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黄素蛋白单加氧酶在天然产物生物合成中的功能研究

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中国中药杂志 2025年第1期 71-77页

作者：程梦雅刘畅谭何新上海理工大学健康科学与工程学院海军军医大学药学院

黄素蛋白单加氧酶(flavoprotein monooxygenases, FPMOs)和细胞色素P450(cytochrome P450, CYP450)氧化酶是自然界中重要的单加氧酶，在多种生命活动中催化重要的氧化还原反应，并负责合成高度复杂的天然产物。P450氧化酶已经有较多的... 详细信息

黄素蛋白单加氧酶(flavoprotein monooxygenases, FPMOs)和细胞色素P450(cytochrome P450, CYP450)氧化酶是自然界中重要的单加氧酶，在多种生命活动中催化重要的氧化还原反应，并负责合成高度复杂的天然产物。P450氧化酶已经有较多的报道，在过去的研究中也发现多种FPMOs,但这些酶的分类、催化反应、催化机制等方面仍然未被系统分析。该文系统地总结了FPMOs的最新研究进展，首先根据序列相似性和特定的结构特征对FPMOs进行分类，并详细阐述了植物B类FPMOs在天然产物生物合成途经中的3种亚家族(FMO、BVMO、NMO)的催化特点。B类FPMOs包括2个典型的Rossmann折叠基序(FAD结合域GxGxxG和NADPH结合域GxGxxA),和1个位于中间的FMO识别基序FxGxxxHxxxF/Y/W。这些酶在多种代谢路径中扮演着关键角色，精确调控植物的生长发育。该文还总结了植物B类FPMOs的应用，并通过具体实例展示了其在生长素、靛蓝及氰苷等天然产物合成中的应用潜力等。这些分析，将会拓展和增强人们对FPMOs的认识，推动FPMOs从基础研究走向实际应用，通过FPMOs设计出更加优化的生物合成路径，以期为农业生产、植物保护、天然产物生物合成及合成生物学等领域提供新的策略和工具。

关键词：黄素蛋白单加氧酶单加氧酶生物合成

铜转运蛋白1介导的铜死亡途径及其在肿瘤治疗中的潜在价值

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海军军医大学学报 2025年

作者：王议贤欧崇阳郝璐焦旸曹建平海军军医大学(第二军医大学)影像医学系核医学教研室苏州大学放射医学与防护学院放射医学与辐射防护国家重点实验室

作为一种独特的细胞死亡方式，铜死亡的发生取决于细胞内铜离子的累积。铜离子是生物体内正常生理状态下的必需微量元素，但细胞内过量的游离铜不仅对正常细胞产生毒害作用，还会对肿瘤细胞发挥其特异性杀伤功能。铜转运蛋白1（copper t... 详细信息

作为一种独特的细胞死亡方式，铜死亡的发生取决于细胞内铜离子的累积。铜离子是生物体内正常生理状态下的必需微量元素，但细胞内过量的游离铜不仅对正常细胞产生毒害作用，还会对肿瘤细胞发挥其特异性杀伤功能。铜转运蛋白1（copper transporter 1，CTR1）是细胞跨膜摄取铜离子的关键转运体，作为一种铜死亡调节因子，其在肿瘤中的突变及表达变化对铜离子在胞内外的分布有影响，并可能通过调控铜死亡途径参与肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移等多个生物学过程。本文对CTR1介导的铜死亡途径及其在肿瘤治疗中的潜在价值进行综述，阐述铜离子稳态调控机制对于生物体完成正常生命活动的重要性以及CTR1调控的铜死亡机制，探讨以CTR1为干预靶点进行肿瘤治疗的潜在价值，为临床肿瘤患者的救治提供理论研究基础。

关键词：铜离子铜死亡 CTR1 肿瘤治疗

新型中性粒细胞响应性发光纳米胶束的构建及其在小鼠烧伤模型成像中的应用

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陆军军医大学学报 2025年

作者：胡涛郭嘉伟张建祥重庆大学生物工程学院陆军军医大学（第三军医大学）药学与检验医学系药物分析学教研室陆军军医大学（第三军医大学）药学与检验医学系药剂学教研室

目的基于发光材料鲁米诺（Luminol）构建中性粒细胞响应性发光纳米胶束，并考察其在小鼠烧烫伤模型早期炎症中的成像能力。方法以六氯三聚磷腈（hexachlorotripolyphosphazene，HCCP）为骨架材料，化学键合鲁米诺（Luminol）和聚乙二... 详细信息

目的基于发光材料鲁米诺（Luminol）构建中性粒细胞响应性发光纳米胶束，并考察其在小鼠烧烫伤模型早期炎症中的成像能力。方法以六氯三聚磷腈（hexachlorotripolyphosphazene，HCCP）为骨架材料，化学键合鲁米诺（Luminol）和聚乙二醇（Polyethylene Glycol，PEG）合成两亲性发光材料LHP，并采用红外光谱、核磁氢谱等方法对LHP的化学结构进行表征；将LHP溶于去离子水自组装形成纳米胶束LHP NM，同时测定其粒径大小和电位，并采用透射电镜（transmission electron microscope， TEM）观察纳米胶束的形态；使用光纤光谱仪、微弱发光测量仪和小动物活体成像仪对纳米胶束的光谱学性质、化学发光规律和体外发光成像能力进行详细评价。使用70、80和90 ℃热水按简单随机抽样法分组对雌性Balb/c小鼠进行烫伤处理以建立Ⅰ度至深Ⅱ度小鼠烧烫伤模型，各组样本数n=10，通过H&E染色结果判断模型小鼠皮肤烫伤深度，采用荧光定量qPCR测定烫伤皮肤组织TNF-α，IL-1β、IL-6和髓过氧化物酶（myeloperoxidase，MPO）的mRNA表达水平，ROS检测试剂盒考察烧伤小鼠皮肤组织活性氧（reactive oxygen species，ROS）水平随烫伤时间和深度变化的情况；采用FITC-Ly6G抗体标记中性粒细胞，观察模型小鼠皮肤组织中性粒细胞数量的变化；使用小动物活体成像系统考察纳米胶束LHP NM在小鼠烧烫伤模型中的成像能力，分析发光强度改变与中性粒细胞募集数量变化的相关性，对发光纳米胶束在小鼠烧烫伤模型早期炎症反应监测及烧烫伤深度能力诊断中的效果进行评价。结果核磁谱图解析证实一个HCCP分子上约键合了5个鲁米诺单元和一个聚乙二醇（PEG）链，TEM和粒径测定结果表明所制备纳米胶束形态呈空心球形，粒径约为120.000 nm。体外发光实验中，在不同浓度活性氧和MPO条件下，纳米胶束能实现高亮且持续的化学发光，发光强度与活性氧水平及纳米胶束浓度呈现良好的剂量依赖性。细胞实验表明纳米胶束能够实现中性粒细胞响应性成像，发光强度与中性粒细胞数量和LHP NM剂量呈正相关，线性相关系数分别为r = 0.98、0.99。动物实验结果表明，烧烫伤模型小鼠皮肤损伤组织中的中性粒细胞数量和活性氧水平显著升高（P<0.05）。实验发现，在24 h时间点，80 ℃与70 ℃处理组对比，中性粒细胞募集数量增加约86.4%，发光成像强度增加约71.5%，证明烧伤深度与损伤局部中性粒细胞募集数量具有相关性，且LHP NM可在模型小鼠中实现中性粒细胞响应性成像，其成像强度变化与皮肤损伤组织中的中性粒细胞数量和活性氧水平密切相关。结论成功构建中性粒细胞响应性发光纳米胶束LHP NM，基于LHP NM可实现小鼠烧烫伤模型皮肤损伤组织的响应性成像，其发光强度可准确反映烧烫伤模型中的中性粒细胞浸润程度及ROS水平变化，从而实现小鼠烧烫伤模型早期炎症反应的实时监测，并为烧烫伤深度的诊断提供方法和策略。

关键词：烫伤纳米胶束中性粒细胞活性氧

新型冻干血小板联用乳酸林格氏液救治家兔失血性休克海水浸泡的复苏效果观察

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陆军军医大学学报 2025年

作者：代承麟杜文琼唐婷杨昊洋陈丽缘张冬朝阳钟鑫蒋仁庆陈灿贾益君宗兆文胡波陆军军医大学(第三军医大学)陆军卫勤训练基地战救技能训练教研室创伤与化学中毒全国重点实验室陆军军医大学士官学校战救医疗系陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院基础医学教学实验中心

目的评估新型冻干血小板（lyophilized platelet，LP）即凝血酶刺激下LP联用乳酸林格氏液对家兔失血性休克海水浸泡的复苏效果。方法将50只家兔，[雌雄不拘，3～4月、周龄、体质量（2.25±0.16）kg]按随机数法分为A、B、C、D、E 5组（... 详细信息

目的评估新型冻干血小板（lyophilized platelet，LP）即凝血酶刺激下LP联用乳酸林格氏液对家兔失血性休克海水浸泡的复苏效果。方法将50只家兔，[雌雄不拘，3～4月、周龄、体质量（2.25±0.16）kg]按随机数法分为A、B、C、D、E 5组（n=10），以3%戊巴比妥钠按1 mL/kg剂量麻醉家兔，而后给予左下肢软组织损伤，同时以纱布止血，计量下肢软组织损伤的失血量。右下肢进行股动脉插管，随后按照家兔总血容量的26%进行抽血，后将家兔竖直浸泡在3%人工海盐模拟海水中，海水没过剑突，15 min后捞出。按照A组：致伤后不复苏；B组：致伤后输注乳酸林格氏液；C组：致伤后输注乳酸林格氏液及新鲜血小板；D组：致伤后输注乳酸林格氏液加LP；E组:致伤后输注乳酸林格氏液加新型LP，给予对应复苏策略。实验在致伤前及伤后1 h、2 h、4 h检测凝血功能、血常规、血气、血栓弹力图等指标。结果成功制备出具有功能活性的LP及家兔失血性休克海水浸泡损伤模型。在致伤后1 h，联用血小板制剂复苏的C、D、E组的平均动脉压(mean arterial pressure，MAP）显著高于未复苏的A组（P<0.05），C组的乳酸值（lactate，Lac）显著低于A、B组（P<0.05），C、D、E组的碱剩余（base excess，BE）及尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）显著低于A、B组（P<0.05），A组的凝血酶原时间（prothrombin time，PT）较0 h显著延长（P<0.05）。伤后2 h，C、D组的MAP高于A、B组，E组MAP高于A组（P<0.05），C、E组的Lac低于A、B组而D组Lac低于A组（P<0.05），C、D、E 3组的BE、BUN值均低于A、B组（P<0.05），C组的最大振幅（maximum amplitude，MA）高于A组，A、D 组此时刻的MA值较本组0 h显著下降（P<0.05），A、D组的活化部分凝血时间（activated partial clotting time ，APTT）较0 h延长（P<0.05）。伤后4 h，C、D、E组的MAP高于A、B组，B组MAP高于A组（P<0.05），C、D、E组的Lac、BUN值均低于A、B组（P<0.05），C、D组BE值低于A组，E组BE值低于A、B组（P<0.05），B、C、E组的MA值高于A组（P<0.05），而A、D组的MA值、APTT值较0 h本组初始值显著下降（P<0.05）。结论新型LP联用乳酸林格氏液能显著提高家兔的MAP，降低其乳酸值，维持血凝块强度及凝血功能。

关键词：冻干血小板失血性休克海水浸泡复苏血栓弹力图

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不同胚层来源成体干细胞修复周围神经损伤

中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4102-4110页

作者：郑家晨杨恩同朱弈舟刘芳海军军医大学基础医学院上海市200433 海军军医大学人体解剖学教研室上海市200433

背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一。中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能。而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研... 详细信息

背景:成体干细胞疗法是周围神经损伤修复与再生领域的研究热点之一。中胚层被视为成体干细胞的理想来源,间充质干细胞具有获得率高、来源广、增殖快等优异性能。而外胚层来源成体干细胞,尤其是神经嵴干细胞,具有神经源性,越来越受到研究人员的关注。目的:对来自外胚层和中胚层的多功能成体干细胞在周围神经损伤修复与再生中的作用及机制进行简要综述,探究不同来源成体干细胞的研究进展与应用前景,并结合临床研究,探讨成体干细胞疗法潜在的应用价值以及亟待解决的问题。方法:第一作者于2024年2月应用计算机在PubMed和SinoMed数据库检索2001年12月至2024年2月相关文献,以“ectodermal stem cells,mesenchymal stem cells,peripheral nerve injury,repair,regeneration”为英文检索词,以“外胚层干细胞、间充质干细胞、周围神经损伤、修复、再生”为中文检索词,最终纳入69篇文献进行分析论述。结果与结论:①外胚层来源成体干细胞具有优异的分化和再生潜能,尤其是毛囊神经嵴干细胞、嗅干细胞、牙外胚层干细胞等,具有神经源性,可在体外表达神经特异性标志物,但目前缺少临床试验研究。②中胚层来源成体干细胞种类多、易获得及纯化,其中骨髓间充质干细胞和脐带间充质干细胞在周围神经损伤修复的应用疗效及安全性方面有相关临床试验支持,能改善感觉及运动神经传导,且在随访中未出现并发症和明显不良反应。骨髓间充质干细胞的获取需行侵入性外科手术且要求患者与捐赠者骨髓配型吻合,应用受到一定限制;而脐带间充质干细胞虽无需侵入性获取,但分离较困难且表型不稳定。③内胚层来源成体干细胞常难以在体外生长,应用受限,目前应用于临床的可能性低。④综合来看,骨髓间充质干细胞仍为周围神经损伤干细胞治疗的首选细胞,适用于无外科手术禁忌且符合配型要求的情况,其次为脐带间充质干细胞,辅以分离方法的改进和表型稳定性的提高策略。⑤牙外胚层干细胞以及脂肪间充质干细胞具有较高应用潜能,有待进一步临床试验,其他外胚层、中胚层来源成体干细胞各以其优异特性在动物及细胞实验研究中具有显著优势。

关键词：成体干细胞周围神经损伤毛囊神经嵴干细胞嗅干细胞牙外胚层干细胞骨髓间充质干细胞脐带间充质干细胞羊水间充质干细胞皮肤干细胞肌肉间充质干细胞

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第二军医大学药学院科研仪器管理的思考

第二军医大学药学院科研仪器管理的思考

深化职工管理制度改革构建合理职工管理体系——第二军医大学药学院加强职工管理工作之浅见

医学科研管理前沿与实务研讨班

作者：丁力蔡国君姜远英第二军医大学药学院

随着国家和社会力量对高校加大投入,高等院校的科技资源迅速增长,而高校科研仪器设备使用与管理中的使用率低下、重复购置现象日渐突出。本文拟从平台建设、制度建设两个方面入手,探讨如何建立一个实用高效并且科学合理的实验室管理体系... 详细信息

随着国家和社会力量对高校加大投入,高等院校的科技资源迅速增长,而高校科研仪器设备使用与管理中的使用率低下、重复购置现象日渐突出。本文拟从平台建设、制度建设两个方面入手,探讨如何建立一个实用高效并且科学合理的实验室管理体系,体现以人为本为核心的科学发展观。

关键词：仪器管理公共实验平台预约系统维修基金

来源： cnki会议评论

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管理观察 2013年第30期 84-86页

作者：章海荣刘璐第二军医大学药学院上海200433 第二军医大学政治部上海200433

前言：在立足部队完成多样化军事任务使命下，部队职工管理涉及众多方面，职工队伍的岗位领域分布广、人员数量多，是军事力量构成中不可缺少的组成部分。长期以来，药学院的职工队伍默默奉献在库管、技术维护、财务管理等后勤保障工作... 详细信息

前言：在立足部队完成多样化军事任务使命下，部队职工管理涉及众多方面，职工队伍的岗位领域分布广、人员数量多，是军事力量构成中不可缺少的组成部分。长期以来，药学院的职工队伍默默奉献在库管、技术维护、财务管理等后勤保障工作岗位上，为保障全院工作学习的开展发挥了重要的作用。本文立足工作实际，从后勤管理工作中丞待解决的问题入手，总结职工管理的方法、举措，并提出思考和建议。

关键词：后勤管理工作职工管理第二军医大学药学院制度改革管理体系多样化军事任务职工队伍

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咪喹莫特两种给药方式构建斑秃动物模型的稳定性研究

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空军军医大学学报 2025年

作者：郑玲玲李旺廷张璐璐杜洋靳福星周旋翁琰王婧雯空军军医大学西京医院药剂科陕西中医药大学药学院

目的通过比较咪喹莫特两种不同造模方式构建的斑秃（AA）小鼠模型，探索稳定的AA动物模型的构建方法。方法 48只5～7周龄C57BL/6雄性小鼠随机分成4组。模型组1和空白对照组1：1次/d、同一时间在小鼠背部涂抹0.2 g咪喹莫特乳膏或凡士林... 详细信息

目的通过比较咪喹莫特两种不同造模方式构建的斑秃（AA）小鼠模型，探索稳定的AA动物模型的构建方法。方法 48只5～7周龄C57BL/6雄性小鼠随机分成4组。模型组1和空白对照组1：1次/d、同一时间在小鼠背部涂抹0.2 g咪喹莫特乳膏或凡士林，连续7d；模型组2和空白对照组2：3次/周、同一时间在小鼠背部涂抹0.2 g咪喹莫特乳膏或凡士林，持续35d。两种造模方式给药结束后均观察1周。实验中观测小鼠毛发宏观变化，持续监测体质量生长状态变化。给药结束与观察期后分别采集脱毛皮损部位，通过ELISA检测皮损部位IFN-γ蛋白表达情况，HE染色观察皮肤毛囊数量变化情况，免疫组化检测脱毛区域附近毛囊CD4+、CD8+T细胞浸润情况。结果咪喹莫特两种给药方式造模后，模型组1小鼠于第3日出现涂抹部位毛发脱落，7d后脱落完全；造模后潮红的脱毛部位在观察期第4日转呈青色，第7日开始有微小毛发生长，毛囊表现为造模7d后萎缩并于观察期内再度恢复生长；与空白对照组1相比，CD4+、CD8+T细胞在造模结束时出现明显浸润且IFN-γ表达显著（P＜0.01），但观察期内CD4+、CD8+T细胞浸润减少且IFN-γ表达明显下降；模型组2在造模第35日明显引起宏观毛发脱落，毛发镜可见脱毛部位皮肤光滑；组织病理学显示，与空白对照组2相比毛囊数量大量减少，CD4+、CD8+T细胞浸润增加明显，IFN-γ显著性表达（P＜0.01），且相关各项指标在观察期内未有明显变化。结论外用咪喹莫特每周3次、持续35 d建立的C57BL/6 AA模型小鼠，模型持续时间更长，与AA患者发病机制临床吻合度更高，是一种相对稳定、理想的研究AA疾病的动物模型。

关键词：斑秃动物模型稳定性咪喹莫特自身免疫性疾病

结核分枝杆菌c-di-AMP磷酸二酯酶的重组腺病毒的构建及其诱导的体液免疫应答

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中国人兽共患病学报 2025年

作者：胡家豪宁唤唤董梦娟路延之代婷张从玥徐子晴王姝予周正言柏银兰空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学基础医学院学员队空军军医大学军事医学创新中心宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系延安大学生命科学学院

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达... 详细信息

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达。重组pcADV-CnpB与骨架质粒共转染HEK293T细胞包装获得重组腺病毒rAd-CnpB，以HEK293T细胞扩增rAd-CnpB，Westernblot和免疫荧光检测rAd-CnpB表达目的蛋白。以rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，收集小鼠血清与肺泡灌洗液（BALF），ELISA检测抗原特异性抗体水平。结果酶切和测序鉴定表明重组质粒pcADV-CnpB构建成功，该质粒能够在真核细胞中表达。在HEK293T细胞内包装并获得rAd-CnpB，大量扩增并纯化获得滴度为5.53×1010PFU/mL的rAd-CnpB。rAd-CnpB可在HEK293T细胞中表达目的蛋白CnpB。rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，可诱导BALF中CnpB特异性IgG与分泌型IgA水平的增加，同时诱导血清中产生高水平的CnpB特异性IgG。结论成功构建表达Mtb c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒rAd-CnpB，并且rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导抗原特异性体液免疫与黏膜免疫应答，可用于结核病新疫苗策略的研究。

关键词：结核分枝杆菌重组腺病毒 c-di-AMP 磷酸二酯酶黏膜免疫