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星形胶质细胞条件培养液对tbOOH致PC12细胞凋亡的抑制作用

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第一军医大学学报 2004年第9期24卷 998-1000页

作者：莫永炎邢飞跃张宝陈瑗姜勇第一军医大学病理生理学教研室暨全军休克微循环重点实验室广东广州510515 暨南大学生殖免疫研究中心广东广州510632 第一军医大学自由基研究室广东广州510515

目的探讨星形胶质细胞条件培养液对活性氧叔丁基脂氢过氧化物tbOOH诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法以分离、纯化的SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞制备的条件培养液培养tbOOH应激的PC12细胞,采用荧光显微镜和透射电镜形态观察细胞凋亡;用流... 详细信息

目的探讨星形胶质细胞条件培养液对活性氧叔丁基脂氢过氧化物tbOOH诱导的PC12细胞凋亡的影响。方法以分离、纯化的SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞制备的条件培养液培养tbOOH应激的PC12细胞,采用荧光显微镜和透射电镜形态观察细胞凋亡;用流式细胞术测定细胞凋亡率的变化;用巴比妥酸法评估细胞内丙二醛含量的变化。结果tbOOH可诱导PC12细胞凋亡,而星形胶质细胞条件培养液可降低其凋亡;同时,巴比妥酸法显示星形胶质细胞条件培养液可显著性降低PC12细胞丙二醛含量(P<0.05)。结论星形胶质细胞条件培养液有提高PC12细胞抗氧化能力,可抑制活性氧tbOOH诱导的神经细胞凋亡。

关键词：星形胶质细胞条件培养液/抗氧化作用叔丁基脂氢过氧化物 PCI2细胞/凋亡活性氧种

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体外反搏对休克犬血中SOD和MDA的影响

中华创伤杂志 1994年第1期10卷 7-9页

作者：吴坤莹赵克森姜勇黄绪亮刘武汉唐妙云第一军医大学病理生理学教研室510515

作者复制犬失血性休克模型。用改良的硫代巴比妥酸法测定血浆丙二醛（ＭＤＡ）含量，用光化学扩增法测定全血超氧歧化酶（ＳＯＤ）活性。观察ＷＦＢ—Ⅴ型电脑控制的增强型体外反搏机治疗失血性休克后对上述指标的影响。结果表明，犬失... 详细信息

作者复制犬失血性休克模型。用改良的硫代巴比妥酸法测定血浆丙二醛（ＭＤＡ）含量，用光化学扩增法测定全血超氧歧化酶（ＳＯＤ）活性。观察ＷＦＢ—Ⅴ型电脑控制的增强型体外反搏机治疗失血性休克后对上述指标的影响。结果表明，犬失血性休克后血浆ＭＤＡ明显升高，全血ＳＯＤ活性显著下降。体外反搏治疗可使升高的ＭＤＡ含量降至正常水平，ＳＯＤ活性明显恢复，从而证明体外反搏治疗失血性休克时，并没有因微循环灌流的改善而带来再灌流损伤，反而能使休克时氧自由基产生减少，为临床应用体外反搏治疗休克提供了理论基础。

关键词：休克缺血超氧物歧化酶体外反搏

山羊烧伤后高代谢状态及与肿瘤坏死因子的关系

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中国危重病急救医学 1994年第4期6卷 193-195页

作者：金丽娟谢忠琳程亚明金春华王静珍第一军医大学病理生理教研室

研究烧伤后高代谢状态及其与肿瘤坏死因子（ＴＮＰ）的关系。在短时间将山羊全身麻醉后用９５℃水烫两侧臀部和大腿３０ｓ造成面积为２０％～２５％的３度烧伤，６ｈ后按Ｐａｒｋｌａｎｄ公式输入生理盐水，伤后每日测定有关指标直至死... 详细信息

研究烧伤后高代谢状态及其与肿瘤坏死因子（ＴＮＰ）的关系。在短时间将山羊全身麻醉后用９５℃水烫两侧臀部和大腿３０ｓ造成面积为２０％～２５％的３度烧伤，６ｈ后按Ｐａｒｋｌａｎｄ公式输入生理盐水，伤后每日测定有关指标直至死亡。结果：氧耗量从烧伤后２４ｈ起逐日升高，第３天达高峰，为基础值的１５０％，死前下降；心率、体温、血白细胞计数及心指数从第１天起均升高，第３天达峰值，ｐ值均＜０．０１，此后下降，但仍高于基础值；外周血管阻力从烧伤后２４ｈ起下降，第３天最低，Ｐ＜０．０１；烧伤后２４ｈ起血浆ＴＮＦ升高，第３天达高峰，Ｐ＜０．０１，此后虽有下降仍显著高于基础值；烧伤后１～４天氧耗量和血浆ＴＮＦ均呈显著正相关；烧伤后第１天起血浆皮质醇和生长激素未见升高。研究表明：山羊２０％～２５％３度烧伤延迟复苏后约２／３出现高代谢状态和高动力循环。ＴＮＦ释放可能是本研究中出现高代谢的重要因素。

关键词：烧伤高代谢肿瘤坏死因子

晚期糖基化终产物受体在脂多糖介导小鼠肺微血管内皮细胞骨架变化中的作用

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南方医科大学学报 2015年第1期35卷 6-11页

作者：周晓燕张伟金黄巧冰郭晓华南方医科大学病理生理学教研室//广东省医学休克微循环重点实验室广东广州510515

目的建立一种可以得到高纯度肺微血管内皮细胞的分离方法,并分别观察野生型小鼠及晚期糖基化终产物受体（RAGE）敲除小鼠细胞在脂多糖（LPS）刺激下细胞骨架F-actin变化情况。方法取6~8周龄野生型C57小鼠及RAGE基因敲除小鼠的肺,经I型... 详细信息

目的建立一种可以得到高纯度肺微血管内皮细胞的分离方法,并分别观察野生型小鼠及晚期糖基化终产物受体（RAGE）敲除小鼠细胞在脂多糖（LPS）刺激下细胞骨架F-actin变化情况。方法取6~8周龄野生型C57小鼠及RAGE基因敲除小鼠的肺,经I型胶原酶消化后,尼龙细胞筛过滤,然后采用免疫磁珠法分离原代小鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）,经形态学及免疫荧光法鉴定后,以LPS（1 mg/L）刺激不同时间后用激光共聚焦显微镜观察细胞骨架F-actin的变化情况。结果镜下可见原代培养的PMVECs呈梭形或多角形,经细胞抗Ⅷ因子相关抗原（ⅧF-Ag）染色鉴定纯度高,LPS刺激后野生型小鼠PMVEC骨架重排,形成应力纤维,而RAGE敲除小鼠PMVEC骨架破坏不明显。结论采用免疫磁珠法可以获得高纯度的小鼠肺微血管内皮细胞,且RAGE参与了LPS介导的小鼠肺微血管内皮细胞骨架破坏。

关键词：小鼠肺微血管内皮细胞脂多糖晚期糖基化终产物受体细胞骨架

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次声暴露对大鼠血视网膜屏障超微结构的损害

中华眼科杂志 2002年第8期38卷 499-501,W005页

作者：邱萍藻张作明姜勇藻郭群王冰苟琳陈景第一军医大学病理生理教研室第四军医大学空军医学系航空临床教研室西京医院理疗科

目的　观察次声暴露对大鼠血视网膜屏障超微结构和通透性的作用。方法　将 15只Sprague Dawley(SD)大鼠分为 :实验组 12只 ,给予 8Hz,130dB基础噪音的次声暴露 ,2h/d ,分别于暴露后 1、7、14及 2 1d ,用 2 0g/L戊巴比妥纳腹腔麻醉动物 ,... 详细信息

目的　观察次声暴露对大鼠血视网膜屏障超微结构和通透性的作用。方法　将 15只Sprague Dawley(SD)大鼠分为 :实验组 12只 ,给予 8Hz,130dB基础噪音的次声暴露 ,2h/d ,分别于暴露后 1、7、14及 2 1d ,用 2 0g/L戊巴比妥纳腹腔麻醉动物 ,10min后取其眼球 ,均以硝酸镧 (La)作为示踪剂 ,采用镧醛灌注固定法制备电镜样品。对照组 3只 ,亦置于次声舱中 2h/d ,但不接受次声暴露。结果　在次声作用下 ,暴露 1d时La的渗漏无明显变化 ,7d时沉积在内节间 ,到达光感受器细胞核层 ,14d时在神经细胞间隙出现La颗粒 ,2 1d时到达神经细胞及玻璃体 ,而形态学改变并不明显 ,主要是代谢方面的变化 ,如线粒体肿胀 ,内质网扩张 ,糖原颗粒的沉积 ,核周间隙增宽等。提示随时间的延长 ,血视网膜屏障的损害加重。结论　次声可影响一定程度的血视网膜屏障通透性。

关键词：次声暴露大鼠血视网膜屏障超微结构视功能损害

人细胞表面黏附分子P选择素启动子报告基因的构建及鉴定

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南方医科大学学报 2016年第3期36卷 332-338页

作者：徐若霆周辉刘玮璐吴炜刘鲜艳张文强谭洁赵明南方医科大学病理生理学教研室//广东省医学休克微循环重点实验室广东广州510515

目的构建人细胞表面黏附分子P选择素(p-selectin)基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-pselectin-promoter,检测其转录活性,并应用于筛选药物对其转录活性的影响。方法根据UCSC软件查找的人基因组DNA的p-selectin启动子序列并设计两端引... 详细信息

目的构建人细胞表面黏附分子P选择素(p-selectin)基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-pselectin-promoter,检测其转录活性,并应用于筛选药物对其转录活性的影响。方法根据UCSC软件查找的人基因组DNA的p-selectin启动子序列并设计两端引物,扩增人基因组DNA中的p-selectin启动子。用限制性内切酶KpnⅠ和XhoⅠ双酶切质粒pGL3-Basic和p-selectin启动子后,将p-selectin基因启动子插入到pGL3-basic报告基因载体上。重组质粒命名为pGL3-pselectin-promoter。将其与内参质粒p RL-SV40瞬时共转染293F细胞,检测双荧光素酶活性。对不同启动子片段长度的p-selectin报告基因进行双荧光素酶的检测。以炎症因子和药物分组刺激转染了报告基因质粒的293F细胞并检测双荧光素酶活性。结果成功构建p-selectin基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL3-pselectin-promoter,质粒酶切及测序结果完全正确。瞬时共转染pGL3-pselectin-promoter/p RL-SV40组荧光素酶活性为0.8573±0.4703,高于转染pGL3-Basic/p RL-SV40组的荧光素酶活性值0.03955±0.05894。pGL3-1826 bp相比较于pGL3-1092 bp组和pGL3-3738 bp组具有最强的转录活性。炎症因子LPS和TNF-α和药物As2O3均具有上调pGL3-pselectin-promoter转录活性的作用。结论 pGL3-pselectin-promoter在293F细胞中能被转录激活,并验证了炎症因子对其转录表达的作用,并为药物筛选与评价提供解决方案。

关键词：细胞黏附分子类 P选择素炎症反应荧光素酶

创伤失血性休克早期大鼠胸腺和脾脏中的细胞凋亡

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中华创伤杂志 1998年第S1期14卷 77-78页

作者：官健金大地金丽娟第一军医大学附属南方医院骨科第一军医大学病理生理学教研室

严重创伤导致免疫抑制的现象早已为人们所认识，免疫系统在创伤后多器官衰竭中的重要作用正逐渐受到重视。胸腺和脾脏是产生淋巴细胞和免疫应答的重要器官，细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）在淋巴细胞的选择、分化和成熟中起着至关重要... 详细信息

严重创伤导致免疫抑制的现象早已为人们所认识，免疫系统在创伤后多器官衰竭中的重要作用正逐渐受到重视。胸腺和脾脏是产生淋巴细胞和免疫应答的重要器官，细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）在淋巴细胞的选择、分化和成熟中起着至关重要的作用。笔者重点研究了细胞凋亡这一...

关键词：细胞凋亡创伤失血性休克胸腺细胞脾脏大鼠凋亡细胞多器官衰竭病理生理学免疫抑制复苏后

内皮细胞屏障与烧伤后血管通透性的关系及机制

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中华烧伤杂志 2007年第5期23卷 324-326页

作者：黄巧冰南方医科大学病理生理学教研室(广东省医学休克微循环重点实验室) 广州510515

正常血管通透性的维持有赖于血管内皮细胞屏障的完整性，内皮细胞与内皮细胞间、细胞与基底膜间的连接以及胞内骨架蛋白收缩这3种力量，经蛋白质相互作用，在功能和调节上互相关联。烧伤休克的主要临床特点是低血容量性休克，其主要原... 详细信息

正常血管通透性的维持有赖于血管内皮细胞屏障的完整性，内皮细胞与内皮细胞间、细胞与基底膜间的连接以及胞内骨架蛋白收缩这3种力量，经蛋白质相互作用，在功能和调节上互相关联。烧伤休克的主要临床特点是低血容量性休克，其主要原因之一是毛细血管扩张，血管通透性增加，毛细血管静水压增加，促进了血浆样液体的渗出，导致血容量锐减。关于内皮细胞屏障功能在烧伤后血管通透性变化中的作用，我们近年来做了一些研究工作。

关键词：烧伤内皮细胞通透性细胞骨架紧密连接部肌动蛋白类

中国人雄激素受体N端转录激活区的测序及突变检测

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第5期32卷 459-462页

作者：于小玲王晓慧陈光椿赵子文卢建第二军医大学病理生理教研室!上海200433 山东滨州医学院病理生理教研室!滨州256603

雄激素受体 (androgenreceptor,AR)N端转录激活功能区 (AF1)是AR发挥转录激活功能所必需的。用 4对引物 (A3 ～A6)PCR扩增 2 0例中国正常男性AR的AF1,双链DNA循环测序以确定正常中国人AR的AF1的核苷酸顺序。在此基础上 ,用PCR SSCP分析... 详细信息

雄激素受体 (androgenreceptor,AR)N端转录激活功能区 (AF1)是AR发挥转录激活功能所必需的。用 4对引物 (A3 ～A6)PCR扩增 2 0例中国正常男性AR的AF1,双链DNA循环测序以确定正常中国人AR的AF1的核苷酸顺序。在此基础上 ,用PCR SSCP分析和双链DNA循环测序法对 2例雄激素抵抗征 (AIS)患者外周血白细胞和 15例前列腺癌 (PC)患者癌组织中AR的AF1区进行突变检测。发现正常中国人AR的AF1序列与欧美报道的完全一致 ;在一低分化PC患者石蜡切片组织中 (PC2 8)发现有一AF1的错义突变 (C96 6A ,Ser2 96Arg)。这表明正常中国人AR的AF1序列与欧美人无差别 ;PC组织中存在ARN端转录激活区的突变。

关键词：雄激素受体 N端区基因突变