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胆道生态系统：全局视角下的胆道外科关键科学问题

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中华外科杂志 2025年第1期63卷 39-44页

作者：王向付静海军军医大学第三附属医院胆道二科上海海军军医大学国家肝癌科学中心上海

随着胆道外科现代诊疗体系的建立与科学研究范式的转变, 无论是良性还是恶性胆道疾病, 均已进入精准化、个体化、全程化及多学科协作的诊疗和研究阶段。然而胆道外科医师仍面临着两大困境:(1)外科技术在降低良性胆道疾病致残率、提高胆... 详细信息

随着胆道外科现代诊疗体系的建立与科学研究范式的转变, 无论是良性还是恶性胆道疾病, 均已进入精准化、个体化、全程化及多学科协作的诊疗和研究阶段。然而胆道外科医师仍面临着两大困境:(1)外科技术在降低良性胆道疾病致残率、提高胆道肿瘤患者生存率方面进入了瓶颈期;(2)对于"切胆保胆""如何减黄"等临床争议, 传统的临床研究似乎难以给出确切答案。借鉴系统生物学的理念, 作者提出了"胆道生态系统"的概念框架:胆管是丛林, 血管、淋巴管、神经和免疫系统是土壤, 干细胞是种子, 胆汁是河流, 肝细胞是河流的发源地。良恶性疾病具有动态转化的特征;不同部位的胆管构成"大"环境, 胆汁形成"小"环境, 不同细胞组成"微"环境;细胞亚群具有不同状态及多样性, 并受复杂分子信号网络的调控。作者据此进一步凝练了胆道外科的若干关键科学问题, 提出了优化研究范式的建议, 旨在从全局视角推动学科交叉融合, 推动胆道外科临床及转化研究。

关键词：胆道疾病胆道肿瘤胆道生态系统普通外科学范式转变多组学技术

胃印戒细胞癌的H3K27me3沉默子重塑特征及转录调控功能

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陆军军医大学学报 2025年

作者：杜艾贝任原锋储召乐刘碧颖李先锋向俊宇陈东风王涛王斌郭海英张璇李玉红陆军军医大学基础医学院细胞生物学教研室陆军特色医学中心(第三军医大学大坪医院)消化内科消化系统肿瘤精准防治重庆市重点实验室重庆市中医院肿瘤科

目的本研究旨在通过表观遗传组学技术，解析胃印戒细胞癌（Signet-Ring Cell Carcinoma of the stomach，SRCC）的H3K27me3沉默子的全基因组特征及其对基因转录的调控作用，以阐明SRCC恶性进展的表观调控机制。方法本研究收集2021年1... 详细信息

目的本研究旨在通过表观遗传组学技术，解析胃印戒细胞癌（Signet-Ring Cell Carcinoma of the stomach，SRCC）的H3K27me3沉默子的全基因组特征及其对基因转录的调控作用，以阐明SRCC恶性进展的表观调控机制。方法本研究收集2021年1月至2023年12月期间就诊于陆军特色医学中心消化内科患者内镜下获得的15例正常胃窦/胃体样本和20例SRCC样本，进行染色质可及性测序（Assay for Transposase-Accessible Chromatin with high-throughput Sequencing，ATAC-seq），H3K27me3沉默子的染色质靶向捕获测序（Cleavage Under Targets and Tagmentation，CUT&Tag）以及RNA测序，并联合分析。筛选受沉默子调控的候选差异表达基因，利用GO和KEGG分析其潜在肿瘤生物学功能。富集SRCC特征性沉默子的关键转录因子调控基序，构建转录因子调控网络，探讨其调控机制。结果 SRCC沉默子主要分布于基因组远端基因间区（占37.06%）。与正常组织相比，SRCC中H3K27me3沉默子信号显著降低（P＜0.01），共鉴定出6 257个丢失位点。CUT&Tag和RNA-seq整合分析显示，380个因沉默子丢失而上调的基因显著富集于免疫相关通路，如T细胞受体信号通路（P＜0.01）。免疫组化验证表明转录因子EHF表达显著升高（P＜0.05）。结论本研究揭示SRCC中H3K27me3沉默子的重塑现象及其转录调控关键作用，为SRCC的防治提供了干预新思路。

关键词：胃印戒细胞癌表观遗传组蛋白修饰沉默子

管花苷B抑制Aβ1-42淀粉样纤维化并降低其细胞毒性的研究

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药学学报 2025年第1期 96-104页

作者：张迪张娟利文爱东王婧雯空军军医大学第一附属医院药剂科

本文旨在探讨管花苷B （tubuloside B,Tub B）对β-淀粉样蛋白（amyloid β-protein,Aβ）纤维化的抑制作用及潜在作用机制。采用体外孵育Aβ1-42建立蛋白质淀粉样纤维化模型,利用硫黄素-T （thioflavin T,Th T）、刚果红（Congo red,C... 详细信息

本文旨在探讨管花苷B （tubuloside B,Tub B）对β-淀粉样蛋白（amyloid β-protein,Aβ）纤维化的抑制作用及潜在作用机制。采用体外孵育Aβ1-42建立蛋白质淀粉样纤维化模型,利用硫黄素-T （thioflavin T,Th T）、刚果红（Congo red,CR）、8-苯胺-1-萘磺酸（8-anilino-1-naphthalene sulfonic acid,ANS）染色和透射电子显微镜（transmission electron microscope,TEM）考察Tub B对Aβ1-42纤维形成的抑制作用;圆二色谱（circular dichroism,CD）分析Tub B对Aβ1-42二级结构的影响;3-（4,5-二甲基-2-噻唑）-2,5-二苯基溴化四氮唑噻唑蓝[3-（4,5-dimethyl-2-thiazolyl）-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT]和红细胞溶血实验研究Tub B对Aβ1-42诱导的细胞毒性的抑制作用;2',7'-二氯二氢荧光素二乙酸酯（2',7'-dichlorofluorescin diacetate,DCFH-DA）染色检测Tub B对Aβ1-42诱导的细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）含量的影响;以及利用分子对接实验研究Tub B与Aβ1-42分子相互作用。结果显示,Tub B对Aβ1-42淀粉样纤维形成具有一定抑制作用,可降低Aβ1-42二级结构中α-螺旋结构向β-折叠结构的转化,减少疏水区域暴露,减弱Aβ1-42引起的细胞毒性和红细胞溶血性,降低细胞损伤。综上所述,Tub B能够抑制蛋白质淀粉样纤维形成,且这种抑制作用可能与其抗氧化活性及与蛋白质分子间的氢键和疏水作用力有关。本研究的动物实验经空军军医大学动物实验伦理委员会批准（批准号:20190051）。

关键词：管花苷B 阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白纤维化抑制作用

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肺癌气腔播散的影像学预测研究进展

临床放射学杂志 2025年第1期44卷 191-194页

作者：吕登望云(综述) 刘士远(审校) 海军军医大学第二附属医院放射诊断科上海200003

2015年,世界卫生组织正式提出气腔播散(spread through air spaces,STAS)的定义,即肿瘤细胞以微乳头状细胞簇、实性癌巢或单个肿瘤细胞的形式出现在主肿瘤周边的肺组织内,并确定STAS为肺腺癌的第四类侵袭方式[1]。随后的研究表明肺鳞癌... 详细信息

2015年,世界卫生组织正式提出气腔播散(spread through air spaces,STAS)的定义,即肿瘤细胞以微乳头状细胞簇、实性癌巢或单个肿瘤细胞的形式出现在主肿瘤周边的肺组织内,并确定STAS为肺腺癌的第四类侵袭方式[1]。随后的研究表明肺鳞癌、肺多形性癌、肺神经内分泌肿瘤、肺小细胞癌亦存在STAS,对于STAS阳性肺癌患者而言,选择肺叶切除术较亚肺叶切除术可以获得更好的预后[2~8]。目前诊断STAS的金标准为术后病理,但对STAS阳性患者临床治疗方案的选择缺乏时效性,术前穿刺、术中冰冻病理检查存在灵敏度不高、组织样本有限、诊断时间较短等局限性[9,10]。因此术前无创、全面反映肿瘤特征的影像学检查得到广泛关注。本文对近年来影像学预测STAS方面的研究进行综述,旨在探索术前准确预测肺癌STAS状态的新思路、新方法。

关键词：肺小细胞癌诊断时间肺叶切除术肺鳞癌临床治疗方案影像学检查术前穿刺肿瘤特征

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丹参多酚酸盐对小鼠糖尿病心肌梗死后的保护作用及初步机制探讨

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空军军医大学学报 2025年

作者：杨雪蒲思颖赵美娜梁琦耿静郭栋王瑛胡朗李妍空军军医大学唐都医院心内科空军军医大学西京医院药剂科

目的探讨丹参多酚酸盐（SAL）对糖尿病小鼠心肌梗死（MI）后的保护作用及初步机制。方法将成年雄性C57BL/6J小鼠设为对照组；自发性2型糖尿病小鼠（db/db）分为模型组、阳性药组和SAL给药组（50、100、200mg/kg），每组6只，结扎小鼠... 详细信息

目的探讨丹参多酚酸盐（SAL）对糖尿病小鼠心肌梗死（MI）后的保护作用及初步机制。方法将成年雄性C57BL/6J小鼠设为对照组；自发性2型糖尿病小鼠（db/db）分为模型组、阳性药组和SAL给药组（50、100、200mg/kg），每组6只，结扎小鼠冠状动脉左前降支建立MI损伤模型。连续给药7d。使用彩色多普勒超声设备对小鼠心脏功能各项指标进行评估。此外，运用HE染色技术对心肌组织的病理损伤进行检测。ELISA法测定小鼠血清中血管性血友病因子（vWF）、血小板内皮细胞黏附分子-1（PECAM-1）、内皮细胞选择素（E-selectin）、一氧化氮（NO）、活性氧（ROS）、白细胞介素–1β（IL-1β）、白细胞介素–6（IL-6）、肿瘤坏死因子–α（TNF-α）等指标；同时，利用qRT-PCR和Westernblotting技术分析小鼠心肌组织中血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮细胞生长因子受体2（VEGFR2）、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）和蛋白激酶B（Akt）的mRNA及其蛋白表达水平。结果模型组相较于对照组血糖和胰岛素水平更高，心肌组织病理损伤更严重，左室射血分数、左室小轴缩短率、NO水平降低（均P＜0.01），左室收缩末期内径（P＜0.01）、左室舒张末期内径（P＜0.01）、vWF（P＜0.001）、PECAM-1（P＜0.01）、E-selectin（P＜0.0001）、ROS（P＜0.001）、IL-1β（P＜0.001）、IL-6（P＜0.001）、TNF-α（P＜0.001）表达均升高，VEGF、VEGFR2的mRNA和蛋白表达应激性升高（均P＜0.01）；与模型组比较，阳性药组和SAL不同剂量给药组可明显改善上述变化。结论SAL通过抑制炎症进程，恢复血管内皮损伤功能，调控VEGF/PI3K/Akt信号通路改善心脏功能，发挥糖尿病小鼠MI后的保护作用。

关键词：糖尿病并发症丹参多酚酸盐心肌梗死内皮功能小鼠

FTA-环介导等温扩增技术直接提取变异链球菌DNA的效果评价

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中国组织工程研究 2025年第5期29卷 1043-1049页

作者：王玥晖尚进杨晨符冬格曹灿张晓东王敬夫北部战区总医院口腔科辽宁省沈阳市110016 空军军医大学第三附属医院颌面外科陕西省西安市710004

背景:变异链球菌是龋病的重要病原菌,及时检测变异链球菌水平对龋病的早发现、早治疗有重要意义。目的:建立并评价FTA-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术直接提取变异链球菌DNA的应用效果。方法:①制备... 详细信息

背景:变异链球菌是龋病的重要病原菌,及时检测变异链球菌水平对龋病的早发现、早治疗有重要意义。目的:建立并评价FTA-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术直接提取变异链球菌DNA的应用效果。方法:①制备含有ATCC标准菌株变异链球菌的菌悬液,接种于脑心浸出液培养基,充分混匀后按10倍梯度稀释成7种浓度(4.2×10^(7),4.2×10^(6),4.2×10^(5),4.2×10^(4),4.2×10^(3),4.2×10^(2),4.2×10 CFU/mL),每个稀释级做2个平行对照,并增加无菌水作为空白对照;②分别采用FTA卡、常规煮沸法、试剂盒提取及裂解液提取4种方法直接提取菌株DNA,通过LAMP技术进行扩增,并进行特异性试验,比较4种提取方法的差异。结果与结论:①4种方法提取的DNA均满足LAMP扩增的要求;②特异性试验结果显示,只有变异链球菌才可特异扩增出靶基因;③裂解液提取法最低检测限为4.2×10^(3) CFU/mL,FTA卡提取法最低检测限为4.2×10^(4) CFU/mL,试剂盒提取法和常规煮沸法最低检测限分别为4.2×10^(6) CFU/mL和4.2×10^(7) CFU/mL;④4种提取方法其他方面的比较显示,试剂盒提取法的实验成本、步骤数和时间都是最高;其他3种方法步骤数一致,其中FTA卡所需仪器设备最少,常规煮沸法单次成本最低,裂解液提取法所需时间最少;FTA卡和裂解液提取法仅需少量菌即可提取成功,后者在时间方面优于FTA卡,但相较于FTA卡其单次成本高,所需设备多;⑤结果说明,该研究建立的FTA-LAMP技术具有操作简便、特异性强、灵敏度高、结果可视化等优势,有望为高效提取检测变异链球菌提供新途径。

关键词：变异链球菌环介导等温扩增 FTA卡 DNA 可视化

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滚环扩增型压电石英晶体传感器检测乙型肝炎病毒

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高等学校化学学报 2014年第8期35卷 1635-1639页

作者：姚春艳王云霞府伟灵第三军医大学西南医院检验科重庆400038

通过捕获探针与纳米金膜之间的共价连接,保证了滚环扩增(RCA)产物始终结合于金膜表面,Phi29DNA聚合酶的高效扩增和Escherichia coli DNA链接酶的高度精确性使检测达到单碱基识别,检测灵敏度达到104copies/mL.实验结果表明,与单碱基错配... 详细信息

通过捕获探针与纳米金膜之间的共价连接,保证了滚环扩增(RCA)产物始终结合于金膜表面,Phi29DNA聚合酶的高效扩增和Escherichia coli DNA链接酶的高度精确性使检测达到单碱基识别,检测灵敏度达到104copies/mL.实验结果表明,与单碱基错配序列相比,RCA可明显增强检测的灵敏度.该RCA基因传感器操作简单,灵敏度和特异性较高,在乙型肝炎病毒的快速检测方面具有一定的开发潜力.

关键词：滚环扩增石英晶体传感器乙型肝炎病毒

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长链非编码RNA TP53TG1促进根尖牙乳头干细胞成牙本质及成骨分化

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中国组织工程研究 2025年

作者：黎庭悦郭倩何文喜吴家媛遵义医科大学口腔医学院军事口腔医学国家重点实验室陕西省口腔医学重点实验室空军军医大学第三附属医院牙体牙髓病科空军军医大学特色医学中心口腔科

背景：长链非编码RNA TP53TG1(lncRNA TP53TG1)参与调控多种癌症细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡，但在其他细胞中的作用报道甚少。目的：探讨lncRNA TP53TG1对人根尖牙乳头干细胞增殖和分化的影响及途径。方法：分离、培养人根尖牙乳头... 详细信息

背景：长链非编码RNA TP53TG1(lncRNA TP53TG1)参与调控多种癌症细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡，但在其他细胞中的作用报道甚少。目的：探讨lncRNA TP53TG1对人根尖牙乳头干细胞增殖和分化的影响及途径。方法：分离、培养人根尖牙乳头干细胞，转染lncRNA TP53TG1过表达慢病毒，RT-qPCR检测lncRNA TP53TG1的过表达效率，Western blot检测PI3K、AKT、ERK、P38、Smad3及其磷酸化蛋白的相对表达量。将人根尖牙乳头干细胞分为慢病毒空载体组和过表达lncRNA TP53TG1组，采用CCK-8法检测细胞增殖情况；成骨诱导第5天采用碱性磷酸酶染色检测碱性磷酸酶活性，成骨诱导第21天采用茜素红染色检测矿化结节形成情况；成骨诱导第3,7,14天采用RT-qPCR检测牙本质涎磷蛋白、Runt相关转录因子2、牙本质基质蛋白1、骨涎蛋白的mRNA表达水平；成骨诱导第3,7,14天采用Western blot检测牙本质涎磷蛋白和Runt相关转录因子2的蛋白表达水平。结果与结论：(1)RT-qPCR检测结果显示慢病毒成功整合到根尖牙乳头干细胞基因组中，Western blot检测结果显示，过表达lncRNA TP53TG1上调了p-PI3K、p-AKT的蛋白水平而不影响其他通路磷酸化蛋白的表达；(2)从细胞培养第3天开始，过表达lncRNA TP53TG1显著促进根尖牙乳头干细胞的增殖；(3)在诱导根尖牙乳头干细胞牙源性分化过程中，过表达lncRNA TP53TG1促进成牙本质及成骨分化相关基因和蛋白的表达，碱性磷酸酶活性和矿化结节形成显著增加；(4)结果表明：lncRNA TP53TG1可能通过激活PI3K/AKT信号通路促进根尖牙乳头干细胞成牙本质及成骨分化。

关键词：根尖牙乳头干细胞长链非编码RNA lncRNA TP53TG1 病毒转染成牙本质向分化 PI3K/AKT信号通路工程化干细胞

右美托咪定对于尾吊骨质疏松大鼠骨代谢调控作用及机制

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陆军军医大学学报 2025年

作者：郭云亮王灿张新雨颜泽栋温志鹏刘若冰刘鹏森河南省中医院麻醉科空军军医大学军事生物医学工程学系

目的研究右美托咪定对于尾吊大鼠骨丢失的作用效果，并初步探究其对于骨代谢的调控机制。方法 30只雄性大鼠按照随机数字表法分为对照组、尾吊组、尾吊+右美托咪定组，每组10只。尾吊大鼠行4周后肢悬吊处理，尾吊+右美托咪定组大鼠从... 详细信息

目的研究右美托咪定对于尾吊大鼠骨丢失的作用效果，并初步探究其对于骨代谢的调控机制。方法 30只雄性大鼠按照随机数字表法分为对照组、尾吊组、尾吊+右美托咪定组，每组10只。尾吊大鼠行4周后肢悬吊处理，尾吊+右美托咪定组大鼠从尾吊当天开始进行右美托咪定干预（10 μg/kg，隔天1次），通过骨组织学染色、生物力学三点弯曲测试、钙黄绿素/茜素红荧光双标评价作用效果。分离尾吊大鼠胫骨原代成骨细胞，进行右美托咪定干预（1 nmol/L），通过碱性磷酸酶染色、活性测试及成骨相关基因表达评价成骨活性功能。结果动物实验结果揭示，右美托咪定显著增加了尾吊大鼠胫骨骨小梁的面积占比（P<0.001），显著抑制尾吊大鼠骨力学强度的降低（P<0.001），显著增加尾吊大鼠小梁骨矿化沉积率和新骨形成速率（P<0.001）。体外细胞实验结果表明，右美托咪定显著增加了尾吊大鼠体外原代成骨细胞碱性磷酸酶活性及碱性磷酸酶阳性成骨细胞数量（P<0.001），并上调了成骨分化相关基因（骨钙素、Runt相关转录因子2、Osterix蛋白、I型胶原蛋白）的表达水平（P<0.01）。结论右美托咪定能对抗尾吊大鼠骨丢失，刺激成骨细胞的骨形成可能是其作用机制。

关键词：右美托咪定成骨尾吊大鼠骨质疏松成骨细胞