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胆道生态系统：全局视角下的胆道外科关键科学问题

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中华外科杂志 2025年第1期63卷 39-44页

作者：王向付静海军军医大学第三附属医院胆道二科上海海军军医大学国家肝癌科学中心上海

随着胆道外科现代诊疗体系的建立与科学研究范式的转变, 无论是良性还是恶性胆道疾病, 均已进入精准化、个体化、全程化及多学科协作的诊疗和研究阶段。然而胆道外科医师仍面临着两大困境:(1)外科技术在降低良性胆道疾病致残率、提高胆... 详细信息

随着胆道外科现代诊疗体系的建立与科学研究范式的转变, 无论是良性还是恶性胆道疾病, 均已进入精准化、个体化、全程化及多学科协作的诊疗和研究阶段。然而胆道外科医师仍面临着两大困境:(1)外科技术在降低良性胆道疾病致残率、提高胆道肿瘤患者生存率方面进入了瓶颈期;(2)对于"切胆保胆""如何减黄"等临床争议, 传统的临床研究似乎难以给出确切答案。借鉴系统生物学的理念, 作者提出了"胆道生态系统"的概念框架:胆管是丛林, 血管、淋巴管、神经和免疫系统是土壤, 干细胞是种子, 胆汁是河流, 肝细胞是河流的发源地。良恶性疾病具有动态转化的特征;不同部位的胆管构成"大"环境, 胆汁形成"小"环境, 不同细胞组成"微"环境;细胞亚群具有不同状态及多样性, 并受复杂分子信号网络的调控。作者据此进一步凝练了胆道外科的若干关键科学问题, 提出了优化研究范式的建议, 旨在从全局视角推动学科交叉融合, 推动胆道外科临床及转化研究。

关键词：胆道疾病胆道肿瘤胆道生态系统普通外科学范式转变多组学技术

干扰素诱导蛋白P56与糖皮质激素受体的相互作用及对其转录活性的影响

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生物化学与生物物理进展 2004年第9期31卷 791-795页

作者：李淑蓉粟永萍刘晓宏楼淑芬程天民第三军医大学全军复合伤研究所重庆400038

糖皮质激素受体(GR)在严重创伤早期及全身性炎症反应中具有重要作用,为寻找与GR相互作用的新的蛋白质,以期调节GR的功能活性,应用酵母双杂交技术,以糖皮质激素受体配体结合区(GR LBD)为诱饵蛋白,在人骨髓cDNA文库中筛选到 4 2个阳性克隆... 详细信息

糖皮质激素受体(GR)在严重创伤早期及全身性炎症反应中具有重要作用,为寻找与GR相互作用的新的蛋白质,以期调节GR的功能活性,应用酵母双杂交技术,以糖皮质激素受体配体结合区(GR LBD)为诱饵蛋白,在人骨髓cDNA文库中筛选到 4 2个阳性克隆.测序结果表明,其中一个克隆为干扰素诱导蛋白P5 6的大部分编码序列(2 2 1～ 16 4 2bp,编码第 5 3位至第 4 78位氨基酸).利用酵母双杂交实验再次验证P5 6与GR具有结合作用.并用PCR方法从酵母质粒中扩增出P5 6片段,进行GST P5 6原核融合蛋白表达与纯化,及真核表达与免疫共沉淀.蛋白质结合实验表明,P5 6与GR LBD在体内外有结合作用.CAT报告基因检测表明P5

关键词：糖皮质激素受体,干扰素诱导蛋白P56 酵母双杂交系统转录活性

骨髓间充质干细胞对合并局部放射损伤创面促愈作用及机理研究

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中华医学杂志 2002年第23期82卷 1632-1636页

作者：艾国平粟永萍闫国和王蒙刘晓宏徐辉程天民第三军医大学预防医学系复合伤研究所重庆400038

目的　探讨骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)对合并局部放射损伤难愈性创面的作用及其机理研究。方法　成年健康贵州小香猪 8只 ,3%戊巴比妥钠静脉麻醉 ,电子线照射脊柱两旁皮肤 ,深度 1cm ,立即在受照射创面打孔 ,直径 2c... 详细信息

目的　探讨骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells,MSC)对合并局部放射损伤难愈性创面的作用及其机理研究。方法　成年健康贵州小香猪 8只 ,3%戊巴比妥钠静脉麻醉 ,电子线照射脊柱两旁皮肤 ,深度 1cm ,立即在受照射创面打孔 ,直径 2cm ,每侧 8～ 10个。一侧为对照组 ,局部注射生理盐水 ;一侧为MSC组 ,局部注射自体MSC。采用早期贴壁法分离小香猪骨髓MSC ,将自体的MSC移植到局部合并 2 0Gy的放射损伤创面 ,采用激光共聚焦、胶原定量、ELSIA、细胞划痕实验、RT PCR等方法 ,观察了MSC对合并放射损伤创面的促愈作用及其促愈的机理。结果　将自体的MSC移植到局部合并 2 0Gy创面后能加快创面愈合的速度 ,使愈合的时间比对照组提前了 3～ 4d ,肉芽组织形成丰富 ,胶原合成增加。其促愈的机理与MSC分泌IL 8、IL 6、G CSF等细胞因子吸引和趋化炎症细胞和修复细胞向创面迁移 ,启动修复 ,增加伤口中修复细胞 (成纤维细胞 ,血管内皮细胞 )的数量有关 ,同时MSC在创伤局部微环境的作用下 ,基因和蛋白表达发生变化 ,尤其是I型胶原基因表达和蛋白合成增加 ,提示在局部微环境作用下 ,MSC可分泌细胞外基质或 /和直接分化为成纤维细胞参与组织的修复。结论　MSC对局部合并放射损伤的创面有明显有效的促愈效应。

关键词：骨髓间充质干细胞创面愈合作用机理动物实验局部放射损伤

Red/ET同源重组介导细菌人工染色体的快速修饰

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生物化学与生物物理进展 2005年第5期32卷 468-473页

作者：王军平张友明粟永萍第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所创伤烧伤复合伤国家重点实验室 GeneBridgeGmbH Dresden01307Germany

随着基因组测序工程的实施与完成,如何对包含完整基因信息的特定细菌人工染色体(BAC)进行有目的修饰,已成为功能基因组学研究的一个重要环节.应用新近优化的Red/ET同源重组技术对目标BAC进行修饰,以pSC101-BAD-gbaA为依托质粒,采用rpsL... 详细信息

随着基因组测序工程的实施与完成,如何对包含完整基因信息的特定细菌人工染色体(BAC)进行有目的修饰,已成为功能基因组学研究的一个重要环节.应用新近优化的Red/ET同源重组技术对目标BAC进行修饰,以pSC101-BAD-gbaA为依托质粒,采用rpsL鄄neo为正/反向筛选系统,可以快速、高效地对BAC进行剪切、插入、替换等操作,其中能够进行抗性筛选的一步BAC修饰只需一周时间,以插入非抗性标记基因Cre为代表的两步BAC修饰在两周内即可完成.通过阿拉伯多糖诱导调控和简单地变化培养温度,能使pSC101-BAD-gbaA依托质粒在发挥完Red/ET同源重组作用后自然消失,最终获得完整而纯净的修饰后BAC,为加快功能基因组学研究提供了一个可靠的实验平台.

关键词： Red/ET同源重组 BAC修饰功能基因组

放创复合伤大鼠伤口液对血管内皮细胞迁移和增殖活性的影响

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中华放射医学与防护杂志 2002年第3期22卷 175-177页

作者：陈晓红程天民冉新泽高京生粟永萍林远第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所

伤口难愈是临床上常见的一种顽症。电离辐射、局部营养障碍、局部感染以及全身性疾病如糖尿病等，均可导致伤口难以愈合。其中，电离辐射引起伤口难愈，至今尚缺乏系统深入的研究报告。我们前期的研究表明，大鼠受6 Gy全身照射后，伤口... 详细信息

伤口难愈是临床上常见的一种顽症。电离辐射、局部营养障碍、局部感染以及全身性疾病如糖尿病等，均可导致伤口难以愈合。其中，电离辐射引起伤口难愈，至今尚缺乏系统深入的研究报告。我们前期的研究表明，大鼠受6 Gy全身照射后，伤口的肉芽组织内毛细血管数量于伤后3d即明显低于单纯创伤组，说明放创复合的伤口修复起始过程就有障碍。本研究仍采用大鼠6Gy全射照射复全背部切割伤的模型，从伤口液刺激血管内皮细胞活性的变化方面来探讨放创复合的伤口修复启动受抑的机理。

关键词：放射损伤创伤细胞迁移细胞增殖放创复合伤大鼠伤口液血管内皮细胞

不同取片方式对植入贫铀片大鼠组织铀浓度的影响

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第三军医大学学报 2004年第7期26卷 569-572页

作者：李蓉艾国平徐辉任洄楼淑芬程天民粟永萍郑怀恩黄跃生蒋建新第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所

目的　取出嵌入的贫铀弹片后 ,其周围组织中仍有高浓度的贫铀污染 ,研究何种取片方法能最低限度减轻这种污染 ,对减轻机体损伤有重要意义。方法　动物麻醉状态下手术植入贫铀片 ,10d后以各种不同的方法取出 ,分为常规手术组、术前 4%碳... 详细信息

目的　取出嵌入的贫铀弹片后 ,其周围组织中仍有高浓度的贫铀污染 ,研究何种取片方法能最低限度减轻这种污染 ,对减轻机体损伤有重要意义。方法　动物麻醉状态下手术植入贫铀片 ,10d后以各种不同的方法取出 ,分为常规手术组、术前 4%碳酸氢钠去污组、创口去污组、更换手术器械组、剪去周围组织组和综合法组 ,在取片后第 7、14、2 1天收集组织样本 ,测定铀含量。结果　以常规手术组组织铀含量最高 ,术前去污组、切口去污组和更换器械组次之 ,剪去周围组织铀含量下降较大 ,综合组最低。结论　综合应用各种方法实行手术 ,即术前 4%碳酸氢钠去污 +切口去污 +更换器械 +剪去周围组织效果最好。

关键词：贫铀弹片浓度

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贫铀对人肾小管上皮细胞的毒性作用

第三军医大学学报 2004年第3期26卷 185-188页

作者：李蓉艾国平徐辉楼淑芬程天民粟永萍郑怀恩蒋建新黄跃生第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所

目的　阐明贫铀 (depleteduranium ,DU)对人肾小管上皮细胞 (humankidneycell,HKC)的急性毒性作用及损伤部位 ,为救治提供依据。方法　将 0 0 63～ 0 5 0 0mg ml的DU溶液作用于HKC ,研究细胞超微结构、存活率的变化 ,多种酶含量的改变... 详细信息

目的　阐明贫铀 (depleteduranium ,DU)对人肾小管上皮细胞 (humankidneycell,HKC)的急性毒性作用及损伤部位 ,为救治提供依据。方法　将 0 0 63～ 0 5 0 0mg ml的DU溶液作用于HKC ,研究细胞超微结构、存活率的变化 ,多种酶含量的改变及HGPRT基因突变的频率。结果　 0 0 63～ 0 5 0 0mg ml浓度的DU可引起HKC细胞结构改变 ,存活率显著下降 ;溶酶体酶NAG含量随DU浓度的增加而增加 ;其他酶含量也发生变化 ;HGPRT基因突变的发生率显著高于正常对照组 ,并呈二项式相关关系。加入苯乙酸、亚硒酸钠使上述指标变化不大。结论　DU可引起细胞活力降低 ,损伤细胞膜、线粒体、溶酶体等 ,使细胞抗氧化能力下降 ;HGPRT基因突变率与DU浓度之间呈相关关系 ;加入恶性转化的抑制剂亚硒酸钠和苯乙酸。

关键词：贫铀毒性人肾小管上皮细胞

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复合伤研究的开拓者——程天民院士

中华放射医学与防护杂志 1998年第4期18卷 3-4页

作者：冉新泽林远第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所

复合伤研究的开拓者——程天民院士冉新泽林远中国工程院院士程天民教授，１９２７年１２月出生于江苏省宜兴市的周铁镇。他从小就亲身经历了家乡被日寇侵占所受到的苦难。１９４５年７月，在江苏省立苏州中学（内迁宜兴，改名弘毅中学... 详细信息

复合伤研究的开拓者——程天民院士冉新泽林远中国工程院院士程天民教授，１９２７年１２月出生于江苏省宜兴市的周铁镇。他从小就亲身经历了家乡被日寇侵占所受到的苦难。１９４５年７月，在江苏省立苏州中学（内迁宜兴，改名弘毅中学）毕业后，步行到当时的东南重镇的安...

关键词：复合伤创伤防原医学程天民

真皮来源成体多能干细胞体外自发恶性转化现象及机制研究

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第三军医大学学报 2004年第1期26卷 71-73页

作者：史春梦麦跃程天民粟永萍徐辉郑怀恩王军平黄跃生蒋建新第三军医大学预防医学系全军复合伤研究所

目的　研究真皮来源成体多能干细胞体外恶性转化现象及其相关机制。方法　对分离的真皮多能干细胞克隆体外进行连续传代培养 ,观察其生长性状的改变 ,通过裸鼠皮下接种实验观察其是否恶性转化 ;应用基因芯片技术比较转化前后细胞基因表... 详细信息

目的　研究真皮来源成体多能干细胞体外恶性转化现象及其相关机制。方法　对分离的真皮多能干细胞克隆体外进行连续传代培养 ,观察其生长性状的改变 ,通过裸鼠皮下接种实验观察其是否恶性转化 ;应用基因芯片技术比较转化前后细胞基因表达谱的改变。结果　经过长期体外连续传代培养后 ,真皮多能干细胞可发生恶性转化 ,在裸鼠体内形成肉瘤样组织 ;基因芯片技术检测显示 ,转化后细胞仍表达多种类型细胞特异性基因的转录子 ,提示其仍具有多向分化的潜能 ;但转化后细胞多种增殖相关基因的表达升高 ,代谢反应酶类基因表达升高 ,生长因子和受体的表达下调 ,符合肿瘤细胞的特征 ;c ki ras基因及其相关信号分子的表达上调可能在转化过程中起重要作用 ;初步筛选鉴定了一个与干细胞增殖调控相关的候选基因。结论　体外长期连续传代培养可诱发真皮多能干细胞的恶性转化。

关键词：干细胞恶性转化皮肤