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边缘供肝面临的机遇与挑战

器官移植 2024年第3期15卷 463-468页

作者：鲁欣翼滕飞傅宏赵渊宇朱鲤烨董家勇毛家玺郭闻渊海军军医大学第二附属医院(上海长征医院)器官移植科上海200003 海军军医大学免疫学教研室暨医学免疫学国家重点实验室

随着手术技术和术后免疫抑制治疗的不断突破与成熟,肝移植受者和移植物存活率显著提高,供肝短缺已成为限制肝移植临床发展的主要阻碍,如何扩大供肝来源也成为了当前迫切需要解决的问题。高龄供肝、脂肪变性供肝、病毒性肝炎供肝、心脏... 详细信息

随着手术技术和术后免疫抑制治疗的不断突破与成熟,肝移植受者和移植物存活率显著提高,供肝短缺已成为限制肝移植临床发展的主要阻碍,如何扩大供肝来源也成为了当前迫切需要解决的问题。高龄供肝、脂肪变性供肝、病毒性肝炎供肝、心脏死亡器官捐献供肝等常见边缘供肝在临床肝移植中的使用已经取得了一定的突破性进展,但边缘供肝的使用仍存在较多限制。因此,本文对边缘供肝的定义,几种常见边缘供肝的应用及研究进展进行综述,探讨目前边缘供肝面临的机遇与挑战,旨在为临床肝移植供者池的扩大提供参考,造福更多终末期肝病患者。

关键词：肝移植边缘供肝高龄脂肪变性病毒性肝炎劈离式肝移植心脏死亡器官捐献机械

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移植后糖尿病危险因素研究进展

器官移植 2024年第1期15卷 145-150页

作者：董骏峰薛强滕飞赵渊宇殷浩海军军医大学第二附属医院(上海长征医院)器官移植科上海200003 海军军医大学第三附属医院(东方肝胆外科医院)神经外科

实体器官移植极大地延长了终末期疾病患者的生存时间,但器官移植受者术后需要长期服用免疫抑制药,会导致移植后糖尿病(PTDM)的发生风险增加,从而使感染、心血管疾病和死亡的风险升高。近年来,随着PTDM诊断标准的不断完善,临床医师对其... 详细信息

实体器官移植极大地延长了终末期疾病患者的生存时间,但器官移植受者术后需要长期服用免疫抑制药,会导致移植后糖尿病(PTDM)的发生风险增加,从而使感染、心血管疾病和死亡的风险升高。近年来,随着PTDM诊断标准的不断完善,临床医师对其认识越来越深入,与2型糖尿病相比,PTDM在病理生理特征和临床进展上存在着明显差异,需采用不同的治疗策略。及早识别器官移植受者的危险因素,早期诊断和干预对于改善受者的生活质量,延长移植物的存活时间以及降低受者病死率具有重要意义。因此,本文就PTDM的诊断、发生情况及危险因素做一综述,以期为临床医师早期识别并干预PTDM提供参考。

关键词：器官移植移植后糖尿病钙调磷酸酶抑制剂哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂糖皮质激素巨细胞病毒排斥反应单核苷酸多态性

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血液肿瘤精准诊治

陆军军医大学学报 2024年第4期46卷 299-310页

作者：张曦血液病与微环境重庆市重点实验室创伤与化学中毒全国重点实验室全军临床重点专科金凤实验室重庆市临床重点专科陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院血液病医学中心

目的随着对血液肿瘤发病机制的深入研究，血液肿瘤的精准诊断和分层治疗逐年优化提升。近年来在人工智能的推动下，血液肿瘤诊断由人工化、经验化不断向智能化、信息化升级，在未来有望实现高效、高准确率的智能诊断;同时，小分子药物... 详细信息

目的随着对血液肿瘤发病机制的深入研究，血液肿瘤的精准诊断和分层治疗逐年优化提升。近年来在人工智能的推动下，血液肿瘤诊断由人工化、经验化不断向智能化、信息化升级，在未来有望实现高效、高准确率的智能诊断;同时，小分子药物、抗体类药物、免疫细胞治疗及造血干细胞移植新疗法在不断完善，新药不断涌现，为血液肿瘤的治疗提供了更多选择。本文从血液肿瘤的精准/智能诊断、药物治疗和细胞治疗等3个方面探讨血液肿瘤的精准诊断与治疗。

关键词：血液肿瘤精准诊断靶向治疗

异体毛乳头细胞对小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响及其机制

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第8期40卷 772-780页

作者：尚亚鸽张丽霞韩超李梦洋罗亮王许杰胡大海空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

目的探索异体毛乳头细胞(DPC)对小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响及其机制。方法该研究为实验研究。利用显微解剖结合胶原酶消化法自5只6周龄雄性C57BL/6J小鼠触须毛囊中提取DPC并成功鉴定。将18只8周龄雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表... 详细信息

目的探索异体毛乳头细胞(DPC)对小鼠全层皮肤缺损创面愈合的影响及其机制。方法该研究为实验研究。利用显微解剖结合胶原酶消化法自5只6周龄雄性C57BL/6J小鼠触须毛囊中提取DPC并成功鉴定。将18只8周龄雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为磷酸盐缓冲液(PBS)组及DPC组(每组9只小鼠),在所有小鼠背部创建全层皮肤缺损创面模型。分别于伤后2、4、6 d,通过创面周围皮下注射给予DPC组小鼠含1×10^(6)个第4代DPC的细胞悬液100μL、PBS组小鼠等体积的PBS。伤后3、7、10、14 d,观察2组小鼠创面愈合情况及毛发生长情况并测量创面剩余面积;另测量2组小鼠伤后14 d创面毛发覆盖面积。伤后14 d,收集2组小鼠创面组织标本,行苏木精-伊红染色观察新生毛囊情况并计数,行Masson染色观察真皮层胶原沉积情况并测量胶原沉积面积,采用免疫荧光法检测Wnt/β连环蛋白信号通路相关分子β连环蛋白、淋巴增强结合因子1(Lef1)的蛋白表达,分别采用蛋白质印迹法和实时荧光定量反转录PCR法检测β连环蛋白、Lef1的蛋白和mRNA表达。各实验样本数均为3。结果与PBS组相比,DPC组小鼠伤后各时间点创面再上皮化速度加快,且在伤后10、14 d可见更多毛发生长。伤后7、10、14 d,DPC组小鼠创面剩余面积分别为(13.92±2.90)、(3.69±1.78)、(1.09±0.14)mm^(2),分别明显小于PBS组的(26.19±2.06)、(10.84±3.59)、(6.75±2.11)mm^(2)(t值分别为5.85、3.09、4.63,P值均免疫荧光法和蛋白质印迹法检测均显示,DPC组小鼠创面组织中β连环蛋白(t值分别为5.49、4.25,P值均<0.05)和Lef1(t值分别为7.50、11.54,P值均<0.05)的蛋白表达均明显高于PBS组;DPC组小鼠创面组织中β连环蛋白和Lef1的mRNA表达均明显高于PBS组(t值分别为7.68、9.67,P<0.05)。结论DPC通过激活Wnt/β连环蛋白信号通路加快小鼠全层皮肤缺损创面再上皮化,并促进创面愈合过程中的毛囊再生。

关键词：创伤和损伤伤口愈合淋巴样增强子结合因子1 胶原毛囊再生毛乳头细胞 Wnt/β连环蛋白信号通路

PTPRZ1高表达胶质瘤干细胞诱导TAM向M2免疫抑制表型极化的机制研究

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陆军军医大学学报 2024年第8期46卷 796-803页

作者：安乐乐杨莹刘庆窦飞越王路静程玥王超阮潜瑛周磊郭海涛孔维凯李学刚兰川李飞时雨陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院病理科重庆400038 金凤实验室渝粤病理科学研究中心重庆400039 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院输血科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院神经外科重庆400038

目的探究蛋白酪氨酸磷酸酶受体Z1型(protein tyrosine phosphatase receptor-type Z1,PTPRZ1)高表达胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)对肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)表型极化和吞噬能力的影响及其调控机制。方法利用流式细胞术分选人胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)样本中GSCs和非干性肿瘤细胞(non-stem tumor cells,NSTCs),并检测PTPRZ1表达。用胶质瘤细胞条件培养基或趋化因子配体20(chemokine C-C motif ligand 20,CCL20)诱导外周单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)来源的CD14阳性单核细胞向TAM极化。通过CRISPR/Cas9技术构建PTPRZ1稳定敲除的GSCs细胞株(PTPRZ1-KO GSCs)。利用流式细胞术检测TAM吞噬GSCs、NSTCs、PTPRZ1-Control GSCs(PTPRZ1-Ctrl GSCs)和PTPRZ1-KO GSCs的能力和TAM免疫抑制(M2)表型极化标记物CD163的表达。于基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)中配对GSCs和NSTCs转录组测序数据(GSE54791)中获得差异表达基因;于癌症和肿瘤基因图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库GBM队列中鉴定预后不良基因集。上述基因集与编码人膜蛋白基因集取交集获得PTRRZ1,利用基因集富集分析(gene set enrichment Analysis,GSEA)比较TCGA数据库中高表达和低表达PTPRZ1的GBM样本的差异通路。利用转录组测序鉴定PTPRZ1-Ctrl GSCs和PTPRZ1-KO GSCs组中差异表达基因并通过RT-qPCR和Western blot验证。结果与NSTCs比较,GSCs抵抗TAM吞噬的能力较强(P<0.05)且特异性高表达PTPRZ1。PTPRZ1-KO GSCs抵抗TAM吞噬的能力显著下降(P<0.01)。高表达PTPRZ1的GBM样本中吞噬相关通路活化显著受抑(P<0.05)。PTPRZ1-KO GSCs显著下调M2型TAM极化相关趋化因子CCL20的表达(P<0.05)。CCL20重组蛋白诱导M2型TAM标记物CD163表达升高。结论PTPRZ1高表达GSCs介导TAM向M2型极化并抑制其吞噬能力,机制可能与PTPRZ1高表达GSCs上调CCL20表达有关。

关键词：胶质瘤干细胞肿瘤相关巨噬细胞细胞吞噬 PTPRZ1

Ms4a6d 基因敲除对雌性小鼠生育力的影响

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陆军军医大学学报 2024年第10期46卷 1115-1122页

作者：亢恩川王莹曾继涛何畏陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院生殖医学中心重庆400038

目的探究巨噬细胞表面特异分子跨膜4域亚家族A成员6D(membrane-spanning 4-domains subfamily A member 6D,Ms4a6d)基因敲除对雌性小鼠生育力的影响。方法构建Ms4a6d基因敲除小鼠,以各周龄纯合Ms4a6d基因敲除(Ms4a6d^(-/-))小鼠为实验组... 详细信息

目的探究巨噬细胞表面特异分子跨膜4域亚家族A成员6D(membrane-spanning 4-domains subfamily A member 6D,Ms4a6d)基因敲除对雌性小鼠生育力的影响。方法构建Ms4a6d基因敲除小鼠,以各周龄纯合Ms4a6d基因敲除(Ms4a6d^(-/-))小鼠为实验组;采用qPCR、琼脂糖凝胶法鉴定小鼠基因型;运用HE染色、免疫荧光、ELISA等方法检测血清抗缪勒管激素(anti-müllerian hormone,AMH)和雌性Ms4a6d^(-/-)小鼠卵巢中巨噬细胞数量及各级卵泡构成变化;通过生育力实验比较成年Ms4a6d^(-/-)雌鼠妊娠率及平均产仔数变化。结果与同周龄野生型(Ms4a6d+/+)雌鼠比较,2周龄和4周龄的Ms4a6d^(-/-)雌鼠卵巢组织中巨噬细胞显著减少(P<0.01);8周龄时2组卵巢巨噬细胞差异无统计学意义;8周龄Ms4a6d^(-/-)雌鼠卵巢系数显著降低(P<0.01);8周龄时卵巢组织中原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和窦卵泡数量显著减少(P<0.05),各年龄段Ms4a6d^(-/-)雌鼠血清中AMH显著降低(P<0.05)。成年Ms4a6d^(-/-)雌鼠的平均妊娠率为56%,每胎产仔数为(4.1±1.1)只,均显著低于同龄野生型雌鼠的妊娠率(89%)和每胎产仔数[(6.3±1.2)只]。结论Ms4a6d基因敲除导致青春期前雌鼠卵巢组织中巨噬细胞数量减少,抑制其生长卵泡发育,最终表现为成年雌鼠卵巢储备减少,生育力降低。

关键词： Ms4a6d 巨噬细胞卵巢生育力

外周T细胞淋巴瘤患者血清代谢产物与临床特征的相关性分析

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陆军军医大学学报 2024年第4期46卷 352-358页

作者：段一硕饶军夏菁马娜丫蔺诗佳李甫唐书翰周沙曾韫璟李炘檑黄德智李琼刘帮洞赵先兰魏锦张曦川北医学院附属医院血液内科南充637002 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院血液病医学中心全军临床重点专科创伤与化学中毒全国重点实验室重庆市临床重点专科血液病与微环境重庆市重点实验室重庆400037 金凤实验室重庆401329

目的观察外周T细胞淋巴瘤患者血清能量代谢产物的变化,从能量代谢角度寻找监测外周T细胞淋巴瘤的血清生物标志物。方法收集2020年11月至2021年12月在陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心诊治的16例外周T细胞淋巴瘤初诊患者,并招... 详细信息

目的观察外周T细胞淋巴瘤患者血清能量代谢产物的变化,从能量代谢角度寻找监测外周T细胞淋巴瘤的血清生物标志物。方法收集2020年11月至2021年12月在陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心诊治的16例外周T细胞淋巴瘤初诊患者,并招募同期10名健康志愿者作为对照。采用选择性反应/多反应监测技术(selected/multiple reaction monitoring, SRM/MRM)检测其血清中能量相关代谢产物的差异,并结合其临床资料,包括病史、影像学、实验室检查等进行回顾性分析。结果与健康对照相比,外周T细胞淋巴瘤患者血清中能量代谢相关产物水平表达谱存在差异,其中环磷腺苷、琥珀酸、柠檬酸和顺乌头酸含量显著降低(P临床分期呈负相关(P临床分期呈负相关(P免疫母细胞性T细胞淋巴瘤患者(n=6),与健康对照相比,其血清中环磷腺苷、柠檬酸和琥珀酸的含量明显降低,而6-磷酸葡萄糖的含量明显升高(P临床分期和危险度分级都表现出明显的负相关(P<0.05)。结论外周T细胞淋巴瘤患者与健康对照人群在血清代谢产物水平上共鉴定出5个差异代谢产物,其中琥珀酸、柠檬酸有希望成为血清生物标志物。

关键词：外周T细胞淋巴瘤结外NK/T细胞淋巴瘤血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤血清代谢组学生物标志物多反应监测

细胞因子组合辅助诊断眼部慢性移植物抗宿主病的临床研究

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中华血液学杂志 2024年第3期45卷 242-248页

作者：程先静吉锐黄瑞昊黄世勤范围赵元程袁容娣王筱淇张曦陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心全军临床重点专科创伤与化学中毒国家重点实验室重庆市医学重点学科血液病与微环境重庆市重点实验室重庆400037 陆军军医大学新桥医院眼科重庆400037 金凤实验室重庆400037

目的探索细胞因子与眼部慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的相关性,筛选眼部cGVHD的特异性生物标志物。方法通过建立小鼠cGVHD模型,探讨cGVHD与血清细胞因子相关性。根据动物实验结果和文献检索,确定了16种细胞因子组合,使用酶联免疫吸附试验(... 详细信息

目的探索细胞因子与眼部慢性移植物抗宿主病(cGVHD)的相关性,筛选眼部cGVHD的特异性生物标志物。方法通过建立小鼠cGVHD模型,探讨cGVHD与血清细胞因子相关性。根据动物实验结果和文献检索,确定了16种细胞因子组合,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)比较从2017年6月至2022年3月在陆军军医大学新桥医院血液病医学中心接受异基因造血干细胞移植后发生眼部cGVHD和未发生眼部cGVHD患者的血清与泪液细胞因子表达水平。结果①与对照组比较,cGVHD小鼠血清IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、IFN-γ、CX3CL1、CXCL11、CXCL13、CCL11、CCL19浓度升高(P0.7),并且泪液细胞因子与眼部cGVHD疾病眼表参数相关。结论泪液细胞因子较血清细胞因子诊断眼部cGVHD更具有特异性与敏感性。泪液细胞因子IL-8、IL-10、IFN-γ、CXCL9、CCL17和CCL19可以作为移植后眼部cGVHD诊断性生物标志物,对其临床诊断具有一定价值。

关键词：异基因造血干细胞移植眼部慢性移植物抗宿主病泪液细胞因子生物标志物

小鼠真皮毛乳头细胞外囊泡对人增生性瘢痕成纤维细胞的影响及其机制

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第3期40卷 258-265页

作者：王运帷张浩曹鹏张万福佟琳李少珲陈阳韩超官浩空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032 江南大学附属医院烧创伤诊疗中心无锡214062

目的探讨小鼠真皮毛乳头细胞外囊泡(DPC-EV)对人增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)的影响及其机制。方法该研究为实验研究。取10只6周龄雄性C57BL/6J小鼠,提取触须的原代真皮毛乳头细胞(DPC)并成功鉴定。取第3~5代DPC,于培养24 h采用超高速离... 详细信息

目的探讨小鼠真皮毛乳头细胞外囊泡(DPC-EV)对人增生性瘢痕成纤维细胞(HSF)的影响及其机制。方法该研究为实验研究。取10只6周龄雄性C57BL/6J小鼠,提取触须的原代真皮毛乳头细胞(DPC)并成功鉴定。取第3~5代DPC,于培养24 h采用超高速离心法提取DPC-EV,采用透射电子显微镜观察形态、纳米颗粒跟踪分析仪检测粒径(样本数为3)。将第3代HSF分为DPC-EV组和磷酸盐缓冲液(PBS)组,分别加入DPC-EV、PBS培养,行细胞划痕试验并计算划痕后24 h细胞迁移率(样本数为5),采用细胞计数试剂盒8检测培养0(行饥饿处理12 h后、加入DPC-EV或PBS前)、24、48、72、96 h细胞增殖水平(样本数为4),采用免疫荧光法、蛋白质印迹法检测培养24 h细胞中α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)的蛋白表达情况,采用蛋白质印迹法检测培养24 h细胞中Krüppel样因子4(KLF4)的蛋白表达情况。取第3代HSF,加入DPC-EV培养24 h后,采用随机数字表法将HSF分为空白对照组、KLF4敲低组和KLF4过表达组,其中空白对照组细胞仅常规培养48 h,KLF4敲低组和KLF4过表达组细胞均先加入KLF4敲低病毒培养24 h,而后KLF4敲低组细胞常规培养24 h,KLF4过表达组细胞加入KLF4过表达病毒培养24 h。于培养48 h,采用蛋白质印迹法检测细胞中KLF4、α-SMA、ColⅠ的蛋白表达情况。结果培养24 h,提取的DPC-EV为囊泡状结构,平均粒径108.8 nm。划痕后24 h,PBS组HSF的迁移率为(54±10)%,明显高于DPC-EV组的(29±8)%(t=4.37,P<0.05)。培养48、72、96 h,DPC-EV组HSF的增殖水平均明显低于PBS组(t值分别为4.06、5.76、6.41,P<0.05)。培养24 h,DPC-EV组HSF中α-SMA和ColⅠ的蛋白表达均明显低于PBS组,而KLF4的蛋白表达明显高于PBS组。培养48 h,与空白对照组比较,KLF4敲低组HSF中KLF4的蛋白表达下调,α-SMA及ColⅠ的蛋白表达均上调;与KLF4敲低组比较,KLF4过表达组HSF中的KLF4的蛋白表达上调,ColⅠ和α-SMA的蛋白表达均下调。结论小鼠DPC-EV可抑制人HSF的增殖和迁移,并通过激活KLF4抑制人HSF中纤维化标志物α-SMA和ColⅠ的表达。

关键词：瘢痕胞外囊泡成纤维细胞 Krüppel样因子4 真皮毛乳头细胞