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甲硫氨酸摄入限制对LPS诱导急性肺损伤小鼠巨噬细胞的影响及作用机制

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陆军军医大学学报 2024年第7期46卷 688-694页

作者：廖先建文静段家翔向伦理杨贞何青盈甯交琳陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院麻醉科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院肾病内科重庆400038

目的探究甲硫氨酸摄入限制(methionine restriction,MR)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的急性肺损伤(acute lung injury,ALI)小鼠的巨噬细胞的影响及其作用机制。方法将36只体质量为(23±2)g的雄性C57BL/6J小鼠(6~8周龄)按随机数字表法分为3组(n=12):Sham组、LPS组和LPS+MR组。对各组小鼠的肺组织行HE染色和肺损伤病理评分。采用RT-qPCR和Western blot检测肺组织中脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)和Toll样受体-4(Toll-like receptor-4,TLR4)mRNA和蛋白的表达水平;利用免疫组化技术对各组肺组织巨噬细胞的浸润情况及其相关趋化因子巨噬细胞集落刺激因子(macrophage-colony stimulating factor,M-CSF)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage-colony stimulating factor,GM-CSF)和C-C基序趋化因子配体3(chemokine C-C motif ligand 3,CCL3)的表达水平进行分析。结果与Sham组小鼠比较,LPS组小鼠肺组织损伤的病理评分显著升高(P<0.01)。LBP和TLR4的mRNA和蛋白表达均显著增加;CD11b和F4/80阳性细胞的数量增加,肺间质和肺泡巨噬细胞浸润明显;M-CSF、GM-CSF和CCL3的阳性细胞数量显著升高(P均<0.01)。MR可以显著改善LPS诱导的ALI,降低LPS组小鼠肺损伤病理评分(P<0.01);MR可以减少ALI小鼠肺组织LBP和TLR4 mRNA和蛋白的表达(P<0.01);与LPS组小鼠相比较,LPS+MR组小鼠肺组织CD11b、F4/80M-CSF、GM-CSF和CCL3阳性细胞数量显著降低(P<0.01)。结论MR可通过抑制巨噬细胞趋化因子的表达、进而减少巨噬细胞浸润和活化、减轻LPS诱导的肺损伤。

关键词：急性肺损伤巨噬细胞甲硫氨酸摄入限制趋化因子脂多糖

微信联合Teach-Back健康教育对乳腺癌改良根治术后患者功能恢复的影响

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陆军军医大学学报 2024年第5期46卷 500-506页

作者：李丹王寅欢沈巧巧苏小君杨英陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院乳腺甲状腺外科重庆400038

目的探讨微信联合Teach-Back模式在乳腺癌改良根治术后患者功能恢复中的应用效果。方法选取2021年1-6月在我院行乳腺癌改良根治术患者148例,为传统组;2021年7-12月在我院行乳腺癌改良根治术患者182例,为改进组。传统组采用常规宣教和功... 详细信息

目的探讨微信联合Teach-Back模式在乳腺癌改良根治术后患者功能恢复中的应用效果。方法选取2021年1-6月在我院行乳腺癌改良根治术患者148例,为传统组;2021年7-12月在我院行乳腺癌改良根治术患者182例,为改进组。传统组采用常规宣教和功能锻炼;改进组采用微信联合Teach-Back模式行健康宣教并指导患者行功能锻炼。分别于术后1、3、6个月比较2组患者Constant-Murley肩关节功能评分、生活质量评分及焦虑、抑郁评分。结果改进组患者术后1、3、6个月Constant-Murley肩关节功能评分均高于传统组,重复测量方差分析显示,2组患者肩关节功能评分在时间效应、组间效应和交互效应的比较差异均有统计学意义(时间点比较F=1953.281,P<0.001;组间比较F=368.970,P<0.001;交互作用F=30.104,P<0.001);改进组生活质量评分高于传统组(时间点比较F=3793.770,P<0.001;组间比较F=168.969,P<0.001;交互作用F=29.468,P<0.001);改进组焦虑、抑郁评分均低于传统组(焦虑时间点比较:F=530.849,P<0.001;组间比较:F=10.993,P=0.001;交互作用:F=4.084,P=0.007;抑郁时间点比较:F=797.101,P<0.001;组间比较:F=9.453,P=0.002;交互作用:F=9.364,P<0.001)。结论微信联合Teach-Back模式应用于乳腺癌改良根治术后患者肩关节功能康复的锻炼中,不仅能改善患者术后肩关节活动度,还有助于缓解患者的负性情绪并提高患者生活质量。

关键词： Teach-Back模式微信乳腺癌改良根治术健康教育

“锚定结”法小鼠颈部异位心脏移植模型构建及其稳定性测试

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陆军军医大学学报 2024年第8期46卷 822-828页

作者：李子炫方易冰程伟陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院心脏外科重庆400038

目的在传统Cuff法(“袖套”法)血管吻合技术基础上进行改良,优化小鼠颈部异位心脏移植操作步骤、过程,以建立更稳定的小鼠颈部异位心脏移植模型。方法将6~8周龄雄性C57BL/6小鼠(体质量20~24 g)分为实验组(通过“锚定结”法进行小鼠颈部... 详细信息

目的在传统Cuff法(“袖套”法)血管吻合技术基础上进行改良,优化小鼠颈部异位心脏移植操作步骤、过程,以建立更稳定的小鼠颈部异位心脏移植模型。方法将6~8周龄雄性C57BL/6小鼠(体质量20~24 g)分为实验组(通过“锚定结”法进行小鼠颈部异位心脏移植)和对照组(用传统Cuff法进行小鼠颈部异位心脏移植)。记录各项操作步骤时间、血管外翻次数、血管修剪次数、实验失败原因等。术后每天观察、触摸判断小鼠颈部供心存活情况,存活>48 h为移植成功。术后第7、14天HE染色观察实验组小鼠吻合血管处组织;第7天心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)染色观察2组小鼠供心。结果①实验组共进行25只移植,失败2只,供心存活率92%;对照组共进行25只移植,失败8只,供心存活率68%。实验组动脉平均外翻1.16次,修剪0.04次;静脉平均外翻1.16次,修剪0.04次。对照组动脉平均外翻2.00次,修剪0.21次;静脉平均外翻2.28次,修剪0.46次。②实验组、对照组的颈部心脏移植总时间[(77.22±3.82)vs(87.49±8.01)min]、分离血管+套管时间[(30.06±2.68)vs(36.50±6.67)min]、颈部血管吻合时间[(7.31±1.08)vs(12.34±2.58)min]差异有统计学意义(P<0.05)。③术后第7、14天实验组吻合血管处组织HE染色显示血管通畅。④术后第7天供心cTnT染色情况提示对照组、实验组均无大面积坏死。结论“锚定结”法进行小鼠颈部异位心脏移植保证了单人显微操作的稳定、高效,术后供心存活时间长、吻合血管通畅率高、心功能状态好、术后并发症少。

关键词：心脏移植袖套法小鼠模型

肝移植术后早期移植器官功能不全的预测模型构建

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陆军军医大学学报 2024年第7期46卷 746-752页

作者：黎鑫衣杏林陈妍邓鑫刘祥凤刘先哲蒋颖刘冠磊陈春梅邱芳顾健腾陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院麻醉科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院呼吸科重庆400038

目的分析肝移植术后早期移植物功能不全(early allograft dysfunction,EAD)的相关因素并构建预测模型。方法收集2008年12月至2021年12月于我院麻醉科手术室实施肝移植手术的375例患者,其中术后发生EAD的患者90例,未发生EAD的患者266例,... 详细信息

目的分析肝移植术后早期移植物功能不全(early allograft dysfunction,EAD)的相关因素并构建预测模型。方法收集2008年12月至2021年12月于我院麻醉科手术室实施肝移植手术的375例患者,其中术后发生EAD的患者90例,未发生EAD的患者266例,比较2组患者30项基线资料。按照7∶3的比例进行分组后,在训练集中依次采用单因素和多因素Logistic回归分析评价EAD的相关因素并构建列线图,采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)、临床决策曲线分析(decision curve analysis,DCA)、灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、Kappa值等指标评估模型表现。结果肝移植术后EAD发生率为24%。多因素Logistic回归分析显示,术前肿瘤复发史(OR=3.15,95%CI:1.28~7.77,P=0.013)、手术时间(OR=1.22,95%CI:1.04~1.42,P=0.015)与术后发生EAD有关,根据约登指数鉴定的0.519为截点划分预测结局后,训练集和验证集中模型表现尚可,临床决策曲线提示模型有较好的临床适用性。结论术后EAD的危险因素为术前肿瘤复发史、手术时间,建立的模型能较好地预测患者的预后。

关键词：肝移植移植物功能不全预测模型危险因素

睑板腺疏通对白内障患者术后干眼症状和睑板腺功能的影响

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陆军军医大学学报 2024年第3期46卷 288-293页

作者：蔡佳馨刘美芳谢晶刘玺陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院眼科重庆400038

目的探讨白内障术前睑板腺疏通治疗对术后手术相关性睑板腺功能障碍及干眼的疗效。方法本研究为前瞻性随机对照研究。纳入2021年6-12月在我科行白内障手术的110例老年性白内障患者。采用随机数字表法分为睑板腺疏通治疗组(n=56)和对照... 详细信息

目的探讨白内障术前睑板腺疏通治疗对术后手术相关性睑板腺功能障碍及干眼的疗效。方法本研究为前瞻性随机对照研究。纳入2021年6-12月在我科行白内障手术的110例老年性白内障患者。采用随机数字表法分为睑板腺疏通治疗组(n=56)和对照组(n=54),睑板腺疏通治疗组在白内障手术前1周接受睑板腺疏通治疗1次,对照组不作任何处理。睑板腺疏通治疗前、术后1个月及3个月比较两组的眼表疾病指数(ocular surface disease index,OSDI)评分、睑板腺功能(油脂厚度LLT、睑板腺开口数量MYGLS、睑板腺分泌物评分MGYSS)、泪膜破裂时间(tear film break-up time,TBUT)。结果对照组在白内障手术后1个月表现出MGYLS显著下降(P一种安全有效的干预措施,可缓解手术引起的睑板腺功能障碍和干眼症。

关键词：睑板腺功能障碍干眼症白内障手术睑板腺疏通治疗

HPV16 E6 下调 DHRS2 表达可介导宫颈上皮细胞的致癌转化

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陆军军医大学学报 2024年第7期46卷 715-724页

作者：杜秀蓉陶沐珩贾永琴伍婷婷凌开建王延洲梁志清陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院妇产科重庆400038

目的探讨HPV16 E6对宫颈上皮细胞基因及信号通路的影响,筛选与致癌转化相关的基因。方法构建HPV16 E6感染的正常人宫颈上皮细胞(HUCEC)模型,进行转录组测序筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并进行基因本体(Gene ... 详细信息

目的探讨HPV16 E6对宫颈上皮细胞基因及信号通路的影响,筛选与致癌转化相关的基因。方法构建HPV16 E6感染的正常人宫颈上皮细胞(HUCEC)模型,进行转录组测序筛选差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并进行基因本体(Gene Ontology,GO)和京都基因和基因组(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析差异信号通路。采用RT-qPCR验证主要差异下调表达基因。对主要差异基因的蛋白结构与HPV16 E6蛋白进行分子对接预测分析,通过RT-qPCR及Western blot验证HUCEC细胞模型中主要差异基因表达情况,并采用RT-qPCR及Western blot实验在宫颈癌细胞系SiHa及CaSki中进一步验证差异基因的表达。结果共筛选出差异表达2倍以上的基因55个。本研究聚焦下调差异基因,结果表明:负调控的差异基因GO功能富集于氧化还原过程;KEGG富集分析主要与碳水化合物代谢及癌症等相关。10个差异基因mRNA下调表达趋势与测序结果基本一致。分子对接预测DHRS2与HPV16 E6蛋白存在相互作用。与对照组比较,HUCEC细胞模型中HPV16 E6下调DHRS2的mRNA(P<0.01)和蛋白(P<0.05)、ETV5的蛋白(P<0.01)表达;在SiHa、CaSki细胞系中,与对照组比较,DHRS2的mRNA及蛋白表达亦明显下调(P<0.05),并与P53蛋白表达趋势正相关。结论HPV16 E6可能通过下调DHRS2表达介导宫颈细胞致癌转化,促进宫颈癌发生。

关键词： HPV16 E6 DHRS 2 宫颈上皮细胞致癌转化宫颈癌

干扰素诱导基因IFIT1与卵巢癌免疫浸润及预后的相关性

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陆军军医大学学报 2024年第10期46卷 1132-1141页

作者：王瑞伟李凤杰梁小龙周鑫刘丽萍李秋蓉何明敏李宇迪陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院妇产科重庆400038

目的探讨干扰素诱导基因IFIT1与卵巢癌免疫浸润及预后的相关性。方法通过GEO数据库筛选肿瘤免疫相关基因,Kaplan-Meier与Prognoscan预后数据库筛选与卵巢癌预后显著相关的差异基因。GEPIA、Human Protein Atlas与Timer数据库分析IFIT1... 详细信息

目的探讨干扰素诱导基因IFIT1与卵巢癌免疫浸润及预后的相关性。方法通过GEO数据库筛选肿瘤免疫相关基因,Kaplan-Meier与Prognoscan预后数据库筛选与卵巢癌预后显著相关的差异基因。GEPIA、Human Protein Atlas与Timer数据库分析IFIT1在卵巢癌组织与正常组织中的表达差异。UALCAN数据库分析IFIT1在不同分级和分期的卵巢癌组织中的表达情况。David数据库对String和Genemania数据库筛选的相互作用基因与蛋白进行GO富集分析。Timer和Tisidb数据库相互验证IFIT1与免疫细胞的相关性。IFIT1干扰质粒成功构建后,利用IFIT1干扰稳转株构建裸鼠移植瘤模型,观察IFIT1敲降后肿瘤生长情况,免疫组化检测中性粒细胞浸润。结果GEO数据库、Kaplan-Meier与Prognoscan预后数据库筛选出IFIT1是与卵巢癌预后显著负相关的肿瘤免疫基因。GEPIA、Human Protein Atlas、Timer数据库以及UALCAN数据库表明IFIT1在卵巢癌组织中表达显著高于正常卵巢组织(P<0.05),但与肿瘤的分期、分级并不存在显著相关性。String、Genemania、David数据库分析发现IFIT1的互作基因与蛋白富集于2’-5’寡聚腺苷酸合成酶的活化、病毒防御、先天性免疫等过程。Timer数据库表明IFIT1与卵巢癌中CD8+T细胞、B细胞、树突状细胞、中性粒细胞和巨噬细胞浸润呈正相关,其中与中性粒细胞相关性最为明显(P<0.001)。Tisidb与GSCA均验证了IFIT1与卵巢癌组织的中性粒细胞浸润呈高度正相关(P<0.05)。RT-qPCR和Western blot证明卵巢癌细胞中IFIT1被成功敲降后,IFIT1干扰细胞的移植瘤生长显著减缓(P<0.05),肿瘤中性粒细胞浸润减少。结论IFIT1可能促进中性粒细胞浸润影响卵巢癌的恶性进程。

关键词：卵巢癌干扰素诱导的四肽重复蛋白1 生信分析免疫浸润中性粒细胞

PTPRZ1高表达胶质瘤干细胞诱导TAM向M2免疫抑制表型极化的机制研究

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陆军军医大学学报 2024年第8期46卷 796-803页

作者：安乐乐杨莹刘庆窦飞越王路静程玥王超阮潜瑛周磊郭海涛孔维凯李学刚兰川李飞时雨陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院病理科重庆400038 金凤实验室渝粤病理科学研究中心重庆400039 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院输血科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院神经外科重庆400038

目的探究蛋白酪氨酸磷酸酶受体Z1型(protein tyrosine phosphatase receptor-type Z1,PTPRZ1)高表达胶质瘤干细胞(glioma stem cells,GSCs)对肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophage,TAM)表型极化和吞噬能力的影响及其调控机制。方法利用流式细胞术分选人胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)样本中GSCs和非干性肿瘤细胞(non-stem tumor cells,NSTCs),并检测PTPRZ1表达。用胶质瘤细胞条件培养基或趋化因子配体20(chemokine C-C motif ligand 20,CCL20)诱导外周单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)来源的CD14阳性单核细胞向TAM极化。通过CRISPR/Cas9技术构建PTPRZ1稳定敲除的GSCs细胞株(PTPRZ1-KO GSCs)。利用流式细胞术检测TAM吞噬GSCs、NSTCs、PTPRZ1-Control GSCs(PTPRZ1-Ctrl GSCs)和PTPRZ1-KO GSCs的能力和TAM免疫抑制(M2)表型极化标记物CD163的表达。于基因表达综合数据库(gene expression omnibus,GEO)中配对GSCs和NSTCs转录组测序数据(GSE54791)中获得差异表达基因;于癌症和肿瘤基因图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库GBM队列中鉴定预后不良基因集。上述基因集与编码人膜蛋白基因集取交集获得PTRRZ1,利用基因集富集分析(gene set enrichment Analysis,GSEA)比较TCGA数据库中高表达和低表达PTPRZ1的GBM样本的差异通路。利用转录组测序鉴定PTPRZ1-Ctrl GSCs和PTPRZ1-KO GSCs组中差异表达基因并通过RT-qPCR和Western blot验证。结果与NSTCs比较,GSCs抵抗TAM吞噬的能力较强(P<0.05)且特异性高表达PTPRZ1。PTPRZ1-KO GSCs抵抗TAM吞噬的能力显著下降(P<0.01)。高表达PTPRZ1的GBM样本中吞噬相关通路活化显著受抑(P<0.05)。PTPRZ1-KO GSCs显著下调M2型TAM极化相关趋化因子CCL20的表达(P<0.05)。CCL20重组蛋白诱导M2型TAM标记物CD163表达升高。结论PTPRZ1高表达GSCs介导TAM向M2型极化并抑制其吞噬能力,机制可能与PTPRZ1高表达GSCs上调CCL20表达有关。

关键词：胶质瘤干细胞肿瘤相关巨噬细胞细胞吞噬 PTPRZ1

非瓣膜性心房颤动患者左心耳封堵术后心包填塞的发生及相关因素分析

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陆军军医大学学报 2024年第7期46卷 768-774页

作者：王斌斌许祥王兴鹏李华康姚青黄海韵王文婷万陈刘锋郭燕丽宋治远陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院心血管内科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院超声科重庆400038

目的观察非瓣膜性心房颤动(nonvalvular atrial fibrillation,NVAF)患者左心耳封堵术后(left atrial appendage closure,LAAC)心包填塞(pericardial tamponade,PT)的发生率,探讨其相关因素及转归。方法选择2014年8月至2023年3月在我院心血管内科住院并接受LAAC治疗的1192例NVAF患者为研究对象,通过医院病案管理系统收集患者一般临床资料、术前经胸超声心动图(transthoracic echocardiography,TTE)和经食道超声心动图(transesophageal echocardiography,TEE)检测资料、术前常规化验检查、术中资料及随访资料,根据LAAC后是否发生PT分为无PT组(n=8)和PT组(n=1184)。统计分析PT的发生率、相关因素及转归。结果1192例患者中,有男性639例(53.6%)、女性553例(46.4%),年龄(68.10±9.65)岁,CHA 2 DS 2-VASc评分(4.51±1.72)分,HAS-BLED评分(3.36±1.09)分。共发生PT 8例(0.67%),其中6例发生于LAAC后1~33 h,2例发生在LAAC后第19、27天。与无PT组比较,PT组中,TEE检测与左心耳造影测量左心耳最大口径较大(P=0.025,P=0.015),而左心耳最大深度则较小(P=0.028,P=0.031),PT组封堵器一次放置成功率较显著降低(P=0.031);PT组封堵器压缩率明显大于无PT组(P=0.046)。多因素分析结果显示,左心耳最大口径较大、左心耳平均有效深度较小、封堵器压缩率较大是发生PT的主要危险因素。8例PT患者均经停用抗栓药物、心包穿刺/手术引流后治愈。随访(39±27)个月,PT组患者未发生器械相关血栓形成(device-related thrombosis,DRT)、缺血性卒中/系统性栓塞等并发症。结论LAAC术后PT发生率低,其发生与左心耳口径较大、深度相对不足、封堵器压缩率较大相关,PT可经停用抗栓药物、心包穿刺/手术引流后治愈。

关键词：心房颤动左心耳封堵术心包填塞