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四生汤对电磁辐射所致大鼠海马神经元损伤的抑制作用

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海军军医大学学报 2024年第7期45卷 838-843页

作者：秦浩然骆华杰黄帅周西彬郑国银王丽娜顾伟黄念凌昌全海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院中医肿瘤科上海200433 上海交通大学医学院附属仁济医院耳鼻喉科上海200001 上海市浦东医院骨科上海201399 海军军医大学(第二军医大学)中医系经典著作教研室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)中医系中医内科教研室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)中医系军事中医学教研室上海200433 海军军医大学(第二军医大学)第三附属医院中西医结合科上海201805

目的评价四生汤抑制电磁辐射所致大鼠海马神经元损伤的作用。方法利用电磁辐射源辐射大鼠4周,低、中、高辐射功率密度分别为10、20及40 mW/cm^(2),构建大鼠电磁辐射损伤模型。以生理盐水为空白对照,安多霖胶囊为阳性对照,通过Morris水... 详细信息

目的评价四生汤抑制电磁辐射所致大鼠海马神经元损伤的作用。方法利用电磁辐射源辐射大鼠4周,低、中、高辐射功率密度分别为10、20及40 mW/cm^(2),构建大鼠电磁辐射损伤模型。以生理盐水为空白对照,安多霖胶囊为阳性对照,通过Morris水迷宫实验评估四生汤对大鼠因电磁辐射所致的学习记忆力下降的影响。利用TUNEL试剂盒和流式细胞术检测大鼠海马神经元的凋亡水平,采用细胞活性氧(ROS)试剂盒和流式细胞术检测大鼠海马神经元中ROS含量。结果Morris水迷宫实验结果表明,高剂量辐射结束后第7天,空白对照组大鼠的平均逃避潜伏期(AEL)比四生汤组、安多霖组延长,安多霖组大鼠的AEL比四生汤组延长(均P学意义(均P>0.05)。细胞凋亡检测结果证实,高剂量和中剂量比低剂量辐射的大鼠海马神经元凋亡率增大(均P学意义(P>0.05),但安多霖组和四生汤组大鼠海马神经元ROS含量均比空白对照组降低(均P学习记忆力的下降。

关键词：电磁辐射四生汤海马神经损伤

IGFBP5增龄性表达促进胸腺上皮细胞线粒体自噬和凋亡

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陆军军医大学学报 2024年第6期46卷 567-577页

作者：陈禧禅曾继涛瞿思铭高维武吴玉章陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院免疫学教研室重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院生殖科重庆4000382 昆明医科大学第一附属医院器官移植中心昆明650032

目的探讨在胸腺上皮细胞中随年龄增长而上调表达的胰岛素样生长因子结合蛋白5(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5,IGFBP5)在胸腺衰退中的作用和机制。方法使用基因差异表达分析方法从已发表人胸腺基质细胞单细胞数据集(GS... 详细信息

目的探讨在胸腺上皮细胞中随年龄增长而上调表达的胰岛素样生长因子结合蛋白5(Insulin Like Growth Factor Binding Protein 5,IGFBP5)在胸腺衰退中的作用和机制。方法使用基因差异表达分析方法从已发表人胸腺基质细胞单细胞数据集(GSE147520)中筛选出随年龄增长表达上调程度最高的基因IGFBP5;Mfuzz趋势分析筛选出与IGFBP5具有相同表达趋势的基因;富集分析注释与IGFBP5共趋势基因集;使用蛋白序列比对工具研究IGFBP5蛋白氨基酸序列的人鼠同源性;使用NIH基因数据库研究IGFBP5在人鼠器官组织中表达模式;免疫组化研究IGFBP5在不同年龄C57/BL6小鼠胸腺中的表达模式;构建IGFBP5过表达胸腺上皮细胞系;透射电镜观察IGFBP5过表达胸腺上皮细胞系中线粒体的形态变化;免疫蛋白印记(Western Blot, WB)对线粒体及全细胞组分线粒体自噬标志物微管相关蛋白1B(Microtubule Associated Protein 1 Light Chain 3 Beta, LC3B)、PTEN诱导激酶1(Pten Induced Kinase 1, PINK1)、Parkin泛素蛋白连接酶(Parkin Rbr E3 Ubiquitin Protein Ligase, Parkin)、BCL2互作蛋白3(BCL2 Interacting Protein 3, BNIP3),细胞凋亡标记物活化型胱天蛋白酶3 (Cleaved-Caspase3)表达水平进行检测;细胞双重免疫荧光对线粒体标志物与线粒体探针(MitoTracker)胞内定位进行检测;使用流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)对细胞系凋亡水平进行检测。结果 IGFBP5是人胸腺上皮细胞中随年龄增长表达上调程度最大的基因,与其具有共同表达模式的基因集显著富集在线粒体相关通路上。人与小鼠IGFBP5蛋白序列高度保守,其在人、小鼠多器官组织中表达模式相近,且IGFBP5在人、小鼠胸腺中均呈现中等表达水平;此外,IGFBP5在人和小鼠胸腺上皮中随年龄增长表达升高;在IGFBP5过表达小鼠胸腺上皮细胞系中,透射电镜结果表明线粒体自噬体增多,WB结果表明线粒体组分和细胞组分LC3B、PINK1、Parkin蛋白表达水平上调,BNIP3无明显差异;细胞双重免疫荧光结果表明LC3B、PINK1、Parkin蛋白胞质表达增多且与线粒体共定位;WB表明IGFBP5过表达鼠胸腺上皮细胞系中细胞凋亡标志物Cleaved-Caspase3水平升高;FCM表明IGFBP5过表达细胞系凋亡细胞比例增加。结论人、小鼠胸腺上皮细胞中随年龄增长而表达升高的IGFBP5促进线粒体自噬和细胞凋亡,从而导致胸腺上皮细胞减少和胸腺功能衰退,因此,IGFBP5可成为干预胸腺衰老、重构人体免疫力的潜在靶标。

关键词：胸腺上皮细胞胰岛素样生长因子结合蛋白5 线粒体自噬凋亡胸腺衰退

转录因子SOX3对卵巢颗粒细胞增殖和雌二醇分泌的影响

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安徽医科大学学报 2024年第3期59卷 371-376,383页

作者：蔡睿张浩刘壮陈远华谢芬芬洪强安徽医科大学基础医学院组织胚胎学教研室合肥230032

目的研究性别决定区Y框蛋白3(SOX3)对人卵巢颗粒细胞(KGN)增殖和雌二醇分泌的影响。方法在NCBI数据库Gene-Bank中搜索人SOX3(NM_005634.3)的基因序列,用PCR方法扩增目的基因SOX3,将其克隆到慢病毒载体pLV-EF1a-GFP-2A-Puro上,获得过表... 详细信息

目的研究性别决定区Y框蛋白3(SOX3)对人卵巢颗粒细胞(KGN)增殖和雌二醇分泌的影响。方法在NCBI数据库Gene-Bank中搜索人SOX3(NM_005634.3)的基因序列,用PCR方法扩增目的基因SOX3,将其克隆到慢病毒载体pLV-EF1a-GFP-2A-Puro上,获得过表达慢病毒重组质粒pLV-EF1a-GFP-2A-Puro-SOX3;将测序正确的过表达慢病毒重组质粒以及包装质粒(pGag/Pol、pRev、pVSV-G)共同转染到人胚肾细胞系(HEK 293T)细胞中(pLV-SOX3组),将pLV-EF1a-GFP-2A-Puro及包装质粒(pGag/Pol、pRev、pVSV-G)共同转染到HEK 293T细胞中(pLV-NC组),转染48 h后收集两组慢病毒颗粒并测定病毒的滴度,将两组慢病毒感染KGN细胞,经嘌呤霉素筛选2周后,获得稳定表达的细胞系;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blot法检测两组中SOX3的mRNA和蛋白水平;CCK-8法检测两组细胞增殖能力;ELISA测定两组雌二醇的浓度。结果PCR产物的鉴定和测序结果表明SOX3基因片段扩增成功,酶切和测序结果表明过表达慢病毒重组质粒构建完成;慢病毒感染HEK 293T细胞后可检测到绿色荧光,表明慢病毒包装成功;慢病毒感染KGN细胞后经嘌呤霉素筛选,荧光显微镜下观察细胞表达绿色荧光;RT-qPCR和Western blot检测结果均表明pLV-SOX3组中SOX3表达水平高于pLV-NC组(P<0.05)。CCK-8检测结果表明,pLV-SOX3组较pLV-NC组细胞增殖能力明显增强(P<0.01)。ELISA结果显示,pLV-SOX3组雌二醇浓度较pLV-NC组升高(P<0.05)。结论过表达转录因子SOX3能够促进KGN的增殖和雌二醇分泌。

关键词： SOX3 卵巢颗粒细胞慢病毒载体增殖雌二醇绿色荧光蛋白

甘油三酯葡萄糖指数及其衍生指标对瘦型代谢相关脂肪性肝病的预测价值

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海军军医大学学报 2024年第8期45卷 973-980页

作者：董旭葛宇王超群许明晓陈怡陈琳海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院感染科上海200433 海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院超声诊断科上海200433 海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院内分泌科上海200433 海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院健康管理中心上海200433

目的探讨甘油三酯葡萄糖指数(TyG)及其衍生指标TyG-BMI、TyG-丙氨酸转氨酶(ALT)与瘦型代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)患病风险的相关性。方法选择2023年7-12月在我院健康管理中心进行年度健康体检并诊断为瘦型MAFLD的207例患者及100名瘦型... 详细信息

目的探讨甘油三酯葡萄糖指数(TyG)及其衍生指标TyG-BMI、TyG-丙氨酸转氨酶(ALT)与瘦型代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)患病风险的相关性。方法选择2023年7-12月在我院健康管理中心进行年度健康体检并诊断为瘦型MAFLD的207例患者及100名瘦型健康对照为研究对象,比较两组血脂、血糖、肝功能、TyG、TyG-BMI、TyG-ALT等,采用单因素和多因素logistic回归模型分析影响瘦型MAFLD的因素。将所有研究对象按照TyG及其衍生指标四分位数分为4个亚组(Q1~Q4),观察各亚组瘦型MAFLD的患病率。绘制TyG、TyG-BMI、TyG-ALT预测瘦型MAFLD的ROC曲线,评估各指标的预测效能。结果纳入的8764例体检者中MAFLD患者2350例(26.8%),其中瘦型207例(8.8%,207/2350)。与瘦型健康对照组相比,瘦型MAFLD组患者的年龄大、男性多见、BMI高,空腹血糖、总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、ALT、天冬氨酸转氨酶、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶、总胆红素、TyG、TyG-BMI与TyG-ALT均升高,高密度脂蛋白胆固醇降低(均P学意义(均P学意义(均P一定的预测价值;TyG及其衍生指标计算简易且价格低廉,可用于对瘦型MAFLD的临床初步评估。

关键词：代谢相关脂肪性肝病瘦型甘油三酯葡萄糖指数体重指数丙氨酸转氨酶

Fgl2对小鼠急性肾损伤中巨噬细胞极化的作用

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陆军军医大学学报 2024年第13期46卷 1467-1476页

作者：朱琳许桂莲谢攀彭侃夫陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院肾内科重庆400038 陆军军医大学(第三军医大学)基础医学院免疫学教研室重庆400038

目的探讨纤维蛋白原样蛋白2(fibrinogen-like protein2,Fgl2)对顺铂诱导的急性肾损伤(cisplatin-induced acute kidney injury,Cis-AKI)中巨噬细胞极化的作用。方法选取24只8~10周龄(体质量20~25 g)的雄性野生型(Fgl2^(+/+))小鼠和Fgl2基因敲除(Fgl2^(-/-))小鼠各12只。单次腹腔注射生理盐水(saline)或顺铂(cisplatin,Cis)处理3 d,按随机数字表法分成4组(n=6):Fgl2^(+/+)Saline组、Fgl2^(+/+)Cis组、Fgl2^(-/-)Saline组和Fgl2^(-/-)Cis组。3 d后,检测肾功能相关指标血肌酐(serum creatinine,Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)的水平,HE染色评估肾损伤程度;Western blot检测肾组织中Fgl2和肾损伤分子1(kidney injury molecule 1,Kim-1)的表达;RT-qPCR检测Fgl2、Kim-1、中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL)、IL-6、IL-12p40、IL-1β、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、TNF-α的表达;免疫组化检测肾脏Fgl2和巨噬细胞(F4/80^(+))的表达;免疫荧光检测肾组织中巨噬细胞(F4/80^(+))和M1型巨噬细胞(F4/80^(+)CD86^(+))的表达;流式细胞术检测肾组织中巨噬细胞(F4/80^(+))及M1型巨噬细胞(F4/80^(+)MHCⅡ+)、M2型巨噬细胞(F4/80^(+)CD206^(+))的表达。结果与Fgl2^(+/+)Saline组比较,Fgl2^(+/+)Cis组小鼠肾功能显著下降(P组织Fgl2表达显著上调(P<0.05);与Fgl2^(+/+)Cis组相比,Fgl2^(-/-)Cis组小鼠肾功能显著下降(P<0.05),肾损伤相关分子Kim-1、NGAL表达显著升高(P<0.05),肾小管损伤病理评分显著升高(P<0.05),巨噬细胞浸润显著增加(P<0.05),M1型巨噬细胞相关分子IL-6、IL-1β、TNF-α和iNOS表达显著上升(P<0.05),流式细胞术结果显示M1型巨噬细胞百分比显著升高(P<0.05),M2型巨噬细胞百分比无明显变化,且M1型占比显著高于M2型(P<0.05)。结论Fgl2基因敲除可通过促进巨噬细胞向M1型转化加重Cis-AKI。

关键词：顺铂急性肾损伤纤维蛋白原样蛋白2 巨噬细胞

非致残性缺血性脑血管事件患者早期淡漠与认知和情感障碍的相关性

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海军军医大学学报 2024年第1期45卷 8-15页

作者：高昕杜冰滢谷正盛孙旭蔡晨毕晓莹海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院神经内科上海200433 海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院特需诊疗科上海200433

目的探究非致残性缺血性脑血管事件(NICE)患者早期淡漠与认知和情感障碍的关系。方法选择2021年6月至2022年12月海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院收治的NICE患者244例,男156例、女88例,年龄为(63.1±9.7)岁。根据入院时淡漠评估... 详细信息

目的探究非致残性缺血性脑血管事件(NICE)患者早期淡漠与认知和情感障碍的关系。方法选择2021年6月至2022年12月海军军医大学(第二军医大学)第一附属医院收治的NICE患者244例,男156例、女88例,年龄为(63.1±9.7)岁。根据入院时淡漠评估量表-临床医师版(AES-C)评分分为淡漠组(评分≥33分,n=64)和非淡漠组(评分学资料、血液检测结果和影像学检查结果。根据影像学检查结果,将病因分为短暂性脑缺血发作和轻型卒中,后者再进行Org 10172急性脑卒中治疗试验(TOAST)分型;使用Fazekas量表对白质损伤进行评分。于发病2周内完成匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)、听觉语词学习测验(AVLT)、数字广度测验(DST)、数字符号转换测验(DSST)、数字连线测验(TMT)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)、汉密尔顿抑郁量表(HAMD)等评估。比较两组患者之间一般资料和各指标的差异,采用多因素logistic回归分析确定早期淡漠的影响因素。结果NICE患者早期淡漠的发生率为26.2%(64/244)。与非淡漠组相比,淡漠组患者的年龄较大,而BMI和受教育年限较低(均P学意义(均P>0.05)。入院时首次血液检测结果显示两组患者甲状腺激素水平差异无统计学意义,影像学评估结果显示两组患者的病因差异无统计学意义(均P>0.05);Fazekas量表评分结果提示,淡漠组患者的脑白质损伤程度明显高于非淡漠组(P=0.004)。认知功能检测结果提示,淡漠组患者认知障碍(MoCA总分学意义(均P>0.05)。此外,淡漠组PSQI、HAMA、HAMD得分高于非淡漠组,且睡眠障碍、焦虑和抑郁的发生率高于非淡漠组(均P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,HAMD得分、年龄和TMT-A用时为NICE后早期淡漠的危险因素(均P<0.05)。结论早期淡漠的NICE患者认知障碍发生率更高,且更易出现睡眠障碍、焦虑状态和抑郁状态。HAMD得分、年龄和TMT-A用时为NICE后早期淡漠的危险因素。

关键词：非致残性缺血性脑血管事件淡漠认知障碍睡眠障碍抑郁焦虑

高糖条件下氧化应激-AMPK-Cx43-NLRP3途径调节大鼠胃平滑肌细胞外基质重构的机制研究

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中国病理生理杂志 2024年第1期40卷 68-73页

作者：张高源宋佰慧包伊特格乐张默函延边大学医学院组织胚胎学教研室吉林延吉133000 长春医学高等专科学校吉林长春130031

目的:探讨高糖条件下通过氧化应激-AMP活化蛋白激酶(AMPK)-缝隙连接蛋白43(Cx43)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路对胃平滑肌细胞外基质重构的调节作用。方法:将体外培养的大鼠原代平滑肌细胞分为正常糖组、高糖组、高糖+... 详细信息

目的:探讨高糖条件下通过氧化应激-AMP活化蛋白激酶(AMPK)-缝隙连接蛋白43(Cx43)-核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路对胃平滑肌细胞外基质重构的调节作用。方法:将体外培养的大鼠原代平滑肌细胞分为正常糖组、高糖组、高糖+NLRP3抑制剂MCC950(15 nmol/L)组、高糖+Cx43半通道阻滞剂GAP19(100μmol/L)组、高糖+AMPK抑制剂Compound C(CC;10μmol/L)组和高糖+抗氧化剂α-硫辛酸(α-LA;100μmol/L)组,均培养48 h后检测。Western blot检测细胞中caspase-1、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、NLRP3、Cx43、转化生长因子β1(TGF-β1)、TGF-β3、金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)、嘌呤能P2X7受体(P2X7R)和磷酸化AMPK(pAMPK)蛋白水平;ELISA检测细胞培养液中腺苷三磷酸、白细胞介素1β、I型胶原(Col I)和ColⅢ含量。结果:与高糖组相比,高糖+MCC950组MMP-2和TGF-β3表达水平显著降低(P<0.01),TGF-β1和TIMP-1表达水平显著升高(P<0.01);高糖+GAP19组NLRP3和caspase-1表达水平显著降低(P<0.01),而P2X7R表达无显著差异;高糖+CC组NLRP3、caspase-1、P2X7R、总Cx43和胞膜Cx43蛋白水平,以及胞膜Cx43/胞浆Cx43比值均显著降低(P<0.01);高糖+α-LA组p-AMPK、caspase-1、NLRP3、P2X7R、总Cx43和胞膜Cx43蛋白水平,以及胞膜Cx43/胞浆Cx43比值均显著下降(P<0.05)。结论:高糖通过氧化应激-AMPK-Cx43-NLRP3通路调节Col I和ColⅢ含量,进而参与了胃平滑肌细胞外基质的重构。

关键词：糖尿病胃轻瘫胃平滑肌细胞外基质氧化应激-AMPK-Cx43-NLRP3信号通路

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胰岛β细胞去分化与2型糖尿病

中国病理生理杂志 2024年第3期40卷 535-542页

作者：张茂森张海章卫平海军军医大学病理生理学教研室上海200433

最新的流行病学数据显示,截止2018年,我国糖尿病患病率已上升至12.4%,在非传染性疾病中仅次于心血管疾病和肿瘤,是严重威胁我国人民健康的常见病、多发病[1],其中绝大多数为2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)。胰岛β细胞数量减少与胰岛... 详细信息

最新的流行病学数据显示,截止2018年,我国糖尿病患病率已上升至12.4%,在非传染性疾病中仅次于心血管疾病和肿瘤,是严重威胁我国人民健康的常见病、多发病[1],其中绝大多数为2型糖尿病(type 2 diabetes,T2D)。胰岛β细胞数量减少与胰岛素分泌功能障碍是T2D的病理生理学基础之一。以往认为,β细胞减少与细胞凋亡相关,近十年的研究发现β细胞去分化是T2D进程中β细胞衰竭的主要原因。本文就β细胞去分化的特征、原因和机制等最新研究进展做一综述,为更深入地了解T2D的发病机制和干预方法提供参考。

关键词： 2型糖尿病胰岛β细胞去分化胰岛素

海军某部官兵兴奋易感性与心理健康状态的关系:心理弹性和应对倾向的链式中介作用

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海军军医大学学报 2024年第2期45卷 227-232页

作者：张建国毛晓飞陈艾彬蔡文鹏邓文曦李自强董薇海军军医大学(第二军医大学)心理系海军航空及特种心理学教研室上海200433

目的探索海军某部官兵心理健康状态与兴奋易感性、心理弹性和应对倾向的关系,阐明兴奋易感性影响心理健康的可能机制。方法采用心理健康自评问卷(SRQ-20)、心理弹性量表、简化版高敏感者量表10和简易应对方式问卷对1870名海军某部官兵... 详细信息

目的探索海军某部官兵心理健康状态与兴奋易感性、心理弹性和应对倾向的关系,阐明兴奋易感性影响心理健康的可能机制。方法采用心理健康自评问卷(SRQ-20)、心理弹性量表、简化版高敏感者量表10和简易应对方式问卷对1870名海军某部官兵进行调查。采用Spearman相关法验证变量间的相关性,采用多元逐步回归分析评估兴奋易感性、心理弹性和应对倾向对心理健康状态的预测效果,通过构建结构方程模型探索心理弹性、应对倾向在兴奋易感性和心理健康状态之间的中介作用。结果官兵的SRQ-20得分为1(0,5)分,阳性检出率为21.2%(395/1865)。相关分析显示官兵心理健康状态与兴奋易感性呈正相关(P<0.01),与审美敏感性、心理弹性及应对倾向呈负相关(均P<0.01)。多元回归分析显示,兴奋易感性、心理弹性和应对倾向对心理健康状态有预测作用,心理弹性和应对倾向在兴奋易感性和心理健康状态之间起部分链式中介作用。结论海军某部官兵的兴奋易感性可以直接预测其心理健康状态,还可以通过心理弹性、应对倾向的独立及链式中介作用间接预测心理健康状态。

关键词：心理健康心理弹性感觉加工敏感性应对方式链式中介效应