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结核分枝杆菌c-di-AMP磷酸二酯酶的重组腺病毒的构建及其诱导的体液免疫应答

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中国人兽共患病学报 2025年

作者：胡家豪宁唤唤董梦娟路延之代婷张从玥徐子晴王姝予周正言柏银兰空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学基础医学院学员队空军军医大学军事医学创新中心宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系延安大学生命科学学院

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达... 详细信息

目的构建表达结核分枝杆菌（Mtb）c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒（rAd）并检测其诱导的体液免疫应答。方法经密码子优化的MtbCnpB编码基因克隆入质粒pcADV，获得的重组质粒pcADV-CnpB转染HEK293T细胞，并用Westernblot鉴定表达。重组pcADV-CnpB与骨架质粒共转染HEK293T细胞包装获得重组腺病毒rAd-CnpB，以HEK293T细胞扩增rAd-CnpB，Westernblot和免疫荧光检测rAd-CnpB表达目的蛋白。以rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，收集小鼠血清与肺泡灌洗液（BALF），ELISA检测抗原特异性抗体水平。结果酶切和测序鉴定表明重组质粒pcADV-CnpB构建成功，该质粒能够在真核细胞中表达。在HEK293T细胞内包装并获得rAd-CnpB，大量扩增并纯化获得滴度为5.53×1010PFU/mL的rAd-CnpB。rAd-CnpB可在HEK293T细胞中表达目的蛋白CnpB。rAd-CnpB滴鼻免疫小鼠，可诱导BALF中CnpB特异性IgG与分泌型IgA水平的增加，同时诱导血清中产生高水平的CnpB特异性IgG。结论成功构建表达Mtb c-di-AMP磷酸二酯酶CnpB的重组腺病毒rAd-CnpB，并且rAd-CnpB经黏膜免疫可诱导抗原特异性体液免疫与黏膜免疫应答，可用于结核病新疫苗策略的研究。

关键词：结核分枝杆菌重组腺病毒 c-di-AMP 磷酸二酯酶黏膜免疫

硫化氢钠补充外源性硫化氢改善子代自闭症小鼠神经功能障碍

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陕西医学杂志 2025年第1期54卷 3-8页

作者：陈柄迪罗耀文程俊凯王利戴舒惠王成果张磊空军军医大学基础医学院三大队九队陕西西安710032 空军军医大学第一附属医院神经外科陕西西安710032 空军军医大学第二附属医院普通外科陕西西安710032

目的:探讨硫氢化钠(NaHS)补充外源性硫化氢(H_(2)S)同时,通过上调3-巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)和胱硫氨酸-β-合成酶(CBS),促进内源性H_(2)S产生,共同改善自闭症(ASDs)小鼠的神经功能障碍。方法:C57BL/6孕鼠15只,随机分为正常对照组(Con... 详细信息

目的:探讨硫氢化钠(NaHS)补充外源性硫化氢(H_(2)S)同时,通过上调3-巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)和胱硫氨酸-β-合成酶(CBS),促进内源性H_(2)S产生,共同改善自闭症(ASDs)小鼠的神经功能障碍。方法:C57BL/6孕鼠15只,随机分为正常对照组(Con组,n=3)、2-丙基戊酸钠致ASDs模型组(VPA组,n=4)、NaHS干预组(VPA+NaHS组,n=4)和生理盐水干预对照组(VPA+NS组,n=4)。除Con组外,其余三组孕10、12 d小鼠用VPA 300 mg/kg一次性腹腔注射制备子代自闭症模型。NaHS+VPA组和NS+VPA组从孕13 d开始每天给孕鼠灌胃100μmol/kg NaHS直至子代小鼠23 d断奶。四组成活子代雄性幼鼠分别取15只进行行为学检测(高架十字迷宫实验、旷场实验和刻板行为检测)鉴定模型和治疗效果。利用H_(2)S试剂盒检测纹状体H_(2)S浓度,采用Western blot检测H_(2)S生成相关分子MPST和CBS表达情况,并利用TUNEL试剂盒检测神经细胞凋亡情况。结果:相较于Con组,VPA致自闭症谱系障碍模型可显著增加小鼠神经功能障碍(P<0.01)、下调纹状体神经细胞内MPST和CBS表达并促进凋亡(均P<0.05)。给予NaHS干预后可显著改善神经功能障碍(P<0.05),补充外源性H_(2)S的同时,还通过促进MPST和CBS表达增加内源性H_(2)S生成(均P<0.05),抑制神经细胞凋亡(P<0.05)。结论:NaHS补充外源性H_(2)S并上调与H_(2)S生成相关分子表达,抑制神经细胞凋亡,有效改善ASDs小鼠神经功能障碍。

关键词：自闭症谱系综合征硫氢化钠硫化氢凋亡 3-巯基丙酮酸硫转移酶胱硫氨酸-β-合成酶

c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗免疫对小鼠白色脂肪的调节作用

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中国人兽共患病学报 2025年

作者：董梦娟常宇骁宁唤唤路延之康健徐铭泽代婷李嘉玲郝乐冉张琳娜柏银兰宁夏医科大学基础医学院生理学和神经生物学系空军军医大学基础医学院微生物与病原生物学教研室空军军医大学军事医学创新中心延安大学生命科学学院

目的研究c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗（rBCG）调节小鼠附睾白色脂肪（eWAT）代谢及免疫的作用及机制。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠经静脉免疫卡介苗（BCG）和重组卡介苗（rBCG），监测小鼠体重变化。分离并称重小鼠eWAT重量，血球仪计血... 详细信息

目的研究c-di-AMP为佐剂的重组卡介苗（rBCG）调节小鼠附睾白色脂肪（eWAT）代谢及免疫的作用及机制。方法SPF级雄性C57BL/6小鼠经静脉免疫卡介苗（BCG）和重组卡介苗（rBCG），监测小鼠体重变化。分离并称重小鼠eWAT重量，血球仪计血管基质成分（SVFs）数量。制备小鼠脂肪组织切片，HE染色后显微镜下观察和比较各组小鼠eWAT脂肪细胞大小、数量和形态以及冠状结构（CLS）形成等变化。qRT-PCR检测各组小鼠脂肪代谢相关因子、细胞因子和衰老相关基因的转录水平。结果BCG和rBCG免疫小鼠体重随时间逐渐增加，rBCG免疫诱导eWAT比重增加，SVFs数量降低。HE染色结果显示，BCG免疫促进eWAT脂肪细胞增生和rBCG免疫促进脂肪细胞肥大，BCG和rBCG免疫均可诱导eWAT中CLS形成。qRT-PCR检测结果显示，rBCG免疫可抑制eWAT脂肪分解和能量消耗相关基因表达。BCG免疫对细胞因子转录作用影响不大，而rBCG显著诱导IFN-γ和IL-1Ra，抑制IL-15和IL-2的转录，但不诱导衰老相关基因的表达。结论 rBCG免疫可诱导eWAT脂肪细胞肥大，其机制与抑制eWAT脂肪分解及调节细胞因子表达有关。

关键词：卡介苗重组卡介苗环二腺苷酸白色脂肪脂肪代谢细胞因子

长链非编码RNA TP53TG1促进根尖牙乳头干细胞成牙本质及成骨分化

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中国组织工程研究 2025年

作者：黎庭悦郭倩何文喜吴家媛遵义医科大学口腔医学院军事口腔医学国家重点实验室陕西省口腔医学重点实验室空军军医大学第三附属医院牙体牙髓病科空军军医大学特色医学中心口腔科

背景：长链非编码RNA TP53TG1(lncRNA TP53TG1)参与调控多种癌症细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡，但在其他细胞中的作用报道甚少。目的：探讨lncRNA TP53TG1对人根尖牙乳头干细胞增殖和分化的影响及途径。方法：分离、培养人根尖牙乳头... 详细信息

背景：长链非编码RNA TP53TG1(lncRNA TP53TG1)参与调控多种癌症细胞的增殖、迁移、侵袭、凋亡，但在其他细胞中的作用报道甚少。目的：探讨lncRNA TP53TG1对人根尖牙乳头干细胞增殖和分化的影响及途径。方法：分离、培养人根尖牙乳头干细胞，转染lncRNA TP53TG1过表达慢病毒，RT-qPCR检测lncRNA TP53TG1的过表达效率，Western blot检测PI3K、AKT、ERK、P38、Smad3及其磷酸化蛋白的相对表达量。将人根尖牙乳头干细胞分为慢病毒空载体组和过表达lncRNA TP53TG1组，采用CCK-8法检测细胞增殖情况；成骨诱导第5天采用碱性磷酸酶染色检测碱性磷酸酶活性，成骨诱导第21天采用茜素红染色检测矿化结节形成情况；成骨诱导第3,7,14天采用RT-qPCR检测牙本质涎磷蛋白、Runt相关转录因子2、牙本质基质蛋白1、骨涎蛋白的mRNA表达水平；成骨诱导第3,7,14天采用Western blot检测牙本质涎磷蛋白和Runt相关转录因子2的蛋白表达水平。结果与结论：(1)RT-qPCR检测结果显示慢病毒成功整合到根尖牙乳头干细胞基因组中，Western blot检测结果显示，过表达lncRNA TP53TG1上调了p-PI3K、p-AKT的蛋白水平而不影响其他通路磷酸化蛋白的表达；(2)从细胞培养第3天开始，过表达lncRNA TP53TG1显著促进根尖牙乳头干细胞的增殖；(3)在诱导根尖牙乳头干细胞牙源性分化过程中，过表达lncRNA TP53TG1促进成牙本质及成骨分化相关基因和蛋白的表达，碱性磷酸酶活性和矿化结节形成显著增加；(4)结果表明：lncRNA TP53TG1可能通过激活PI3K/AKT信号通路促进根尖牙乳头干细胞成牙本质及成骨分化。

关键词：根尖牙乳头干细胞长链非编码RNA lncRNA TP53TG1 病毒转染成牙本质向分化 PI3K/AKT信号通路工程化干细胞

SHP-1在肿瘤发生发展及免疫调控中的作用及其药物研发进展

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空军军医大学学报 2025年

作者：张玲玲郑文静赵自豪张瀚江俊伟高小朋王涛延安大学生命科学学院空军军医大学基础医学院医学遗传与发育生物学教研室

Src同源区2蛋白质酪氨酸磷酸酶1（SHP-1）由PTPN6基因编码，是一种重要的非受体酪氨酸磷酸酶，在调节细胞周期、细胞运动和细胞死亡等多种重要生物学过程中发挥着关键作用。SHP-1的表达水平与多种肿瘤的预后紧密相关，但其在不同肿瘤中... 详细信息

Src同源区2蛋白质酪氨酸磷酸酶1（SHP-1）由PTPN6基因编码，是一种重要的非受体酪氨酸磷酸酶，在调节细胞周期、细胞运动和细胞死亡等多种重要生物学过程中发挥着关键作用。SHP-1的表达水平与多种肿瘤的预后紧密相关，但其在不同肿瘤中的作用因癌症类型而异。尤为重要的是，SHP-1在调节巨噬细胞免疫应答中发挥着关键调控作用，通过参与如CD47-SIRPα、MHC-Ⅰ-LILRB1和CD24-Siglec-10等信号途径，对肿瘤免疫逃逸具有重要影响。目前，SHP-1已成为抗癌药物研发中具有吸引力的靶标，多种旨在调节SHP-1活性的小分子化合物正处于临床试验探索阶段。本文综述了SHP-1的分子结构、生物学功能、在肿瘤发生发展进程中的作用，及其对巨噬细胞介导的肿瘤免疫调控的深刻影响，并概述了针对SHP-1的药物研发最新进展，旨在为深入理解SHP-1作为肿瘤治疗策略中的潜在靶点提供全面而深入的视角。

关键词： SHP-1 非受体酪氨酸酶肿瘤生物学信号转导抗癌药物

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新型腰椎关节突关节融合装置的有限元分析

中国组织工程研究 2025年第15期29卷 3081-3088页

作者：孙飞龙邱海洋姬宇飞杨意鹏刘大铭王龙超王飞雷伟张扬西安医学院研究生处陕西省西安市710068 空军军医大学附属西京医院骨科陕西省西安市710032

背景:脊柱小关节骨关节炎被认为是引起老年人下腰痛的常见原因,新型脊柱小关节突关节融合装置能够在脊柱小关节骨关节炎的早期对病变的小关节突关节进行融合,明显降低了由于早期保守治疗不佳和晚期手术治疗引起的一系列并发症的发生率,... 详细信息

背景:脊柱小关节骨关节炎被认为是引起老年人下腰痛的常见原因,新型脊柱小关节突关节融合装置能够在脊柱小关节骨关节炎的早期对病变的小关节突关节进行融合,明显降低了由于早期保守治疗不佳和晚期手术治疗引起的一系列并发症的发生率,但其对腰椎生物力学的影响尚未可知。目的:探讨新型腰椎关节突关节融合装置与传统融合装置的生物力学差异。方法:建立完整的L_(3)-S_(1)腰椎三维有限元模型并进行验证。在完整模型的基础上建立3组手术模型(双侧椎弓根螺钉固定模型、双侧新型小关节突关节融合固定模型和双侧关节突螺钉固定模型),手术节段为L_(4-5)。在500N载荷下,对所有腰椎模型施加7.5Nm力矩,计算L_(4-5)节段活动度、位移值和椎间盘应力值,以及L_(3-4)节段和L_(5)-S_(1)节段应力值。结果与结论:①与完整模型相比,各手术模型L_(4-5)节段的活动度都降低;②新型装置在左右旋工况下L_(4-5)节段活动度最小,在后伸工况下L_(4-5)节段活动度最大,在其他工况下L_(4-5)节段活动度大于双侧椎弓根螺钉固定模型;③新型装置在左右旋工况下L_(4-5)节段的位移值最小,在其他工况下L_(4-5)节段位移值大于双侧椎弓根螺钉固定模型;④对于新型装置在L_(4-5)节段的应力分布,在各个工况下都是最小的;⑤对于L_(3-4)节段新型装置在后伸和左右旋工况下的应力值最大,在其他工况下则小于双侧椎弓根螺钉固定模型;⑥与椎弓根螺钉固定相比,在L_(5)-S_(1)节段该新型装置的应力值都较小;⑦结果表明,与椎弓根螺钉固定相比,该新型装置通过对脊柱小关节进行融合,对腰椎的生物力学产生了一定的影响;在保留手术节段活动度的同时提供了一定的稳定性,同时也减少了手术节段及邻近节段椎间盘的应力值,从而对延缓椎间盘的退变有促进作用,进而表明该新型装置在理论上能够达到与椎弓根螺钉固定相类似的生物力学效果。

关键词：腰椎关节突关节椎弓根螺钉融合有限元分析脊柱生物力学固定

沙库巴曲缬沙坦防治肿瘤治疗相关心功能不全的效果分析

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中国肿瘤临床 2024年第4期51卷 186-191页

作者：林艺婷韩晴郭小博张红梅空军军医大学基础医学院学员四大队西安市710032 空军军医大学基础医学院学员六大队空军军医大学西京医院肿瘤科

目的:探讨沙库巴曲缬沙坦治疗肿瘤治疗相关心功能不全(cancer therapy-related cardiac dysfunction,CTRCD)的疗效。方法:汇总分析自建库至2023年3月发表于Pubmed、Web of Science、Cochrane Library、Medline、Embase五大数据库的沙库巴曲缬沙坦治疗CTRCD的所有文献,归纳总结用药时机、剂量、药物疗效等;梳理总结其预防CTRCD的临床研究。结果:使用沙库巴曲缬沙坦治疗CTRCD 3~12个月后,肿瘤患者NYHA心功能从Ⅱ~Ⅳ级改善为Ⅰ~Ⅱ级,LVEF上升幅度为3.0%~37.0%,NTproBNP下降幅度为280.0~65498.0 pg/mL。结论:沙库巴曲缬沙坦治疗CTRCD有效,在改善患者LVEF、GLS等指标方面具有较好的临床应用价值,使肿瘤患者抗肿瘤治疗得以继续、生存期得以延长。

关键词：沙库巴曲缬沙坦肿瘤治疗相关心功能不全心力衰竭肿瘤心脏病学

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线粒体融合在阿霉素诱导心脏毒性中的作用

基础医学与临床 2025年第1期45卷 126-129页

作者：王钰淇王心雨罗皓文逯照鑫赵艺玮常盼西安医学院第二临床医学院麻醉系陕西西安710038 空军军医大学基础部生理与病理生理教研室陕西西安710000

阿霉素是一种广泛使用的抗肿瘤药物。靶向线粒体融合蛋白/丝裂素1/2(MFN1/2)及核转录因子红系2相关因子2(NRF2)可通过PKCε/Stat3/MFN2、SIRT1/MFN2、AMPK/NRF2等信号通路,上调线粒体融合蛋白表达,促进线粒体融合,维持动力学平衡进而保... 详细信息

阿霉素是一种广泛使用的抗肿瘤药物。靶向线粒体融合蛋白/丝裂素1/2(MFN1/2)及核转录因子红系2相关因子2(NRF2)可通过PKCε/Stat3/MFN2、SIRT1/MFN2、AMPK/NRF2等信号通路,上调线粒体融合蛋白表达,促进线粒体融合,维持动力学平衡进而保障线粒体功能,起到减少心肌细胞凋亡,减轻心脏毒性的作用。了解阿霉素性心脏毒性中线粒体融合的调节作用和机制将为疾病的防治提供新策略。

关键词：阿霉素线粒体融合心脏毒性丝裂素1/2(MFN1/2) 核转录因子红系2相关因子2(NRF2)

有机小分子探针对过氧亚硝酸根离子的荧光检测响应机理的研究进展

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分析化学 2024年第2期52卷 166-177页

作者：陈佳鑫田秦秦何炜空军军医大学基础医学院学员五大队二十队空军军医大学药学系化学制药学教研室

过氧亚硝酸根离子（ONOO-）是非常活跃的活性氧（ROS）和活性氮（RNS）物种，因具有高氧化性和强硝化性而备受关注。ONOO-作为一种重要的生理活性分子，其在体内的水平异常会损害细胞中的蛋白质和DNA，从而导致生物体内炎症和其它严重... 详细信息

过氧亚硝酸根离子（ONOO-）是非常活跃的活性氧（ROS）和活性氮（RNS）物种，因具有高氧化性和强硝化性而备受关注。ONOO-作为一种重要的生理活性分子，其在体内的水平异常会损害细胞中的蛋白质和DNA，从而导致生物体内炎症和其它严重疾病的发生。近年来，研究者利用荧光检测技术实现了对生物活性分子的快速且灵敏的监测，并借助成像工具进行了高分辨率示踪，其中开发了许多用于检测ONOO-的有机小分子荧光探针。本文评述了近年来基于分子内电荷转移（ICT）、光诱导电子转移（PET）、荧光共振能量转移（FRET）和激发态分子内电荷转移（ESIPT）等多种荧光响应机理构建的ONOO-荧光检测方法的最新研究进展。

关键词：过氧亚硝酸根离子荧光检测荧光响应机理评述