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大蒜素对LM-8细胞Bcl-2及Bax表达的影响

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中国组织工程研究与临床康复 2008年第15期12卷 2997-3000页

作者：何宇杨述华周钢华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科湖北省武汉市430022

背景:有研究证实,大蒜素对LM-8细胞增殖及凋亡有影响。目的:观察大蒜素干预C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞Bcl-2、Bax凋亡蛋白的表达,以及LM-8细胞的形态学变化与Bcl-2及Bax变化的关系。设计:随机分组,非盲法,细胞水平体外实验。单位:实验... 详细信息

背景:有研究证实,大蒜素对LM-8细胞增殖及凋亡有影响。目的:观察大蒜素干预C3H小鼠骨肉瘤细胞株LM-8细胞Bcl-2、Bax凋亡蛋白的表达,以及LM-8细胞的形态学变化与Bcl-2及Bax变化的关系。设计:随机分组,非盲法,细胞水平体外实验。单位:实验于2006-09/2007-05在华中科技大学同济医学院附属协和医院中心实验室完成。材料:实验所用C3H小鼠LM-8骨肉瘤细胞株购自解放军第四军医大学实验动物中心。大蒜素为武汉汇海公司产品,是从大蒜球茎中分离出的硫化物。CellCountingKit-8试剂购于上海同仁化学研究所,Bcl-2和Bax抗体及SP试剂盒购于福州迈新生物技术开发公司。方法:以含体积分数为0.1新生牛血清的1640完全培养基,培养LM-8细胞,制作细胞爬片。SP免疫细胞组织化学技术检测细胞爬片中Bcl-2和Bax蛋白表达;倒置显微镜下观察5.0,10.0和15.0mg/L质量浓度大蒜素作用前后LM-8细胞形态变化;将LM-8细胞调整至7.5×107L-1接种于96孔板,用1.0,5.0,10.0和15.0mg/L质量浓度的大蒜素处理细胞,设立不加任何处理因素的对照组及不含细胞和药物的培养基空白组,孵育24,48,72h后取出培养板,加入CCK-8测定吸光度值,计算LM-8细胞生长抑制率;以5.0,10.0和15.0mg/L质量浓度大蒜素干预LM-8细胞24,48,72h,消化离心收集细胞,以流式细胞仪分析细胞凋亡率的变化。主要观察指标:LM-8细胞中Bcl-2和Bax蛋白表达;LM-8细胞形态及增殖、凋亡情况。结果:①Bcl-2和Bax蛋白表达:大蒜素可以降低Bcl-2表达,增强Bax表达,经15.0mg/L大蒜素作用72h,Bcl-2和Bax蛋白表达阳性率及Bcl-2/Bax表达与对照组比较,差异有显著性意义(P<0.01)。②LM-8细胞的形态:经不同质量浓度大蒜素干预后均出现明显凋亡表现。③LM-8细胞的增殖:大蒜素能明显抑制LM-8细胞的增殖,当大蒜素浓度从1.0mg/L增加到15.0mg/L,LM-8细胞72h时生长抑制率由(23.87±3.26)%增至(58.32±5.38)%,在72h其药物半数抑制率浓度是11.09mg/L。④LM-8细胞的凋亡:5.0,10.0和15.0mg/L质量浓度的大蒜素作用72h后可诱导LM-8细胞凋亡,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论:①大蒜素可抑制LM-8细胞增殖,该效应与大蒜素的浓度和时间有关。②大蒜素可诱导LM-8细胞凋亡,作用呈浓度依赖性。③大蒜素抑制LM-8细胞增殖和诱导LM-8细胞凋亡的机制可能与下调Bcl-2的表达和上调Bax的表达有关。

关键词：凋亡相关基因大蒜素细胞凋亡骨肉瘤 LM-8细胞

新药专家邹全明：大胆破解世界难题顽强死磕“超级细菌”

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重庆行政（公共人物） 2017年第3期 36-39页

作者：陈玉婷向燕妮《重庆行政:公共人物》编辑部

人物简介：邹全明，国家重大科技专项课题首席专家，国家免疫生物制品工程技术研究中心主任，第三军医大学教授，博士生导师，享爱国务院特殊津贴，获得国际及国家发明专利授权32项、国家技术发明二等奖、

关键词：国家重大科技专项专家工程技术研究中心细菌世界新药技术发明博士生导师

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《第六届全国肝脏外科学术会议》纪要

中华肝胆外科杂志 2001年第7期7卷 445-446页

作者：张必翔华中科技大学同济医学院附属同济医院肝脏外科中心

第六届全国肝脏外科学术会议于2000年10月25～28日在武汉召开,与会代表550余人, 会议以'院士论坛'、'专题报告'、'大会交流'、'中青年专家论坛'四种形式进行,所涉内容反映了我国二十世纪肝脏外科水平,并指明了新世纪我国肝外科发展的方... 详细信息

第六届全国肝脏外科学术会议于2000年10月25～28日在武汉召开,与会代表550余人, 会议以'院士论坛'、'专题报告'、'大会交流'、'中青年专家论坛'四种形式进行,所涉内容反映了我国二十世纪肝脏外科水平,并指明了新世纪我国肝外科发展的方向.现将主要内容简述如下.一、院士论坛中国科学院资深院士裘法祖教授在'器官移植:二十一世纪的外科'的讲演中,概括了许多终末期病人只能通过器官移植才能获得第二次生命的重要性,并指出器官移植推动了现代基础医学的发展,并在少数领域处于国际领先水平,但与国际相比,无论在数量上或质量上仍存在极大差距.亟待解决的首要问题是要保证高质量供体的来源,必须从整个社会舆论和法律上承认和支持'脑死亡就等于机体整体死亡'的概念.其次是必须加速免疫抑制药物的国产化,以降低移植费用.中国科学院院士吴孟超教授在'肝癌诊治进展'的报告中指出,目前肝癌的总体疗效并不理想,近期工作宜将现有的各种综合治疗进行合理组合,达到最大程度抑制肝癌生长、转移及保护肝脏代偿功能的目的.就其远期目标而言,揭示肝癌的病因机制,揭示生长、转移的分子机制,从中获得特异性的干预手段是关键,但要达到此目的尚需要漫长时间的艰苦努力.中国工程院院士汤钊猷教授从原发性肝癌转移复发的临床预测指标、转移复发的治疗与预防、分子水平的研究、人肝癌高转移裸鼠与细胞模型的建立与研究、肝癌血管生成及转移复发的实验性干预、染色体改变与肝癌转移等方面,全面叙述了原发性肝癌切除术后转移复发的研究现状,虽然某些方面的成绩令人鼓舞,但要获得真正的发展,必须将临床与基础紧密结合.中国工程院院士黄志强教授在'肝门部胆管癌外科治疗的发展'中回顾了肝门部胆管癌外科治疗的历史,指出肝门部胆管癌应包括那些来源于大的肝管而又侵犯肝管汇合部的癌,介绍了Blumgart肿瘤定期标准,即根据照片显示的对门静脉的侵犯和同侧的肝叶萎缩的表现来决定分期.扩大的根治切除术对晚期肝门胆管癌并无益处,多数病人应争取好的姑息性效果及更低的术后并发症.而且,必须认识肝门部胆管癌是一区域性而不是局部性的疾病,若其沿神经周围淋巴间隙'跳跃'性转移,侵犯周围的血管、淋巴和软组织,在肝门部施行的切除手术肯定是不可能根治的.二、专题报告上海东方肝胆外科医院陈汉就'复发性肝癌的外科治疗'作了专题报告,结合该院160 余例复发性肝癌再切除治疗体会,认为再切除是肝癌复发的首选治疗,适合再次切除者可取得较好临床效果.香港中文大学刘允怡介绍了香港地区肝癌外科治疗现状,认为如果肿瘤大于5 cm,估计可以切除且无手术禁忌证者应施行手术切除;如果肿瘤无法切除,则采用新的联合化疗方案(顺铂+α-干扰素+阿霉素+氟尿嘧啶);对转为可切除者则手术切除;肝切除的全部病人辅以脂碘-131治疗;不能切除的小肝癌选择肝移植或Intra Dose TM局部坏死治疗.华中科技大学同济医院陈孝平报告了湖北地区375例巨大肝癌肝切除的经验,其术后1,2,3,5,10年生存率分别为63.3%,45.6%,34.7%,16.5%,1.8%,说明巨大肝癌是可安全切除的,且与其它非手术方法相比疗效更好.南京医科大学王学浩对肝癌的现代综合治疗提出了几点参考意见:①肝肿瘤根治性切除术后为预防复发一般在术后行TACE治疗;②部分不能切除的肝癌可在术中直视下瘤体内注射无水酒精,亦可手术后在B 超引导下反复穿刺注射;③不能切除的大肝癌可行125I或131I-碘油-抗癌药物乳剂导向治疗,也可直接行TACE治疗,待肿瘤缩小后二期切除;④免疫治疗和基因治疗可用于肝癌术后复发的预防及不能切除的肝癌.华西医科大学何生回顾了临床常用的几种肝癌的微创、无创疗法,认为其操作简便,可反复进行,对肝功能影响小,并发症少,有取代手术治疗的趋势.第二军医大学王红阳在'细胞信号传导与肝癌'的报告中认为SIRPα与肿瘤发生、发展有关,SIRPα有可能成为肿瘤治疗的一个指标. 复旦大学肝癌研究所叶胜龙介绍了肝癌免疫学治疗及免疫基因治疗的现状,认为生物治疗作为现有三大治疗模式的辅助和补充,在控制肿瘤的增殖、预防和延缓复发转移以及提高病人的生活质量等方面可能具有独特的优势.北京301医院刘永雄认为,必须认识到以胆固醇为主要成分的肝内胆管结石是涉及肝、胆道乃至全身性的有关代谢和感染两方面因素的疾病,应加强对结石成因的高水平研究,从多方面追求外科技术(包括肝外科技术)和应用手段的创新,以期获得治疗的新突破.香港大学范上达介绍了香港地区活体肝移植的发展,认为影响活体肝移植疗效的主要问题是肝移植时移植物太小,后者不适应大量的门静脉血液而易受损,而右半肝移植物是解决成人活体肝移植时移植物大小受限的有效途径,劈离式肝移植是增加近期肝移植数目的正确方向.中山医科大学陈积圣指出,肝细胞移植可以治疗急慢性肝功能衰竭及各种肝

关键词：肝脏外科学学术会议器官移植肝癌

坐骨神经预损伤后背根神经节中miRNomes改变对大鼠脊髓后索损伤修复的影响

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中国脊柱脊髓杂志 2014年第12期24卷 1090-1098页

作者：王天仪原文琦刘勇张衍军张亮王志杰曹建刚冯世庆天津医科大学总医院骨科天津市300052 解放军266医院骨一科河北省承德市067000 天津医科大学第二附属医院骨科天津市300211 承德医学院附属医院儿内科河北省承德市067000

目的:研究大鼠坐骨神经预损伤后背根神经节中mi RNomes改变对脊髓后索损伤修复的影响。方法:39只雌性Wistar大鼠随机分为A、B、C、D组。A组(n=12)坐骨神经损伤造模后7d进行T10节段脊髓后索损伤造模,B组(n=12)仅进行T10节段脊髓后索损伤... 详细信息

目的:研究大鼠坐骨神经预损伤后背根神经节中mi RNomes改变对脊髓后索损伤修复的影响。方法:39只雌性Wistar大鼠随机分为A、B、C、D组。A组(n=12)坐骨神经损伤造模后7d进行T10节段脊髓后索损伤造模,B组(n=12)仅进行T10节段脊髓后索损伤造模,C组(n=12)仅进行坐骨神经损伤造模,D组(n=3)不进行任何造模操作。A组和B组分别于脊髓后索损伤造模后4h、3d、7d、14d取背根神经节行总RNA提取和Western blot检测,于脊髓后索损伤造模后14d取损伤中心脊髓组织行神经丝蛋白200(NF-200)免疫组织化学染色和HE染色;C组于A组各时间点取材的同时取背根神经节行总RNA提取和Western blot检测;D组取背根神经节行总RNA提取和Western blot检测。对A、B两组各时间点背根神经节mi RNA表达谱进行微阵列芯片分析和生物信息学分析,观察与坐骨神经预损伤促进脊髓后索损伤修复有关的mi RNA,选出A组中与B组相比变化倍数明显、经过生物信息学分析靶蛋白为Dusp4的mi R-199a-5p进行研究。并用RT-q PCR技术对各组mi R-199a-5p及A、B和D组Dusp4 m RNA表达进行检测,用Western blot技术检测各组Dusp4蛋白以及A、D组p38蛋白和p-p38蛋白,对A组和B组脊髓后索损伤中心脊髓组织用NF-200免疫组织化学染色及HE染色观察损伤脊髓的恢复情况。结果:芯片分析结果显示mi R-199a-5p在A组各个时间点表达与D组相比明显下调,B组mi R-199a-5p在脊髓后索损伤后4h表达与D组相比上调,3d、7d和14d的表达量无明显变化。RT-q PCR结果显示A组各时间点mi R-199a-5p表达与D组相比下调(P学差异(P及p-p38蛋白的表达变化趋势与mi R-199a-5p趋势一致。在脊髓后索损伤后14d,与B组比较A组损伤中心尾端脊髓NF-200表达明显增加,且损伤中心尾端脊髓白质纤维束形态规整、后索纤维束排列有序。结论:大鼠坐骨神经预损伤后背根神经节中mi R-199a-5p表达下调可以促进脊髓后索损伤的修复。

关键词：坐骨神经预损伤脊髓后索损伤 miRNA Dusp4 p38蛋白大鼠

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成人乙型病毒性肝炎疫苗免疫策略研究

成人乙型病毒性肝炎疫苗免疫策略研究

作者：王吉玲浙江大学

学位级别：硕士

研究背景乙型病毒性肝炎(乙肝,HepB)是全球公共卫生的一个重要问题。我国属于乙肝病毒(HBV)感染中、高流行区,大概有7亿多人受过感染,有1.2亿人长期携带HBsAg,每年有约30万人死于与HBV感染相关的肝硬化和肝癌。注射乙肝疫苗是迄今为止... 详细信息

研究背景乙型病毒性肝炎(乙肝,HepB)是全球公共卫生的一个重要问题。我国属于乙肝病毒(HBV)感染中、高流行区,大概有7亿多人受过感染,有1.2亿人长期携带HBsAg,每年有约30万人死于与HBV感染相关的肝硬化和肝癌。注射乙肝疫苗是迄今为止全球公认的预防和控制乙肝最有效的措施。我国自1992年将乙肝疫苗纳入新生儿计划免疫管理。近10多年来,新生儿乙肝疫苗计划免疫已取得了很大成绩。然而我国的乙肝防制工作仍然面临许多困难与挑战:总人群的HBsAg携带率和HBV感染率没有明显下降,近几年的总报告发病率不但没有下降,却还有上升趋势;从近期效果来看,新生儿免疫策略虽能阻断母婴传播,却不能控制成人间的水平传播,而这种传播有愈演愈烈之势;仍然有5～10%的人接种乙肝疫苗表现为无、弱应答而仍保持为易感状态。研究目的本文以绍兴市为例,分析1998年以来乙肝发病流行特征,揭示现阶段乙肝发病的重点人群,提出乙肝防制工作的重点;对成人乙肝疫苗免疫效果和失败机理展开研究,并对成人乙肝疫苗免疫策略进行探讨,以期为各级政府制定成人乙肝免疫策略和实施方案提供科学依据。材料与方法疫情资料来源于绍兴市法定传染病疫情年鉴,人口资料来源于绍兴市统计局和全国人口普查资料。将疫情数据导入Excel 2003统计软件,并利用部分相对数指标和统计图表对从1998年以来的乙肝的性别年龄分布、地区分布以及职业分布等流行特征的变化情况进行描述性分析。绍兴市结合当前国内的乙肝流行特征的共同点探讨阐述成人乙肝疫情的严峻性和制定成人免疫策略的紧迫性。为探讨成人乙肝疫苗免疫策略的可行性,以绍兴某市区一工厂为研究地点,选择18～50岁的成人,进行乙肝疫苗接种史、疫苗过敏史、乙肝感染史等的问询和血清学筛选,最终选择HBsAg、抗-HBs阴性的健康成人为乙肝疫苗免疫对象,开展乙肝疫苗免疫成功率研究;对无、弱应答人群再进行免疫失败影响因素研究。乙肝疫苗由华北制药金坦生物技术股份有限公司提供,血清学检测由浙江省疾病预防控制中心和绍兴市疾病预防控制中心实验室共同承担完成。数据用卡方、秩和检验等统计学方法分析后推断出结果。结果1 1998～2006年绍兴市乙肝疫情流行病学特征乙型肝炎是绍兴市病毒性肝炎的优势型别,2006年报告发病率达到93.76/10万。地区分布:越城区、绍兴县、诸暨市报告发病数占了全市总发病数的74.48%,报告发病地区差异明显的主要原因是近年越城区、绍兴县、诸暨市三地外来人口的大量涌入。年龄、性别分布:15岁以下儿童占2.72%,15～59岁占89.35%,60岁及以上占7.93%,15～59岁的成人是绍兴市乙肝发病的主要对象。15岁以下儿童的乙肝发病率从1998年的16.54/10万降至2006年的9.71/10万,比1998年下降了41.29%,而其余年龄组总体呈上升趋势,保持高发病状态。男女之比为2.37:1。职业分布:发病前三位的职业分别是:农民(占59.25%)、工人(12.31%)、学生(6.85%)。2成人全程接种乙肝疫苗后免疫效果471名HBsAg、抗-HBs阴性者接受10μg/mlCHO重组乙肝疫苗免疫,完成全程接种401人,全程接种率为85.14%。按免疫前的血清学结果分为三项全阴性组、单抗-HBc阳性组。全程接种后1个月接种对象免疫后的抗-HBs阳转率为96.76%,抗-HBs滴度中位数为352.79mIU/ml。两组均有随年龄增长免疫水平下降、男性比女性免疫反应弱的规律。全程接种后1年,观察175人,抗-HBs阳性率85.71%,抗-HBs滴度中位数为53.86mIU/ml,与全程接种后1月后比较,差别有显著性(P＜0.05)。3首次全程免疫失败人群加强免疫效果观察13名首次免疫无、弱应答对象用20μg/mlCHO细胞重组乙肝疫苗按0,1,6月的接种程序进行加强免疫。加强免疫结束后1个月检测抗-HBs,结果5名抗-HBs阳转。4免疫失败相关因素研究4.1 HLA-DR区基因表型对免疫失败者和强应答者各13名进行HLA-DR区基因表型检测,结果发现免疫失败者和强应答组的人群中DR2(15)、DR5(12)、DR7、DR9检出率基本一致,无显著差异。4.2微量病毒感染8名加强免疫失败者中,发现1例HBV DNA阳性者。4.3生活行为方式对12名(13名首次免疫失败者中除外1名HBV DNA阳性者)免疫失败者和免疫成功者以1:2同年龄、性别配对,进行吸烟、饮酒、乙肝家族史、拔牙、手术等情况的调查问卷和身高、体重等

关键词：成人乙肝疫苗免疫策略

基于肠肝轴对COSM治疗NAFLD作用机制及肠溶滴丸制备的研究

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基于肠肝轴对COSM治疗NAFLD作用机制及肠溶滴丸制备的研究

作者：刘永健广东药科大学

学位级别：硕士

非酒精性脂肪肝病(NAFLD),即因酒精外其他因素导致的脂肪肝疾病。NAFLD给人类带来的危害不可忽视,目前市场治疗NAFLD的药物较少,有许多应用缺陷且治疗效果不佳。因此,迫切需要研制安全、有效、副作用少的治疗NAFLD药物。壳寡糖(Chitosan... 详细信息

非酒精性脂肪肝病(NAFLD),即因酒精外其他因素导致的脂肪肝疾病。NAFLD给人类带来的危害不可忽视,目前市场治疗NAFLD的药物较少,有许多应用缺陷且治疗效果不佳。因此,迫切需要研制安全、有效、副作用少的治疗NAFLD药物。壳寡糖(Chitosan Oligosaccharides,COS)是由氨基葡萄糖和少量N-乙酰氨基葡萄糖通过β-1,4-糖苷键连接而成的海洋寡糖,具有多种生物活性,同时有一定调节肠道菌群的能力。肠溶滴丸具有生物利用度高、药物稳定性强、同时能够控制药物于肠道中释放等特性。因此,本文探索了COSM(平均分子量≤3000)对NAFLD的治疗活性及其作用机制,并将COSM制备为肠溶滴丸,对其制备方法及质量标准进行了探讨。动物实验结果表明:COSM能够在不影响食欲的情况下,显著改善NAFLD小鼠血糖水平异常、降低胰岛素水平,从而改善机体胰岛素抵抗状态。COSM能够显著改善NAFLD小鼠肝功能受损,降低血清AST、ALT指标。COSM能够增加NAFLD小鼠CAT,增强T-AOC能力,从而增强抗氧化能力;降低血清中促炎因子TNF-α水平,增加抗炎因子IL-10水平,具有一定的抗炎能力。肝脂质测定、病理学分析结果表明,COSM能够显著改善肝脏脂质代谢,减轻肝脏脂肪变性。同时COSM能够在一定程度上改善小鼠回肠及结肠屏障功能障碍。机制研究结果表明:与Model组小鼠相比,COSM组粪便菌群群落丰富度及多样性有所降低,能够显著增加Akkermansia属细菌(P免疫荧光染色结果亦证明COSM能够上调结肠ZO-1蛋白的表达,改善肝脏LPS/TLR4/NF-κB通路,从而改善NAFLD小鼠的肝脏病变状态。制剂实验结果表明,COSM滴丸丸芯的最优制备工艺条件如下:药物:基质=1:3,药液熔融温度为80℃,滴距为15 cm,所选基质为PEG6000,冷凝介质为液体石蜡,冷凝温度为5-10℃。据此工艺条件制备滴丸外观圆整,色泽均一。在此丸芯基础上,考察得到肠溶包衣的最佳工艺为:1)包衣液:5%质量分数的肠溶包衣材料,5%质量分数的滑石粉,0.5%质量分数的PEG6000。2)包衣条件:进风温度为40-50℃、排风温度为25-30℃、物料温度为25-30℃;包衣机转速为25 rpm,雾化压力为0.12 Mpa,包衣增重量为20%。制得肠溶滴丸呈白色至浅灰色的类圆球形丸,无特殊气味。对所制肠溶滴丸进行性状、重量、溶散时限检查,均符合药典规定。每丸平均含COSM 14.05 mg,符合设定要求。成功建立COSM肠溶滴丸稳定的制备工艺及质量标准。

关键词：非酒精性脂肪肝病壳寡糖肠道菌群肠溶滴丸

脑缺血再灌注大鼠血浆细胞因子和内皮素含量的变化及前列腺素E_1的干预作用

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中华老年心脑血管病杂志 2001年第2期3卷 139-139页

作者：戴伟娟郭子林冯国清宋爱芹刘善庭翁世艾山东济宁医学院药理室山东济宁272013 河南医科大学药理室河南郑州450052

我们应用线栓法制备局灶脑缺血再灌注模型,并首次应用前列腺素E1进行治疗,旨在探讨脑缺血再灌注后血浆细胞因子、内皮素水平的变化及前列腺素E1对其含量的影响.1材料和方法健康雄性Wistar大鼠,体重320～360 g,由山东医科大学动物中心提... 详细信息

我们应用线栓法制备局灶脑缺血再灌注模型,并首次应用前列腺素E1进行治疗,旨在探讨脑缺血再灌注后血浆细胞因子、内皮素水平的变化及前列腺素E1对其含量的影响.1材料和方法健康雄性Wistar大鼠,体重320～360 g,由山东医科大学动物中心提供;放免试剂盒购自东亚免疫技术研究所;前列腺素E1注射剂,沈阳市生物化学制药厂生产,批号990301.

关键词：脑缺血肿瘤坏死因子白细胞介素-1 内皮素前列腺素E2 细胞因子再灌注损伤大鼠

微小RNA-92b在儿童急性横贯性脊髓炎发生机制中的作用

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中华实用儿科临床杂志 2018年第24期33卷 1859-1863页

作者：王志杰王天仪刘丽娜虞妹李波刘霞张铮周搏王新郭晓玲承德医学院附属医院儿内科 067000 中国人民解放军第二六六医院骨一科河北承德067000 中国人民解放军第二六六医院神经内科河北承德067000 中国医学科学院血液病医院白血病诊疗中心天津300020 天津医科大学总医院骨科 300052

目的筛选调控儿童急性横贯性脊髓炎的关键微小RNA(miRNA),并验证其调控的相关通路。方法本研究纳入12例急性横贯性脊髓炎患者作为ATM组,纳入3例正常脑脊液儿童作为对照组,使用microarray4.0芯片检测儿童急性横贯性脊髓炎患者脑脊液中发... 详细信息

目的筛选调控儿童急性横贯性脊髓炎的关键微小RNA(miRNA),并验证其调控的相关通路。方法本研究纳入12例急性横贯性脊髓炎患者作为ATM组,纳入3例正常脑脊液儿童作为对照组,使用microarray4.0芯片检测儿童急性横贯性脊髓炎患者脑脊液中发生改变的miRNA。运用生物信息学方法论证发挥关键调控作用的miRNA并进行靶基因预测。实时荧光定量PCR(qPCR)技术进行生物学与技术重复。用酶联免疫吸附法(ELISA)与Westernblot技术检测关键miRNA靶蛋白表达量。在背根神经节神经元中抑制/过表达关键候选miRNA,进行体外功能验证。应用夫拉平度(Flavopiridol)抑制CDKs的活性来验证miR-92b是通过p57-CDKs-GAP-43通路发挥作用的。结果急性横贯性脊髓炎患者脑脊液样本中miR-92b特征性上调明显。生物信息分析结果显示p57可为miR-92b的靶基因。miR-92b与p57蛋白样本间表达趋势相反。体外细胞实验显示miR-92b过表达组的神经元轴突生长明显弱于对照组;miR-92b抑制组的神经元轴突明显延长;在miR-92b过表达+Flavopiridol组,背根神经节神经元轴突与对照组相比依旧显著延长。Westernblot实验结果显示miR-92b过表达组的p57和GAP-43蛋白表达低于对照组;与对照组相比,miR-92b抑制组的p57和GAP-43蛋白表达显著上调;而在miR-92b过表达+Flavopiridol组,p57表达低于对照组,GAP-43蛋白的表达量高于对照组。结论儿童急性横贯性脊髓炎患者miR-92b的上调导致了p57的下调,使CDKs的活性增强,进而抑制GAP-43蛋白的表达和脊髓损伤区域轴突的再生。miR-92b是儿童急性横贯性脊髓炎治疗的关键靶点之一。

关键词：急性横贯性脊髓炎儿童脑脊液微小RNA 治疗靶点

鲜山药提取物对实验性胃溃疡大鼠血清胃泌素的影响

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中国中医药科技 2010年第3期17卷 195-195页

作者：沈亚芬沈金根朱曙东浙江省中医院杭州310006 浙江省桐乡市第一人民医院桐乡314500

1 实验材料1.1 动物清洁级SD大鼠,7-8同龄,体重(180±20)g,雄性60只,由浙江中医药大学动物实验中心提供.1.2 药品及仪器新鲜山药:购自南城阿颖金山药食品有限责任公司,制成1.67g/ml、0.83g/ml、0.42g/ml 3个浓度.施维舒胶囊:由卫材(苏... 详细信息

1 实验材料1.1 动物清洁级SD大鼠,7-8同龄,体重(180±20)g,雄性60只,由浙江中医药大学动物实验中心提供.1.2 药品及仪器新鲜山药:购自南城阿颖金山药食品有限责任公司,制成1.67g/ml、0.83g/ml、0.42g/ml 3个浓度.施维舒胶囊:由卫材(苏州)制药有限公司生产,批号:***2003/50pγ放射免疫计数器:国营二六二厂.1.3 试剂胃泌素放免疫分析盒:北京华英生物技术研究所.

关键词：血清胃泌素胃溃疡大鼠实验性提取物清洁级SD大鼠山药中医药大学实验材料