检索结果-南通市图书馆

流式细胞术检测组蛋白乙酰化水平方法的建立与应用

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遗传 2016年第6期38卷 581-587页

作者：李建辉汪春付白帆庄严毛卓君孙永涛第四军医大学附属唐都医院传染科西安710038

组蛋白去乙酰化酶抑制剂是近年来出现的一类新的抗肿瘤药物,在艾滋病等其他疾病中同样也受到关注。但是在基础和临床研究中,目前还缺乏统一可靠的组蛋白乙酰化水平的检测手段。本文利用全血和外周血单个核细胞,通过一系列的对比实验,比... 详细信息

组蛋白去乙酰化酶抑制剂是近年来出现的一类新的抗肿瘤药物,在艾滋病等其他疾病中同样也受到关注。但是在基础和临床研究中,目前还缺乏统一可靠的组蛋白乙酰化水平的检测手段。本文利用全血和外周血单个核细胞,通过一系列的对比实验,比较了不同样品处理温度(冰上和室温)、破膜方法(细胞内因子染色破膜和核内因子染色破膜)、抗体剂量(抗体滴定)和抗体孵育时间(时间梯度)等实验条件对流式细胞术检测的影响,最终建立了一套基于流式细胞术的组蛋白乙酰化水平检测手段。同时,将优化后的流式细胞检测技术应用于西达本胺(目前国内唯一上市的组蛋白去乙酰化酶抑制剂)的体外实验和临床试验,结果均证明本文建立的组蛋白乙酰化流式细胞检测方法可以作为基础和临床研究中一个可靠、快速、便捷的检测手段。

关键词：流式细胞术组蛋白乙酰化组蛋白去乙酰化酶抑制剂

IL-27调控未经抗病毒治疗的HIV-1感染者CD8^+T淋巴细胞功能耗竭的研究

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中国艾滋病性病 2018年第5期24卷 432-435页

作者：魏乾奇庄严孙永涛第四军医大学唐都医院传染科

目的探究未经抗病毒治疗的艾滋病病毒1型（HIV-1）感染者CD8＋T淋巴细胞（简称CD8细胞）在白细胞介素27（IL-27）刺激下,表面受体及核内因子的变化情况,进一步理解IL-27在HIV-1感染中发挥的作用。方法分离得到22例符合条件的HIV-1感染者... 详细信息

目的探究未经抗病毒治疗的艾滋病病毒1型（HIV-1）感染者CD8＋T淋巴细胞（简称CD8细胞）在白细胞介素27（IL-27）刺激下,表面受体及核内因子的变化情况,进一步理解IL-27在HIV-1感染中发挥的作用。方法分离得到22例符合条件的HIV-1感染者CD8细胞,经CD3＋ CD28＋抗体刺激后,加或不加人重组IL-27蛋白,体外培养48小时后,通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应（real-time RT-PCR）检测WSX-1、Tbet,流式细胞学方法检测CTLA-4、PD-1、Tim-3的变化。结果 HIV-1感染者CD8细胞在体外培养2天后,与无IL-27培养组相比,IL-27刺激组CD8细胞WSX-1受体信使核糖核酸（mRNA）水平表达降低。同时在IL-27刺激组中,表达抑制性受体CTLA-4、PD-1、Tim-3的CD8细胞比例均明显增高,转录因子Tbet的mRNA表达量上升。结论 IL-27在HIV-1慢性感染中,会受自身的分泌影响而在CD8细胞中下调WSX-1的表达,存在着一定的负反馈机制。同时IL-27使CD8细胞表达与功能耗竭,相关的抑制性受体的细胞比例增多,参与调控CD8细胞功能耗竭。

关键词： 1型艾滋病病毒细胞因子 CD8+T淋巴细胞功能耗竭转录因子

miRNA影响HIV-1的复制和潜伏及相关治疗进展

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中国艾滋病性病 2018年第3期24卷 315-318页

作者：魏乾奇庄严孙永涛第四军医大学唐都医院传染科

微小核糖核酸（miRNA）在细胞内具有重要的转录后调控功能,经由一系列复杂的加工过程形成,并通过RNA沉默复合物调控信使核糖核酸（mRNA）的翻译。miRNA也能够通过调控关键的转录蛋白或直接与Ⅰ型艾滋病病毒（HIV-1）整合的基因结合,从... 详细信息

微小核糖核酸（miRNA）在细胞内具有重要的转录后调控功能,经由一系列复杂的加工过程形成,并通过RNA沉默复合物调控信使核糖核酸（mRNA）的翻译。miRNA也能够通过调控关键的转录蛋白或直接与Ⅰ型艾滋病病毒（HIV-1）整合的基因结合,从而调控HIV-1的感染。而利用miRNA进行HIV-1治疗也是当下研究的热门课题。文章主要从miRNA的产生及对HIV-1的复制和潜伏的影响和miRNA对HIV-1治疗进展进行了综述。

关键词： Ⅰ型艾滋病病毒微小核糖核酸病毒复制潜伏治疗

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细胞与分子免疫学杂志 2016年第11期32卷 1522-1526页

作者：郑煦暘叶传涛赵洁茹边培育张颖贾战生第四军医大学唐都医院传染科陕西西安710038

目的观察肾综合征出血热(HFRS)患者血浆外泌体(exosome)固有免疫相关长链非编码RNA(lncRNA)的含量变化情况及其与疾病发生发展的关系。方法提取并鉴定HFRS患者及健康对照者血浆外泌体,对其中的lncRNA进行高通量测序,找出具有足够丰度的... 详细信息

目的观察肾综合征出血热(HFRS)患者血浆外泌体(exosome)固有免疫相关长链非编码RNA(lncRNA)的含量变化情况及其与疾病发生发展的关系。方法提取并鉴定HFRS患者及健康对照者血浆外泌体,对其中的lncRNA进行高通量测序,找出具有足够丰度的固有免疫相关lncRNA,进行实时定量PCR鉴定,分析其与HFRS发生发展的关系。结果提取血浆外泌体;发现固有免疫相关lncRNA抗病毒应答负性调节因子(NRAV)、干扰素应答负性调节因子(NRIR)及核旁斑装配转录物1(NEAT1)在HFRS患者血浆外泌体中有一定丰度,其中NEAT1含量显著低于健康对照,但与疾病的进展无明显关系。结论HFRS患者血浆外泌体中含有多种固有免疫相关lncRNA,其中NEAT1含量降低与HFRS的发生显著相关。

关键词：肾综合征出血热外泌体(exosome) 长链非编码RNA(lncRNA) 核旁斑装配转录物1(NEAT1)

骨髓源性单核细胞向LPS脑炎小鼠中枢神经系统迁徙的实验研究

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神经解剖学杂志 2018年第3期34卷 290-296页

作者：王博文康文孙永涛第四军医大学唐都医院传染科西安710038

目的:研究小鼠骨髓源性单核细胞(bone marrow derived monocytes,BMDM)向细菌脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)脑炎小鼠中枢神经系统内迁徙的能力。方法:分离小鼠原代BMDM,用不同的超顺氧化铁(super paramagnetic iron oxide,SPIO)对其进行体外标记。5μg LPS脑内注射小鼠诱导急性炎症,24 h后尾静脉注射5×106BMDM。分别于注射后第2、5、7 d收取脑组织,免疫荧光染色检测脑内星形胶质细胞活化程度,检测体外标记的BMDM和GFP+BMDM在小鼠脑内的迁移变化,实时定量PCR检测BMDM在小鼠脑内的数量变化。结果:SHP30对BMDM体外标记效果最好,且以0.1 mg/ml的浓度标记2 h即可达到100%标记效率。LPS注射可以成功诱导小鼠产生急性脑炎,外源性BMDM可有效的向炎症形成部位聚集,且随着炎症消散而逐步消失。结论:小鼠原代BMDM可以有效的向LPS脑炎小鼠脑炎部位迁徙并聚集,且随炎症缓解而消散,因此BMDM有望成为治疗性药物的中枢神经系统运输工具。

关键词：骨髓源性单核细胞细菌脂多糖脑炎细胞治疗小鼠

γ链细胞因子对慢性乙型肝炎患者T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3表达调控的诱导机制

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临床肝胆病杂志 2021年第5期37卷 1059-1064页

作者：杨晓飞王临旭黄长形董杰胡海峰毕占虎连建奇张野空军军医大学第二附属医院(第四军医大学唐都医院)传染科西安710038

目的探讨γ链(γC)细胞因子对慢性乙型肝炎(CHB)患者CD8+T淋巴细胞中T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)表达调控的机制。方法选取2017年1月—5月在第四军医大学唐都医院就诊的CHB患者23例,采集外周血,利用Ficoll密度梯度离心法分... 详细信息

目的探讨γ链(γC)细胞因子对慢性乙型肝炎(CHB)患者CD8+T淋巴细胞中T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)表达调控的机制。方法选取2017年1月—5月在第四军医大学唐都医院就诊的CHB患者23例,采集外周血,利用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,分别使用IL-7、IL-15和IL-21刺激培养,同时向培养液中加入抗γC和/或抗IL-7Rα、抗IL-2Rβ、抗IL-21R。培养96 h后,流式细胞术检测CD8+T淋巴细胞中TIM-3表达水平以及IL-2、IL-10、IFNγ和相关磷酸化信号传导及转录激活蛋白(STAT)磷酸化水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果IL-7和IL-15刺激后,CD8+T淋巴细胞中TIM-3阳性细胞比例较无刺激组升高(t值分别为9.966、9.074,P值均<0.05),IL-2、IL-10、IFNγ水平以及STAT-5、pSTAT-1水平亦较无刺激组升高(P值均<0.05)。抗IL-7Rα+抗γC联合刺激后可降低IL-7刺激组TIM-3、IL-2和IL-10表达升高(t值分别为5.537、6.224和4.500,P值均<0.05)。抗IL-2Rβ单独刺激、抗IL-2Rβ+抗γC刺激均可降低IL-15刺激组的TIM-3、IL-2、pSTAT-1水平(P值均<0.05)。结论IL-7和IL-15可能主要通过γC受体介导的STAT-细胞因子信号通路上调CHB患者CD8+T淋巴细胞中TIM-3表达。

关键词：乙型肝炎,慢性细胞因子类 CD8阳性T淋巴细胞 T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3

肺部超声在甲型H7N9流感重症肺炎中的应用

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中华医学超声杂志（电子版） 2019年第1期16卷 72-76页

作者：杨勇王臻杜虹任嵘刘禧袁丽君段云友第四军医大学唐都医院超声诊断科西安710038 第四军医大学唐都医院传染科西安710038

人感染甲型H7N9流感是由新亚型H7N9禽流感病毒引起的急性呼吸道传染病。该病起病急、发展快、并发症严重、病死率高,其爆发流行已成为我国高度重视的一项公共卫生事件[1]。H7N9病毒侵袭呼吸道所致的重症肺炎和并发的急性呼吸窘迫综合征... 详细信息

人感染甲型H7N9流感是由新亚型H7N9禽流感病毒引起的急性呼吸道传染病。该病起病急、发展快、并发症严重、病死率高,其爆发流行已成为我国高度重视的一项公共卫生事件[1]。H7N9病毒侵袭呼吸道所致的重症肺炎和并发的急性呼吸窘迫综合征是患者死亡的主要原因。

关键词：禽流感病毒重症肺炎甲型急性呼吸道传染病急性呼吸窘迫综合征超声肺部公共卫生事件

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危重型日本斑点热1例

中华传染病杂志 2022年第2期40卷 108-110页

作者：王媛媛李孝锋张文静李瑞娟马春燕李璟康文王临旭黄长形连建奇张野空军军医大学(第四军医大学)唐都医院传染病科西安710038

日本斑点热是由日本立克次体感染、经蜱虫叮咬传播的一种自然疫源性疾病。本例患者表现为发热、皮疹、头痛、焦痂溃疡,病程中出现血小板急剧下降、凝血功能异常、低血压休克、急性呼吸窘迫综合征、肝肾功能损伤、意识障碍等严重并发症,... 详细信息

日本斑点热是由日本立克次体感染、经蜱虫叮咬传播的一种自然疫源性疾病。本例患者表现为发热、皮疹、头痛、焦痂溃疡,病程中出现血小板急剧下降、凝血功能异常、低血压休克、急性呼吸窘迫综合征、肝肾功能损伤、意识障碍等严重并发症,宏基因组学第二代测序检出日本立克次体,结合患者实验室检查和临床表现诊断为日本斑点热,经多西环素抗感染及对症支持治疗后好转。

关键词：斑点热群立克次体日本斑点热宏基因组学第二代测序

CCL28通过增强MMP-2活力促进滋养细胞浸润功能

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现代妇产科进展 2017年第5期26卷 337-341页

作者：康玲彭诗元秦源李梦苑尹国武朱晓明第四军医大学唐都医院妇产科西安710038 第四军医大学唐都医院传染科西安710038

目的:探究趋化因子CCL28对滋养细胞生物学行为的影响及其调控机制。方法:分离培养并鉴定原代人早孕蜕膜基质细胞(DSCs),ELISA法检测人DSCs与人正常绒毛膜滋养细胞系HTR8/Svneo的CCL28的分泌。采用噻唑兰(MTT)、Annexin V-FITC、Transwel... 详细信息

目的:探究趋化因子CCL28对滋养细胞生物学行为的影响及其调控机制。方法:分离培养并鉴定原代人早孕蜕膜基质细胞(DSCs),ELISA法检测人DSCs与人正常绒毛膜滋养细胞系HTR8/Svneo的CCL28的分泌。采用噻唑兰(MTT)、Annexin V-FITC、Transwell方法检测人工合成的CCL28对HTR8/Svneo细胞的增殖、凋亡及浸润能力的影响。RT-PCR及明胶酶谱法阐明HTR8/Svneo细胞浸润功能改变的机制。结果:HTR8/Svneo细胞与蜕膜基质细胞均能分泌CCL28,两者共培养能促进CCL28的分泌(P0.05)和凋亡(P>0.05),但能增强细胞的浸润能力(P<0.01),且主要通过受体CCR10介导。RT-PCR与明胶酶谱法提示,CCL28通过提高滋养细胞内MMP-2活力来增强其浸润能力。结论:CCL28通过与受体CCR10的结合,以自分泌或旁分泌的方式增强滋养细胞MMP-2活力来促进滋养细胞的浸润功能。

关键词： CCL28 滋养细胞蜕膜基质细胞浸润 MMP-2