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腹腔注射攻毒建立蜱媒脑炎病毒感染BALB/c小鼠模型

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海军军医大学学报 2024年第1期45卷 42-48页

作者：唐万达彭浩然赵平赵兰娟海军军医大学(第二军医大学)海军医学系生物医学防护教研室上海200433

目的通过腹腔注射攻毒途径建立蜱媒脑炎病毒(TBEV)感染BALB/c小鼠模型,观察小鼠的感染症状和病毒在小鼠体内的复制特征。方法将6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为未感染病毒对照组、1×10^(3)空斑形成单位(PFU)TBEV感染组(以每只小鼠1×10^(3... 详细信息

目的通过腹腔注射攻毒途径建立蜱媒脑炎病毒(TBEV)感染BALB/c小鼠模型,观察小鼠的感染症状和病毒在小鼠体内的复制特征。方法将6周龄雌性BALB/c小鼠随机分为未感染病毒对照组、1×10^(3)空斑形成单位(PFU)TBEV感染组(以每只小鼠1×10^(3)PFU的攻毒剂量经腹腔注射感染小鼠)、1×10^(4)PFU TBEV感染组(以每只小鼠1×10^(4)PFU的攻毒剂量经腹腔注射感染小鼠),观察小鼠的感染症状、体重变化与生存情况。通过H-E染色观察小鼠脑、脾的病理改变,采用免疫组织化学染色检测小鼠脑、脾中TBEV蛋白的表达,采用空斑试验检测小鼠脑、脾中TBEV滴度的动态变化。结果1×10^(4)PFU TBEV感染组小鼠于感染后第6天出现弓背、后肢瘫痪等感染症状,1×10^(3)PFU TBEV感染组小鼠于感染后第7天出现上述症状。与未感染病毒对照组小鼠相比,1×10^(4)PFU TBEV感染组小鼠从第5天、1×10^(3)PFU TBEV感染组小鼠从第6天开始体重明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。1×10^(4)PFU TBEV感染组小鼠第7天开始死亡、第8天全部死亡,1×10^(3)PFU TBEV感染组小鼠第7天开始死亡、第9天全部死亡。H-E染色结果显示,TBEV感染后第5天、第7天小鼠大脑皮质仅出现少量神经元核固缩、深染,未观察到炎症细胞浸润;TBEV感染后第5天小鼠脾红髓轻度淤血、多见中性粒细胞,第7天中性粒细胞数量增多。免疫组织化学染色结果显示,TBEV感染后第5天小鼠脑与脾少量表达TBEV蛋白,第7天TBEV蛋白表达量增加。1×10^(3)PFU TBEV感染第7天,小鼠脑内TBEV滴度高达(1.3±0.6)×10^(5)PFU/mL,而脾中TBEV滴度为(1.3±0.6)×10^(3)PFU/mL。结论经腹腔注射攻毒成功建立了TBEV感染BALB/c小鼠模型,TBEV可在小鼠体内增殖并具致病性。

关键词：蜱媒脑炎病毒 BALB/c小鼠腹腔注射感染致病性

Homer1b/c通过内质网功能调节由谷氨酸兴奋性毒性损伤诱发的小鼠海马神经元HT22细胞自噬

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海军军医大学学报 2024年第3期45卷 277-283页

作者：张敏敏朱宣沈红健吕楠吴雄枫徐小龙吴涛海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院脑血管病中心上海200433

目的研究Homer1b/c蛋白在谷氨酸兴奋性毒性损伤诱发的细胞自噬中的作用及机制。方法选用小鼠海马神经元HT22细胞,通过500μmol/L L-谷氨酸处理建立细胞损伤模型。用siRNA慢病毒转染方式下调Homer1b/c表达,用10μmol/L钙离子螯合剂BAPTA... 详细信息

目的研究Homer1b/c蛋白在谷氨酸兴奋性毒性损伤诱发的细胞自噬中的作用及机制。方法选用小鼠海马神经元HT22细胞,通过500μmol/L L-谷氨酸处理建立细胞损伤模型。用siRNA慢病毒转染方式下调Homer1b/c表达,用10μmol/L钙离子螯合剂BAPTA-AM、10 mmol/L内质网应激抑制剂4-PBA分别抑制细胞内钙离子释放和内质网应激后,使用蛋白质印迹法检测细胞中Homer1b/c蛋白,自噬效应蛋白[beclin-1、微管相关蛋白1轻链3(LC3)]及内质网应激标志蛋白[C/EBP同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)]的表达水平。结果L-谷氨酸处理HT22细胞12 h后,细胞中beclin-1表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值均较对照组升高(均P<0.05);与转染对照组相比,下调Homer1b/c表达可降低细胞中beclin-1表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(均P<0.05);抑制细胞内钙离子释放和内质网应激均能降低细胞中beclin-1表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值(均P<0.05);下调Homer1b/c表达后,抑制细胞内钙离子释放和内质网应激未能进一步降低细胞中beclin-1表达和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值。结论Homer1b/c能够调节谷氨酸兴奋性毒性损伤诱发的细胞自噬,其调节作用可能与内质网功能有关。

关键词：海马神经元自噬 Homer 钙稳态内质网应激兴奋性损伤谷氨酸

低能量CO点阵激光通过激活瘢痕表皮细胞Wnt/β-联蛋白通路改善大鼠烧伤后瘢痕

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海军军医大学学报 2024年

作者：顾昊煜刘莹莹杨璐肖仕初罗鹏飞夏照帆海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院烧伤外科

目的探究瘢痕表皮细胞在低能量CO2点阵激光改善烧伤后瘢痕中的作用及其可能的分子机制。方法建立大鼠背部大面积烧伤后瘢痕模型。给予30mJ低能量CO2点阵激光干预，观察瘢痕表皮细胞激活情况，分离表皮组织行转录组测序筛选激活通路。... 详细信息

目的探究瘢痕表皮细胞在低能量CO2点阵激光改善烧伤后瘢痕中的作用及其可能的分子机制。方法建立大鼠背部大面积烧伤后瘢痕模型。给予30mJ低能量CO2点阵激光干预，观察瘢痕表皮细胞激活情况，分离表皮组织行转录组测序筛选激活通路。将烧伤后瘢痕模型大鼠随机分3组：对照组不予激光干预，激光组予30mJCO2点阵激光干预，激光+抑制剂组予激光干预+瘢痕内注射IWR-1，以验证筛选到的通路激活情况及其效应。通过病理染色和蛋白质印迹法检测表皮细胞和成纤维细胞活化、Wnt/β-联蛋白通路激活及瘢痕改善情况。结果低能量激光干预后，瘢痕表皮组织Ki67、PCNA、CK19、p63阳性细胞数量增多，活化明显；转录组测序结果结合文献分析筛选出Wnt/β-联蛋白通路作为候选通路。验证性实验结果显示，与对照组相比，激光组瘢痕表皮细胞Wnt/β-联蛋白通路被激活（β-联蛋白相对表达量1.00±0.22 vs 2.22±0.61，P<0.05），H-E和Masson染色示激光干预后第30天大鼠瘢痕组织真皮胶原排列更为疏松，厚度变薄（1.32±0.09 vs 1.59±0.12 mm，P<0.05），α-SMA阳性成纤维细胞数减少（52.17±11.70 vs 88.17±10.30/HPF，P<0.05），Ⅰ型、Ⅲ型胶原的含量及Ⅰ型／Ⅲ型胶原的比例下降；给予Wnt/β-联蛋白通路抑制剂后，上述低能量激光干预诱导的Wnt/β-联蛋白通路激活、瘢痕表皮细胞活化和瘢痕改善现象均被逆转。结论低能量CO2点阵激光可通过激活瘢痕表皮Wnt/β-联蛋白通路活化瘢痕表皮细胞、改善烧伤后瘢痕。

关键词：烧伤瘢痕低能量点阵激光表皮细胞 Wnt/β-联蛋白通路

91种炎症蛋白与5种心血管疾病的因果关系:双向孟德尔随机化研究

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海军军医大学学报 2024年第5期45卷 558-568页

作者：陈世崧黄凯徐泓杰徐志云韩林刘晓红海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院心血管外科上海200433

目的采用孟德尔随机化(MR)和反向MR方法评估91种炎症蛋白与5种心血管疾病(主动脉夹层、动脉瘤、冠心病、非风湿性心瓣膜病和风湿性心瓣膜病)之间的因果关系。方法使用来自欧洲人群的全基因组关联研究(GWAS)数据,利用MR方法和反向MR方法... 详细信息

目的采用孟德尔随机化(MR)和反向MR方法评估91种炎症蛋白与5种心血管疾病(主动脉夹层、动脉瘤、冠心病、非风湿性心瓣膜病和风湿性心瓣膜病)之间的因果关系。方法使用来自欧洲人群的全基因组关联研究(GWAS)数据,利用MR方法和反向MR方法对91种炎症蛋白与5种心血管疾病之间的双向因果关系进行评估分析。MR分析方法包括逆方差加权法、加权中位数法、MR-Egger回归、简单模式和加权模式,敏感性分析包括Cochran’s Q检验、MR-Egger截距检验、MR-PRESSO法和留一法。结果共有16种炎症蛋白可能与心血管疾病风险存在相关性,分别为C-C趋化因子配体(CCL)20、CD5、CCL28、白细胞介素20受体α(IL-20RA)、潜在转化生长因子β1前体(LAP-TGF-β1)、胸腺基质淋巴细胞生成集(TSLP)、胱抑素D(CST5)、白血病抑制因子(LIF)、翻译起始因子4E结合蛋白1(EIF4EBP1)、CCL4、白细胞介素22受体α1(IL-22RA1)、IL-10、IL-17C、单核细胞趋化蛋白(MCP)-2/CCL8、神经秩蛋白(NRTN)、MCP-3/CCL7。此外,心血管疾病的进展可能会导致10种炎症蛋白水平的变化,包括CCL11、IL-8、TNF-β、成纤维细胞生长因子(FGF)-19、白细胞介素10受体α(IL-10RA)、FGF-21、白细胞介素10受体β(IL-10RB)、β-神经生长因子(β-NGF)、CD5和MCP-1/CCL2。结论多种炎症蛋白与5种心血管疾病之间存在双向因果关系,进一步研究各种炎症蛋白与上述心血管疾病之间的相关性具有潜在临床价值。

关键词：炎症炎症蛋白心血管疾病孟德尔随机化全基因组关联研究

三氧化二砷通过降低Pin1表达及调节Wnt/β-连环素通路抑制肝癌细胞增殖

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海军军医大学学报 2024年第4期45卷 433-440页

作者：李欣万迁迁黄念万旭英海军军医大学(第二军医大学)第三附属医院中西医结合科上海200438

目的探讨三氧化二砷(ATO)在肝癌中对肽基脯氨酰基顺反异构酶NIMA相互作用蛋白1(Pin1)表达的抑制作用及其分子机制。方法使用DepMap数据库和GEPIA数据库中的数据分析Pin1在人肝癌细胞系和肝癌组织中的表达情况。以人肝癌细胞系Huh7和小... 详细信息

目的探讨三氧化二砷(ATO)在肝癌中对肽基脯氨酰基顺反异构酶NIMA相互作用蛋白1(Pin1)表达的抑制作用及其分子机制。方法使用DepMap数据库和GEPIA数据库中的数据分析Pin1在人肝癌细胞系和肝癌组织中的表达情况。以人肝癌细胞系Huh7和小鼠肝癌细胞系H22为细胞模型,通过ATP法检测ATO对肿瘤细胞活力的影响;通过蛋白质印迹法、免疫荧光染色和qPCR检测ATO对Pin1在蛋白质水平和转录水平表达的作用。用氯喹预处理Huh7细胞抑制溶酶体途径后,通过蛋白质印迹法和免疫荧光染色检测ATO对Pin1表达的调控作用。通过皮下荷瘤小鼠模型和免疫组织化学染色验证ATO在体内对肝癌细胞生长和Pin1表达的影响。采用RNA测序分析ATO可能影响的信号通路,并通过蛋白质印迹法和qPCR验证。结果在DepMap数据库23种人肝癌细胞系和GEPIA数据库人肝癌组织中,Pin1的表达均呈现较高水平。在体外实验中,ATO处理后Huh7和H22细胞的细胞活力均降低,细胞中Pin1在蛋白质和转录水平的表达均降低,但用氯喹抑制溶酶体途径逆转了ATO对Pin1表达的影响。在皮下荷瘤小鼠模型中,ATO表现出一定的抗肿瘤效果,免疫组织化学染色显示ATO处理后Pin1表达和肿瘤细胞增殖受到抑制。在ATO处理的H22细胞中Wnt/β-连环素通路相关基因富集,抑制H22细胞中Pin1的表达后β-连环素表达减少。结论ATO通过溶酶体途径抑制Pin1表达,以及影响Wnt/β-连环素信号通路来抑制肝癌细胞增殖。

关键词：三氧化二砷肽基脯氨酰基顺反异构酶NIMA相互作用蛋白1 肝癌 Wnt/β-连环素

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胰腺囊性肿瘤：超声内镜的诊治研究进展

海军军医大学学报 2024年

作者：王心悦孙力祺黄浩杰金震东海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院消化内科

胰腺囊性肿瘤（PCN）是一类具有显著异质性的胰腺肿瘤，近年来其检出率不断增加，逐渐成为临床医师关注的问题。当前PCN的诊断水平有限，每年仍有部分患者进行不必要的手术治疗。超声内镜（EUS）可以贴近胰腺扫查并进行穿刺活检，对于PC... 详细信息

胰腺囊性肿瘤（PCN）是一类具有显著异质性的胰腺肿瘤，近年来其检出率不断增加，逐渐成为临床医师关注的问题。当前PCN的诊断水平有限，每年仍有部分患者进行不必要的手术治疗。超声内镜（EUS）可以贴近胰腺扫查并进行穿刺活检，对于PCN的诊断和治疗具有一定的优势。本文主要总结了EUS应用于PCN诊断和治疗的最新进展。囊液分子标志物（如KRAS、GNAS、VHL）及新兴内镜技术（如EUS引导下细针型共聚焦显微内镜和经穿刺针囊内活检术）都被证明可提高PCN的诊断准确性。EUS引导下消融术是新兴的PCN微创治疗技术，特别是化学消融的有效性和安全性得到大量研究的支持。

关键词：胰腺囊性肿瘤黏液性非黏液性超声内镜消融治疗

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原发性胆汁性胆管炎伴多发性骨髓瘤1例报告

海军军医大学学报 2024年第6期45卷 781-783页

作者：田思佳李江燕魏婷婷张婷梁艳海军军医大学(第二军医大学)第二附属医院检验科上海200003

1病例资料患者男,61岁,因“多发性骨髓瘤”于2022年1月6日收入我院血液科。患者2020年出现乏力伴上腹不适,γ谷氨酰转肽酶和碱性磷酸酶升高,抗线粒体M2型抗体阳性,外院诊断为原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC),予每... 详细信息

1病例资料患者男,61岁,因“多发性骨髓瘤”于2022年1月6日收入我院血液科。患者2020年出现乏力伴上腹不适,γ谷氨酰转肽酶和碱性磷酸酶升高,抗线粒体M2型抗体阳性,外院诊断为原发性胆汁性胆管炎(primary biliary cholangitis,PBC),予每日口服熊去氧胆酸250 mg治疗。2021年10月患者无明显诱因出现颈部、左上肢酸痛不适,伴左手食指、中指、环指麻木,于2021年12月至我院骨肿瘤外科就诊,颈椎增强CT检查示颈椎轻度退变.

关键词：原发性胆汁性胆管炎多发性骨髓瘤免疫球蛋白

通用型CAR-NK治疗系统性红斑狼疮的应用与展望

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海军军医大学学报 2024年

作者：于奕奕胡佳琪靳正逸孔瑞娜高洁海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院风湿免疫科

系统性红斑狼疮（SLE）的特点是B细胞异常活化产生大量自身抗体，这些自身抗体与自身抗原形成免疫复合物诱发系统性炎症，导致全身多系统多器官受累。现有靶向B细胞的治疗策略（如贝利尤单抗、泰它西普及利妥昔单抗等）的临床疗效仍然... 详细信息

系统性红斑狼疮（SLE）的特点是B细胞异常活化产生大量自身抗体，这些自身抗体与自身抗原形成免疫复合物诱发系统性炎症，导致全身多系统多器官受累。现有靶向B细胞的治疗策略（如贝利尤单抗、泰它西普及利妥昔单抗等）的临床疗效仍然有限，近年来靶向CD19自体嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）治疗SLE展现出卓越的疗效。但自体CAR-T治疗存在细胞因子释放综合征、T细胞肿瘤、感染等潜在风险且价格昂贵。嵌合抗原受体自然杀伤细胞（CAR-NK）治疗是现货型细胞疗法，其安全性高，无神经毒性及肿瘤化风险，且治疗费用低。目前，CAR-NK在治疗血液系统肿瘤中取得了显著的研究成果，且CAR-NK治疗SLE的初步临床研究展现出良好的治疗效果、优异的安全性及可预期的持久性。本文将重点阐述新一代通用型CAR-NK的特点及其用于复发难治性SLE治疗的最新临床研究结果，展望其治疗SLE及B细胞相关自身免疫病的广阔前景。

关键词：系统性红斑狼疮嵌合抗原受体自然杀伤细胞通用型

虚拟购物改善轻度认知障碍患者认知功能的meta分析

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海军军医大学学报 2024年

作者：吴成浩丁琦超孙旭毕晓莹海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院神经内科

目的　系统性评价虚拟购物对轻度认知障碍患者认知功能的改善效果。方法　利用PubMed、EMBASE、Cochrane Library、Web of Science和中国知网数据库，检索建库至2023年9月发表的虚拟购物、轻度认知障碍、认知功能相关文献。严格按照纳... 详细信息

目的　系统性评价虚拟购物对轻度认知障碍患者认知功能的改善效果。方法　利用PubMed、EMBASE、Cochrane Library、Web of Science和中国知网数据库，检索建库至2023年9月发表的虚拟购物、轻度认知障碍、认知功能相关文献。严格按照纳入标准筛选文献、提取资料，应用Review Manager 5.3软件进行meta分析。结果　共纳入12项随机对照试验研究，包括382例轻度认知障碍患者。meta分析结果显示，与传统认知康复训练相比，虚拟购物能够改善轻度认知障碍患者的总体认知功能、执行功能、注意和日常生活能力（均P＜0.05），对记忆、语言、视空间能力的影响均无统计学意义（均P＞0.05）。结论　虚拟购物对改善轻度认知障碍患者的总体认知功能、执行功能、注意和日常生活能力有益。

关键词：虚拟现实技术虚拟购物轻度认知障碍 meta分析