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细胞培养稳定核素标记技术的发展与应用

第二军医大学学报 2014年第8期35卷 892-897页

作者：吕权真阎澜姜远英第二军医大学药学院新药研究中心上海200433

细胞培养稳定核素标记(stable isotope labeling by amino acids in cell culture,SILAC)技术是一种利用稳定核素标记细胞内蛋白并根据质谱丰度比率进行定量的体内代谢标记技术。结合不同的蛋白亲和富集方式,可以获得较高灵敏度和准确... 详细信息

细胞培养稳定核素标记(stable isotope labeling by amino acids in cell culture,SILAC)技术是一种利用稳定核素标记细胞内蛋白并根据质谱丰度比率进行定量的体内代谢标记技术。结合不同的蛋白亲和富集方式,可以获得较高灵敏度和准确性的蛋白定量信息。本文综述了SILAC技术的发展历史、原理、特点以及应用,着重介绍了其在研究蛋白质与小分子间的相互作用、定量蛋白组学以及蛋白翻译后修饰等方面的应用进展。

关键词：细胞培养稳定核素标记亲和富集质谱定量蛋白组学

过氧化氢对5种唑类药物体外抗耐药白假丝酵母菌的协同作用

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第二军医大学学报 2011年第9期32卷 1000-1005页

作者：张姗姗王彦李德东曹永兵姜远英第二军医大学药学院新药研究中心上海200433

目的考察过氧化氢(H2O2)对5种唑类药物:氟康唑(FLC),伊曲康唑(ICZ),酮康唑(KCZ),咪康唑(MCZ)和硫康唑(SCZ)体外抗耐药白假丝酵母菌作用的影响。方法利用8株对氟康唑耐药,2株对氟康唑敏感的白假丝酵母菌,采用微量液基稀释法测定药物单用... 详细信息

目的考察过氧化氢(H2O2)对5种唑类药物:氟康唑(FLC),伊曲康唑(ICZ),酮康唑(KCZ),咪康唑(MCZ)和硫康唑(SCZ)体外抗耐药白假丝酵母菌作用的影响。方法利用8株对氟康唑耐药,2株对氟康唑敏感的白假丝酵母菌,采用微量液基稀释法测定药物单用时的最低抑菌浓度MIC80值,采用棋盘式微量液基稀释法测定两药联用时的MIC80值,在此基础上计算部分抑菌浓度指数(FICI)即协同指数,依据FICI值判断H2O2与唑类药物联用是具有协同、无关还是拮抗作用。结果对所有耐药菌株,两药联用的FICI值均小于0.5,H2O2与唑类药物联用显现出协同作用;对2株敏感菌株,两药联用的FICI值大于0.5、小于2,显示为无关作用。结论 H2O2和唑类药物(氟康唑,伊曲康唑,酮康唑,咪康唑,硫康唑)联用有协同抗耐药白假丝酵母菌作用。

关键词：过氧化氢唑类抗真菌药药物协同作用

蛇床子总香豆素抑制大鼠多核破骨细胞的形成和分化

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Acta Pharmacologica Sinica 2003年第2期24卷 181-186页

作者：秦路平张巧艳田野苹郑汉臣黄矛黄宝康第二军医大学基础医学部免疫学教研室第二军医大学新药评价中心第二军医大学药学院生药学教研室第二军医大学药学院生药学教研室上海 200433 中国

目的:研究蛇床子总香豆素(TCFC)对破骨细胞的作用,探讨其抗骨质疏松的作用机制。方法:采用原代培养的成骨细胞和骨髓单核细胞联合培养的方法,在1,25-(OH)2维生素D3和地塞米松作用下,使骨髓单核细胞分化形成破骨细胞。通过相差显微镜下... 详细信息

目的:研究蛇床子总香豆素(TCFC)对破骨细胞的作用,探讨其抗骨质疏松的作用机制。方法:采用原代培养的成骨细胞和骨髓单核细胞联合培养的方法,在1,25-(OH)2维生素D3和地塞米松作用下,使骨髓单核细胞分化形成破骨细胞。通过相差显微镜下的形态观察,抗酒石酸酸性磷酸酶染色和骨片上骨吸收陷窝的形成来鉴定破骨细胞。磷酸苯二钠法测定破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶的活性,计算机图像分析技术测定骨片上破骨性骨吸收陷窝的面积,原子吸收光谱法测定破骨细胞和骨片联合培养的培养上清中钙的浓度。结果:蛇床子总香豆素(TCFC)2.5—25mg/L抑制破骨细胞的形成和分化。TCFC0.25-25mg/L作用24-72h,可以显著抑制抗酒石酸酸性磷酸酶的活性,TCFC 25mg/L作用48h和72h分别可使其降低26.3%和24.1%。TCFC 25mg/L可使破骨细胞在骨片上形成的吸收陷窝的面积减少25.05%,骨片中Ca2+的释放减少41.73%。结论:TCFC通过抑制破骨细胞的形成、抗酒石酸酸性磷酸酶的活性和骨吸收作用减少骨质丢失。

关键词：蛇床子香豆素类骨质疏松破骨细胞骨吸收

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一氧化氮对微生物生长影响作用的两面性

第二军医大学学报 2010年第12期31卷 1356-1358页

作者：李德东王彦李莹姜远英第二军医大学药学院新药研究中心上海200433

近年来,随着研究的深入,一氧化氮(NO)越来越多的生物学功能逐渐被发现。以往国内外很多报道都证实NO在抗微生物感染方面起到重要作用,然而近年来的一些发现表明,NO对微生物的生长还起到保护作用,这种保护作用体现在NO能促进细菌的耐药... 详细信息

近年来,随着研究的深入,一氧化氮(NO)越来越多的生物学功能逐渐被发现。以往国内外很多报道都证实NO在抗微生物感染方面起到重要作用,然而近年来的一些发现表明,NO对微生物的生长还起到保护作用,这种保护作用体现在NO能促进细菌的耐药及在氧化应激和压力应激时对微生物的保护等方面。本文综述了NO对微生物生长影响作用的两面性及其机制的研究进展。

关键词：一氧化氮微生物两面性

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白假丝酵母菌对宿主的应激反应

第二军医大学学报 2013年第3期34卷 328-332页

作者：康烨阎澜姜远英第二军医大学药学院新药研究中心上海200433

白假丝酵母菌是临床最常见的条件致病真菌之一,近年来引起人们的广泛关注。白假丝酵母菌在侵染宿主时会遇到各种环境条件如温度、pH、渗透压及氧化损伤等的改变,如何适应这些环境条件对白假丝酵母菌在宿主中生存及发挥其致病性至关重要... 详细信息

白假丝酵母菌是临床最常见的条件致病真菌之一,近年来引起人们的广泛关注。白假丝酵母菌在侵染宿主时会遇到各种环境条件如温度、pH、渗透压及氧化损伤等的改变,如何适应这些环境条件对白假丝酵母菌在宿主中生存及发挥其致病性至关重要。本文总结了白假丝酵母菌应对宿主的应激反应通路,提示进一步深入研究白假丝酵母菌应激反应通路有助于发现新的抗真菌药物靶点。

关键词：白假丝酵母菌宿主与病原体相互作用应激

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NADH和NADPH代谢和功能的研究进展

第二军医大学学报 2011年第11期32卷 1239-1243页

作者：张姗姗王彦李德东曹永兵姜远英第二军医大学药学院新药研究中心上海200433

近年来的研究发现,NADH和NADPH在机体生理与病理条件下都发挥重要的功能,本文综述了NADH和NADPH的合成和降解,重点阐述了NADH、NADPH和NADPH氧化酶的功能,并按炎症、心血管疾病、肿瘤、神经退行性疾病等不同病理状况分别叙述。当前对细... 详细信息

近年来的研究发现,NADH和NADPH在机体生理与病理条件下都发挥重要的功能,本文综述了NADH和NADPH的合成和降解,重点阐述了NADH、NADPH和NADPH氧化酶的功能,并按炎症、心血管疾病、肿瘤、神经退行性疾病等不同病理状况分别叙述。当前对细胞内NADH(NADPH)作用和代谢的研究已成为国际性的研究热点,其相关机制的探讨将逐步深入。

关键词： NAD NADP 代谢功能

基于协同氟康唑抗耐药真菌活性的小檗碱结构衍生化研究

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药学学报 2014年第11期49卷 1563-1568页

作者：田淑娟高越臧成旭蔡瞻倪廷峻弘谭善伦曹永兵姜远英张大志第二军医大学药学院有机化学教研室上海200433 第二军医大学药学院新药研究中心上海200433

前期研究发现小檗碱能显著提高氟康唑对耐药白念珠菌的敏感性,提示其具有协同氟康唑抗耐药真菌作用。通过结构修饰和改造等衍生化研究,可为研究其作用靶点和构效关系、提高成药性、获得新结构活性化合物提供依据。以13位引入苄基对小檗... 详细信息

前期研究发现小檗碱能显著提高氟康唑对耐药白念珠菌的敏感性,提示其具有协同氟康唑抗耐药真菌作用。通过结构修饰和改造等衍生化研究,可为研究其作用靶点和构效关系、提高成药性、获得新结构活性化合物提供依据。以13位引入苄基对小檗碱进行结构修饰;以胡椒乙胺为起始原料合成异喹啉类化合物,模拟打开小檗碱D环、保持其A、B、C、E环的方式,对小檗碱进行结构改造;对获得的化合物进行体外与氟康唑合用抗耐药白念珠菌活性测试。结果显示13-苄基取代小檗碱类衍生物1a^1e保持了协同氟康唑抗耐药白念珠菌的活性,提示可通过13位苄基取代的方式引入各种功能基团而不降低其活性。小檗碱结构改造类似物N-苄基异喹啉类衍生物活性总体不高,但化合物2b、2c、4b表现了一定的活性,说明其基本骨架D环可以打开,值得进一步优化研究。

关键词：小檗碱氟康唑耐药白念珠菌构效关系合成

西那沙星与牛血清白蛋白的相互作用及共存金属离子影响的研究

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光谱学与光谱分析 2008年第11期28卷 2609-2614页

作者：费燕陆国才范国荣亓云鹏吴会灵吴玉田第二军医大学药学院上海市药物代谢产物研究重点实验室上海200433 第二军医大学基础部新药评价中心上海200433

应用荧光光谱法、紫外分光光度法研究了在不同酸度、温度条件下,西那沙星(Sinafloxacin)与牛血清白蛋白(bovine serum albumins,BSA)的相互作用,研究表明:西那沙星对BSA内源荧光的猝灭机制属于形成复合物所引起的静态猝灭,利用荧光猝灭... 详细信息

应用荧光光谱法、紫外分光光度法研究了在不同酸度、温度条件下,西那沙星(Sinafloxacin)与牛血清白蛋白(bovine serum albumins,BSA)的相互作用,研究表明:西那沙星对BSA内源荧光的猝灭机制属于形成复合物所引起的静态猝灭,利用荧光猝灭双倒数图计算了西那沙星与牛血清白蛋白之间的结合常数KD,根据F rster非辐射能量转移理论计算出西那沙星与牛血清白蛋白结合时授体-受体间的结合距离r=3.64 nm、能量转移效率E=0.163,表明两者之间有较强的作用,并根据热力学参数确定了西那沙星与牛血清白蛋白之间的主要作用力类型为静电作用力,同时采用同步荧光、三维荧光技术考察了西那沙星对BSA构象的影响。此外,讨论了共存Cu2+,Fe3+,Zn2+,Mg2+对西那沙星与BSA结合作用的影响。为探讨西那沙星在生物体内与蛋白质的作用机理和生物学效应提供了理论依据。

关键词：西那沙星牛血清白蛋白荧光法能量转移共存离子

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新的抗真菌药物靶点研究进展

菌物学报 2018年第10期37卷 1378-1390页

作者：张景翔阎澜姜远英第二军医大学药学院新药研究中心上海200433

近30年来,侵袭性真菌感染发病率持续上升,病死率居高不下,而治疗药物十分有限是造成其高致死率的重要因素之一。因此,发现新的抗真菌靶点和药物,已成为迫切需要。正在研究的新的抗真菌靶点如下:一是信号通路介导的抗真菌靶点,包括钙调... 详细信息

近30年来,侵袭性真菌感染发病率持续上升,病死率居高不下,而治疗药物十分有限是造成其高致死率的重要因素之一。因此,发现新的抗真菌靶点和药物,已成为迫切需要。正在研究的新的抗真菌靶点如下:一是信号通路介导的抗真菌靶点,包括钙调神经磷酸酶及其分子伴侣Hsp90、3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶(PKH)以及参与Ras蛋白修饰的相关酶等,其拮抗剂包括传统免疫抑制剂的类似物以及Hsp90抗体、KP-372-1和PS77以及手霉素A等;二是GPI锚定蛋白合成通路的催化酶,其抑制剂有E1210和M720等化合物;三是分泌型天冬氨酸蛋白酶,肽类、逆转录病毒抑制剂,以及砜类的衍生物等均可以抑制这一靶点;四是海藻糖的合成的两个关键酶Tps1和Tps2。鉴于侵袭性真菌感染严重影响人类公共健康安全,而新型抗真菌药物的研发又依赖于新靶点的探索,因此,本文靶向这一核心真菌临床问题,系统介绍了当前新的抗真菌药物靶点发展概况,并在靶点选择可行性以及针对靶点的药物研发策略上提出见解。

关键词：抗真菌靶点抑制剂