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纳米铝佐剂吸附HBsAg及其免疫学效应的研究

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高等学校化学学报 2005年第5期26卷 886-888,F013页

作者：何萍吕凤林陈月李元朝何凤慈第三军医大学野战外科研究所大坪医院第一研究室

We have synthesized a novel formulation of nanoparticulate（NP） alum adjuvant specifically in the cationic water-in-oil microemulsions of water/benzalkonium bromide（BB）, octyl alcohol/cyclohexane at 30 ℃, which was characterized to be crystalline Al（OH）3 with average particle diameter about 70 nm by the analysis of X-ray diffraction and to have a spherical shape structure by TEM photography analysis. Then adsorption degree was assayed. The OD492 of the NP is about 10 times higher than the bulk（BK） alum adjuvant. Compared to bulk alum adjuvant, we studied the immune effect of the NP alum adjuvant with HBsAg vaccine, which was injected intraperitoneally into Guinea pig, and serum antibody titers of the first and second week after immunization were higher in NP group than BK group by ELISA（P<0\^01, P<0\^05）; Groin immuno-injection intraperitoneally into Balb/c mice, was performed once or there times, prolife responses of spleen cells were determined by （）3H thymidine incorporation; non-specific phagocytosis of macrophage of abdominal cavity was measured by lack of color Malachite Green and IL-2 was assayed by activation mouse spleen cells. It is indicated that all cellular immunity bioassay results were higher in NP group than in BK group, except non-specific phagocytosis of macrophage of abdominal cavity by there times immunity. However, there was no significant differerces. Thus, nanoparticulate alum adjuvant can be employed as a more effective adjuvant for HBsAg vaccine than bulk alum adjuvant in the earlier period of post-immunity.

关键词：微乳液纳米铝佐剂乙肝病毒表面抗原体液免疫细胞免疫

核因子-κB反应性不稳定增强型绿色荧光蛋白报告系统的建立与应用

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生物化学与生物物理进展 2003年第1期30卷 78-83页

作者：王付龙梁华平刘昕徐祥王正国第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所

建立核因子 κB (NF κB)反应性不稳定增强型绿色荧光蛋白 (d2EGFP)报告系统 ,作为筛选NF κB拮抗药物及研究其相关信号转导途径的工具 .分别以EGFP与d2EGFP为报告基因、neor 为筛选基因 ,构建成 4×κB基序为增强子、SV40为基本启动... 详细信息

建立核因子 κB (NF κB)反应性不稳定增强型绿色荧光蛋白 (d2EGFP)报告系统 ,作为筛选NF κB拮抗药物及研究其相关信号转导途径的工具 .分别以EGFP与d2EGFP为报告基因、neor 为筛选基因 ,构建成 4×κB基序为增强子、SV40为基本启动子的报告基因载体 p4κB EGFP和 p4κB d2EGFP .两载体分别与p6 5载体瞬时共转染HEK2 93细胞 ,通过比较不同时相点EGFP和d2EGFP的调控表达 ,证明 p4κB d2EGFP是较理想的NF κB反应性绿色荧光蛋白 (GFP)报告基因载体 .将 p4κB d2EGFP稳定转染HEK2 93细胞 ,从而获得NF κB反应性报告细胞株HEK d2EGFP .应用NF κB“圈套”寡核苷酸 (TFD)与 p6 5载体瞬时共转染HEK d2EGFP ,1mg/L NF κB和 2mg/LNF κBTFD组对p6 5蛋白诱导调控表达的d2EGFP具有明显拮抗作用 .结果表明 ,NF κB反应性d2EGFP报告系统可特异、灵敏、动态地反映和监测NF κB的活性变化 .

关键词：核因子-κB 不稳定增强型绿色荧光蛋白报告系统基因表达调控寡核苷酸

5.56mm和7.62mm弹压力波对培养大鼠肝脏细胞的作用

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中国生物医学工程学报 1997年第1期16卷 18-22页

作者：陈林王正国刘荫秋第三军医大学大坪医院野战外科研究所

７．６２ｍｍ弹的压力波能否引起组织细胞损伤目前未见报道。本研究采用培养肝脏细胞（ＨＣ）在体外用枪弹压力波致伤。结果发现：两种子弹均可产生明显的压力波，５．５６ｍｍ弹的压力波比７．６２ｍｍ弹的大。两种子弹均可引起ＨＣ明... 详细信息

７．６２ｍｍ弹的压力波能否引起组织细胞损伤目前未见报道。本研究采用培养肝脏细胞（ＨＣ）在体外用枪弹压力波致伤。结果发现：两种子弹均可产生明显的压力波，５．５６ｍｍ弹的压力波比７．６２ｍｍ弹的大。两种子弹均可引起ＨＣ明显的形态、功能损伤，如线粒体扩张、嵴消失，细胞脱落、肿胀、溶解破裂以及细胞ＭＤＡ水平升高、上清液中ＡＬＴ活性增高等。细胞所受压力愈大，损伤越重，５．５６ｍｍ弹损伤细胞的能力比７．６２ｍｍ弹强。压力波损伤细胞的机制可能与其对细胞的剧烈机械性振荡作用及引发自由基反应等有关。

关键词：高速投射物压力波肝细胞火器伤诊断治疗

三七皂苷Rg_1对失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体损伤保护作用的研究

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中国药学杂志 2003年第9期38卷 665-667页

作者：柏干荣陆松敏李萍刘建仓郭素清陈凤第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所二室重庆400042

目的　观察大鼠失血性休克后肠上皮细胞线粒体编码基因细胞色素氧化酶 (COXⅠ ,COXⅡ ,COXⅢ )mRNA的表达变化 ,并探讨三七皂苷Rg1(Rg1)对其保护作用的分子机制 ,为休克的防治提供实验依据。方法　采用失血性休克模型 ,分离肠上皮细胞... 详细信息

目的　观察大鼠失血性休克后肠上皮细胞线粒体编码基因细胞色素氧化酶 (COXⅠ ,COXⅡ ,COXⅢ )mRNA的表达变化 ,并探讨三七皂苷Rg1(Rg1)对其保护作用的分子机制 ,为休克的防治提供实验依据。方法　采用失血性休克模型 ,分离肠上皮细胞后进行RNA的提取 ,应用RT PCR检测大鼠失血性休克后及用Rg1治疗后COXⅠ ,COXⅡ ,COXⅢmRNA的表达变化情况。结果　大鼠失血性休克 1h ,COXⅠ ,COXⅡ基因表达开始增强 ,2h表达最强 ,以后随着休克时间延长 ,表达又逐渐减弱 ,失血性休克晚期 5h表达显著低于正常对照鼠 (P <0 .0 1) ;Rg1(5mg·kg-1)治疗后 ,可使COXⅠ ,COXⅡmRNA表达显著增强 (P <0 .0 1)。结论　失血性休克可引起大鼠肠上皮细胞线粒体编码基因COXⅠ ,COXⅡmRNA的明显改变 ,Rg1可提高其表达 ,对失血性休克肠上皮细胞线粒体损伤有明显的保护作用。

关键词：三七皂苷 Rgl 失血性休克大鼠肠上皮细胞线粒体损伤细胞色素氧化酶

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核因子κB的跨核膜转运及其调控机制

生物化学与生物物理进展 2002年第3期29卷 368-371页

作者：沈利群徐祥吕凤林梁华平第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所

核因子kappaB (NF κB)是一组重要的转录调节因子 ,当细胞处于静息状态时 ,它与抑制蛋白IκB结合以非活性的形式存在于胞浆中 .当细胞受到多种外界信号刺激 ,NF κB、IκB分别在核定位信号 (NLS)的介导下经核孔复合物 (NPC)转运入核 .... 详细信息

核因子kappaB (NF κB)是一组重要的转录调节因子 ,当细胞处于静息状态时 ,它与抑制蛋白IκB结合以非活性的形式存在于胞浆中 .当细胞受到多种外界信号刺激 ,NF κB、IκB分别在核定位信号 (NLS)的介导下经核孔复合物 (NPC)转运入核 .在核内 ,NF κB与IκB再次结合成复合物 ,在核转出信号 (NES)介导下 ,经CRM 1依赖的途迳出核 .该过程是能量依赖的主动转运过程。

关键词：核因子кB 跨核膜转运调控机制

钙增敏剂MCI-154对内毒素血症家兔心功能的影响(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2000年第9期21卷 58-63页

作者：梅建民胡德耀陈惠孙刘良明肖南陈海花卢儒权第三军医大学大坪医院外科研究所第三军医大学大坪医院外科研究所重庆 400042 中国

目的:研究钙增敏剂MCI-154对内毒素血症家兔心功能的影响.方法:内毒素血症家兔静脉注射MCI-154 1.0 mg·kg-1,然后再输入50 mL·kg-1生理盐水(NS)+MCI-154 0.1 mg·kg-1液体.监测心功能指标.结果:单纯给予50 mL·kg-1NS治疗,对内毒素血... 详细信息

目的:研究钙增敏剂MCI-154对内毒素血症家兔心功能的影响.方法:内毒素血症家兔静脉注射MCI-154 1.0 mg·kg-1,然后再输入50 mL·kg-1生理盐水(NS)+MCI-154 0.1 mg·kg-1液体.监测心功能指标.结果:单纯给予50 mL·kg-1NS治疗,对内毒素血症家兔心功能无明显改善作用.MCI-154+NS治疗后,左室收缩压(LVSP)、左室等容收缩压(IP)、心肌收缩性能(MC)、心肌收缩向量环面积(Lo)明显增加,显著高于单纯NS治疗组.MCI-154治疗后,心率(HR)无明显增加,左室舒张末压(LVEDP)明显降低.结论:钙增敏剂MCI-154对家兔内毒素血症心功能障碍具有良好的治疗效果.

关键词：心脏内毒素类左心室功能内毒素血症强心药钙 MCI-154

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水下冲击波的生物效应

爆炸与冲击 2003年第2期23卷 134-139页

作者：杨志焕朱佩芳蒋建新尹志勇周继红李晓炎宁心刘大维冯刚张良张秀岫杨在亮重庆第三军医大学大坪医院野战外科研究所重庆400042

研究了水下冲击波的生物效应。研究结果表明:水下冲击伤死亡率高,肺仍然是水下冲击波致伤和致死的主要靶器官,肠道损伤的发生率较高,而肝、脾、肾等脏器和体表很少发生损伤;初步的量效关系分析表明,引起轻度、中度、重度和极重度冲击伤... 详细信息

研究了水下冲击波的生物效应。研究结果表明:水下冲击伤死亡率高,肺仍然是水下冲击波致伤和致死的主要靶器官,肠道损伤的发生率较高,而肝、脾、肾等脏器和体表很少发生损伤;初步的量效关系分析表明,引起轻度、中度、重度和极重度冲击伤的冲量值分别为121.1～142.0、142.0～214.3、247.8～322.6和322.6～579.8kPa·ms。

关键词：爆炸力学冲击波生物效应水力爆炸冲击伤

Toll样受体4介导内毒素对内皮细胞NF-κB的激活

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生物化学与生物物理进展 2002年第3期29卷 407-410页

作者：杨清武朱佩芳王正国蒋建新第三军医大学大坪医院野战外科研究所重庆400042

为探讨Toll样受体 4 (Toll likereceptor 4 ,TLR4 )在内毒素 (LPS)对内皮细胞NF κB激活中的作用 ,以LPS刺激培养的ECV 30 4细胞为模型 ,运用RT PCR和蛋白质印迹技术检测了内皮细胞TLR4的表达及LPS对其表达的影响 .同时利用基因转染和... 详细信息

为探讨Toll样受体 4 (Toll likereceptor 4 ,TLR4 )在内毒素 (LPS)对内皮细胞NF κB激活中的作用 ,以LPS刺激培养的ECV 30 4细胞为模型 ,运用RT PCR和蛋白质印迹技术检测了内皮细胞TLR4的表达及LPS对其表达的影响 .同时利用基因转染和抗体阻断方法进一步观察了TLR4在LPS对内皮细胞NF κB激活中的作用 .研究发现 ,LPS能明显上调内皮细胞TLR4的表达 ,呈一定的时间和剂量依赖性 .转染TLR4的功能突变体和运用抗TLR4单抗能明显抑制LPS对内皮细胞NF κB的激活 .提示TLR4介导了LPS对内皮细胞NF κB激活 ,可能在LPS对内皮细胞激活

关键词： Toll样受体4 介导内毒素内皮细胞 NF-кB 激活核因子кB 脓毒症休克

钙增敏剂MCI-154对内毒素血症大鼠心肌收缩系统钙敏感性的影响(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2000年第9期21卷 64-68页

作者：梅建民胡德耀陈惠孙刘良明肖南陈海花卢儒权第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所第三军医大学附属大坪医院野战外科研究所重庆 400042 中国

目的:研究MCI-154对内毒素血症大鼠心肌收缩系统钙敏感性的影响.方法:利用皂素500 mg/L制备内毒素血症大鼠蜕膜右心室乳头状肌标本,用不同钙浓度的含或不含强心药物的激活液进行顺序激活,记录Ca2+激活张力.结果:同正常对照组相比,内毒... 详细信息

目的:研究MCI-154对内毒素血症大鼠心肌收缩系统钙敏感性的影响.方法:利用皂素500 mg/L制备内毒素血症大鼠蜕膜右心室乳头状肌标本,用不同钙浓度的含或不含强心药物的激活液进行顺序激活,记录Ca2+激活张力.结果:同正常对照组相比,内毒素血症大鼠蜕膜乳头状肌钙最大激活张力(Tmax)降低,pCa50值下降.甲腈吡酮50μmol/L对上述异常无明显的改善作用.内毒素血症大鼠蜕膜乳头状肌经含MCI-154 10 μmol/L的激活液处理后,Tmax和pCa50值明显增加,与假休克组类似,明显高于内毒素血症组和内毒素血症+甲腈吡酮组值.MCI-154的上述作用还具有剂量依赖性.结论:大鼠内毒素血症后,心肌收缩系统对Ca2+敏感性降低,MCI-154可明显增加内毒素血症大鼠心肌收缩蛋白对钙的敏感性,增加心肌钙最大激活张力.

关键词：内毒素血症强心药乳头状肌钙 MCI-154