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梓醇对肝肺综合征大鼠肝肺损伤的保护作用研究

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陆军军医大学学报 2024年第6期46卷 587-596页

作者：曾子洋雷雨豪吴宪锋宋艾璘杨纯勇杨智勇李雨捷易斌陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院麻醉科重庆400038 重庆市中医院麻醉科重庆400021

目的探索梓醇通过增强TGR5表达和降低肝胆汁酸水平对胆总管结扎术(CBDL)大鼠肺损伤的保护作用。方法将大鼠随机分为三组[Sham组、CBDL组和梓醇(Catalpol)组],评估生存率、动脉血氧分压(PO2)和肺泡-动脉血氧分压差P(A-a)O2、肝功能、... 详细信息

目的探索梓醇通过增强TGR5表达和降低肝胆汁酸水平对胆总管结扎术(CBDL)大鼠肺损伤的保护作用。方法将大鼠随机分为三组[Sham组、CBDL组和梓醇(Catalpol)组],评估生存率、动脉血氧分压(PO2)和肺泡-动脉血氧分压差P(A-a)O2、肝功能、肝肺组织病理变化差异;进一步分析胆汁酸表达水平和TGR5的关系以及相关机制。结果梓醇治疗改善CBDL导致的肝功能损伤,提高CBDL的生存率和改善了低氧血症;减少了肝、肺血管新生。同时,梓醇通过增强TGR5和降低FXR的表达,减轻BAs水平过高引起肺损伤。结论梓醇通过上调TGR5和降低FXR的表达,改善BAs水平过高引起的肺损伤,发挥对CBDL大鼠的肝肺保护作用。

关键词：肝肺综合征(HPS) 梓醇 TGR5 BAs

COPD患者肺泡灌洗液来源外泌体通过miR-223-3p/FOXO3通路抑制成骨细胞成骨分化的作用

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陆军军医大学学报 2024年第15期46卷 1780-1788页

作者：陈红娅唐渝镇曹英陈墨龙陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院重症医学科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院运动医学中心重庆400038

目的探索慢性阻塞性肺病患者肺泡灌洗液来源的外泌体(COPD-bronchoalveolar lavage fluid-exosome,COPD-Exo)调控成骨细胞分化的作用及机制。方法选取2023年6月于陆军军医大学第一附属医院就诊的6例COPD患者和6例非COPD患者(对照),在临... 详细信息

目的探索慢性阻塞性肺病患者肺泡灌洗液来源的外泌体(COPD-bronchoalveolar lavage fluid-exosome,COPD-Exo)调控成骨细胞分化的作用及机制。方法选取2023年6月于陆军军医大学第一附属医院就诊的6例COPD患者和6例非COPD患者(对照),在临床肺泡灌洗过程中收集肺泡灌洗液,提取COPD-Exo、非COPD患者肺泡灌洗液来源的外泌体(ctrl-bronchoalveolar lavage fluid-exosome,Ctrl-Exo),使用电镜和Western blot进行鉴定。使用茜素红染色、qRT-PCR检测COPD-Exo干预成骨细胞后成骨分化水平的改变。对GEO数据库数据集(GSE218571)中COPD-Exo的微小RNA(microRNA,miRNA)表达谱进行生物信息学分析,获得COPD-Exo中差异表达的miRNA,使用Antagomir阻碍MircoRNA功能,明确具有成骨分化调控功能的miRNA,使用Targetscan软件预测miRNA的下游靶基因并进行验证。结果COPD患者和非COPD患者的肺泡灌洗液内均可提取出外泌体。茜素红染色及PCR结果表明,COPD-Exo可以抑制人hFOB 1.19成骨细胞的成骨分化(P<0.05)。生物信息学分析显示,COPD-Exo中miR-223-3p表达水平显著上调。使用Antagomir阻碍miR-223-3p可减轻COPD-Exo对于人hFOB 1.19成骨细胞的成骨分化抑制(P<0.05)。Targetscan预测和Western blot结果显示miR-223-3p可能靶向抑制成骨分化相关因子FOXO3的表达(P<0.05)。结论COPD-Exo可能通过miR-223-3p抑制人hFOB 1.19成骨细胞的成骨分化,该过程与miR-223-3p抑制FOXO3表达有关。

关键词：慢性阻塞性肺疾病外泌体成骨分化 miR-223-3p

IGFBP5增龄性表达促进胸腺上皮细胞线粒体自噬和凋亡

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陆军军医大学学报 2024年第6期46卷 567-577页

作者：陈禧禅曾继涛瞿思铭高维武吴玉章陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院免疫学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院生殖科重庆4000382 昆明医科大学第一附属医院器官移植中心昆明650032

目的探讨在胸腺上皮细胞中随年龄增长而上调表达的胰岛素样生长因子结合蛋白5(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5,IGFBP5)在胸腺衰退中的作用和机制。方法使用基因差异表达分析方法从已发表人胸腺基质细胞单细胞数据集(GS... 详细信息

目的探讨在胸腺上皮细胞中随年龄增长而上调表达的胰岛素样生长因子结合蛋白5(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5,IGFBP5)在胸腺衰退中的作用和机制。方法使用基因差异表达分析方法从已发表人胸腺基质细胞单细胞数据集(GSE147520)中筛选出随年龄增长表达上调程度最高的基因IGFBP5;Mfuzz趋势分析筛选出与IGFBP5具有相同表达趋势的基因;富集分析注释与IGFBP5共趋势基因集;使用蛋白序列比对工具研究IGFBP5蛋白氨基酸序列的人鼠同源性;使用NIH基因数据库研究IGFBP5在人鼠器官组织中表达模式;免疫组化研究IGFBP5在不同年龄C57/BL6小鼠胸腺中的表达模式;构建IGFBP5过表达胸腺上皮细胞系;透射电镜观察IGFBP5过表达胸腺上皮细胞系中线粒体的形态变化;免疫蛋白印记(Western Blot, WB)对线粒体及全细胞组分线粒体自噬标志物微管相关蛋白1B(Microtubule Associated Protein 1 Light Chain 3 Beta, LC3B)、PTEN诱导激酶1(Pten Induced Kinase 1, PINK1)、Parkin泛素蛋白连接酶(Parkin Rbr E3 Ubiquitin Protein Ligase, Parkin)、BCL2互作蛋白3(BCL2 Interacting Protein 3, BNIP3),细胞凋亡标记物活化型胱天蛋白酶3 (Cleaved-Caspase3)表达水平进行检测;细胞双重免疫荧光对线粒体标志物与线粒体探针(MitoTracker)胞内定位进行检测;使用流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)对细胞系凋亡水平进行检测。结果 IGFBP5是人胸腺上皮细胞中随年龄增长表达上调程度最大的基因,与其具有共同表达模式的基因集显著富集在线粒体相关通路上。人与小鼠IGFBP5蛋白序列高度保守,其在人、小鼠多器官组织中表达模式相近,且IGFBP5在人、小鼠胸腺中均呈现中等表达水平;此外,IGFBP5在人和小鼠胸腺上皮中随年龄增长表达升高;在IGFBP5过表达小鼠胸腺上皮细胞系中,透射电镜结果表明线粒体自噬体增多,WB结果表明线粒体组分和细胞组分LC3B、PINK1、Parkin蛋白表达水平上调,BNIP3无明显差异;细胞双重免疫荧光结果表明LC3B、PINK1、Parkin蛋白胞质表达增多且与线粒体共定位;WB表明IGFBP5过表达鼠胸腺上皮细胞系中细胞凋亡标志物Cleaved-Caspase3水平升高;FCM表明IGFBP5过表达细胞系凋亡细胞比例增加。结论人、小鼠胸腺上皮细胞中随年龄增长而表达升高的IGFBP5促进线粒体自噬和细胞凋亡,从而导致胸腺上皮细胞减少和胸腺功能衰退,因此,IGFBP5可成为干预胸腺衰老、重构人体免疫力的潜在靶标。

关键词：胸腺上皮细胞胰岛素样生长因子结合蛋白5 线粒体自噬凋亡胸腺衰退

伴有新突变位点的ELOC突变肾细胞癌合并肺腺癌1例

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中华病理学杂志 2024年第8期53卷 861-863页

作者：陈小情黄娟蓝洋吴友莉阎晓初卞修武段光杰陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院病理科重庆400038

ELOC突变肾细胞癌是2022年第5版WHO泌尿与男生殖器官肿瘤分类新纳入的一种罕见肾细胞癌类型,其组织形态学谱系广泛,与透明细胞肾细胞癌等在形态和免疫表型上有交叉重叠,诊断有挑战性,常因未考虑到该肿瘤而漏诊或误诊。本例为特殊的合并... 详细信息

ELOC突变肾细胞癌是2022年第5版WHO泌尿与男生殖器官肿瘤分类新纳入的一种罕见肾细胞癌类型,其组织形态学谱系广泛,与透明细胞肾细胞癌等在形态和免疫表型上有交叉重叠,诊断有挑战性,常因未考虑到该肿瘤而漏诊或误诊。本例为特殊的合并有肺腺癌的ELOC突变肾细胞癌,最初被诊断为透明细胞肾细胞癌,Sanger测序发现其具有新的突变位点(c.299C>A p.A100E突变),二代测序显示希佩尔-林道、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白及结节性硬化综合征基因均无突变。加强对该类罕见肿瘤的认识,有助于提高诊断准确性。

关键词：肾细胞癌哺乳动物雷帕霉素靶蛋白生殖器官肿瘤免疫表型肺腺癌组织形态学交叉重叠二代测序

成年严重烧伤患者肠内营养护理专家共识(2024版)

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第9期40卷 801-811页

作者：中华医学会烧伤外科学分会中国医疗保健国际交流促进会烧伤医学分会黎宁张寅罗高兴李茂君程林陈华玲冯苹不详陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所创伤与化学中毒全国重点实验室重庆400038 上海交通大学医学院附属瑞金医院护理部上海200025 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院全军烧伤研究所陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院药剂科海军军医大学第一附属医院烧伤外科

肠内营养是严重烧伤患者营养治疗的主要方式之一。为推动临床护士规范、安全、有效地实施肠内营养护理,该共识编写组以循证医学证据为基础,德尔菲法为指导,围绕成年严重烧伤患者肠内营养的适应证与启动时机、医院感染控制、营养风险筛... 详细信息

肠内营养是严重烧伤患者营养治疗的主要方式之一。为推动临床护士规范、安全、有效地实施肠内营养护理,该共识编写组以循证医学证据为基础,德尔菲法为指导,围绕成年严重烧伤患者肠内营养的适应证与启动时机、医院感染控制、营养风险筛查、吞咽功能评估、胃肠道功能评估、能量评估、喂养途径、输注管理、血糖管理、营养状况监测、营养过渡等11个主题进行文献检索、质量评价、证据综合、专家函询,制订了《成年严重烧伤患者肠内营养护理专家共识(2024版)》,为护士临床实践提供参考。

关键词：烧伤肠道营养护理专家共识

沉默CTGF对肝星状细胞凋亡及胞外基质表达的影响

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陆军军医大学学报 2024年第2期46卷 147-154页

作者：蔡秀华董岸莺张荣华柏干苹蒋毅陈雪猛陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院中医与风湿免疫科重庆400038 解放军951医院心肾呼吸科新疆库尔勒841000

目的观测沉默结缔组织生长因子(connective tissue growth factor, CTGF)基因对肝星状细胞T6(hepatic stellate cell T6,HSC_T6)的生长与凋亡,以及增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen, PCNA)、CTGF、整合素α5(integrin alpha 5,Itgα5)和Ⅰ型胶原(collagenⅠ, ColⅠ)表达的影响。方法将CTGF-shRNA病毒感染HSC_T6(实验组)。空病毒感染的HSC_T6(空病毒组)或未感染的HSC_T6(正常组)作对照。在显微镜下观测被感染HSC_T6的生长与绿色荧光蛋白(green fluorescent protein, GFP)的表达变化;采用CCK-8(cell count kit-8)比色检测被感染HSC_T6的增殖情况;流式细胞仪(flow cytometry, FCM)检测被感染HSC_T6的凋亡情况。定量PCR、Western blot及免疫荧光细胞化学分别检测PCNA、CTGF、Itgα5和ColⅠ的表达变化。结果在显微镜下观察到被感染的HSC_T6高表达GFP。CCK-8结果表明,与对照相比,沉默CTGF基因的HSC_T6生长显著受抑,72 h开始其差异具统计学意义(P<0.05)。FCM检测结果显示,沉默CTGF基因可诱导HSC_T6凋亡。定量PCR、Western blot及免疫荧光细胞化学结果证实,沉默CTGF基因可在mRNA及蛋白水平明显下调HSC_T6的PCNA、CTGF、Itgα5与ColⅠ的表达,与对照比较,差异均具统计学意义(P<0.05)。结论沉默CTGF基因可下调HSC_T6的PCNA、CTGF、Itgα5及ColⅠ的表达,抑制HSC_T6的生长,诱导HSC_T6凋亡,其机制可能和HSC_T6的CTGF/Itgα5信号通路受阻紧密相关。

关键词：结缔组织生长因子肝星状细胞T6 整合素α5 Ⅰ型胶原细胞凋亡

外周血嗜酸性粒细胞升高对评估糖尿病肾病预后的临床价值

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陆军军医大学学报 2024年第19期46卷 2218-2224页

作者：张江南唐莎王渊杨莉莉田易赵婷婷张静波陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院肾内科重庆400037 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院内分泌科重庆400037 陆军军医大学(第三军医大学)第二附属医院病案室重庆400037 陆军军医大学(第三军医大学)免疫研究所重庆400038 重庆国家免疫研究院重庆400030

目的评价外周血嗜酸性粒细胞计数(peripheral eosinophil count, PEC)在糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)预后中的临床价值。方法收集2021年3月至2023年3月在我院肾内科经肾活检确诊的220例DN患者的血常规、肾功能相关指标等临... 详细信息

目的评价外周血嗜酸性粒细胞计数(peripheral eosinophil count, PEC)在糖尿病肾病(diabetic nephropathy, DN)预后中的临床价值。方法收集2021年3月至2023年3月在我院肾内科经肾活检确诊的220例DN患者的血常规、肾功能相关指标等临床资料进行回顾性队列研究。根据X-tile 3.6.1生物信息软件计算PEC的最佳截点值;采用Cox比例风险回归模型及Kaplan-Meier生存分析肾脏预后。结果 PEC水平与血肌酐(serum creatinine, Scr)(r=0.245)、血尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)(r=0.237)和血尿酸(blood uric acid, UA)(r=0.252)水平呈正相关,与估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate, eGFR)(r=-0.236)呈负相关。根据PEC的最佳截点值(0.29×10^(9)/L)将DN患者分为高水平组(>0.29×10^(9)/L)(n=41)和低水平组(≤0.29×10^(9)/L)(n=179)。与低水平组比较,高水平PEC组患者的Scr(P<0.001)、BUN(P=0.001)和UA(P=0.005)水平明显高于低水平组患者,eGFR低于低水平组患者(P<0.001)。多因素Cox比例风险回归分析显示,高水平PEC与肾脏预后不良相关(HR=2.20,95%CI:1.05~4.60,P=0.036);Kaplan-Meier生存分析提示,高水平PEC组患者终末期肾病(end-stage renal disease, ESRD)发生率明显高于低水平组患者(P=0.024)。结论 PEC水平与DN的进展及预后密切相关,是预测DN预后的潜在生物标志物。

关键词：糖尿病肾病炎症嗜酸性粒细胞预后

Fgl2对小鼠急性肾损伤中巨噬细胞极化的作用

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陆军军医大学学报 2024年第13期46卷 1467-1476页

作者：朱琳许桂莲谢攀彭侃夫陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院肾内科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院免疫学教研室重庆400038

目的探讨纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein2,Fgl2)对顺铂诱导的急性肾损伤(cisplatin-induced acute kidney injury,Cis-AKI)中巨噬细胞极化的作用。方法选取24只8~10周龄(体质量20~25 g)的雄性野生型(Fgl2^(+/+))小鼠和Fgl2基因敲除(Fgl2^(-/-))小鼠各12只。单次腹腔注射生理盐水(saline)或顺铂(cisplatin,Cis)处理3 d,按随机数字表法分成4组(n=6):Fgl2^(+/+)Saline组、Fgl2^(+/+)Cis组、Fgl2^(-/-)Saline组和Fgl2^(-/-)Cis组。3 d后,检测肾功能相关指标血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)的水平,HE染色评估肾损伤程度;Western blot检测肾组织中Fgl2和肾损伤分子1(kidney injury molecule 1,Kim-1)的表达;RT-qPCR检测Fgl2、Kim-1、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)、IL-6、IL-12p40、IL-1β、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、TNF-α的表达;免疫组化检测肾脏Fgl2和巨噬细胞(F4/80^(+))的表达;免疫荧光检测肾组织中巨噬细胞(F4/80^(+))和M1型巨噬细胞(F4/80^(+)CD86^(+))的表达;流式细胞术检测肾组织中巨噬细胞(F4/80^(+))及M1型巨噬细胞(F4/80^(+)MHCⅡ+)、M2型巨噬细胞(F4/80^(+)CD206^(+))的表达。结果与Fgl2^(+/+)Saline组比较,Fgl2^(+/+)Cis组小鼠肾功能显著下降(P<0.05),肾小管损伤病理评分显著升高(P<0.05),肾组织Fgl2表达显著上调(P<0.05);与Fgl2^(+/+)Cis组相比,Fgl2^(-/-)Cis组小鼠肾功能显著下降(P<0.05),肾损伤相关分子Kim-1、NGAL表达显著升高(P<0.05),肾小管损伤病理评分显著升高(P<0.05),巨噬细胞浸润显著增加(P<0.05),M1型巨噬细胞相关分子IL-6、IL-1β、TNF-α和iNOS表达显著上升(P<0.05),流式细胞术结果显示M1型巨噬细胞百分比显著升高(P<0.05),M2型巨噬细胞百分比无明显变化,且M1型占比显著高于M2型(P<0.05)。结论Fgl2基因敲除可通过促进巨噬细胞向M1型转化加重Cis-AKI。

关键词：顺铂急性肾损伤纤维蛋白原样蛋白2 巨噬细胞

小鼠的下丘脑室旁核向前包钦格复合体直接投射参与调控呼吸

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陆军军医大学学报 2024年第20期46卷 2265-2275页

作者：刘凌琳张俊鸿熊玮陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院老年医学与特勤医学科重庆400038

目的探究小鼠全脑呼吸相关核团的空间分布,以及下丘脑室旁核(paraventricular hypothalamic nucleus, PVN)与前包钦格复合体(preB9tzinger complex, preB9tC)之间的环路连接及投射关系。方法运用从外周到中枢逆行示踪的研究策略,在小... 详细信息

目的探究小鼠全脑呼吸相关核团的空间分布,以及下丘脑室旁核(paraventricular hypothalamic nucleus, PVN)与前包钦格复合体(preB9tzinger complex, preB9tC)之间的环路连接及投射关系。方法运用从外周到中枢逆行示踪的研究策略,在小鼠的膈肌微量注射伪狂犬病毒(pseudorabies virus, PRV),逆行标记脊髓呼吸膈运动神经元的上游输入脑区。在PVN微量注射顺行不跨突触病毒(AAV2/9-EGFP),标记PVN下游脑区;并利用Cre/loxP基因表达策略,在PVN及preB9tC分别注射Dio-EGFP及Retro-Cre病毒,验证PVN-preB9tC环路及二者之间的投射关系。结果 PRV介导的逆行示踪结果显示:被PRV-EGFP标记的阳性神经元分布在PVN、preB9tC、孤束核(nucleus tractus solitarii, NTS)、蓝斑(locus coeruleus, LC)和中脑导水管周围灰质(periaqueductal gray, PAG)等多个脑区,除延髓区域外,PVN脑区的PRV-EGFP阳性神经元占比最高(P<0.000 1)。在PVN注射AAV2/9-EGFP,经病毒感染后在preB9tC脑区可见绿色神经纤维。在PVN和preB9tC分别注射Dio-EGFP及Retro-Cre病毒,经病毒感染后PVN脑区可见绿色神经元胞体。结论 PVN是脊髓呼吸膈运动神经元上游重要的输入核团,并有可能通过PVN-preB9tC环路的直接投射调控呼吸。

关键词：下丘脑室旁核前包钦格复合体呼吸运动神经网络膈运动神经元