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加速康复外科在中国西部地区胃肠外科中应用的问题、策略与展望

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中华胃肠外科杂志 2017年第3期20卷 263-265页

作者：叶景旺刘宝华童卫东第三军医大学大坪医院野战外科研究所普通外科重庆400042

加速康复外科（ERAS）理念在国际上应用已有近20年，改变了我们长期以来习以为常的围手术期处理原则，加速了患者的术后康复，减轻了术后痛苦，节约了医疗资源，是现代医学进步的里程碑。ERAS在中国西部地区的应用虽然有一定的进步，但... 详细信息

加速康复外科（ERAS）理念在国际上应用已有近20年，改变了我们长期以来习以为常的围手术期处理原则，加速了患者的术后康复，减轻了术后痛苦，节约了医疗资源，是现代医学进步的里程碑。ERAS在中国西部地区的应用虽然有一定的进步，但从整体实施的质量与推广的范围看都落后于国际水平，与我国ERAS开展较好的单位与地区相比，存在一定的差距，术后平均住院日显著长于国际通常的3~5 d。建议：（1）我国西部地区医疗机构应根据已发布的专家共识，以结直肠外科实施ERAS的成功经验为基础，利用示范基地，大力推广此项技术，并积极进行科普宣传，把ERAS适宜技术推广到广大基层医院，改变医务人员以及患者心中根深蒂固的传统观念；（2）相关行政部门应该把ERAS作为适宜的推广技术列入年度工作计划，甚至作为医院质量考评指标之一；（3）在医院层面，应该建立院级多学科团队，麻醉、外科、营养及护理部协同攻关，提高ERAS的实施质量。ERAS在我国西部地区的普及与标准化是必然的。相信未来会有更多的中国西部临床研究为ERAS增添新的内容，制定更符合中国国情以及更符合西部地区特色的共识。

关键词：加速康复外科胃肠外科中国西部

Nm23-H1核内定位对人肺腺癌A549细胞增殖的影响

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中国肺癌杂志 2017年第4期20卷 226-232页

作者：盛亚熊艳丽许明芳况勋杰王东杨雪琴第三军医大学大坪医院野战外科研究所肿瘤中心重庆400042

背景与目的现有研究发现Nm23-H1还存在胞核表达,而既往的研究都是以过表达或抑制胞浆Nm23-H1为研究手段,由于Nm23-H1本身缺乏核引导序列,其研究结果并不能真实反映或重复临床中Nm23-H1以胞核定位为主的实际生物学效应。因此,本研究通过... 详细信息

背景与目的现有研究发现Nm23-H1还存在胞核表达,而既往的研究都是以过表达或抑制胞浆Nm23-H1为研究手段,由于Nm23-H1本身缺乏核引导序列,其研究结果并不能真实反映或重复临床中Nm23-H1以胞核定位为主的实际生物学效应。因此,本研究通过构建带有核引导序列的Nm23-H1载体并转染A549细胞以探讨Nm23-H1从胞浆向胞核转位对肺癌细胞增殖的影响。方法采用基因重组技术构建带核定位信号序列的p Lentis-CMV-NME1-IRES2-PURO慢病毒载体,酶切和测序鉴定正确后,稳定转染A549细胞后用Western blot和激光共聚焦检测Nm23-H1蛋白的定位和表达,用CCK-8法检测细胞的增殖,流式细胞术检测细胞周期变化。结果成功构建了核内定向表达Nm23-H1的慢病毒载体。转染组在72 h、96 h和120 h时增殖率与空载体组相比均显著升高(P所占比例为35.69%,高于转染组的28.28%(t=1.461,P=0.217);而转染组细胞在G2期/M期所占比例为58.7%,空载体组为31.30%(t=4.560,P=0.010)。结论 Nm23-H1在人肺腺癌A549细胞的核内过表达使细胞主要分布在G2期/M期并促进了细胞的体外增殖。

关键词：肺肿瘤 Nm23-H1 核内定位细胞周期细胞增殖

转化生长因子β2对人眼Tenon囊成纤维细胞中赖氨酰氧化酶家族表达的诱导作用

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中华实验眼科杂志 2017年第4期35卷 314-319页

作者：郭凤朱晓燕陈侠张勇谭燕吴晓凤刘锐李磊鲜光军谢琳第三军医大学大坪医院野战外科研究所眼科重庆400042 第三军医大学大坪医院野战外科研究所研究室重庆400042

背景研究表明，转化生长因子β2（TGF-β2）促进Tenon囊成纤维细胞（TFs）的活化，在青光眼滤过术后结膜下纤维化过程中发挥作用，但其作用机制尚未完全明了。赖氨酰氧化酶家族（LOXs）与细胞外基质重塑有关，了解青光眼术后滤过泡的纤... 详细信息

背景研究表明，转化生长因子β2（TGF-β2）促进Tenon囊成纤维细胞（TFs）的活化，在青光眼滤过术后结膜下纤维化过程中发挥作用，但其作用机制尚未完全明了。赖氨酰氧化酶家族（LOXs）与细胞外基质重塑有关，了解青光眼术后滤过泡的纤维化过程中TGF-β2与LOXs活化的关系对青光眼滤过术后滤过泡瘢痕化的防治具有重要意义。目的观察TGF-β2对体外培养的人眼TFs中LOXs蛋白表达变化的影响。方法将培养的第4～8代人TFs分为正常对照组和不同质量浓度TGF-β2培养组，分别在细胞培养液中添加终质量浓度为2、4、8和16ng／ml TGF-β2继续培养24h，采用Western blot法测定不同质量浓度TGF-β2培养组细胞中LOXs蛋白表达的变化，确定最适TGF-β2刺激质量浓度。用4ng／ml TGF-β2分别处理培养的TFs6、12、24和48h，采用Western blot法测定各时间点细胞中LOXs蛋白表达的变化。采用细胞免疫荧光法分别检测正常对照组和4ng／ml TGF-β2培养组TFs中LOX蛋白的表达及其在细胞中的分布。结果Western blot法检测显示，正常对照组及2、4、8和16ng／ml TGF-β2培养组人TFs中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3及LOXL4蛋白的表达强度均随TGF-β2质量浓度的升高而增加，各组间细胞中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3和LOXL4蛋白相对表达量的总体比较，差异均有统计学意义（F=37．338、13．438、31．067、11．767、15．167，均P〈0．01）。细胞中LOX、LOXL1、LOXL2、LOXL3及LOXL4蛋白相对表达量的升高呈TGF-β2剂量依赖性。正常对照组及4ng／ml TGF-β2刺激人TFs后6、12、24和48h组，细胞中LOXL2蛋白的相对表达量分别为0．68±0．07、1．09±0．10、1．32±0．07、1．50±0．06和1．89±0．12，其表达强度呈时间依赖性，总体比较差异有统计学意义（F=82．832，P=0．000）。正常对照组人TFs中LOX蛋白表达强度较弱，主要位于细胞质中，TGF-β2培养组细胞中LOX蛋白的表达强度明显强于正常对照组，且表达LOX蛋白的细胞增多。结论正常人TFs中可见LOXs呈低表达，TGF-β2以剂量和时间依赖的方式上调人TFs中LOXs蛋白的表达。这个结果为青光眼术后滤过泡纤维化的相关防治研究提供了实验依据。

关键词：青光眼滤过手术/不良反应 Tenon囊成纤维细胞人赖氨酰氧化酶转化生长因子β2/药物作用细胞培养

抑制自噬增强门冬酰胺酶对小细胞肺癌细胞H1688和H446的抗癌作用

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第三军医大学学报 2017年第6期39卷 515-521页

作者：隋征谭群友王如文邓波陶绍霖范小青金花第三军医大学大坪医院野战外科研究所胸外科重庆400042

目的研究门冬酰胺酶(asparaginase,AN)对小细胞肺癌H1688和H446细胞的抗癌作用,探讨自噬在AN抗癌过程中的功能。方法采用MTT法及台盼蓝染色法检测AN单独或联用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)对H1688和H446细胞的生长抑制作用;免疫荧光... 详细信息

目的研究门冬酰胺酶(asparaginase,AN)对小细胞肺癌H1688和H446细胞的抗癌作用,探讨自噬在AN抗癌过程中的功能。方法采用MTT法及台盼蓝染色法检测AN单独或联用自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)对H1688和H446细胞的生长抑制作用;免疫荧光法观察自噬标记物LC3表达,示踪自噬体形成;Western blot检测自噬相关蛋白LC3及Akt/m TOR信号通路的表达。结果 AN呈浓度依赖性抑制H1688和H446细胞增殖并促进其死亡(P<0.05);AN处理组可以显著增加H1688和H446细胞自噬小体数量并诱导LC3-Ⅱ表达;自噬抑制剂CQ提高AN对H1688和H446细胞杀伤作用(P<0.05);AN作用H1688细胞后p-Akt、p-m TOR、p-70S6K蛋白表达降低。结论 AN对小细胞肺癌H1688和H446细胞具有抑制作用并诱导细胞保护性自噬,阻断自噬可以增强AN对小细胞肺癌H1688和H446细胞的抗癌疗效。

关键词：小细胞肺癌门冬酰胺酶 AKT/mTOR 自噬

提高慢性便秘的手术疗效——从临床到基础研究

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中华胃肠外科杂志 2016年第12期19卷 1335-1337页

作者：童卫东王李第三军医大学大坪医院野战外科研究所普通外科重庆400042

成人慢性便秘的发病率大约为16%，且随年龄增长而升高，特别是60岁以上患者高达30%。手术是部分症状顽固、长期综合保守治疗无效患者的最终选择。由于便秘分类的多样，临床表现差异很大，外科手术方式繁多，缺乏金标准与共识。针对慢传... 详细信息

成人慢性便秘的发病率大约为16%，且随年龄增长而升高，特别是60岁以上患者高达30%。手术是部分症状顽固、长期综合保守治疗无效患者的最终选择。由于便秘分类的多样，临床表现差异很大，外科手术方式繁多，缺乏金标准与共识。针对慢传输型便秘有结肠全切除、次全切除和旷置术等，对出口梗阻型便秘，仅仅直肠内脱垂的术式就不止10种。而且目前在手术指征的把握、术式的选择以及疗效判断标准上也缺乏权威指南。当前的现实是顽固性便秘的手术疗效并不很理想，特别是出口梗阻型便秘，总体有效率仅70%左右。如何提高手术疗效，可寄望于临床研究与转化医学研究。最近几年，有关骶神经调节和电刺激特别是足三里等穴位电刺激在便秘治疗中的应用取得了令人振奋的初步结果。便秘患者的肠道微生态研究和感觉神经调控机制等正是目前研究的热点。相信未来会有更多的转化医学成果能够应用于临床，进一步提高便秘的综合疗效。

关键词：慢性便秘外科手术转化医学

精道远端区域常见病变及精囊镜诊治技术的应用

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中华医学杂志 2016年第36期96卷 2849-2853页

作者：廖良功李彦锋第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科重庆400042

精道是指男性生殖系统中输送精子的管道系统，精子由睾丸曲细精管产生后经过附睾管、输精管、精囊、射精管以及尿道排出体外。精道远端区域包括输精管壶腹、精囊、射精管、前列腺小囊和前列腺等结构。该区域的结构异常可影响精子的正常... 详细信息

精道是指男性生殖系统中输送精子的管道系统，精子由睾丸曲细精管产生后经过附睾管、输精管、精囊、射精管以及尿道排出体外。精道远端区域包括输精管壶腹、精囊、射精管、前列腺小囊和前列腺等结构。该区域的结构异常可影响精子的正常排出，从而导致射精管梗阻（ejaculatory duct obstruction，EDO），成为引起男性不育的常见原因之一。EDO占男性不育患者的1%-5%[1]。该区域常见的病变包括局部炎症和感染、囊肿和结石所致EDO、新生物或肿瘤、血管异常、创伤或医源性损伤等。该类患者临床表现为血精、无精子症、少弱精症、会阴部隐痛及射精痛等。近十余年来，随着各类腔道内镜技术的不断发展，利用精囊镜诊治精道远端区域常见病变，已成为当今男科领域的一种蓬勃发展的新技术。

关键词：常见病变诊治技术精囊精道远端射精管梗阻无精子症应用

复方氨基酸胶囊联合维生素E治疗特发性弱精子症的临床研究

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中华男科学杂志 2016年第4期22卷 343-346页

作者：周青松曾凡春张祯雪周波孙中义第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科重庆400042

目的：研究复方氨基酸胶囊联合维生素E治疗特发性弱精子症的疗效。方法：纳入2014年2月至2015年1月门诊120例弱精子症患者。患者被随机分为两组：治疗组70例,年龄23~43岁,平均32.5岁;对照组50例,年龄23~44岁,平均31.7岁。治疗组口服复... 详细信息

目的：研究复方氨基酸胶囊联合维生素E治疗特发性弱精子症的疗效。方法：纳入2014年2月至2015年1月门诊120例弱精子症患者。患者被随机分为两组：治疗组70例,年龄23~43岁,平均32.5岁;对照组50例,年龄23~44岁,平均31.7岁。治疗组口服复方氨基酸胶囊＋维生素E,对照组仅服维生素E,均连续服用90 d。比较治疗前、后精子活动力（PR＋NP）、前向运动精子百分率（PR）和配偶妊娠率,评估其临床效果。结果：治疗前,治疗组和对照组PR＋NP、PR分别为（26.24±6.56）%、（24.65±6.43）%和（15.13±5.68）%、（14.73±6.16）,差异无统计学意义（P均〉0.05）。治疗90 d后,治疗组PR＋NP、PR分别为（49.63±9.78）%、（33.33±5.64）%,与治疗前比较差异具有统计学意义（P〈0.05）;对照组PR＋NP、PR分别为（37.67±7.98）%、（27.23±6.46）%,与治疗前比较差异具有统计学意义（P〈0.05）,但治疗组PR＋NP、PR改善明显优于对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。治疗组有4例（5.71%）患者配偶成功受孕,对照组有1例（2.00%）患者配偶成功受孕,总有效率治疗组（74.28%）明显高于对照组（44.0%）（P〈0.05）。两组均未出现不良反应。结论：复方氨基酸胶囊联合维生素E可改善特发性弱精子症患者精子活力。

关键词：弱精子症复方氨基酸维生素E

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盐酸达泊西汀治疗早泄的临床研究进展

中华男科学杂志 2015年第10期21卷 931-936页

作者：周庭友李彦锋第三军医大学大坪医院野战外科研究所泌尿外科重庆400042

早泄(PE)是男性最为常见的性功能障碍疾病之一。而盐酸达泊西汀是目前唯一被芬兰和瑞典2009年批准用于治疗早泄的口服药物,现在已在包括中国在内的60多个国家和地区应用。它是一种强效选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs),其吸收快、起... 详细信息

早泄(PE)是男性最为常见的性功能障碍疾病之一。而盐酸达泊西汀是目前唯一被芬兰和瑞典2009年批准用于治疗早泄的口服药物,现在已在包括中国在内的60多个国家和地区应用。它是一种强效选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs),其吸收快、起效快、半衰期短,支持按需服用。临床试验及应用表明,在各地区及不同人群中皆能有效延长PE患者的阴道内射精潜伏期(IELT),改善患者整体情况。与传统的SSRIs相比具有更好的安全性和耐受性,最常见的不良反应是恶心、腹泻、头痛、眩晕。严重不良事件罕见。总之,盐酸达泊西汀是一种有效,安全和耐受性良好的按需治疗早泄的药物。

关键词：早泄盐酸达泊西汀不良反应

多烯磷脂酰胆碱通过过氧化物酶体增殖物激活爱体α／肉碱棕榈酰基转移酶1A通路影响肝细胞脂肪变性

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中华肝脏病杂志 2016年第4期24卷 291-296页

作者：王涛陈东风第三军医大学大坪医院野战外科研究所消化内科重庆400042

目的观察多烯磷脂酰胆碱（PPC）对肝细胞脂肪变性的影响并初步探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPAR-α）／肉碱棕榈酰基转移酶1A（CPT-1A）通路在其中的作用。方法诱导L02肝细胞脂肪变性的同时使用PPC，采用油红O染色及甘油三酯含... 详细信息

目的观察多烯磷脂酰胆碱（PPC）对肝细胞脂肪变性的影响并初步探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPAR-α）／肉碱棕榈酰基转移酶1A（CPT-1A）通路在其中的作用。方法诱导L02肝细胞脂肪变性的同时使用PPC，采用油红O染色及甘油三酯含量测定评价PPC对脂肪变性程度的影响。并在PPC处理前后，以定量PCR及Westernblot分别检测CPT-1A的mRNA及蛋白水平的变化；随后使用GW6471特异性阻断PPAR仅通路，并观察上述各指标的变化情况。对数据进行单因素方差分析与进一步两两比较的LSD法分析。结果脂肪变性诱导后，与空白对照组及二甲基亚砜（DMSO）组相比，PPC组的甘油三酯蓄积较少[三组分别为（214．97±25．53）μg／mg、（219．62±19．40）μg／mg、（163．82±14．94）μg／mg，F=6．90，P〈0．051、CPT-1A的mRNA（三组分别为0．36±0．04、0．37±0．04、0．75±0．09，F=38．37，尸〈0．05）及蛋白水平有所上升。在PPAR仅通路特异性抑制剂GW6471处理后，空白对照组、DMSO组、PPC组的甘油三酯蓄积程度在脂肪变性诱导后已无明显差别[三组分别为（244．04±22．38）μg／mg、（242．27±18．71）μg／mg、（225．41±27．63）μg／mg，F=0．59，P〉0．05]；CPT-1A的mRNA（三组分别为0．16±0．06、0．17±0．02、0．18±0．04，，=0．18，P〉0．05）及蛋白水平在脂肪变性诱导后的差异也不明显。结论PPC可能通过激活PPARα／CPT-1A通路，发挥缓解肝细胞脂肪变性的作用。

关键词：脂肪肝多烯磷脂酰胆碱