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自体刃厚皮移植预制尿道联合阴囊皮瓣修复尿道中段缺损伴阴茎缺损的临床效果

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中华烧伤与创面修复杂志 2023年第3期39卷 215-220页

作者：佟琳张万福韩飞徐志刚胡大海官浩空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

目的探讨自体刃厚皮移植预制尿道联合阴囊皮瓣修复尿道中段缺损伴阴茎缺损的临床效果。方法采用回顾性观察性研究方法。2015年1月—2022年1月,空军军医大学第一附属医院收治8例符合入选标准的各种外伤致尿道中段缺损伴有阴茎缺损的男性... 详细信息

目的探讨自体刃厚皮移植预制尿道联合阴囊皮瓣修复尿道中段缺损伴阴茎缺损的临床效果。方法采用回顾性观察性研究方法。2015年1月—2022年1月,空军军医大学第一附属医院收治8例符合入选标准的各种外伤致尿道中段缺损伴有阴茎缺损的男性患者,年龄14~58岁,尿道缺损长度为3~5 cm,清创后阴茎缺损创面面积为5.0 cm×2.5 cm~7.0 cm×5.5 cm。患者均于Ⅰ期行自体刃厚皮移植预制缺损段尿道,Ⅱ期行尿道吻接及单侧阴囊皮瓣转移重建尿道及阴茎。阴囊皮瓣面积为6.0 cm×3.0 cm~8.0 cm×6.0 cm。将供皮区创面用油纱覆盖,供瓣区创面直接缝合。观察Ⅱ期术后7 d皮瓣成活情况;Ⅱ期术后3周,采用尿流率检测仪测定患者尿流率(尿流率>15 mL/s为排尿通畅),观察有无尿瘘及勃起功能,采用自行设计的疗效满意度调查表对患者进行疗效满意度调查。随访时观察皮瓣受区外观,采用温哥华瘢痕量表(VSS)评估供皮区及供瓣区瘢痕情况,同前检测尿流率,观察有无尿道狭窄、尿瘘、勃起功能,调查患者对疗效的满意度。结果8例患者Ⅱ期术后7 d皮瓣完全成活;Ⅱ期术后3周,尿流率为25.3(18.0,38.5)mL/s,排尿通畅,无尿瘘,有勃起功能,对疗效的满意度评分为14.3(14.0,15.0)分。随访1~7年,8例患者皮瓣受区外形饱满、不臃肿,颜色与周围组织相近,供皮区VSS评分为11.5(10.0,13.0)分,供瓣区VSS评分为10.5(9.3,12.0)分,尿流率为24.6(17.7,34.1)mL/s,无尿道狭窄、尿瘘及勃起功能受限,对疗效的满意度评分为13.5(13.3,14.8)分。结论自体刃厚皮移植预制尿道联合阴囊皮瓣修复缺损尿道及阴茎,不仅重建了尿道结构及阴茎外形,而且恢复了阴茎的感觉及勃起功能,术后并发症少、瘢痕增生不明显、患者满意度高,值得临床推广。

关键词：皮肤移植尿道疾病阴茎疾病外科皮瓣尿道重建

足底内侧游离皮瓣整复手掌电烧伤创面及瘢痕挛缩的疗效

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中华烧伤与创面修复杂志 2023年第9期39卷 820-825页

作者：韩夫杨薛康何亭王路旭张楠韩军涛空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

目的探讨足底内侧游离皮瓣整复手掌电烧伤创面及瘢痕挛缩的疗效。方法采用回顾性观察性研究方法。2020年1月—2023年1月,空军军医大学第一附属医院收治6例符合入选标准的手掌电烧伤创面或瘢痕挛缩患者,其中男5例、女1例,年龄35~55岁。... 详细信息

目的探讨足底内侧游离皮瓣整复手掌电烧伤创面及瘢痕挛缩的疗效。方法采用回顾性观察性研究方法。2020年1月—2023年1月,空军军医大学第一附属医院收治6例符合入选标准的手掌电烧伤创面或瘢痕挛缩患者,其中男5例、女1例,年龄35~55岁。手掌电烧伤创面清创后及瘢痕切除后创面面积为5.0 cm×3.0 cm~8.0 cm×7.0 cm。均采用吻合皮神经的足底内侧游离皮瓣整复创面,皮瓣面积为5.5 cm×3.5 cm~8.5 cm×7.5 cm。移植腹部全厚皮修复皮瓣供区创面。术后观察皮瓣和皮片存活情况,随访观察皮瓣外形、质地及皮瓣供区情况,评估患手握持功能恢复情况。于末次随访时,测量皮瓣两点辨别觉距离并按照中华医学会手外科学会上肢部分功能评定试用标准评定皮瓣感觉恢复情况,采用皮瓣术后功能评价量表评价皮瓣功能恢复情况。结果术后5个皮瓣存活良好;1个皮瓣远端部分坏死,清创后移植大腿外侧中厚皮修复。皮瓣供区皮片均存活良好。随访3~24个月,皮瓣不臃肿,质地、色泽好,与周围组织匹配度高;皮瓣供区无明显瘢痕挛缩发生;患手握持功能良好。末次随访时,皮瓣两点辨别觉距离为6~8 mm,皮瓣感觉恢复:5个皮瓣恢复到S3+级、1个皮瓣恢复到S3级,皮瓣功能评定:优5个、良1个,患者基本恢复正常的生活和工作。结论吻合皮神经的足底内侧游离皮瓣整复手掌电烧伤创面及瘢痕挛缩具有术后外观匹配度高、感觉恢复良好及患手握持功能良好等诸多优点,是整复手掌电烧伤创面和瘢痕挛缩的理想选择。

关键词：烧伤,电手损伤瘢痕外科皮瓣显微外科手术创面修复

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进一步重视特殊原因及部位烧伤创面处理

中华烧伤与创面修复杂志 2023年第3期39卷 209-214页

作者：胡大海王耘川空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

特殊原因及部位烧伤创面处理是非常具有挑战性的临床工作。该文分别从化学烧伤、电烧伤、面部烧伤、手烧伤、会阴烧伤的发病率,及其创面组织病理损伤的复杂性和严重性,目前临床处理的主要原则及方法,以及尚待解决的疑难问题等方面做了... 详细信息

特殊原因及部位烧伤创面处理是非常具有挑战性的临床工作。该文分别从化学烧伤、电烧伤、面部烧伤、手烧伤、会阴烧伤的发病率,及其创面组织病理损伤的复杂性和严重性,目前临床处理的主要原则及方法,以及尚待解决的疑难问题等方面做了简要的论述。希望引起关注和重视,为进一步提高烧伤整体救治能力提供借鉴。

关键词：烧伤特殊原因及部位创面处理

抗生素骨水泥治疗糖尿病足溃疡的前瞻性随机对照研究

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中华烧伤与创面修复杂志 2023年第4期39卷 311-318页

作者：曹涛计鹏张智肖丹王克甲李娜李雯金广俊郝彤陶克空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

目的探讨用抗生素骨水泥治疗糖尿病足溃疡(DFU)的临床效果及其相关机制。方法采用前瞻性随机对照研究方法。2020年8月—2022年8月,空军军医大学第一附属医院收治24例符合入选标准的DFU患者。按区组随机化法,将患者分为2组(每组12例),抗... 详细信息

目的探讨用抗生素骨水泥治疗糖尿病足溃疡(DFU)的临床效果及其相关机制。方法采用前瞻性随机对照研究方法。2020年8月—2022年8月,空军军医大学第一附属医院收治24例符合入选标准的DFU患者。按区组随机化法,将患者分为2组(每组12例),抗生素骨水泥组患者中男7例、女5例,年龄(64±8)岁,溃疡面积(41±21)cm2;磺胺嘧啶银组患者中男8例、女4例,年龄(62±8)岁,溃疡面积(38±19)cm2。在确保每例患者膝下主要动脉至少1条通畅的情况下,彻底清创后行持续负压封闭引流3~5 d,此后对抗生素骨水泥组创面采用载庆大霉素骨水泥、磺胺嘧啶银组创面采用磺胺嘧啶银乳膏行换药治疗,换药3周后,均取患侧大腿外侧刃厚皮覆盖创面。清创前与换药3周后均用激光多普勒血流仪检测创面组织及足部正常皮肤组织血流强度,计算创面相对血流强度百分比及血流强度改变率。换药3周后取创缘组织,行免疫组织化学染色观测CD31阳性新生血管数与血管形貌,行免疫荧光染色观察CD31与α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)双阳性细胞所围成的血管形态,行免疫荧光染色评估细胞增殖活性(以Ki67阳性细胞比表示),采用蛋白质印迹法检测血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)蛋白表达。观察植皮后3~5 d皮片存活情况,记录创面愈合时间。对数据行独立样本t检验及Fisher确切概率法检验。结果2组患者清创前创面相对血流强度百分比相近(P>0.05);抗生素骨水泥组患者换药3周后创面相对血流强度百分比及血流强度改变率分别为(44.7±2.0)%、(129±12)%,均显著高于磺胺嘧啶银组的(28.3±1.2)%、(41±8)%(t值分别为24.15、20.97,P<0.05)。换药3周后,与磺胺嘧啶银组比较,抗生素骨水泥组患者创缘组织中CD31阳性新生血管数显著增多(t=33.81,P<0.05)且管径更大、排列更有序,CD31与α-SMA双阳性细胞所围成的血管管壁连续性更好,Ki67阳性细胞比、VEGFR2蛋白表达均显著增高(t值分别为40.97、47.38,P<0.05)。植皮后3~5 d,抗生素骨水泥组所有患者及磺胺嘧啶银组8例患者皮片均存活良好;磺胺嘧啶银组4例患者皮片出现点状/片状坏死,经相应处理后治愈。抗生素骨水泥组患者创面愈合时间为(47.1±2.9)d,明显短于磺胺嘧啶银组的(58.8±2.3)d(t=10.86,P<0.05)。结论相较于磺胺嘧啶银,临床应用抗生素骨水泥治疗DFU具有加快创面愈合、更好重建局部血流的特点,这可能与抗生素骨水泥通过增强VEGFR2的表达促进了创面局部血管有效新生密切相关。

关键词：糖尿病足皮肤移植伤口愈合新生血管化,生理性血管内皮生长因子受体2 抗生素骨水泥

腹部不同位置全厚皮片修复小儿功能部位皮肤软组织缺损的前瞻性随机对照研究

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第8期38卷 744-752页

作者：佟琳张万福胡晓龙韩飞韩夫官浩空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

目的对比分析采用腹部不同位置全厚皮片修复小儿功能部位小面积皮肤软组织缺损创面的效果。方法采用前瞻性随机对照研究方法。2019年1月—2020年6月,空军军医大学第一附属医院收治60例符合入选标准的因功能部位小面积皮肤软组织缺损需... 详细信息

目的对比分析采用腹部不同位置全厚皮片修复小儿功能部位小面积皮肤软组织缺损创面的效果。方法采用前瞻性随机对照研究方法。2019年1月—2020年6月,空军军医大学第一附属医院收治60例符合入选标准的因功能部位小面积皮肤软组织缺损需行全厚皮片移植修复的女性住院患儿。按随机数字表法将患儿分为2组,剔除随访脱落患儿后,侧腹部组纳入28例、下腹部组纳入29例,年龄分别为5(3,8)、5(3,7)岁。对下腹部组患儿20(12,26)cm^(2)创面采用于腹下区横行皮纹处切取的(24±10)cm^(2)全厚皮片修复,侧腹部组患儿23(16,32)cm^(2)创面采用于脐平面以下至腹股沟以上的侧腹部区切取的(24±9)cm^(2)全厚皮片修复,供区切口均行连续皮内缝合。术后供受区均行-10.64~-6.65 kPa持续负压治疗,术后7 d开始应用医用皮肤减张闭合器治疗供区。记录供区使用医用皮肤减张闭合器情况、供区术后并发症发生情况及拆线时间并计算并发症发生率;术后7 d,采用自行设计的疗效满意度调查表调查患儿家长对患儿疗效的满意度;术后1、6个月,采用温哥华瘢痕量表(VSS)评估供区瘢痕情况并计算2个时间点VSS评分差值,用直尺测量供区瘢痕宽度并计算2个时间点瘢痕宽度差值。对数据行独立样本t检验或Cochran&Cox近似t检验、Mann-Whitney U检验、Fisher确切概率法检验。结果侧腹部组术后供区应用医用皮肤减张闭合器时间≥4周患儿比例明显高于下腹部组(P皮肤红肿、供区脂肪液化的患儿各1例,下腹部组1例患儿供区出现切口部分裂开;下腹部组患儿供区术后并发症发生率明显低于侧腹部组(P0.05);侧腹部组患儿供区瘢痕的VSS评分差值明显大于下腹部组(Z=-8.12,P0.05);侧腹部组患儿供区瘢痕宽度差值明显大于下腹部组(Z=-14.93,P皮肤软组织缺损创面的方法,行之有效、简便易行、符合美学修复原则;与侧腹部全厚皮片移植相比,下腹部全厚皮片移植术后供区并发症发生率低、瘢痕增生不明显,值得临床推广使用。

关键词：儿童烧伤伤口愈合皮肤移植下腹部全厚皮片功能部位

肝细胞生长因子修饰的人脂肪间充质干细胞外泌体对糖尿病小鼠全层皮肤缺损的作用

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第11期38卷 1004-1013页

作者：曹涛肖丹计鹏张智蔡维霞韩超李雯陶克空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)修饰的人脂肪间充质干细胞(ADSC)外泌体对糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面的作用及其机制。方法采用实验研究方法。取2021年2—5月于空军军医大学第一附属医院整形科行腹部手术的3名健康女性(10~25岁)废弃脂肪组... 详细信息

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)修饰的人脂肪间充质干细胞(ADSC)外泌体对糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面的作用及其机制。方法采用实验研究方法。取2021年2—5月于空军军医大学第一附属医院整形科行腹部手术的3名健康女性(10~25岁)废弃脂肪组织,采用胶原酶消化法获取原代ADSC,培养7 d,用倒置相差显微镜观察细胞形态。取第3代ADSC,转染HGF慢病毒,培养5 d,采用成像系统观察细胞荧光情况并计算转染率。取第3~6代ADSC和第3~6代转染HGF的ADSC,均分别采用密度梯度离心法提取其外泌体,即为ADSC外泌体和HGF-ADSC外泌体。采用透射电子显微镜观察外泌体微观形态,采用流式细胞仪检测外泌体的CD9、CD63、CD81阳性表达。取24只6周龄雄性昆明小鼠,制作糖尿病模型后,在其背部制作全层皮肤缺损创面。按照随机数字表法将小鼠分为磷酸盐缓冲液(PBS)组、单纯HGF组、单纯ADSC外泌体组和HGF-ADSC外泌体组,每组6只,分别作相应处理。伤后3、7、10、14 d,观察创面愈合情况并计算其愈合率,使用多普勒血流仪检测创基血流强度并计算伤后10 d创基相对血流强度百分比。伤后10 d,采用免疫荧光法检测创面中Ki67阳性细胞数,采用免疫组织化学法检测创面中CD31阳性染色且成管样结构的新生血管数,采用蛋白质印迹法检测创面中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)的蛋白表达并计算p-PI3K与PI3K比值及p-Akt与Akt比值。伤后14 d,采用苏木精-伊红染色法、Masson染色法分别检测创面皮肤组织缺损长度及胶原新生情况,并计算胶原容积分数(CVF)。样本数均为3。对数据行重复测量方差分析、单因素方差分析及Tukey检验。结果原代ADSC培养7 d,细胞呈梭形,生长密集后呈旋涡状排列。培养5 d后,第3代转染HGF的ADSC携带绿色荧光,转染率为85%。ADSC外泌体及HGF-ADSC外泌体微观形态相似,均呈囊泡状结构,平均粒径分别为103、98 nm,均呈CD9、CD63、CD81阳性。伤后3 d,4组小鼠创面的创周均红肿且有少量渗液;伤后7 d,HGF-ADSC外泌体组创面逐渐缩小,其余3组创面缩小不明显;伤后10 d,4组创面均缩小、结痂;伤后14 d,HGF-ADSC外泌体组创面基本愈合,其余3组均有残余创面。伤后3 d,4组创面愈合率接近(P>0.05);伤后7、10 d,HGF-ADSC外泌体组创面愈合率均分别明显高于PBS组、单纯HGF组及单纯ADSC外泌体组(q值分别为13.11、13.11、11.89,12.85、11.28、7.74,P皮肤中组织缺损长度明显短于PBS组、单纯HGF组及单纯ADSC外泌体组(q值分别为20.51、18.50、11.99,P值均皮肤缺损创面愈合,其机制可能与HGF-ADSC外泌体通过激活PI3K/Akt信号通路从而促进创面中eNOS的表

关键词：外泌体肝细胞生长因子新生血管化,生理性糖尿病,实验性间质干细胞创面修复

重视胸骨切开术后胸骨深部伤口感染的预防和处理

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中华烧伤与创面修复杂志 2024年第2期40卷 125-130页

作者：官浩陈阳空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

胸骨深部伤口感染(DSWI)是心脏手术后潜在且灾难性的并发症之一。尽管临床上采用了更小的切口、常规预防性使用抗生素和优化血糖管理等措施,但DSWI的发病率依然在1%~5%波动。DSWI在发生初期的症状和体征均不明显,致使临床医师的干预介... 详细信息

胸骨深部伤口感染(DSWI)是心脏手术后潜在且灾难性的并发症之一。尽管临床上采用了更小的切口、常规预防性使用抗生素和优化血糖管理等措施,但DSWI的发病率依然在1%~5%波动。DSWI在发生初期的症状和体征均不明显,致使临床医师的干预介入偏晚。DSWI一旦未被及时处理,患者病死率极高。因此,及早预防、诊断和适当处理对于防止DSWI进一步发展至致命的结局非常重要。鉴于DSWI的临床危害性和治疗的复杂性,故本文重点探讨和分享在各个环节中预防DSWI发生的经验、发生后的重建修复策略,以引起广大同行对DSWI的重视。

关键词：胸骨切开术外科伤口感染纵隔炎手术后并发症胸骨深部伤口感染预防和治疗创面修复

自体毛囊单位提取移植术治疗烧伤后小面积继发性瘢痕秃发的临床效果

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第6期38卷 532-537页

作者：戴娇娇王玲邱海洋黄鑫怡田雨欣彭琴刘洋官浩空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

目的探讨自体毛囊单位提取(FUE)移植术治疗烧伤后小面积继发性瘢痕秃发(以下简称瘢痕秃发)的临床效果。方法采用回顾性观察性研究方法。根据采用的治疗方法,将空军军医大学第一附属医院2017年3月—2019年11月收治的采用自体FUE移植术治... 详细信息

目的探讨自体毛囊单位提取(FUE)移植术治疗烧伤后小面积继发性瘢痕秃发(以下简称瘢痕秃发)的临床效果。方法采用回顾性观察性研究方法。根据采用的治疗方法,将空军军医大学第一附属医院2017年3月—2019年11月收治的采用自体FUE移植术治疗烧伤后小面积瘢痕秃发的18例患者[男12例、女6例,年龄(29±6)岁]纳入FUE移植组,将该单位同一时期由同一手术团队采用扩张皮瓣移植术治疗烧伤后小面积瘢痕秃发的18例患者[男13例、女5例,年龄(33±5)岁]纳入扩张皮瓣移植组。所有患者均随访1年以上,于末次随访时,采用Folliscope毛发检测系统测量移植区毛囊单位密度并计算毛发成活率,采用视觉模拟评分法(VAS)评估疗效,询问患者对治疗效果的满意度及随访期间的并发症发生情况,记录移植区毛发生长情况及头皮厚度、疼痛、瘙痒、色素沉着与表面粗糙度等表征。对数据行Fisher确切概率法检验、独立样本t检验。结果末次随访时,FUE移植组患者移植区毛囊单位密度为(46.8±2.0)个/cm^(2),明显高于扩张皮瓣移植组的(42.5±4.3)个/cm^(2)(t=3.84,P0.05)。末次随访时,2组患者治疗效果VAS评分相近(P>0.05);FUE移植组患者对治疗效果的满意度评分为(8.6±1.1)分,明显高于扩张皮瓣移植组的(7.6±0.8)分(t=2.89,P一致;2组患者移植区头皮厚度、疼痛、瘙痒、色素沉着与表面粗糙度等表征情况比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论采用自体FUE移植术治疗烧伤后小面积瘢痕秃发较扩张皮瓣移植术具有更好的远期毛囊单位密度和患者满意度,术后效果较好,具有良好的临床应用前景。

关键词：烧伤瘢痕秃发扩张术毛囊单位提取皮瓣移植术

人脂肪间充质干细胞来源外泌体对脓毒症小鼠肺血管内皮细胞损伤的影响及其机制

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中华烧伤与创面修复杂志 2022年第3期38卷 266-275页

作者：蔡维霞沈括曹涛王璟赵明王克甲张月韩军涛胡大海陶克空军军医大学第一附属医院全军烧伤中心烧伤与皮肤外科西安710032

目的探讨人脂肪间充质干细胞(ADSC)来源外泌体对脓毒症小鼠肺血管内皮细胞(PMVEC)损伤的影响及其机制。方法采用实验研究方法。取空军军医大学第一附属医院收治的3例行腹部手术切除患者(均为女性,年龄10~25岁)遗弃的新鲜脂肪组织进行原... 详细信息

目的探讨人脂肪间充质干细胞(ADSC)来源外泌体对脓毒症小鼠肺血管内皮细胞(PMVEC)损伤的影响及其机制。方法采用实验研究方法。取空军军医大学第一附属医院收治的3例行腹部手术切除患者(均为女性,年龄10~25岁)遗弃的新鲜脂肪组织进行原代人ADSC的分离培养,于第5天采用倒置相差显微镜观察细胞形态。取第3代ADSC,采用流式细胞术检测ADSC中CD29、CD34、CD44、CD45、CD73和CD90的表达情况。选取第3~5代ADSC,采用差速超高速离心法获取其上清液中的外泌体,采用透射电镜和纳米颗粒跟踪分析法及蛋白质印迹法分别检测外泌体形状、粒径大小及CD9、CD63、肿瘤易感基因101(TSG101)和β肌动蛋白的蛋白表达。取24只成年雄性BALB/c小鼠,按照随机数字表法(分组方法下同)分成正常对照组、单纯盲肠结扎穿孔(CLP)组和CLP+ADSC外泌体组,每组8只,分别进行相应处理。术后24 h,采用酶联免疫吸附测定法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平,采用苏木精-伊红染色和髓过氧化物酶染色检测小鼠肺组织形态,采用免疫荧光法检测小鼠肺组织细胞中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的表达。取1个月龄雌雄不拘C57小鼠,采用组织块法获取原代PMVEC。取第3代PMVEC,采用免疫荧光法和流式细胞术检测PMVEC中CD31的表达。取第3代PMVEC,与ADSC来源外泌体共培养12 h,采用PKH26试剂盒检测PMVEC吞噬外泌体的情况。取第3代PMVEC,将细胞分为空白对照组、单纯巨噬细胞上清液组和巨噬细胞上清液+ADSC外泌体组,每组3孔,分别进行相应处理。24 h后,采用流式细胞术检测细胞中活性氧含量,采用免疫荧光法检测细胞中8-OHdG表达,采用Transwell实验测定细胞单分子层通透性。以上样本数均为3。对数据行单因素方差分析和LSD-t检验。结果分离的原代ADSC培养至第5天,呈梭形密集生长,呈典型的漩涡样排列。第3代ADSC中CD29、CD44、CD73和CD90阳性细胞百分比均>90%,CD34和CD45阳性细胞百分比均<5%。第3~5代ADSC来源外泌体呈典型的双凹盘状结构,外泌体平均粒径为103 nm,外泌体中CD9、CD63和TSG101的蛋白表达均呈阳性,β肌动蛋白的蛋白表达呈阴性。术后24 h,与正常对照组比较,单纯CLP组小鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量均明显增加(t值分别为28.76、29.69,P<0.01);与单纯CLP组比较,CLP+ADSC外泌体组小鼠血清中TNF-α和IL-1β的含量均明显降低(t值分别为9.90、4.76,P<0.05或P<0.01)。术后24 h,正常对照组小鼠肺组织结构清晰完整、无炎症细胞浸润,单纯CLP组小鼠的肺组织较正常对照组水肿明显、炎症细胞浸润现象明显,CLP+ADSC外泌体组小鼠肺组织较单纯CLP组水肿症状明显减轻、炎症细胞浸润明显减少。术后24 h,3组小鼠肺组织中CD31呈阳性表达;单纯CLP组小鼠肺组织中8-OHdG阳性细胞荧光强度较正常对照组显著增大,CLP+ADSC外泌体组小鼠肺组织中8-OHdG阳性细胞荧光强度较单纯CLP组明显下降。第3代PMVEC的免疫荧光结果显示CD31呈阳性表达,流式细胞术鉴定结果显示CD31阳性细胞占比为99.5%。共培养12 h,ADSC来源外泌体成功被PMVEC吞噬,进入胞质。第3代PMVEC培养24 h后,与空白对照组比较,单纯巨噬细胞上清液组PMVEC的活性氧荧光强度明显增加(t=15.73,P<0.01);与单纯巨噬细胞上清液组比较,巨噬细胞上清液+ADSC外泌体组PMVEC的活性氧荧光强度明显降低(t=4.72,P<0.01)。第3代PMVEC培养24 h,与空白对照组相比,单纯巨噬细胞上清液组PMVEC的8-OHdG阳性荧光强度明显增强,巨噬细胞上清液+ADSC外泌体组PMVEC的8-OHdG阳性荧光强度介于空白对照组和单纯巨噬细胞上清液组之间。第3代PMVEC培养24 h,与空白对照组比较,单纯巨噬细胞上清液组的PMVEC单分子层细胞通透性明显增加(t=6.34,P<0.01);与单纯巨噬细胞上清液组比较,巨噬细胞上清+ADSC外泌体组的PMVEC单分子层细胞通透性明显降低(t=2.93,P<0.05)。结论ADSC来源外泌体可改善小鼠肺组织氧化性损伤,降低由巨噬细胞上清液诱导的PMVEC的活性氧含量、8-OHdG表达以及细胞通透性。

关键词：脓毒症急性肺损伤活性氧肺血管内皮细胞 8-羟基脱氧鸟苷