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免疫原性细胞死亡基因风险模型的建立及其对肝细胞癌预后和肿瘤微环境特征的预测价值

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临床肝胆病杂志 2025年第12期40卷 2473-2483页

作者：刘军汪玲姜钰环王靖芝李慧明南昌大学第一附属医院检验科南昌 330006 南昌大学第一临床医学院南昌 330038

目的鉴定肝细胞癌（HCC）免疫原性细胞死亡（ICD）相关基因，并基于相关基因构建评分模型预测HCC的预后和肿瘤微环境特征。方法通过癌症基因组图谱数据库获取HCC数据集，采用热图展示了HCC中57个ICD相关基因的表达。基于ICD相关基因表... 详细信息

目的鉴定肝细胞癌（HCC）免疫原性细胞死亡（ICD）相关基因，并基于相关基因构建评分模型预测HCC的预后和肿瘤微环境特征。方法通过癌症基因组图谱数据库获取HCC数据集，采用热图展示了HCC中57个ICD相关基因的表达。基于ICD相关基因表达进行聚类分析，对2种ICD相关亚型（ICD低表达组和ICD高表达组）进行基因本体富集、京都基因和基因组百科全书富集、体细胞突变差异、免疫细胞浸润差异分析。构建LASSO Cox回归风险预后模型，验证其临床应用价值。构建列线图模型，预测患者1、3和5年的生存率。此外，采用qRT-PCR验证模型中关键基因的表达水平。两组间比较采用成组t检验，采用单因素和多因素Cox回归分析确定临床病理特征中的预后因素。采用Kaplan-Meier生存曲线进行预后分析。采用Spearman秩相关进行相关性分析。结果ICD低表达组预后较差，ICD高表达组与良好的临床结果相关（P=0.004）。进一步研究表明ICD高表达组与免疫活性微环境相关，且ICD高表达组的基因主要富集于免疫相关通路（免疫球蛋白受体结合、造血细胞谱系和B淋巴细胞受体信号通路）。体细胞突变结果显示，ICD高表达组的CD274、CTLA4、HAVCR2、TIGIT、PDCD1和PDCD1LG2的基因表达水平较高（P值均临床特征中均有较好的预测价值。单因素和多因素Cox回归分析表明，在训练集中，年龄和风险评分是总生存期的独立预后因素（P值均<0.05）。qRT-PCR结果表明，HSPA4和REM1在HCC肿瘤样本中的相对表达水平显著高于瘤旁组织（P值均<0.001）。ICD风险评分升高的患者与γδT淋巴细胞（r=-0.29）、浆细胞（r=-0.3）和CD8+T淋巴细胞（r=-0.37）呈负相关（P值均<0.05），与记忆B淋巴细胞（r=0.38）、静止树突状细胞（r=0.47）和M0型巨噬细胞（r=0.49）呈正相关（P值均<0.05）。结论本研究确定了与HCC预后相关的ICD基因，为理解不同ICD表达谱相关的免疫特性提供了见解。构建的风险模型和列线图对于预测HCC患者的预后预测和免疫治疗指导具有重要的价值。

关键词：癌, 肝细胞免疫原性细胞死亡预后肿瘤微环境

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经典名方枳实芍药散的古代文献分析和考证

中国实验方剂学杂志 2025年第1期 234-243页

作者：李晨昱欧阳聪曾柔刘紫彦张烨林洁湖南中医药大学第一中医临床学院深圳市福田区妇幼保健院

枳实芍药散是2023年国家中医药管理局公布的《古代经典名方目录（第二批）》中的第34首，临床运用广泛、疗效确切，但目前暂缺乏对其古代文献考证类的研究，且未有相应的中成药制剂。通过查阅、梳理相关中医古籍，对枳实芍药散的源流、... 详细信息

枳实芍药散是2023年国家中医药管理局公布的《古代经典名方目录（第二批）》中的第34首，临床运用广泛、疗效确切，但目前暂缺乏对其古代文献考证类的研究，且未有相应的中成药制剂。通过查阅、梳理相关中医古籍，对枳实芍药散的源流、药物组成、度量衡、服法、功效主治等进行分析和考证，结果显示枳实芍药散出自东汉张仲景的《金匮要略》，在历代文献中主要以“枳实芍药散”之名记载在册，该方由枳实、白芍2味药物组成，炮制方法为枳实炒炭，白芍生用，古籍中多记载该方用量为“枳实、芍药各等分，服方寸匕，日三服”，折算成现代剂量为1.5 g/次（枳实0.75 g/次，白芍0.75 g/次），服用方法为将药物研磨成粉末状，用大麦粥送服，3次/d。功效为破气和血，除烦止痛，主治产后腹痛、急性盆腔炎、急性胆囊炎、肠道疾病、中风后遗症等病证，该研究通过对记载枳实芍药散的古籍文献进行梳理分析，明确该方关键信息，为推进其成药的研发提供了依据。

关键词：经典名方枳实芍药散《金匮要略》文献分析与考证药物基原

肝豆灵通过LncRNA H19调控PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路治疗Wilson病肝纤维化

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中国实验方剂学杂志 2025年第1期 131-138页

作者：殷馨汪瀚花代平孙兰婷徐芸芸杨文明安徽中医药大学第一临床医学院安徽中医药大学第一附属医院

目的：研究肝豆灵（GDL）治疗Wilson病肝纤维化可能的作用机制及途径。方法：60只雄性SD大鼠随机分为6组：正常组、模型组、GDL低、中、高剂量组（0.24、0.48、0.96 g·kg-1）及青霉胺组（90 mg·kg-1），每组10只。除正常组以外，其余... 详细信息

目的：研究肝豆灵（GDL）治疗Wilson病肝纤维化可能的作用机制及途径。方法：60只雄性SD大鼠随机分为6组：正常组、模型组、GDL低、中、高剂量组（0.24、0.48、0.96 g·kg-1）及青霉胺组（90 mg·kg-1），每组10只。除正常组以外，其余各组以300 mg·kg-1五水合硫酸铜灌胃造模，构建铜负荷Wilson病大鼠模型。采用苏木素-伊红（HE）和马松（Masson）染色观察肝脏病理形态改变；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测透明质酸（HA）、层黏连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原肽（PC-Ⅲ）、Ⅳ型胶原（C-Ⅳ）水平；透射电镜观察肝组织超微结构；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肝组织肝脏和血清外泌体长链非编码核糖核酸H19(LncRNA H19)、磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织中PI3K/Akt/mTOR通路蛋白及其磷酸化蛋白和自噬效应蛋白1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3B(LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ)蛋白表达水平；免疫荧光观察Beclin1、LC3-Ⅱ信号强度。结果：与正常组比较，模型组染色结果显示肝细胞出现炎性细胞浸润，细胞核边界不清伴有裂解、坏死，汇管区周围可见胶原纤维沉积；HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ含量升高（P<0.01）；电镜下观察到自噬小体的数量增多，出现大多数包浆被降解后呈现单层膜结构的自噬溶酶体；Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达升高（P<0.05,P<0.01）;Beclin1、LC3-II荧光信号明显增强；PI3K、Akt、mTOR、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达降低（P<0.01）;LncRNAH19mRNA表达水平升高（P<0.01）,PI3K、Akt、mTORmRNA表达水平降低（P<0.01）。经GDL治疗后，肝组织纤维化程度明显改善；HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ水平降低；自噬小体数量明显减少；Beclin1、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达水平降低（P<0.05,P<0.01）;Beclin1、LC3-Ⅱ荧光信号随药物剂量呈不同程度的减弱；PI3K、Akt、mTOR、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达升高（P<0.01）;LncRNA H19 mRNA表达水平降低（P<0.01）,PI3K、Akt、mTOR mRNA表达水平升高（P<0.05,P<0.01）。结论：GDL可能通过LncRNA H19调控PI3K/Akt/mTOR自噬信号通路减轻肝纤维化程度，减少肝损伤。

关键词： Wilson病肝豆灵长链非编码核糖核酸H19(LncRNA H19) 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路细胞自噬肝纤维化

五劳七损方调控Wnt/β-catenin信号通路对AS成纤维细胞增殖及成骨分化的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年第2期 67-73页

作者：杨娟娟陈平王海东王振东李浩林张智敏杨玉萍程伟刚苏瑾宋静静芦栋生甘肃中医药大学中医临床学院甘肃省中医院

目的：探讨五劳七损方对强直性脊柱炎（AS）病理性新骨形成的作用及可能机制。方法：将分离的AS患者髋关节滑膜成纤维细胞用显微镜观察细胞形态；并用免疫荧光染色法鉴定；将分离的AS成纤维细胞分为5组[空白组、低含药血清组（2.5%）、... 详细信息

目的：探讨五劳七损方对强直性脊柱炎（AS）病理性新骨形成的作用及可能机制。方法：将分离的AS患者髋关节滑膜成纤维细胞用显微镜观察细胞形态；并用免疫荧光染色法鉴定；将分离的AS成纤维细胞分为5组[空白组、低含药血清组（2.5%）、中含药血清组（5%）、高含药血清组（10%）和塞来昔布组（5%）]，药物干预后，通过细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测观察AS成纤维细胞增殖情况，筛选最佳干预时间；碱性磷酸酶法测定检测碱性磷酸酶（ALP）活性；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测骨钙素（OCN）、骨桥蛋白（OPN）和Runt相关转录因子2(Runx2)蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测Wnt5a、β-连环蛋白（β-catenin）和Dickkopf-1(DKK-1)mRNA表达。结果：与空白组比较，五劳七损方各含药血清组及塞来昔布组均可抑制AS成纤维细胞增殖并降低ALP的表达（P一步抑制下游靶基因的转录相关。

关键词：五劳七损方强直性脊柱炎 Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路成纤维细胞成骨分化

内皮活化和应激指数与原发性胃肠道淋巴瘤患者临床特征及预后的关系

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现代肿瘤医学 2025年第1期 68-72页

作者：刘仪凡赵娟王丽娜席亚明兰州大学第一临床医学院兰州大学第一医院血液科

目的:探索内皮活化和应激指数(endothelial activation and stress index, EASIX)与原发性胃肠道淋巴瘤(primary gastrointestinal lymphoma, PGIL)患者临床特征及预后的关系。方法:回顾性分析2000年01月01日至2022年12月30日兰州大学第一医院收治的74例初诊PGIL患者的临床资料，受试者工作特征(receiver operating characteristic, ROC)曲线确定EASIX的最佳截断值并分组；分类变量采用卡方检验或Fisher确切概率法比较，以频率和百分比表示，采用Kaplan-Meier生存曲线分析EASIX分组的PGIL患者的总生存期(OS),并用log-rank检验进行比较；采用Cox比例风险回归模型对OS进行单因素和多因素分析。结果:通过ROC曲线确定EASIX的最佳截断值为0.815。治疗前EASIX≤0.815的患者较多存在于Ann Arbor分期I-II期(P=0.005)、IPI评分为低危组及低中危组(P=0.006)的患者中，治疗前EASIX>0.815的患者较多存在于男性(P=0.047)、IPI评分为非低危组(P=0.006)的患者中。Kaplan-Meier生存曲线表明，高EASIX组比低EASIX组患者具有更差的OS。Cox多因素回归分析显示，具有A症状(HR=0.495,95%CI:0.260～0.941,P=0.032)、IPI评分高中危组、高危组(HR=3.384,95%CI:1.342～8.533,P=0.01)、EASIX>0.815(HR=2.607,95%CI:1.326～5.124,P=0.005)是影响PGIL患者OS的独立危险因素。结论:治疗前高EASIX是PGIL患者不良预后的危险因素，可用于临床上判断PGIL患者的预后。

关键词：内皮活化和应激指数原发性胃肠道淋巴瘤临床特征预后

基于线粒体凋亡途径探讨“秩边透水道”针法对弱精子症小鼠生殖功能的影响

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中国针灸 2025年第01期 71-81页

作者：郝健亨常博雅任佳高珍张艳林王海军冀来喜成都中医药大学针灸推拿学院山西中医药大学第二临床学院

目的：观察“秩边透水道”针法对弱精子症小鼠睾丸组织线粒体凋亡途径中关键调控因子的影响，探究其对生殖功能保护作用的可能机制。方法：将30只C57BL/6雄性小鼠随机分成空白组、模型组和针刺组，各10只。模型组和针刺组小鼠给予环磷... 详细信息

目的：观察“秩边透水道”针法对弱精子症小鼠睾丸组织线粒体凋亡途径中关键调控因子的影响，探究其对生殖功能保护作用的可能机制。方法：将30只C57BL/6雄性小鼠随机分成空白组、模型组和针刺组，各10只。模型组和针刺组小鼠给予环磷酰胺（30 mg·kg-1·d-1）腹腔注射7 d制备弱精子症模型。造模成功后针刺组小鼠予“秩边透水道”针法干预，每日1次，每次20 min，共干预2周。观察小鼠一般情况，并记录小鼠造模前、造模后和干预后体质量。干预后，记录小鼠睾丸质量并计算睾丸系数；检测小鼠精子质量；ELISA法检测血清睾酮（T）、卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）含量；HE染色法观察睾丸组织形态；透射电镜观察睾丸组织线粒体超微结构；JC-1染色检测睾丸组织线粒体膜电位水平；TUNEL染色法观察睾丸组织凋亡细胞情况；实时荧光定量PCR法和Western blot法分别检测睾丸组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2关联X的蛋白（Bax）、细胞色素c(Cyt C)、凋亡蛋白酶活化因子1(Apaf-1)、半胱氨酸蛋白酶（Caspase）9、Caspase-3 mRNA和蛋白表达；免疫组化法检测睾丸组织剪切的Caspase-3(Cleaved Caspase-3)阳性表达。结果：与空白组比较，模型组小鼠精神萎靡，毛发粗糙，饮食与活动量减少，体质量减轻（P一般情况好转；睾丸质量和睾丸系数升高（P功能。

关键词：弱精子症针刺秩边透水道线粒体凋亡

骨髓间充质干细胞来源的外泌体抑制地塞米松诱导的C2C12肌管萎缩

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中国药理学通报 2025年第1期41卷 50-56页

作者：柯义兵丁永宏阿布都克热木·达吾提郭浩然兰志杰王勇平兰州大学第一临床医学院甘肃兰州730000 宁夏医科大学宁夏银川750000 兰州大学第一医院骨科甘肃兰州730000

目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)来源的外泌体(exsomes,EXOs)对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的C2C12肌管萎缩的影响。方法(1)分离提取培养C57BL/6J小鼠BMSCs。(2)提取并鉴定BMSCs-EXOs。(3)C2C12细胞成肌分化。(4)将肌管细胞分为对照组(Control,2%马血清培养基培养48 h)、地塞米松组(DEX、浓度为10μmol·L^(-1)的DEX干预肌管48 h)、外泌体组(EXOs、外泌体干预肌管48 h)、外泌体抑制剂组(GW4869、10μmol的GW4869干预BMSCs后提取的外泌体干预肌管48 h)。48 h后测量各组肌管直径,CCK-8法检测各组细胞活力,Western blot检测各组肌肉萎缩及成肌分化相关蛋白的表达量。结果BMSCs呈长梭形,BMSCs-EXOs在透射电镜下为圆形的双层膜结构,直径约200 nm,且高表达CD9、CD63和CD81。相比于Control组,DEX组细胞活性降低(P<0.01),肌管细胞直径减少(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.01)的表达明显上调,MYOD(P<0.01)蛋白表达降低;相比于DEX组,BMSCs-EXOs组细胞活性升高(P<0.01),肌管细胞直径增加(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.01)的表达明显下调,MYOD(P<0.01)蛋白表达升高;相比于BMSCs-EXOs组,BMSCs-EXOs(GW4869)组细胞活性降低(P<0.05),肌管细胞直径减少(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.05)的表达上调,MYOD(P<0.01)蛋白表达降低。结论骨髓间充质干细胞来源的外泌体(BMSCs-EXOs)可抑制地塞米松诱导的C2C12肌管萎缩。

关键词：骨髓间充质干细胞外泌体地塞米松肌管肌肉萎缩 C2C12

单一切口椎间孔镜治疗双节段腰椎管狭窄合并腰椎间盘突出症的效果

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实用医学杂志 2025年第1期 41-47页

作者：王子桓张翼升余熙荣马楚杰莫泳皓钟远鸣广西中医药大学第一临床医学院广西中医药大学第一附属医院脊柱骨伤科

目的探讨单一切口椎间孔镜治疗双节段腰椎管狭窄并腰椎间盘突出症的临床疗效。方法回顾性分析2016年3月至2018年5月在广西中医药大学第一附属医院脊柱骨伤科就诊的40例双节段腰椎管狭窄并腰椎间盘突出症患者临床资料，其中通过单一切... 详细信息

目的探讨单一切口椎间孔镜治疗双节段腰椎管狭窄并腰椎间盘突出症的临床疗效。方法回顾性分析2016年3月至2018年5月在广西中医药大学第一附属医院脊柱骨伤科就诊的40例双节段腰椎管狭窄并腰椎间盘突出症患者临床资料，其中通过单一切口同时穿刺椎间孔镜治疗的患者11例（A组），通过单一切口前后穿刺椎间孔镜治疗的患者13例（B组），通过双切口前后穿刺椎间孔镜治疗的患者16例（C组）。记录患者的一般临床资料，三组不同时间点（术前、术后即刻、术后1周、术后1个月、末期随访）的VAS评分、JOA评分及临床疗效，并运用统计学进行分析。结果三组间手术时间、术中透视次数、皮肤切开长度和满意度差异均有统计学意义（P 一切口椎间孔镜技术同时减压双节段腰椎管狭窄并腰椎间盘突出症的有效手段，具有手术时间短、术中透视少，损伤小等优势，患者满意，值得临床推广应用。

关键词：单一切口椎间孔镜腰椎管狭窄腰椎间盘突出症

骨细胞程序性坏死上调Biglycan促进PMOP破骨细胞活化的机制

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中国骨质疏松杂志 2025年第1期 8-14页

作者：符永华王裕倩李吉崔红旺苏天李昌家邓小中赵伟杰海南医学院第一附属医院海南医学院临床学院

目的收集临床的绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis, PMOP)标本，检测双糖链蛋白多糖(Biglycan)与Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)的表达情况和表达部位，并明确骨细胞程序性坏死上调Biglycan与破骨细胞TLR4表达的... 详细信息

目的收集临床的绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis, PMOP)标本，检测双糖链蛋白多糖(Biglycan)与Toll样受体4(toll-like receptor 4,TLR4)的表达情况和表达部位，并明确骨细胞程序性坏死上调Biglycan与破骨细胞TLR4表达的相关性。方法运用H&E染色和TRAP染色观察正常组、骨质疏松组和重度骨质疏松组的骨细胞和破骨细胞的形态变化；应用免疫组织化学染色、免疫荧光染色和Western blot等方法检测各组间Biglycan与TLR4的表达情况和部位，并通过相关性分析明确骨细胞程序性坏死上调Biglycan与破骨细胞TLR4表达是否存在关联。结果 (1)各分组间临床基本资料中的年龄、绝经年龄、身高和体重之间无明显差异；而随着PMOP的进展，患者的骨密度T值逐渐下降，且与正常组间的差异明显。(2)H&E染色和TRAP染色结果提示，PMOP患者破骨细胞的活化与骨细胞程序性坏死相关。(3)Western blot检测结果提示PMOP患者的Biglycan和TLR4蛋白的表达发生上调。(4)免疫荧光染色和免疫组织化学染色结果提示PMOP患者骨细胞中的Biglycan和破骨细胞表面的TLR4表达上调，且Biglycan的表达阳性率与TLR4蛋白表达阳性个数呈正相关，其相关系数在免疫组化染色和免疫荧光染色中分别为0.903 8与0.867 2。结论在PMOP的进展过程中，损伤相关分子Biglycan是促进破骨细胞活化的重要因子之一，干预Biglycan/TLR4可能是有效抑制PMOP进展的重要方式之一。

关键词：绝经后骨质疏松症骨细胞程序性坏死双糖链蛋白多糖 Toll样受体4 破骨细胞