例不得已施行半骨盆截除术外,对适宜的病例应用“原位分离+高温灭活”技术是治疗骨盆肿瘤的一种新的有效手段,值得继续使用及改进。

关键词：骨盆肿瘤手术治疗高温灭活原位分离保肢手术骨肿瘤

SOX9基因真核表达载体转染诱导BMSCs分化为类髓核细胞

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中国修复重建外科杂志 2010年第7期24卷 811-816页

作者：张琦钱济先文艳华裘秀春马保安范清宇第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所西安710038

目的椎间盘退行性变的生物学治疗方法是骨科学研究热点,寻找一种有效诱导BMSCs向椎间盘细胞分化的方法成为应用细胞移植治疗椎间盘退变的必要前提。探讨重组质粒pcDNA3.1IE-SOX9 Flag体外转染诱导兔BMSCs向类髓核细胞分化的影响。方法... 详细信息

目的椎间盘退行性变的生物学治疗方法是骨科学研究热点,寻找一种有效诱导BMSCs向椎间盘细胞分化的方法成为应用细胞移植治疗椎间盘退变的必要前提。探讨重组质粒pcDNA3.1IE-SOX9 Flag体外转染诱导兔BMSCs向类髓核细胞分化的影响。方法构建真核表达载体pcDNA3.1IE-SOX9 Flag。取1月龄新西兰大白兔骨髓分离培养BMSCs,体外诱导BMSCs向成骨细胞分化并鉴定;流式细胞仪检测细胞表面标记。将第3代BMSCs随机分为转染组、阴性对照组和空白对照组。转染组转染pcDNA3.1IE-SOX9Flag重组质粒,阴性对照组转染质粒pcDNA3.1,空白对照组不转染任何质粒。将构建好的重组质粒pcDNA3.1IE-SOX9Flag转染第3代BMSCs,72h后加入浓度为500mg/L的G418筛选7d后,改为浓度200mg/L的G418维持筛选压力并培养转染细胞。取各组BMSCs采用RT-PCR检测SOX9和Ⅱ型胶原基因(Col2al)的mRNA表达,Western blot检测SOX9蛋白的表达,免疫组织化学染色观察Ⅱ型胶原的表达。结果 BMSCs成骨诱导7d后ALP染色呈阳性;CD44表达阳性,CD34和CD45表达阴性。成功构建了真核表达载体pcDNA3.1IE-SOX9Flag。将重组质粒转染兔BMSCs,72h后转染效率为34.32%±1.75%;转染2周后BMSCs形态改变,呈多角形或椭圆形,细胞体积增大,增殖速度减缓,与椎间盘髓核细胞生长特点十分接近。RT-PCR鉴定发现转染组细胞SOX9 mRNA和Col2al mRNA表达阳性,对照组均为阴性。Westernblot检测发现转染组SOX9基因蛋白表达阳性,对照组未见表达。转染组BMSCs的Ⅱ型胶原免疫组织化学染色呈阳性。结论 SOX9基因真核表达载体成功转染兔BMSCs,被转染的干细胞向类髓核细胞分化,为进一步研究应用BMSCs移植治疗椎间盘退行性变奠定了理论基础。

关键词： BMSCs SOX9基因转染诱导分化髓核细胞椎间盘退行性变

siRNA干扰FoxM1基因表达对人骨肉瘤MG63细胞增殖与凋亡影响研究

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中华肿瘤防治杂志 2014年第20期21卷 1575-1579页

作者：颜世举肖春靳雷王鑫韩康马保安范清宇第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所陕西西安710038

目的通过抑制骨肉瘤细胞株MG63中FoxM1基因表达,观察对骨肉瘤细胞系增殖与凋亡的影响。方法采用蛋白质印迹法检测不同人骨肉瘤细胞株MG63和SOSP-9607中FoxM1基因的表达。将骨肉瘤细胞株MG63分为实验组、阴性对照组和空白对照组,实验组转... 详细信息

目的通过抑制骨肉瘤细胞株MG63中FoxM1基因表达,观察对骨肉瘤细胞系增殖与凋亡的影响。方法采用蛋白质印迹法检测不同人骨肉瘤细胞株MG63和SOSP-9607中FoxM1基因的表达。将骨肉瘤细胞株MG63分为实验组、阴性对照组和空白对照组,实验组转染FoxM1特异性siRNA(FoxM1-siRNA),阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不做处理。实时-聚合酶链反应(Real-time PCR)和蛋白质印迹法检测转染前后FoxM1基因在mRNA及蛋白表达水平的变化;四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖率,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果人骨肉瘤细胞株MG63和SOSP-9607中存在FoxM1基因的表达。实验组MG63细胞转染siRNA后,FoxM1的mRNA表达为0.39±0.09,低于阴性对照组的0.91±0.07,t=7.92,P<0.001;也低于空白对照组的0.96±0.08,t=8.68,P<0.001。实验组FoxM1蛋白表达为0.31±0.06,显著低于阴性对照组的0.81±0.10,t=7.20,P<0.001;也低于空白对照组的0.89±0.09,t=8.35,P<0.001。实验组MG63细胞增殖率为0.36±0.03,显著低于阴性对照组的0.61±0.02,t=12.86,P<0.001;也低于空白对照组的0.65±0.02,t=14.92,P<0.001。实验组MG63细胞凋亡率为(13.69±1.15)%,显著高于阴性对照组的(2.38±0.90)%,t=14.16,P<0.001;也高于空白对照组的(2.87±0.86)%,t=13.54,P<0.001。结论人骨肉瘤细胞株中存在FoxM1蛋白的表达;特异性siRNA可下调骨肉瘤细胞株MG63中FoxM1基因的表达,对细胞的增殖具有负性调控作用,并能诱导细胞凋亡。

关键词：骨肉瘤 FoxM1 RNA干扰细胞增殖细胞凋亡印迹法,蛋白质

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髋臼骨折的手术治疗

中国修复重建外科杂志 2006年第6期20卷 640-642页

作者：马保安张勇张杏泉郑联合杨彤涛陈军王育才邹宏恩唐农轩范清宇第四军医大学唐都医院全军骨肿瘤研究所西安710038

目的探讨髋臼骨折的手术适应证、手术入路、术后处理及并发症防治。方法1989年1月～2002年12月,分别采用Kocher-Langenbeck入路,髂腹股沟入路和Smith-Peterson入路,前或后入路,以及前后联合入路或扩大的髂股入路,手术治疗68例髋臼骨折... 详细信息

目的探讨髋臼骨折的手术适应证、手术入路、术后处理及并发症防治。方法1989年1月～2002年12月,分别采用Kocher-Langenbeck入路,髂腹股沟入路和Smith-Peterson入路,前或后入路,以及前后联合入路或扩大的髂股入路,手术治疗68例髋臼骨折患者。其中男51例,女17例,年龄15～65岁。车祸伤55例,高处坠落伤13例。急性损伤60例,陈旧性损伤8例。根据Letournel分类,后壁骨折16例,其中5例合并股骨头后脱位;后壁骨折+后柱骨折13例;前壁骨折+前柱骨折12例;双柱骨折8例;髋臼横形骨折19例。结果术中无神经、血管损伤,输血200～3500ml。术后伤口无感染,3例表皮坏死,经换药后治愈。51例获随访1～12年,平均3.9年。按照美国骨科学会评价标准,优26例(51.0%),良17例(33.3%),可6例(11.8%),差2例(3.9%),优良率为84.3%。术后发生异位骨化4例,2例分别于术后6个月和8个月发生股骨头坏死。结论有移位的髋臼骨折应尽早手术治疗,以恢复髋关节的稳定性、连续性及髋臼软骨面的光滑性,这对于髋关节功能恢复具有重要作用。

关键词：髋臼骨折手术修复

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骶骨肿瘤的综合治疗

中华骨科杂志 2002年第8期22卷 488-491页

作者：范清宇马保安周勇张明华沈万安李钊第四军医大学唐都医院全军骨科中心暨全军骨肿瘤研究所西安710038

目的介绍骶骨肿瘤的外科手术治疗,重点阐述高位骶骨肿瘤的治疗手段。方法自1992年1月～2000年3月共治疗骶骨肿瘤64例,骨巨细胞瘤、脊索瘤、神经源性肿瘤及转移癌为主要的诊断。对于低于S2的病变可安全地施行骰骨部分切除术;而对高于S... 详细信息

目的介绍骶骨肿瘤的外科手术治疗,重点阐述高位骶骨肿瘤的治疗手段。方法自1992年1月～2000年3月共治疗骶骨肿瘤64例,骨巨细胞瘤、脊索瘤、神经源性肿瘤及转移癌为主要的诊断。对于低于S2的病变可安全地施行骰骨部分切除术;而对高于S2甚至高达腰椎的骶骨病变则采取前后联合入路、直视下刮除及局部置管持续化疗的方法,滴注时间可持续1周。研究证明高浓度的铂类药物对马尾神经无可见的不良影响。结果4例良性肿瘤者单纯行摘除术均治愈。9例部分切除者中仅1例复发;51例高位骰骨肿瘤的局部控制率为76.5％,无严重而无法控制的并发症。结论前后联合入路、直视下刮除加局部高浓度化疗是高位骶骨肿瘤的有效治疗手段,多数患者可避兔创伤很大的全骶骨切除术。

关键词：骶骨肿瘤综合治疗手术疗法化学疗法放射疗法

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四肢骨巨细胞瘤合并病理性骨折的治疗进展

中华外科杂志 2025年第1期63卷 81-85页

作者：么文淏范道洋蒋协远刘巍峰首都医科大学附属北京积水潭医院骨肿瘤科国家骨科医学中心北京大学第四临床医学院北京北京积水潭骨科机器人工程研究中心有限公司北京

骨巨细胞瘤(GCTB)是一种常见的具有局部侵袭性的交界性原发骨肿瘤。GCTB合并病理性骨折的临床治疗十分困难, 常见手术方式为扩大刮除术和整块切除术, 核因子κB受体活化因子配体(RANKL)抑制剂和双膦酸盐等药物治疗也具有一定效果。对于C... 详细信息

骨巨细胞瘤(GCTB)是一种常见的具有局部侵袭性的交界性原发骨肿瘤。GCTB合并病理性骨折的临床治疗十分困难, 常见手术方式为扩大刮除术和整块切除术, 核因子κB受体活化因子配体(RANKL)抑制剂和双膦酸盐等药物治疗也具有一定效果。对于CampanacciⅡ级或仅限局部软组织侵犯的CampanacciⅢ级、骨结构完整的患者, 推荐行刮除术;广泛软组织侵犯的CampanacciⅢ级或骨结构不完整的复杂骨折, 可考虑行切除术;无法手术的患者或复杂骨折患者实施切除术前, 可使用RANKL抑制剂如地舒单抗进行治疗。本文总结了四肢GCTB合并病理性骨折的常见治疗方式, 分析了不同临床情况下手术方式的选择, 以期为临床提供诊疗思路。

关键词：巨细胞瘤, 骨骨折病理性骨折治疗四肢