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hBMP-7基因转染修复骨缺损的实验研究

中华骨科杂志 2003年第12期23卷 747-751页

作者：金丹裴国献王珂魏宽海陈滨覃昱任高宏第一军医大学南方医院全军创伤骨科中心广州510515

目的探讨利用人骨形态发生蛋白7(hBMP-7)基因转染骨髓基质干细胞(BMSc)构建组织工程化骨组织并修复兔桡骨骨缺损的可行性。方法制备含hBMP-7真核细胞表达载体的逆转录病毒液PT-PLNCX2-hBMP-7并转染BMSc,使用免疫组织化学的方法检测hBMP-... 详细信息

目的探讨利用人骨形态发生蛋白7(hBMP-7)基因转染骨髓基质干细胞(BMSc)构建组织工程化骨组织并修复兔桡骨骨缺损的可行性。方法制备含hBMP-7真核细胞表达载体的逆转录病毒液PT-PLNCX2-hBMP-7并转染BMSc,使用免疫组织化学的方法检测hBMP-7在BMSc中的表达。兔桡骨1.5cm骨缺损修复实验分为4组:转染组,未转染组,单纯PLLA组和对照组,每组6个样本。分别于术后3周,6周采用大体观察、X线、组织学检测、免疫组织化学检测等方法对骨缺损修复情况进行对比。结果免疫组织化学检测显示经PT-PLNCX2-hBMP-7病毒液转染的BMSc中有较强的阳性结果出现。定量检测分析结果证实经转染的BMSc修复骨缺损的成骨速度和成骨量均优于未转染组,单纯PLLA组和对照组中均未见骨缺损得到修复。结论hBMP-7基因转染能够提高BMSc形成组织工程化骨组织和修复骨缺损的能力,可用于以BMSc为种子细胞的组织工程化骨组织的构建。

关键词： hBMP-7 基因转染修复骨缺损实验研究免疫组织化学

肌瓣作为BMP载体构建血管化骨组织修复骨缺损的形态学研究

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解放军医学杂志 2002年第6期27卷 480-481,T001页

作者：魏宽海裴国献王珂田雪梅金丹陈滨郑晓勇马忠立第一军医大学南方医院全军创伤骨科中心广州510515

为探讨肌瓣作为骨形态发生蛋白 (BMP)载体构建血管化骨组织修复骨缺损的可行性及其生物学特征 ,制作兔桡骨下段15mm骨缺损 ,将去神经化的指深屈肌肌瓣转位至缺损区 ,作为BMP载体来修复骨缺损 ,通过大体、X线、组织学、原位末端标记 (TUN... 详细信息

为探讨肌瓣作为骨形态发生蛋白 (BMP)载体构建血管化骨组织修复骨缺损的可行性及其生物学特征 ,制作兔桡骨下段15mm骨缺损 ,将去神经化的指深屈肌肌瓣转位至缺损区 ,作为BMP载体来修复骨缺损 ,通过大体、X线、组织学、原位末端标记 (TUNEL)等方法观察骨缺损的修复过程及生物学变化。结果发现 ,骨骼肌逐渐发生萎缩 ,2周时肌瓣内可触及串珠状团块 ,有大量软骨细胞生成 ,沿肌间隙分布 ;6周时骨桥与宿主骨紧密结合 ,软骨溶解区有大量编织骨形成 ,出现骨髓腔并与宿主骨髓腔再通 ,肌纤维被增殖的间充质细胞、软骨细胞及结缔组织所分割 ;8周时肌纤维几乎完全消失 ,新生骨组织呈条索状桥接两断端 ;组织学显示骨骼肌萎缩的同时 ,部分细胞核出现崩解 ,并有凋亡小体出现 ;TUNEL染色呈阳性。

关键词：肌瓣 BMP载体构建形态学骨形态学发生蛋白质类新生血管化骨缺损

构建内固定术后早期感染细菌生物膜形成灌注冲洗的动物模型

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中国组织工程研究 2024年第23期28卷 3704-3708页

作者：黄家成邵欣欣李浩淼杜少华戴双武南方医科大学第三附属医院骨科医学中心骨肿瘤科广东省广州市510630 中山大学附属第一医院麻醉科广东省广州市510080

背景:骨科内固定术后感染细菌生物膜形成的治疗是临床非常棘手的问题,建立内固定术后早期感染细菌生物膜形成的灌注冲洗动物模型对探索该病的治疗方法具有重要意义。目的:建立可用不同药物灌注冲洗治疗内固定术后早期感染细菌膜形成的... 详细信息

背景:骨科内固定术后感染细菌生物膜形成的治疗是临床非常棘手的问题,建立内固定术后早期感染细菌生物膜形成的灌注冲洗动物模型对探索该病的治疗方法具有重要意义。目的:建立可用不同药物灌注冲洗治疗内固定术后早期感染细菌膜形成的动物模型。方法:选取6只新西兰大白兔,暴露双侧股骨表面并钻孔,将定植铜绿假单胞菌的接骨板(实验组)和空白接骨板(空白对照组)各植入一侧钻孔周围,留置2条引流管并固定分别作为“入口”和“出口”,模拟灌注后保留浸泡一定时间后再进行冲洗。术后5 d,观察兔体温、伤口情况、引流液细菌培养及接骨板结晶紫染色、扫描电镜检查结果。结果与结论:①6只兔术后患肢活动不便,术后第2-4天出现体温升高,实验组部分伤口处可触及局部肿胀,空白对照组伤口愈合良好;②引流液细菌培养结果显示,实验组铜绿假单胞菌向周边扩散或蔓延;术后5 d,实验组接骨板结晶紫染色后呈紫色,酶标仪检测570 nm处吸光度值为2.621±0.088,提示存在细菌;③术后5 d的扫描电镜显示,实验组接骨板表面可见大量细菌微菌落,形成类似“磨菇样”“塔状”的高度组织不均匀性三维立体结构,高倍镜下可见“磨菇样”结构之间有丝状连接的水通道,是典型的生物膜结构且致密度极高,空白对照组未见明显菌落形成;④结果显示该动物模型模拟了内固定术后早期感染生物膜形成后的状态,提供了一种可用不同药物进行灌注冲洗的方法。

关键词：细菌生物膜内固定术接骨板动物模型感染灌注冲洗

感觉和运动神经来源的雪旺细胞p75受体表达的研究

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中华实验外科杂志 2000年第2期17卷 118-119页

作者：秦煜顾立强董文其第一军医大学南方医院创伤骨科广州510515 第一军医大学热研所

目的　研究感觉神经和运动神经来源的雪旺细胞 (Sc)表达低亲和力受体 (p75 )的情况。方法　结合酶消化、阿糖胞苷处理和S 10 0免疫荧光鉴定 ,从 5d龄SD乳鼠背根神经和股神经得到感觉和运动神经来源的Sc。 2种细胞分别进行普通培养基和... 详细信息

目的　研究感觉神经和运动神经来源的雪旺细胞 (Sc)表达低亲和力受体 (p75 )的情况。方法　结合酶消化、阿糖胞苷处理和S 10 0免疫荧光鉴定 ,从 5d龄SD乳鼠背根神经和股神经得到感觉和运动神经来源的Sc。 2种细胞分别进行普通培养基和添加高浓度白细胞介素 (IL) 1培养基的培养 ,检测不同时间Sc表面神经生长因子 p75的表达情况。结果　感觉和运动Sc普通培养基组 p75受体表达方式明显不同 ,前者在第 5d迅速达到峰值 (10 86 .39± 5 35 .16 ) ,而后者在同期呈低水平(410 .5 0± 32 6 .5 5 ,P 一致 ,均在第 5d达到峰值(891.5 0± 40 6 .10、92 2 .32± 5 2 0 .2 5 ,P >0 .0 5 )后均迅速下降。结论　 2种神经来源的Sc表达 p75受体存在差异 ,提示Sc在再生过程中存在感觉性和运动性的差异。

关键词：雪旺细胞运动感觉白细胞介素1 p75受体

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股骨远端粉碎性骨折双板固定的生物力学研究

第一军医大学学报 2002年第2期22卷 148-150页

作者：林昂如高道海胡罢生任高宏第一军医大学南方医院创伤骨科广东广州510515

目的探讨治疗股骨远端粉碎性骨折的新方法。方法应用10件成人鲜尸股骨,造成股骨远端髁间、髁上粉碎性骨折,内侧采用聚乙烯板、外侧采用钢板双向固定,分别作压缩、弯曲、扭转等生物力学实验研究。另取10件标本进行单向外侧钢板固定作为... 详细信息

目的探讨治疗股骨远端粉碎性骨折的新方法。方法应用10件成人鲜尸股骨,造成股骨远端髁间、髁上粉碎性骨折,内侧采用聚乙烯板、外侧采用钢板双向固定,分别作压缩、弯曲、扭转等生物力学实验研究。另取10件标本进行单向外侧钢板固定作为对照。结果双向固定组抗弯曲、扭转能力显著增强(P<0.01),抗压缩能力也较单侧固定组强(P<0.05)。结论双向固定治疗股骨远端粉碎性骨折有明显的应用价值。

关键词：股骨骨手工艺的粉碎性骨折骨折固定术生物力学

腺苷、二氮嗪及缺血预处理对缺血再灌注损伤肢体的作用

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第一军医大学学报 2002年第7期22卷 617-619页

作者：汪群力王钢王华民裴国献第一军医大学南方医院创伤骨科广东广州510515

目的　探讨缺血预处理和腺苷（Ade）、二氮嗪（Dia）药物预处理对肢体缺血再灌注损伤的保护作用。方法　将66只SD大鼠随机分为6组:（1）正常对照组;（2）缺血再灌注（IR）组;（3）预处理10 min组（IP 10）:缺血10min后复流10min,重复3次... 详细信息

目的　探讨缺血预处理和腺苷（Ade）、二氮嗪（Dia）药物预处理对肢体缺血再灌注损伤的保护作用。方法　将66只SD大鼠随机分为6组:（1）正常对照组;（2）缺血再灌注（IR）组;（3）预处理10 min组（IP 10）:缺血10min后复流10min,重复3次;（4）预处理5min组（IP5）:缺血5min、复流5min,重复3次;（5）Ade预处理组;（6）Dia预处理组。对照组不作缺血处理,其余各组双后肢持续缺血4h,分别于再灌注2、24h检测胫前肌的单收缩、强直收缩力及血清肌酸磷酸激酶（CPK）含量。结果　（1）5及Ade组在再灌注2h及24h较IR组的胫前肌单收缩力显著增加,而与对照组接近。（2）IP10组在再灌注2h时的保护作用不明显,在24h时有一定的保护作用,但弱于Ade及IP5组。（3）Dia组腔前肌的单收缩及强直收缩力在再灌注2h时较IR组降低,而在24h单收缩力显著升高,各预处理组对胫前肌的强直收缩力没有明显的保护作用。IP5、IP10及Ade组在再灌注2和24h时,而Dia组只在再灌注24h时血清CPK显著低于IR组。结论　缺血预处理和腺苷对肢体的缺血再灌注损伤有保护作用;Dia有延迟保护作用;IP5的作用优于IP10组;腺苷预处理可以取得与缺血预处理相当的效果。

关键词：腺苷三氮嗪缺血预处理再灌注损伤实验药理学

热应激预处理对大鼠肢体缺血再灌注后血清丙二醛、超氧化物歧化酶的影响

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第一军医大学学报 2002年第6期22卷 506-508页

作者：孙永建王前裴国献郑磊谭雄进第一军医大学南方医院创伤骨科广东广州510515

目的探讨热应激预处理对大鼠肢体缺血再灌注损伤的影响。方法制备大鼠缺血再灌注模型及热应激预处理模型。采用硫代巴比妥酸法测定大鼠丙二醛(MDA)浓度,采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力并与对照组比较。结果大鼠肢体缺... 详细信息

目的探讨热应激预处理对大鼠肢体缺血再灌注损伤的影响。方法制备大鼠缺血再灌注模型及热应激预处理模型。采用硫代巴比妥酸法测定大鼠丙二醛(MDA)浓度,采用黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力并与对照组比较。结果大鼠肢体缺血再灌注后血清中的MDA含量明显增高(P<0.01),并有随再灌时间延长不断升高的趋势,而SOD活性明显降低(P<0.01);热应激预处理后,血清中MDA含量明显降低(P<0.01),SOD活性明显增高(P<0.01)。结论热应激预处理可增强SOD清除细胞内氧自由基的水平。

关键词：热应激预处理大鼠肢体缺血再灌注血清丙二醛超氧化物歧化酶影响

骨髓基质细胞与钙磷陶瓷复合构建组织工程化骨组织

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中华创伤杂志 2001年第3期17卷 151-154页

作者：金丹裴国献王前第一军医大学附属南方医院创伤骨科广州510515

目的　利用组织工程学原理和方法新生骨组织 ,为骨组织工程选择适宜的细胞来源与细胞载体。　方法　将兔骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcell,BMSc)进行体外培养 ,通过形态学观察和组织化学检测 ,分为生物活性玻璃陶瓷 (bioactiveglass... 详细信息

目的　利用组织工程学原理和方法新生骨组织 ,为骨组织工程选择适宜的细胞来源与细胞载体。　方法　将兔骨髓基质细胞 (bonemarrowstromalcell,BMSc)进行体外培养 ,通过形态学观察和组织化学检测 ,分为生物活性玻璃陶瓷 (bioactiveglassceramic ,BGC)复合细胞组和单纯细胞组 ,进行细胞增殖、碱性磷酸酶检测。将两者复合后植入兔自体肌袋内 ,分单纯材料接种组和复合材料接种组 ,于不同时间取材 ,HE染色 ,观察其成骨过程。　结果　骨髓基质细胞在体外培养时表现出与成骨细胞相似的形态学与功能表现 ,BGC利于细胞的生长繁殖 ,对细胞的功能表现无明显影响。BMSc与BGC复合植入体内可产生成熟骨组织。　结论　利用BGC与BMSc复合可产生组织工程化新生骨组织。

关键词：骨髓细胞细胞培养组织工程钙磷陶瓷复合

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1.5岁幼儿3指离断再植1例报告

第一军医大学学报 2001年第2期21卷 140-140页

作者：朱立军相大勇裴国献第一军医大学南方医院创伤骨科广东广州510515

儿童手受伤机会较成人少,加之血管纤细、菲薄、吻合难度大,因此有关儿童断指再植的文献报道很少[1～7],幼儿多指离断再植更为罕见.我科收治了1例3指离断的1.5岁幼儿,行断指再植成功,现报告如下.

关键词：断指再植儿童术式疗效