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携带hIL-2cDNA的逆转录病毒载体的构建及其在人肝癌细胞中的特异表达研究

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中华微生物学和免疫学杂志 1996年第4期16卷 245-249页

作者：曹广文杜平孔宪涛戚中田第二军医大学微生物学教研室上海200433

将人白细胞介素２（ｈＩＬ-２）ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ＭＮＳＭ的ＰＬ位点　，分别构建了转录受ＳＶ４０早期启动子和人甲胎蛋白增强子调控的重组逆转录病毒载体ＭＮＳＩ和ＭＮＳＩＡ。用脂质体转染法将ＭＮＳＩ和ＭＮＳＩＡ分... 详细信息

将人白细胞介素２（ｈＩＬ-２）ｃＤＮＡ克隆到逆转录病毒载体ＭＮＳＭ的ＰＬ位点　，分别构建了转录受ＳＶ４０早期启动子和人甲胎蛋白增强子调控的重组逆转录病毒载体ＭＮＳＩ和ＭＮＳＩＡ。用脂质体转染法将ＭＮＳＩ和ＭＮＳＩＡ分别转导ＰＡ３１７包装细胞，测质粒转染率为（５～２０）×１０^(－３)克隆／μｇＤＮＡ·１０~６细胞，病毒感染率为（５．４～４５０）×１０~４ＣＦＵ／ｍｌ。重组病毒在４μｇ／ｍｌｐｏｌｙｂｒｅｎｅ存在条件下感染人肝癌细胞、肾癌细胞和黑色素瘤细胞，Ｎｅｏ~Ｒ克隆经Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析证明ｈＩＬ－２ｃＤＮＡ转入人肿瘤细胞并整合，　Ｒ　ＮＡ斑点杂交及ＩＬ－２活性表达分析证明，人甲胎蛋白增强子可促进异源启动子启动ｈＩＬ－２ｃＤ－ＮＡ在合成甲胎蛋白的人肝癌细胞中高效特异转录和表达。该研究对肝癌特异性免疫增强基因治疗有重要意义。

关键词：白细胞介素2 逆转录病毒载体基因疗法肝肿瘤

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HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库的构建与筛选

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中华微生物学和免疫学杂志 2001年第4期21卷 359-363页

作者：潘卫戚中田吴晓兰贺祥陈秋莉潘欣第二军医大学微生物学教研室上海200433

目的　探讨噬菌体随机肽展示技术在筛选和鉴定病毒抗原序列研究中的应用前景。方法　用噬菌粒展示载体pCANTAB5X ,构建HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库。用抗 HCV核心单独阳性的血清对该库进行 4轮筛选 ,获得多个阳性克隆 ,测定和分析 ... 详细信息

目的　探讨噬菌体随机肽展示技术在筛选和鉴定病毒抗原序列研究中的应用前景。方法　用噬菌粒展示载体pCANTAB5X ,构建HCV核心蛋白噬菌体随机展示肽库。用抗 HCV核心单独阳性的血清对该库进行 4轮筛选 ,获得多个阳性克隆 ,测定和分析 8个杂交阳性克隆的DNA序列。结果　构建的随机文库含 1.2 3× 10 5个不同克隆 ,噬菌体滴度为 2× 10 12 TU/ml(转化单位 /ml)。所测定的 7个阳性序列中的 6个为HCV核心蛋白序列 ,这些序列均含有与免疫筛选结果相似的HCV核心抗原序列。另一个为大肠杆菌nrfa基因。结论　所建的噬菌体文库有足够大的库容和较好的随机性 ,可以从该文库中筛选出正确的HCVC抗原序列。噬菌体展示技术完全可应用于病毒蛋白抗原序列的筛选 ,并具有简便、快速。

关键词：噬菌体展示文库丙型肝炎病毒核心蛋白病毒抗原

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间充质干细胞在急性髓系白血病骨髓微环境中的研究进展

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实用医学杂志 2025年

作者：万星煜李楠刘水清张曦陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心血液病与微环境重庆市重点实验室金凤实验室

急性髓系白血病（acute myeloid leukemia, AML）是一种高度异质性、多基因突变驱动的血液肿瘤，具有发病率高、致死率高的特点。间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSCs）是具有自我更新、多向分化潜能的多能干细胞，是骨髓微环... 详细信息

急性髓系白血病（acute myeloid leukemia, AML）是一种高度异质性、多基因突变驱动的血液肿瘤，具有发病率高、致死率高的特点。间充质干细胞（mesenchymal stem cells, MSCs）是具有自我更新、多向分化潜能的多能干细胞，是骨髓微环境中的重要细胞成分。研究表明，MSCs通过转移线粒体、传递细胞外囊泡、促进自身成脂分化、分泌促癌蛋白等多种机制促进AML的发生发展。本文就MSCs在AML骨髓微环境中的作用作一综述，为靶向MSCs治疗AML的新策略提供参考。

关键词：急性髓系白血病间充质干细胞骨髓微环境促癌作用靶向治疗

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绿脓杆菌快速产生绿脓色素的探索

海军军医大学学报 1993年第6期 573-574页

作者：蔡燕刚宋艳斌李筠第二军医大学微生物学教研室第二军医大学微生物学教研室 200433

绿脓杆菌具有典型的细菌生长现象:产生菌膜及色素(绿脓色素),适合教学需要。过去对此菌的培养,一贯使用普通的营养肉汤管培养基,所产生的色素常变化不定,教学效果很不理想。为解决这一难题和提高教学质量,作者对原来的营养培养基

关键词：绿脓杆菌培养基

N端9个氨基酸缺失对恶性疟融合抗原免疫原性的影响

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生物化学与生物物理学报 2003年第4期35卷 345-349页

作者：张青锋潘卫庆曲莉薛向阳第二军医大学病原生物学教研室第二军医大学病原生物学教研室上海200433

由两个疟疾疫苗候选抗原AMA 1(III)和MSP1 19融合而成的恶性疟原虫融合抗原 2 (PfCP 2 ) ,是一个很有应用前景的疟疾疫苗候选抗原。但PfCP 2表达产物为双带型 ,这影响到该疫苗候选抗原作为产品进入临床试验。为此分析了表达产物N末端的... 详细信息

由两个疟疾疫苗候选抗原AMA 1(III)和MSP1 19融合而成的恶性疟原虫融合抗原 2 (PfCP 2 ) ,是一个很有应用前景的疟疾疫苗候选抗原。但PfCP 2表达产物为双带型 ,这影响到该疫苗候选抗原作为产品进入临床试验。为此分析了表达产物N末端的氨基酸序列 ,发现其中低分子量条带的N末端不完整 ,缺失 9个氨基酸。进一步用PCR技术对PfCP 2进行改建 ,使其N末端缺少 9个氨基酸 ,产生PfCP 2 .9基因。实验结果显示 :PfCP 2 .9在毕赤酵母中的表达产物为单一条带 ,且在表达水平、二硫键依赖的构象、免疫原性及免疫血清抑制疟原虫生长等方面与PfCP 2一致。PfCP 2表达产物双带型问题得到解决 ,为该融合抗原疟疾疫苗进入临床试验排除了重要障碍。

关键词：恶性疟原虫融合抗原毕赤酵母免疫原性体外抑制试验

印记基因簇Dlk1-Dio3：揭示非酒精性脂肪性肝病发病机制的新视角

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中国生物化学与分子生物学报 2025年

作者：肖思嘉郑永霞王文喜浙江工业大学药学院药物制剂系嘉兴大学医学院生物化学与分子生物学教研室

非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease， NAFLD）是全球日益严重的慢性肝病，其发病机制复杂，诊断和治疗面临诸多挑战。近年来，全基因组研究揭示了表观遗传修饰在NAFLD发生中的重要作用，尤其是印记基因的参与。NAFLD的... 详细信息

非酒精性脂肪肝（nonalcoholic fatty liver disease， NAFLD）是全球日益严重的慢性肝病，其发病机制复杂，诊断和治疗面临诸多挑战。近年来，全基因组研究揭示了表观遗传修饰在NAFLD发生中的重要作用，尤其是印记基因的参与。NAFLD的亲本来源效应表明，印记基因在其发病过程中发挥关键作用。Dlk1-Dio3基因簇作为最大的印记基因簇之一，因其在胚胎发育和代谢调控中的核心作用，成为研究的重点。本综述探讨了Dlk1-Dio3基因簇的结构与功能，及其在NAFLD发病中的潜在作用。该基因簇通过复杂的调控网络影响肝的脂代谢、糖代谢、炎症反应和氧化应激等生物过程，在NAFLD的“二次打击”中发挥关键作用。具体而言，DLK1作为负调控因子，抑制脂肪细胞分化，从而减少肝的脂质积累；而DIO3则通过调节甲状腺激素转化促进脂肪细胞分化，增加肝的脂质积聚。此外，Dlk1-Dio3基因簇通过调控多个microRNA（例如miR-370、miR-122等）调控脂肪代谢。miR-370通过抑制CPT1α加剧脂肪积聚；miR-122上调SREBP-1c，促进脂肪酸合成；miR-379/410簇则通过降低脂质清除能力，增加脂肪积累。长非编码RNA MEG3也在NAFLD中发挥重要作用。MEG3通过上调SIRT6促进脂肪酸氧化，减少脂滴堆积；并通过结合miR-21抑制Wnt/mTOR信号通路，减轻脂质合成。在胰岛素抵抗方面，DLK1通过激活PI3K/Akt/mTOR通路抑制糖异生并促进脂肪酸氧化，从而减轻肝的脂肪负担。DIO3则通过调节甲状腺激素影响胰岛素敏感性，促进NAFLD的发展。同时，Dlk1-Dio3基因簇在调控氧化应激和炎症反应中也具有重要作用，DLK1通过抑制炎症因子表达和激活抗氧化信号，减轻肝的氧化应激损伤。综上所述，Dlk1-Dio3基因簇在NAFLD的发生与发展中扮演着多维度的角色，提供了潜在的生物标志物和治疗靶点。

关键词：非酒精性脂肪肝 Dlk1-Dio3簇印记基因

NAG微量酶反应比色法在IL-2活性检测中的应用

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免疫学杂志 1990年第1期 45-47页

作者：郑杭民杜平第二军医大学微生物学教研室第二军医大学微生物学教研室上海 200433

本文研究了NAG微量酶反应比色法在IL-2活性检测中的应用,结果表明IL-2活性测定所用的CTLL-2细胞浓度与OD值呈直线关系(r=0.964715)。本文还探讨了NAG法在IL-2活性测定中CTLL-2细胞浓度,培养时间对检测效果的影响。本法与~3H—TdR掺入法... 详细信息

本文研究了NAG微量酶反应比色法在IL-2活性检测中的应用,结果表明IL-2活性测定所用的CTLL-2细胞浓度与OD值呈直线关系(r=0.964715)。本文还探讨了NAG法在IL-2活性测定中CTLL-2细胞浓度,培养时间对检测效果的影响。本法与~3H—TdR掺入法和MTT法相比有较好的一致性。

关键词： IL—2活性测定 NAG

数字化背景下脑脊液细胞形态学教学模式的探索

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卫生职业教育 2025年第1期43卷 46-49页

作者：杨武晨高力墙星张洪洋熊静康张诚高蕾彭贤贵张曦陆军军医大学第二附属医院重庆400037

探讨在教育数字化背景下利用人工智能辅助诊断系统开展脑脊液细胞形态学教学的效果。以2019年1月至2022年8月在陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心进修的32名学员为研究对象,随机分为试验组与对照组,试验组采用人工智能辅助诊断系... 详细信息

探讨在教育数字化背景下利用人工智能辅助诊断系统开展脑脊液细胞形态学教学的效果。以2019年1月至2022年8月在陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心进修的32名学员为研究对象,随机分为试验组与对照组,试验组采用人工智能辅助诊断系统教学模式,对照组采用传统教学模式,比较两组学员学习效果。实践表明,基于人工智能辅助诊断系统的教学模式,有助于提高学员对脑脊液细胞形态学的学习兴趣,具备良好的细胞识别能力,教学效果较好。

关键词：数字化人工智能辅助诊断系统脑脊液细胞形态学

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“全过程-全要素”课程考核模式在航空航天生理学心血管教学模块中的探索与实践

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心脏杂志 2025年 444-447+452页

作者：曹青林于菲李培杰卜英睿张斌宋一辰张琳谢满江叶晓龙空军军医大学航空航天医学系航空航天生理学教研室空军军医大学教学考评中心

目的探索“全过程-全要素”考核模式在航空航天生理学心血管教学模块的应用及效果。方法选取空军军医大学2017级和2018级全部航空航天医学专业学员作为研究对象，其中2017级48名学员作为对照组，2018级49名学员作为试验组，对照组采... 详细信息

目的探索“全过程-全要素”考核模式在航空航天生理学心血管教学模块的应用及效果。方法选取空军军医大学2017级和2018级全部航空航天医学专业学员作为研究对象，其中2017级48名学员作为对照组，2018级49名学员作为试验组，对照组采用传统课程考核模式，试验组选取对航空低压低氧等特殊环境因素反应较为敏感的心血管教学模块为考核试点，考核形式采用“全过程-全要素”课程考核模式。通过考核成绩、学员满意度、部队问卷调查、教员问卷调查结果对“全过程-全要素”课程考核模式进行评价与分析。结果试验组考核成绩明显高于对照组（P学员对“全过程-全要素”的考核模式表示认可。部队调研结果也表明试验组学员更能满足部队的实际任职需求，通过新考核模式，教员能更及时得到教学反馈，实现教学相长。结论 “全过程-全要素”课程考核模式能够有效提升学员知识、能力和素质能力，帮助教员提升教学能力，最终实现课程教学质量提升。

关键词：考核模式改革全过程-全要素教学质量