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FTA-环介导等温扩增技术直接提取变异链球菌DNA的效果评价

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中国组织工程研究 2025年第5期29卷 1043-1049页

作者：王玥晖尚进杨晨符冬格曹灿张晓东王敬夫北部战区总医院口腔科辽宁省沈阳市110016 空军军医大学第三附属医院颌面外科陕西省西安市710004

背景:变异链球菌是龋病的重要病原菌,及时检测变异链球菌水平对龋病的早发现、早治疗有重要意义。目的:建立并评价FTA-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术直接提取变异链球菌DNA的应用效果。方法:①制备... 详细信息

背景:变异链球菌是龋病的重要病原菌,及时检测变异链球菌水平对龋病的早发现、早治疗有重要意义。目的:建立并评价FTA-环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术直接提取变异链球菌DNA的应用效果。方法:①制备含有ATCC标准菌株变异链球菌的菌悬液,接种于脑心浸出液培养基,充分混匀后按10倍梯度稀释成7种浓度(4.2×10^(7),4.2×10^(6),4.2×10^(5),4.2×10^(4),4.2×10^(3),4.2×10^(2),4.2×10 CFU/mL),每个稀释级做2个平行对照,并增加无菌水作为空白对照;②分别采用FTA卡、常规煮沸法、试剂盒提取及裂解液提取4种方法直接提取菌株DNA,通过LAMP技术进行扩增,并进行特异性试验,比较4种提取方法的差异。结果与结论:①4种方法提取的DNA均满足LAMP扩增的要求;②特异性试验结果显示,只有变异链球菌才可特异扩增出靶基因;③裂解液提取法最低检测限为4.2×10^(3) CFU/mL,FTA卡提取法最低检测限为4.2×10^(4) CFU/mL,试剂盒提取法和常规煮沸法最低检测限分别为4.2×10^(6) CFU/mL和4.2×10^(7) CFU/mL;④4种提取方法其他方面的比较显示,试剂盒提取法的实验成本、步骤数和时间都是最高;其他3种方法步骤数一致,其中FTA卡所需仪器设备最少,常规煮沸法单次成本最低,裂解液提取法所需时间最少;FTA卡和裂解液提取法仅需少量菌即可提取成功,后者在时间方面优于FTA卡,但相较于FTA卡其单次成本高,所需设备多;⑤结果说明,该研究建立的FTA-LAMP技术具有操作简便、特异性强、灵敏度高、结果可视化等优势,有望为高效提取检测变异链球菌提供新途径。

关键词：变异链球菌环介导等温扩增 FTA卡 DNA 可视化

针刀治疗膝骨关节炎大鼠的转录组测序及实验验证

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中国组织工程研究 2025年第20期29卷 4239-4248页

作者：刘彦彤王世轩赵双利魏巍王东海姜宗坤刘洪飞辽宁中医药大学辽宁省沈阳市110032 辽宁中医药大学附属第二医院骨伤一科辽宁省沈阳市110034 辽宁中医药大学附属第二医院骨伤四科辽宁省沈阳市110034 辽宁中医药大学附属第二医院骨伤二科辽宁省沈阳市110034

背景:针刀治疗膝骨关节炎临床疗效确切,但针刀干预膝骨关节炎在转录组水平上的调节机制仍未明确。目的:通过针刀干预骨关节炎大鼠,对软骨样本进行转录组测序和生物信息学分析并加以验证,揭示针刀干预骨关节炎大鼠的作用机制。方法:采用... 详细信息

背景:针刀治疗膝骨关节炎临床疗效确切,但针刀干预膝骨关节炎在转录组水平上的调节机制仍未明确。目的:通过针刀干预骨关节炎大鼠,对软骨样本进行转录组测序和生物信息学分析并加以验证,揭示针刀干预骨关节炎大鼠的作用机制。方法:采用随机数字表法将48只SD大鼠随机分为针刀组、模型组和假手术组,每组16只。针刀组、模型组采用内侧半月板失稳术建立骨关节炎模型,造模6周后针刀组大鼠每周进行1次针刀治疗,共治疗4周。治疗4周后,对各组大鼠膝关节进行Micro CT扫描,对关节软骨进行苏木精-伊红染色、番红O-固绿染色及Mankin评分,采用Elisa法检测血清炎症因子水平,对软骨样本进行转录组测序,采用R软件进行差异基因生物信息学分析,采用蛋白互作网络和Cytoscape软件筛选核心靶点并进行RT-qPCR验证。结果与结论:①相较于假手术组,模型组大鼠关节软骨表面粗糙不平、关节间隙狭窄,关节表层结构破坏,Mankin评分升高,血清白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶13水平显著上升(P科全书分析涉及蛋白分解代谢、自噬、丝裂原活化蛋白激酶、核因子kB及Wnt信号通路等,蛋白互作网络及Cytoscape筛选出共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子4个关键基因。③模型组大鼠关节软骨中共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子mRNA表达均低于假手术组(P<0.05),针刀组大鼠关节软骨中共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子mRNA表达均高于模型组(P<0.05)。④针刀干预可能作用于丝裂原活化蛋白激酶、核因子kB及Wnt等信号通路来促进软骨修复,并与共济失调毛细血管扩张突变、类Myb SWIRM和MPN结构域蛋白1、热休克蛋白90α1、NIPBL粘连蛋白负载因子基因的表达密切相关。

关键词：膝骨关节炎针刀骨关节炎模型内侧半月板韧带失稳术转录组测序差异基因动物实验实验验证工程化组织构建

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基于FLAIR影像组学模型鉴别H3K27改变弥漫中线胶质瘤与胶质母细胞瘤

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临床放射学杂志 2025年第1期44卷 27-32页

作者：梁寿衡韩宇王敏阳马宇卉空军军医大学第二附属医院放射科陕西省功能与分子影像重点实验室西安710038

目的探讨基于液体衰减反转恢复(FLAIR)序列影像组学模型鉴别H3K27改变弥漫中线胶质瘤(a-DMG)与胶质母细胞瘤(GBM)的应用价值。方法回顾分析经病理证实的45例a-DMG和63例GBM患者资料,按7∶3随机分为训练集和测试集。两名神经影像专业放... 详细信息

目的探讨基于液体衰减反转恢复(FLAIR)序列影像组学模型鉴别H3K27改变弥漫中线胶质瘤(a-DMG)与胶质母细胞瘤(GBM)的应用价值。方法回顾分析经病理证实的45例a-DMG和63例GBM患者资料,按7∶3随机分为训练集和测试集。两名神经影像专业放射科医师勾画三维容积感兴趣区(VOI),利用3D-Slicer软件提取FLAIR序列影像组学特征。采用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)进行特征选择,根据特征回归系数计算Rad评分。通过受试者操作特征(ROC)曲线计算曲线下面积(AUC)评价Rad评分的诊断效能。结果a-DMG和GBM患者的平均年龄、肿瘤位置和在Rad评分两组间差异存在统计学意义(P<0.05)。a-DMG和GBM基于FLAIR序列的11个组学特征Rad评分分别为0.898±0.229和0.558±0.189。Rad评分在训练集和测试集中的AUC值分别为0.896和0.829,敏感度分别为84.4%和78.6%,特异度分别为74.2%和83.3%,阳性预测值分别为82.6%和78.6%,阴性预测值分别为76.7%和83.3%,诊断准确率分别为80.3%和81.3%。结论基于FLAIR序列影像组学模型可以用于鉴别a-DMG和GBM,并有望在中线区高级胶质瘤中预测H3K27突变状态。

关键词： H3K27 弥漫中线胶质瘤胶质母细胞瘤影像组学

单细胞转录组测序技术在骨质疏松症研究中的应用与进展

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2812-2821页

作者：孙成涛孙广江戚晓楠程茗姚啸生辽宁中医药大学辽宁省沈阳市110847 辽宁中医药大学附属第二医院骨伤一科辽宁省沈阳市110034 辽宁中医药大学附属医院骨伤一科辽宁省沈阳市110032 中国医科大学沈阳市第四人民医院辽宁省沈阳市110031

背景:骨质疏松导致的脆性骨折发病率逐年上升,亟需探索其病理生理、潜在生物标志物、治疗靶点及有效药物。骨微环境中存在多种细胞,对骨代谢的维持至关重要。近几年,单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术被开发用于表征单个细胞的转录组,并逐... 详细信息

背景:骨质疏松导致的脆性骨折发病率逐年上升,亟需探索其病理生理、潜在生物标志物、治疗靶点及有效药物。骨微环境中存在多种细胞,对骨代谢的维持至关重要。近几年,单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术被开发用于表征单个细胞的转录组,并逐步应用到骨质疏松症防治的研究。目的:综述单细胞转录组测序技术在骨质疏松症研究中的应用与进展。方法:由第一作者使用计算机检索Web of Science,PubMed和中国知网数据库中2009-2023年出版的文献,英文检索词为:“single-cell RNA sequencing,bone marrow derived stromal cells,osteoblasts,osteocytes,osteoclasts,immune cells,Bone marrow vascular endothelial cells”;中文检索词为:“单细胞转录组测序,骨髓间充质干细胞,成骨细胞,骨细胞,破骨细胞,免疫细胞,骨髓血管内皮细胞”;通过阅读筛选相关文献,最终纳入89篇文献进行综述分析。结果与结论:①单细胞转录组测序技术能够深入了解细胞发育、增殖、分化的轨迹及其调控机制。②影响骨密度的候选基因主要富集在骨髓间充质干细胞亚群,其中Sox9是关键的转录因子。③成骨细胞不同亚群中差异表达Runx2控制骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化。④破骨细胞分化过程中RAB38与组蛋白修饰和转录调控动态变化有关。⑤单细胞层面研究证实,骨微环境中存在多种细胞间通讯,破骨细胞可能通过CD160-TNFRSF14配体-受体结合进行细胞间通讯;中性粒/单核细胞与成骨细胞间可能通过RESISTIN通路进行交互;浆样树突状细胞与成骨细胞系通过表皮生长因子通路进行交流;均可以为靶点预测和药物研发提供方向。⑥新的骨髓毛细血管内皮细胞亚群,称为S型内皮细胞,完全起源于骨骺次级骨化中心,甚至比H型血管更具有可塑性。⑦文章从细胞角度总结单细胞转录组测序技术在表征不同骨组织细胞的分化命运和分化轨迹、识别新的细胞亚群、鉴定细胞调控因子及明确细胞间通讯的研究进展,为探讨骨质疏松症的病理机制、筛选潜在诊断标志物、预测治疗靶点及探究药物作用机制提供细胞层面的信息。⑧未来单细胞测序技术将向单细胞多组学(基因组、蛋白组学及代谢组学)方向及结合其他诸如空间转录组技术为骨组织细胞变化提供更有价值的信息。

关键词：单细胞转录组测序骨质疏松骨代谢骨髓间充质干细胞骨细胞破骨细胞骨免疫学骨髓血管内皮细胞

42例豆角中毒病人血清SOD—1、CG含量变化及其意义

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解放军预防医学杂志 1992年第6期 74-75页

作者：侯晓平黄献章罗南辉邹凤泉张志玲蒿凤英空军总医院急诊科北京空军总医院急诊科

我们对一起42例豆角中毒病人测定了血清铜锌超氧化物岐化酶(SOD—1)、甘胆酸(CG),以探讨中毒对机体的损伤及其机制。现报告如下。(一)材料与方法1.临床资料:中毒组42例,男性38例,女性4例,平均年龄30.8±5.6岁,半年前体检均正常。1989年1... 详细信息

我们对一起42例豆角中毒病人测定了血清铜锌超氧化物岐化酶(SOD—1)、甘胆酸(CG),以探讨中毒对机体的损伤及其机制。现报告如下。(一)材料与方法1.临床资料:中毒组42例,男性38例,女性4例,平均年龄30.8±5.6岁,半年前体检均正常。1989年12月23日晚于同一食堂进食未炒熟豆角后1.5～3h陆续出现恶心、呕吐、腹痛、腹泻而就诊。即取剩余食物送细菌培养。对症状

关键词： SOD 中毒病人病人血清 CG 豆角长豇豆

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吸烟引起飞行人员肺功能损害观察

解放军预防医学杂志 1991年第1期 54-55页

作者：黄献章丁思权栾湘宁马利铭空军总医院急诊科北京空军总医院急诊科

吸烟给人类健康带来的危害,尤以呼吸系统损害最为明显。本文观察了吸烟对飞行人员肺功能的损害情况,现报告如下。(一)材料和方法1187例男性飞行人员进行最大呼吸流量-容积曲线(v-V曲线)测定,采用日产MFR-7100-A型肺功能机,操作方法同时... 详细信息

吸烟给人类健康带来的危害,尤以呼吸系统损害最为明显。本文观察了吸烟对飞行人员肺功能的损害情况,现报告如下。(一)材料和方法1187例男性飞行人员进行最大呼吸流量-容积曲线(v-V曲线)测定,采用日产MFR-7100-A型肺功能机,操作方法同时间肺活量。另选择129例男性飞行人员进行经皮血氧分压(tcPO)测定,采用西德HELLIGE公司生产的经皮血氧监测仪-SM361进

关键词：飞行人员空勤人员航空航天人员肺功能

乙醇对犬消化间期及餐后胃和十二指肠收缩的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2001年第5期15卷 377-381页

作者：杨春敏毛高平许瑞佳张秀荣张映辉曹传平空军总医院消化科北京100036 空军总医院急诊科北京100036

为了探讨饮酒引起消化不良的机理 ,本文应用低顺应性毛细管水灌注消化道腔内测压系统记录清醒犬胃和十二指肠收缩活动并在犬消化间期胃肠移行性复合运动 (MMC)不同时相抽取静脉血 ,观察胃内灌流乙醇对MMC和餐后胃肠运动的作用及血浆胃... 详细信息

为了探讨饮酒引起消化不良的机理 ,本文应用低顺应性毛细管水灌注消化道腔内测压系统记录清醒犬胃和十二指肠收缩活动并在犬消化间期胃肠移行性复合运动 (MMC)不同时相抽取静脉血 ,观察胃内灌流乙醇对MMC和餐后胃肠运动的作用及血浆胃动素浓度变化 .结果表明 :①在MMCⅡ相后期从胃管内灌流 15 %乙醇延长了MMC周期时间 ,灌流乙醇后出现的MMCⅢ相收缩时间 ,振幅和动力指数明显低于正常对照灌流 30 %乙醇则抑制了MMCⅢ相出现 .②血浆胃动素随MMC不同时相呈周期性波动 ,血浆胃动素浓度在MMCⅢ相时最高 ,MMCⅠ相时最低 .在灌流 15 %乙醇后出现MMCⅢ相时 ,血浆胃动素高峰浓度降低 .灌流 30 %乙醇则抑制了消化间期血浆胃动素浓度高峰出现 .③在犬进餐后灌流 30 %乙醇明显抑制了餐后胃和十二指肠的收缩活动 .因此 ,胃内灌流乙醇减弱了犬消化间期和餐后胃和十二指肠的收缩 ,血浆胃动素释放减少可能部分介导了乙醇的胃肠抑制作用 .结果提示这可能是饮酒引起临床消化不良的原因 .

关键词：胃肠活动移行运动复合波乙醇胃肠激素类胃动素

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消炎痛栓治疗胆绞痛及肾绞痛的疗效评价

人民军医 1992年第12期35卷 47-48页

作者：许瑞佳罗南辉侯晓平空军总医院急诊科

我科自1990年1月起对胆绞痛及肾绞痛患者各30例试用消炎痛栓直肠给药治疗,并与传统的肌注杜冷丁和阿托品法进行对照比较,现总结如下。临床资料一、一般资料胆绞痛60例,男8例,女52例,平均年龄42岁(15～78岁),疼痛发作时间为40min～3d,均... 详细信息

我科自1990年1月起对胆绞痛及肾绞痛患者各30例试用消炎痛栓直肠给药治疗,并与传统的肌注杜冷丁和阿托品法进行对照比较,现总结如下。临床资料一、一般资料胆绞痛60例,男8例,女52例,平均年龄42岁(15～78岁),疼痛发作时间为40min～3d,均行腹部B超或后期胆管造影检查证实为胆囊结石、胆囊炎;肾绞痛60例,男54例,女6例,平均年龄30岁(20～49岁),疼痛时间为30min～12h,患者均有镜下血尿,B超及后期静脉肾盂造影证实为肾结石或输尿管结石,其中伴明显肾盂积水者5例。所选病例均无慢性肝肾疾病。

关键词：消炎痛栓胆绞痛肾绞痛

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肾上腺素能药物在心肺复苏中的应用

人民军医 1991年第3期34卷 70-71页

作者：罗南辉侯晓平空军总医院急诊科

目前已不主张在心肺复苏(以下简称复苏)时常规应用碳酸氢钠和钙剂,但对于肾上腺素能药物的应用则仍有争论。争论的焦点是复苏时用纯α受体激动药甲氧胺或苯福林(新福林)好,还是用α、β受体混合激动药肾上腺素好;以及肾上腺素在复苏时... 详细信息

目前已不主张在心肺复苏(以下简称复苏)时常规应用碳酸氢钠和钙剂,但对于肾上腺素能药物的应用则仍有争论。争论的焦点是复苏时用纯α受体激动药甲氧胺或苯福林(新福林)好,还是用α、β受体混合激动药肾上腺素好;以及肾上腺素在复苏时的最适剂量是多少。一、早期的动物实验及临床研究早在60年代Pearson等就证明,在复苏时早期使用肾上腺素能够提高实验狗的存活率。

关键词：心肺复苏肾上腺素