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稳定同位素iTRAQ标记/高效液相色谱-串联质谱法同时定量分析人体中42种氨基酸及典型病例

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分析化学 2012年第5期40卷 762-767页

作者：李鹏飞王燕陶蓓蓓王静罗静张绪得安卓玲刘丽宏第二炮兵总医院药学部

建立稳定同位素iTRAQ标记/高效液相色谱-串联质谱法同时定量分析人体中42种氨基酸的方法。人生物样本经磺基水杨酸沉淀蛋白,稳定同位素iTRAQ-115衍生化后,加入iTRAQ-114同位素标记的氨基酸内标液进样,选用AAA-C18色谱柱,以水-乙腈(含有0... 详细信息

建立稳定同位素iTRAQ标记/高效液相色谱-串联质谱法同时定量分析人体中42种氨基酸的方法。人生物样本经磺基水杨酸沉淀蛋白,稳定同位素iTRAQ-115衍生化后,加入iTRAQ-114同位素标记的氨基酸内标液进样,选用AAA-C18色谱柱,以水-乙腈(含有0.01%七氟丁酸、0.1%甲酸)为流动相,采用梯度洗脱进行分离,选用3200QTRAP型质谱仪的多重反应监测(MRM)扫描方式进行检测。同位素内标消除了系统误差,实现了氨基酸的定量分析,42种氨基酸及同分异构体均能基线分离。本方法快速、灵敏、专属性强、高通量,可用于临床氨基酸代谢疾病的诊疗和营养评估。

关键词：高效液相色谱-串联质谱全谱氨基酸高通量定量稳定同位素标记

高效液相色谱-质谱联用法检测免疫抑制剂及其合并用药

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分析化学 2012年第10期40卷 1573-1578页

作者：李鹏飞王燕张征童卫杭吴华马萍王静刘丽宏北京朝阳医院药事部第二炮兵总医院药剂科

建立高效液相色谱-质谱联用法同时测定人血浆中免疫抑制剂及合并用药12种药物浓度的方法。选用Kromasil-C18色谱柱(50 mm×4.6 mm×5μm),以甲醇-乙腈-1 mmol/L乙酸铵溶液为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样本用甲醇沉淀蛋白后进样,流速:... 详细信息

建立高效液相色谱-质谱联用法同时测定人血浆中免疫抑制剂及合并用药12种药物浓度的方法。选用Kromasil-C18色谱柱(50 mm×4.6 mm×5μm),以甲醇-乙腈-1 mmol/L乙酸铵溶液为流动相,采用梯度洗脱进行分离,样本用甲醇沉淀蛋白后进样,流速:1.1 mL/min;柱温:35℃;进样量:20μL。选用3200QTrap型液相色谱-串联质谱仪的多反应监测(MRM)扫描方式进行检测。12种药物的线性范围为0.2～1000μg/L;定量下限为0.2μg/L。准确度与精密度结果显示方法日间、日内RSD均小于15%;相对偏差"13%～9.33%,稳定性较好。本方法快速、灵敏,专属性强、重现性好,可用于人体血浆中免疫抑制剂及其常用合并用药共12种药物浓度的测定。

关键词：高效液相色谱-质谱联用法免疫抑制剂联合用药

“微移植”治疗80岁以上老年急性髓系白血病4例临床分析

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中国实验血液学杂志 2015年第6期23卷 1679-1683页

作者：刘娟孙万军赵红霞李洁黄雅静郗晓琴胡海兰第二炮兵总医院血液科北京100088

目的:研究4例80岁以上急性髓系白血病(AML)患者接受米托蒽醌+阿糖胞苷(MA)方案化疗,并在化疗后输注亲缘HLA单倍体相合供者G-CSF动员的外周血造血干细胞(G-PBHSC)所组成的"微移植"治疗的疗效。方法:研究对象为2008年8月至2013年9月第二... 详细信息

目的:研究4例80岁以上急性髓系白血病(AML)患者接受米托蒽醌+阿糖胞苷(MA)方案化疗,并在化疗后输注亲缘HLA单倍体相合供者G-CSF动员的外周血造血干细胞(G-PBHSC)所组成的"微移植"治疗的疗效。方法:研究对象为2008年8月至2013年9月第二炮兵总医院血液科收治的4例80岁以上的初诊AML患者,其中男1例,女3例,中位年龄83(80-85)岁。首先给予患者MA方案化疗,在化疗结束后48 h输注亲缘HLA单倍体相合供者G-PBHSC,输注的单个核细胞(MNC)中位数为4.28×108/kg。不做移植物抗宿主病(GVHD)预防。在病情获得完全缓解(CR)后,不再进行化疗,仅给予G-PBHSC输注。结果:3例患者获得CR,无病生存时间分别为18、8、6个月;1例患者未缓解(NR)。4例患者总生存时间中位数为10(3-20)个月。所有患者未发生GVHD。结论:对于高龄老年AML病患者,"微移植"治疗是一个疗效较好、不良反应较少的新方法。

关键词：老年患者急性髓系白血病化疗外周血造血干细胞输注

神经营养因子3经受体切换促进大鼠脊髓损伤后神经功能的恢复

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中国组织工程研究 2025年第11期29卷 2268-2276页

作者：丛岩于健孙志德康大伟承德医学院附属医院急诊科河北省承德市067000

背景:神经营养因子是治疗脊髓损伤的新方法,调控自噬是其发挥作用的机制之一,但具体的信号通路尚不明确。目的:探讨神经营养因子3如何通过P75NTR/Trk C受体切换来调节少突胶质细胞的自噬以及促进脊髓损伤后神经功能恢复的作用,进一步明... 详细信息

背景:神经营养因子是治疗脊髓损伤的新方法,调控自噬是其发挥作用的机制之一,但具体的信号通路尚不明确。目的:探讨神经营养因子3如何通过P75NTR/Trk C受体切换来调节少突胶质细胞的自噬以及促进脊髓损伤后神经功能恢复的作用,进一步明确具体的分子机制。方法:将24只SD大鼠随机分为3组:假手术组、脊髓损伤组和神经营养因子3组,通过大鼠后肢神经功能评分来评估神经营养因子3对脊髓损伤大鼠的治疗效果,采用Western blot检测各组大鼠脊髓组织中神经营养因子3、Olig1、MBP蛋白以及自噬标记蛋白LC3B的表达水平。在细胞实验中,将少突胶质细胞接种在培养皿中,分为糖氧剥夺组、糖氧剥夺+神经营养因子3组、糖氧剥夺+神经营养因子3+P75NTR质粒组、糖氧剥夺+神经营养因子3+Trk C质粒组、糖氧剥夺+3-甲基腺嘌呤(自噬抑制剂)组及糖氧剥夺+雷帕霉素(自噬激活剂)组。光学显微镜观察少突胶质细胞形态变化,TUNEL染色观察细胞凋亡现象,Western blot检测Trk C受体、P75NTR、LC3B表达及PI3K/AKT/m TOR和AMPK/m TOR信号途径的磷酸化状态。结果与结论:(1)动物实验显示,与假手术组相比,脊髓损伤后神经营养因子3的表达显著增加(P<0.05);与脊髓损伤组相比,外源性神经营养因子3治疗能够加快大鼠神经功能的恢复(P<0.05),并增加Olig1和MBP蛋白的表达(P<0.05);(2)细胞实验发现,3 h是损伤早期与中后期的分界点,与糖氧剥夺组相比,糖氧剥夺+神经营养因子3组少突胶质细胞能够更长时间地维持其形态,Trk C受体在早期表达水平较低而中后期显著上调(P<0.05),P75NTR则在早期上调而中后期下调(P<0.05),自噬水平呈现出先升高后降低的趋势(P<0.05);(3)通过对比糖氧剥夺+神经营养因子3组、糖氧剥夺+雷帕霉素组和糖氧剥夺+3-甲基腺嘌呤组的细胞形态和TUNEL染色结果,发现单独促进或抑制自噬对少突胶质细胞的存活均有不利影响,而类似神经营养因子3这样调节自噬的方法则能最大限度地维持细胞存活;(4)神经营养因子3在早期通过P75NTR/AMPK/m TOR信号通路促进自噬,而在后期通过Trk C/PI3K/AKT/m TOR信号通路抑制自噬。根据上述结果,得到如下结论,即神经营养因子3可以通过P75NTR/Trk C受体的切换能够双向调控少突胶质细胞的自噬,从而维持细胞存活,有助于脊髓损伤后大鼠的神经功能恢复。

关键词：神经营养因子3 自噬少突胶质细胞受体切换凋亡脊髓损伤

强化营养治疗促进肝硬化食管静脉曲张镜治疗患者创面的愈合

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中华肝脏病杂志 2013年第10期21卷 739-742页

作者：李长政李青山李雪闫军红王瑞玲蒋仁秀第二炮兵总医院消化科北京100088

目的探讨强化营养治疗对肝硬化伴有食管静脉曲张接受内镜治疗患者创面愈合的影响. 方法肝硬化伴食管静脉曲张接受内镜治疗患者50例,随机分为：强化营养治疗组25例,对照组25例.对照组给予常规饮食及药物治疗,每周1次内镜下硬化剂注射治... 详细信息

目的探讨强化营养治疗对肝硬化伴有食管静脉曲张接受内镜治疗患者创面愈合的影响. 方法肝硬化伴食管静脉曲张接受内镜治疗患者50例,随机分为：强化营养治疗组25例,对照组25例.对照组给予常规饮食及药物治疗,每周1次内镜下硬化剂注射治疗,强化营养治疗组在此基础上给予包括肝营养素在内的强化营养治疗.比较两组患者食管静脉曲张转归及创面愈合的差异.结果患者治疗期间每周复查,强化营养治疗组注射点累计溃疡发生率为64％,明显低于对照组的92％,两组比较,x2=5.711,P=0.017,差异有统计学意义；强化营养治疗组内镜检查注射点溃疡处少量渗血累计仅有1例,低于对照组的7例,两组比较,x 2=5.357,P=0.021,差异有统计学意义.静脉曲张消失平均需要3.8次内镜治疗,低于对照组的4.1次,两组比较,t=2.069,P=0.044,差异有统计学意义. 结论对于肝硬化伴有食管静脉曲张接受内镜下硬化治疗的患者,强化营养治疗可促进内镜治疗后局部损伤的愈合和血管闭塞,预防并发症发生及提高总体疗效.

关键词：肝硬化食管静脉曲张营养治疗内镜治疗创面愈合

“微移植”治疗7例淋巴母细胞淋巴瘤/白血病的临床分析

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中国实验血液学杂志 2014年第4期22卷 995-998页

作者：孙万军赵红霞黄雅静李洁侯慧慧代娜娜郗晓琴胡海兰第二炮兵总医院血液科北京100088

本研究旨在观察Hyper-CVAD/MA化疗方案联合亲缘HLA单倍体相合供者G-CSF动员后外周血造血干细胞(G-PBHSC)输注组成的"微移植"治疗7例淋巴母细胞淋巴瘤/白血病(LBL/ALL)患者的疗效。研究对象为2009年8月至2012年9月第二炮兵总医院血液科... 详细信息

本研究旨在观察Hyper-CVAD/MA化疗方案联合亲缘HLA单倍体相合供者G-CSF动员后外周血造血干细胞(G-PBHSC)输注组成的"微移植"治疗7例淋巴母细胞淋巴瘤/白血病(LBL/ALL)患者的疗效。研究对象为2009年8月至2012年9月第二炮兵总医院血液科收治的7例LBL/ALL患者。所有患者均接受了"微移植"治疗,首先给予患者Hyper-CVAD/MA方案化疗,在MA方案化疗结束后48 h给予亲缘HLA单倍体相合供者G-PBHSC输注,不进行移植物抗宿主病(GVHD)预防。截至2014年4月,中位随访41(20-57)个月。结果显示:7例患者共完成30个疗程"微移植"治疗,均获得完全缓解(CR)。"微移植"治疗主要的不良反应是骨髓抑制及相关感染;在治疗期间未观察到GVHD相关临床表现。随访截止时,5例无病存活,2例复发死亡。结论:"微移植"治疗LBL/ALL的疗效较好,安全性较高。

关键词：淋巴母细胞淋巴瘤/白血病化疗外周血造血干细胞

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四川绵竹等15乡镇震后患者疾病谱分析

解放军医学杂志 2009年第2期34卷 232-234页

作者：聂亚玲江彬彬张蓉王开平刘娜王瑞李芳常宏宇第二炮兵总医院儿科北京100088 第二炮兵总医院皮肤科北京100088 第二炮兵总医院中医科北京100088 第二炮兵总医院医务部北京100088 第二炮兵总医院心胸外科北京100088 第二炮兵总医院计划科北京100088

目的调查四川绵竹、绵阳、德阳等15个乡镇地震后49d内人群常见病的分布情况,为灾后卫生防病工作提供科学依据。方法笔者所在医疗队震后72h即进入灾区进行巡诊工作,为期46d,巡诊灾区群众、救灾部队官兵、志愿者共24 075名,对其中10 862... 详细信息

目的调查四川绵竹、绵阳、德阳等15个乡镇地震后49d内人群常见病的分布情况,为灾后卫生防病工作提供科学依据。方法笔者所在医疗队震后72h即进入灾区进行巡诊工作,为期46d,巡诊灾区群众、救灾部队官兵、志愿者共24 075名,对其中10 862例患者进行流行病学调查。结果震后四川绵竹等15个乡镇巡诊患者皮肤病、机械性损伤、呼吸道感染和创伤后应激障碍的发病率依次为49.5%、20.3%、17.9%、25.0%,其中皮肤病主要为虫咬皮炎(39.0%)、皮炎湿疹(30.8%)、浅部真菌病(8.9%)、神经性皮炎(6.4%)、日光性皮炎(5.9%)。结论皮肤病、机械性致伤、呼吸道感染、创伤后应激障碍是此次四川震后最常见的4种疾病。

关键词：自然灾害四川人群监测疾病谱

前唇皮下组织瓣修复双侧唇裂术后继发口哨畸形和鼻底凹陷

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中华整形外科杂志 2013年第3期29卷 164-167页

作者：田孝臣吕晓杰胡晓春陈俊男崔立龙刘莹刘会娜第二炮兵总医院烧伤整形科北京100088

目的探求一种新的修复口哨畸形和鼻底凹陷方法，提高双侧唇裂术后继发畸形治疗效果。方法应用前唇上方皮下组织双侧c瓣修复鼻底凹陷畸形，两侧口轮匝肌向中线对合，重建口轮匝肌连续性，同时前唇下方皮下组织^瓣向内下翻转再造唇珠。结... 详细信息

目的探求一种新的修复口哨畸形和鼻底凹陷方法，提高双侧唇裂术后继发畸形治疗效果。方法应用前唇上方皮下组织双侧c瓣修复鼻底凹陷畸形，两侧口轮匝肌向中线对合，重建口轮匝肌连续性，同时前唇下方皮下组织^瓣向内下翻转再造唇珠。结果2010年6月至2012年1月，采用上述方法修复双侧唇裂继发口哨畸形和鼻底凹陷30例，所有病例术后全部一期愈合，经3—18个月随访，鼻底、唇部形态明显改善，唇珠明显，上唇形态自然，与下唇关系协调。结论前唇上方皮下组织双侧c瓣及前唇下方皮下组织^瓣，可以改善鼻底凹陷，加强唇珠形态；两侧口轮匝肌在中线对位缝合可以重建口轮匝肌连续性。

关键词：双侧唇裂外科皮瓣畸形口轮匝肌

肝素、鱼精蛋白对血小板膜糖蛋白影响的实验研究

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解放军医学杂志 2003年第1期28卷 79-80页

作者：隋波李茂源第二炮兵总医院

探讨心肺转流 (CPB)体外循环期间肝素化与肝素中和对血小板膜糖蛋白GPⅡb Ⅲa及P 选择素的影响。 10名健康供血者的静脉血注入含枸橼酸或肝素的试管中 ,用流式细胞术检测肝素、鱼精蛋白对血小板分泌标志物P 选择素和凝集标志物活性纤维... 详细信息

探讨心肺转流 (CPB)体外循环期间肝素化与肝素中和对血小板膜糖蛋白GPⅡb Ⅲa及P 选择素的影响。 10名健康供血者的静脉血注入含枸橼酸或肝素的试管中 ,用流式细胞术检测肝素、鱼精蛋白对血小板分泌标志物P 选择素和凝集标志物活性纤维蛋白原受体GPⅡb Ⅲa的影响。结果发现 ,肝素在 5～ 5 0 μg/ml浓度范围内 ,呈剂量依赖性增加ADP诱发的P 选择素和GPⅡb Ⅲa的表达 (P <0 0 5 ) ;鱼精蛋白中和肝素 ,减少GPⅡb Ⅲa的表达 ,但不影响肝素引起P 选择素的表达增加。提示肝素、鱼精蛋白对血小板分泌和凝集均有影响。

关键词：肝素鱼精蛋白血小板膜糖蛋白实验研究心肺转流体外循环