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Wnt/β-catenin信号通路在miR-21介导的非小细胞肺癌顺铂耐药性中的作用

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西安交通大学学报(医学版) 2025年

作者：郑传会林莉汪霞王乃刚南京医科大学第二附属医院病理科山东省立医院菏泽医院重症医学科

目的探究microRNA-21-5p（miR-21）在非小细胞肺癌顺铂（cisplatin，CDDP）耐药性中的作用和机制。方法通过RT-qPCR检测非小细胞肺癌患者癌组织和癌旁组织中miR-21的表达。用非小细胞肺癌细胞系H1299和H1975构建非小细胞肺癌CDDP耐药... 详细信息

目的探究microRNA-21-5p（miR-21）在非小细胞肺癌顺铂（cisplatin，CDDP）耐药性中的作用和机制。方法通过RT-qPCR检测非小细胞肺癌患者癌组织和癌旁组织中miR-21的表达。用非小细胞肺癌细胞系H1299和H1975构建非小细胞肺癌CDDP耐药细胞H1299/CR和H1975/CR，CCK-8检测各组细胞在CDDP处理时的细胞活性，流式细胞术分析细胞凋亡。双荧光素酶检测H1299细胞中miR-21与PTEN的作用关系，RT-qPCR检测miR-21表达，Western blotting检测PTEN和PTEN下游Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达。用H1299和H1299/CR构建荷瘤裸鼠模型，验证miR-21对非小细胞肺癌CDDP治疗敏感性的影响。结果非小细胞肺癌患者癌组织miR-21的表达显著高于癌旁组织（P<0.001）。与H1299和H1975细胞相比，耐药细胞H1299/CR和H1975/CR中miR-21表达显著升高（P<0.05）。H1299/CR和H1975/CR细胞经过inhibitor转染后用不同浓度的CDDP处理，CCK-8检测显示，CDDP≥12 μmol/L时，与inhibitor NC组相比，miR-21 inhibitor组细胞活性显著降低（P<0.001）；流式细胞仪检测显示，与未处理组相比，CDDP组和miR-21 inhibitor组细胞凋亡率无显著变化，CDDP+miR-21 inhibitor组细胞凋亡率显著升高（P<0.001）。H1299和H1975细胞转染miR-21模拟分子（miR-21 mimic）后，用不同浓度的CDDP处理细胞时，CDDP≥12 μmol/L，与miR-21 mimic组相比，mimic-NC组的细胞活性显著降低（P<0.05）。Target scan网站预测显示miR-21与PTEN的3′-UTR区域结合。双荧光素酶检测表明miR-21和PTEN的蛋白表达存在靶向调控关系。PTEN过表达（PTEN-OE）与miR-21 mimic共转染H1299细胞，Western blotting检测显示，与mimic-NC组相比，miR-21 mimic组PTEN表达降低，p-β-catenin（Ser552 、Ser675）和β-catenin表达升高；与miR-21 mimic组相比，miR-21 mimic+H1299/PTEN组PTEN表达升高，p-β-catenin（Ser552、Ser675）和β-catenin水平降低。流式细胞术检测结果显示，mimic-NC组细胞经过CDDP处理后细胞凋亡率显著升高（P<0.05）。使用H1299构建的荷瘤裸鼠模型，对模型鼠进行miR-21 mimic和CDDP注射治疗，计算不同时间肿瘤大小，结果显示，在治疗5 d后，对照+CDDP组肿瘤生长缓慢，各时间点肿瘤小于对照组；miR-21+CDDP组各时间点肿瘤大于对照+CDDP组。TUNEL免疫荧光检测显示，对照+CDDP组肿瘤组织细胞凋亡较对照组增加；miR-21+CDDP组肿瘤组织细胞凋亡较对照+CDDP组降低。在H1299/CR构建的荷瘤裸鼠模型中，治疗5 d后，H1299/CR/CDDP组的肿瘤小于H1299/C组，H1299/CR/CDDP +inhibitor组肿瘤小于H1299/CR/CDDP组；TUNEL免疫荧光检测显示，与H1299/CR组相比，H1299/CR/CDDP组肿瘤组织细胞凋亡增加，与H1299/CR/CDDP组相比，H1299/CR/CDDP +inhibitor组肿瘤组织细胞凋亡进一步增加。结论在非小细胞肺癌中，miR-21过表达抑制PTEN表达，激活Wnt/β-catenin通路参与非小细胞肺癌CDDP耐药性的发生，抑制肿瘤细胞miR-21表达将增强肿瘤细胞对CDDP的敏感性。

关键词： miR-21 非小细胞肺癌顺铂顺铂耐药性 PTEN Wnt/β-catenin通路

基于干性指数模型对肉瘤预后、免疫浸润和铁死亡调控的分析

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中国组织工程研究 2025年第19期29卷 4151-4160页

作者：魏婧娴孟莲孙皓张田田刘春霞石河子大学医学院病理学系/石河子大学第一附属医院病理科新疆维吾尔自治区石河子市832000 广州医科大学附属第二医院病理科广东省广州市510260

背景:干性指数可能与肉瘤预后、免疫浸润有关,但具体调控机制与特征基因尚不清楚。目的:利用基因干性指数模型探究肉瘤干细胞与患者预后和免疫浸润的关系,并识别肉瘤干细胞铁死亡特征基因。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)中获取肉瘤RNA测... 详细信息

背景:干性指数可能与肉瘤预后、免疫浸润有关,但具体调控机制与特征基因尚不清楚。目的:利用基因干性指数模型探究肉瘤干细胞与患者预后和免疫浸润的关系,并识别肉瘤干细胞铁死亡特征基因。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)中获取肉瘤RNA测序数据及相关临床信息。利用肉瘤干性指数,对获取的肉瘤RNA测序数据进行分组。利用生存数据进行组间预后情况分析,获取组间差异表达基因后进行通路富集和免疫浸润分析。获得铁死亡相关差异基因,构建蛋白互作网络并进行预后相关性分析。培养横纹肌肉瘤细胞系,分为贴壁细胞组和干细胞组,贴壁细胞组不予任何干预,干细胞组通过无血清培养处理以诱导横纹肌肉瘤干细胞富集,qRT-PCR验证干细胞相关标志物、铁死亡相关差异基因以及铁死亡相关标志物的mRNA表达。结果与结论:①以干性指数中位数为界将患者分成高干性指数组和低干性指数组,通过患病风险预测显示高干性指数组患者的无进展生存期低于低干性指数组,提示预后不佳;②GO、KEGG分析显示肉瘤高、低干性指数组差异表达基因参与不同的细胞通路;高干性指数组和低干性指数组之间免疫浸润存在差异;差异基因中有23个铁死亡相关基因,其中9个可构成相关性较强的蛋白互作网络,其中IDO1、IFNG、AQP5高表达的肉瘤患者预后更好,CA9高表达的肉瘤患者预后不佳;③qRT-PCR结果显示,与贴壁细胞组相比,干细胞组干细胞相关标志物NANOG、SOX2和OCT4 mRNA表达显著升高(P<0.05);与贴壁细胞组相比,干细胞组铁死亡相关标志物SLC7A11的mRNA表达显著降低(P<0.05),ACSL4、GPX4、FTH1和COX2的mRNA表达显著升高(P<0.05);与贴壁细胞组相比,干细胞组差异基因CA9的mRNA表达显著降低,IDO1、IFNG、AQP5的mRNA表达显著升高(P<0.05)。经上述生物信息学分析与实验验证,干细胞与肉瘤生存、铁死亡过程密切相关,CA9、IDO1、IFNG、AQP5在肉瘤干细胞中异常表达,可能成为肉瘤诊断标志物和治疗新靶点。

关键词：肉瘤干细胞干性指数铁死亡生存预后免疫浸润

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静脉期CT影像组学预测新辅助化疗用于局部进展期胃癌效果

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中国介入影像与治疗学 2025年

作者：韩晓梦刘顺利林吉征娄和南宋洪政王博宋瑶琳赵晓丹青岛大学附属医院放射科青岛大学附属医院病理科

目的　观察静脉期CT影像组学预测新辅助化疗（NACT）用于局部进展期胃癌（LAGC）效果的价值。方法　回顾性收集接受NACT的325例LAGC患者，以247例为训练集、78例为验证集。根据术后病理所示肿瘤退缩分级（TRG）评价NACT疗效。以单因素lo... 详细信息

目的　观察静脉期CT影像组学预测新辅助化疗（NACT）用于局部进展期胃癌（LAGC）效果的价值。方法　回顾性收集接受NACT的325例LAGC患者，以247例为训练集、78例为验证集。根据术后病理所示肿瘤退缩分级（TRG）评价NACT疗效。以单因素logistic回归分析并筛选临床指标，构建预测NACT治疗LAGC效果的临床模型。分别于NACT前、后增强静脉期CT中提取病灶影像组学特征，计算Delta影像组学特征（即NACT前、后影像组学特征差值与前者的比值）并筛选最佳者构建影像组学标签；筛选最优标签，以之联合临床模型构建联合模型。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，计算曲线下面积（AUC），评价各模型预测效能；以决策曲线分析（DCA）评估各模型临床价值。结果　训练集67例疗效显著、180例疗效不显著；验证集18例疗效显著、60例疗效不显著。LAGC Borrmann分型为NACT疗效的预测因素（P=0.031），以之构建的临床模型在训练集和验证集的AUC分别为0.577和0.520。基于NACT前、后及Delta影像组学特征分别筛选出19、14及17个最佳特征，以之建立的NACT前（Pre-Rad）、后（Post-Rad）及Delta（Delta-Rad）影像组学标签在训练集的AUC分别为0.672、0.796及0.789，在验证集分别为0.558、0.805及0.666，其中Post-Rad最佳；以之联合临床模型构建的联合模型在训练集和验证集的AUC分别为0.824和0.818，均高于临床模型（P均＜0.001）而与Post-Rad差异无统计学意义（P均＞0.05）；阈值为0.4～0.7时，联合模型临床净获益高于临床模型及Post-Rad。结论　静脉期CT影像组学可有效预测NACT治疗LAGC效果；联合临床特征可提高预测效能。

关键词：胃肿瘤体层摄影术,X线计算机新辅助化疗治疗转归影像组学

华支睾吸虫ESP刺激胆管上皮细胞产生IL-17A促进肝纤维化的机制研究

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中国病原生物学杂志 2025年第2期 190-194+200页

作者：刘桐彤朱浩王楠王新月胡凤爱曹璋高洪莲刘乃国柏雪莲滨州医学院附属医院医学研究中心滨州医学院附属医院病理科

目的探讨华支睾吸虫感染刺激胆管上皮细胞产生IL-17A激活HSC导致肝纤维化的机制。方法从流行区获取华支睾吸虫感染的患者血清，ELISA法检测IL-17A的表达。人工消化麦穗鱼，分离华支睾吸虫囊蚴，分别灌胃感染新西兰大白兔和BALB/c小鼠... 详细信息

目的探讨华支睾吸虫感染刺激胆管上皮细胞产生IL-17A激活HSC导致肝纤维化的机制。方法从流行区获取华支睾吸虫感染的患者血清，ELISA法检测IL-17A的表达。人工消化麦穗鱼，分离华支睾吸虫囊蚴，分别灌胃感染新西兰大白兔和BALB/c小鼠，无菌分离小鼠肝脏和血清。ELISA法、Western blot和免疫组化法检测小鼠血清和肝脏中IL-17A的表达；ESP刺激人胆管癌细胞RBE,分别应用qRT-PCR和Western blot检测RBE细胞IL-17A的表达。收集RBE细胞培养上清加入LX-2细胞培养体系，qRT-PCR和Western blot检测LX-2细胞的α-SMA和Collagen-I的表达。结果华支睾吸虫感染患者血清IL-17A水平显著高于健康体检者(t=6.536,P<0.01)。被感染的小鼠血清和肝脏中IL-17A的表达水平显著高于正常对照组(t=12.98,P<0.01;t=4.155,P<0.05)。免疫组化结果显示，感染小鼠的肝胆管上皮中IL-17A表达量增多(t=10.80,P<0.01)。ESP刺激后，RBE细胞的IL-17A表达水平显著升高(均P<0.01)。RBE细胞培养上清加入LX-2细胞培养体系后，α-SMA和Collagen-I的表达水平显著高于对照组(均P<0.01)。结论华支睾吸虫可以刺激胆管上皮细胞产生IL-17A,进一步促进炎症并激活HSC产生胶原沉积，从而促进肝纤维化的进展。

关键词：华支睾吸虫分泌代谢产物白介素17A 肝纤维化

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甲状腺内胸腺癌1例

临床耳鼻咽喉头颈外科杂志 2025年第01期 87-90页

作者：赖小龙许贞菊吴策王小雅周学燕邱杰青岛大学附属医院耳鼻咽喉头颈外科青岛大学附属医院病理科

甲状腺内胸腺癌(intrathyroid thymic carcinoma, ITTC)是一种罕见的甲状腺肿瘤，缺乏典型的临床表现及影像学特征，术前诊断较为困难，根治性手术治疗是其首选的治疗方式，术后是否辅以放化疗，尚无明确结论。本文报道1例ITTC患者，分... 详细信息

甲状腺内胸腺癌(intrathyroid thymic carcinoma, ITTC)是一种罕见的甲状腺肿瘤，缺乏典型的临床表现及影像学特征，术前诊断较为困难，根治性手术治疗是其首选的治疗方式，术后是否辅以放化疗，尚无明确结论。本文报道1例ITTC患者，分析该病例临床资料并结合相关文献，探讨ITTC的临床表现、诊疗及预后。

关键词：甲状腺内胸腺癌甲状腺显示胸腺样分化癌甲状腺

中性粒细胞胞外诱捕网在胶质瘤发展及预后中的研究进展

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现代肿瘤医学 2025年第1期 158-164页

作者：杨飞孙皓刘春霞广州医科大学附属第二医院病理科石河子大学医学院病理学系

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)是中性粒细胞在各种刺激因子的作用下向胞外释放的一种纤维网状结构，NETs的形成过程又被称为中性粒细胞炎性凋亡(neutrophil inflammatory apoptosis, NETosis)。近年研究... 详细信息

中性粒细胞胞外诱捕网(neutrophil extracellular traps, NETs)是中性粒细胞在各种刺激因子的作用下向胞外释放的一种纤维网状结构，NETs的形成过程又被称为中性粒细胞炎性凋亡(neutrophil inflammatory apoptosis, NETosis)。近年研究发现，在肿瘤患者体内和动物模型中都存在NETs现象。NETs除了参与机体疾病的发展过程外，还参与肿瘤的增殖、转移、预后等。目前研究显示，NETs在胶质瘤进展过程中也发挥重要作用。该文就NETs的形成、功能、在肿瘤中发挥的作用及其在胶质瘤发展及预后中的研究进展作一综述。

关键词：胶质瘤胶质母细胞瘤中性粒细胞中性粒细胞胞外诱捕网

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外伤性脑出血患者术后感染病原菌分布特点及血清PCT和SAA变化的意义

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中国实用神经疾病杂志 2025年第1期28卷 28-32页

作者：刘红娜陈兴河华红果王娜吴丹秦皇岛市第一医院河北秦皇岛066000

目的分析外伤性脑出血(ICH)患者术后感染病原菌分布特点及血清降钙素原(PCT)和淀粉样蛋白A(SAA)变化的意义。方法回顾性选取2020-05—2023-05秦皇岛市第一医院收治的122例外伤性ICH患者,根据术后是否发生感染分为感染组(42例)和未感染组... 详细信息

目的分析外伤性脑出血(ICH)患者术后感染病原菌分布特点及血清降钙素原(PCT)和淀粉样蛋白A(SAA)变化的意义。方法回顾性选取2020-05—2023-05秦皇岛市第一医院收治的122例外伤性ICH患者,根据术后是否发生感染分为感染组(42例)和未感染组(80例),分析感染分布特征以及病原菌分布,采用酶联免疫吸附试验检测2组患者的血清PCT和SAA水平,ROC曲线评价血清PCT和SAA水平预测外伤性ICH术后发生感染的效能。结果42例外伤性ICH患者术后感染部位以呼吸道为主,占比54.76%,其次为颅内和胃肠道,占比分别为19.05%、14.29%。感染部位共分离出65株病原菌,其中革兰阴性菌占52.31%,以肺炎克雷伯菌(16.91%)和铜绿假单胞菌(12.31%)为主;革兰阳性菌占44.61%,以D型溶血性链球菌(13.84%)为主;真菌占3.08%,主要为白假丝酵母菌(3.08%)。ROC曲线分析显示,血清PCT和SAA及联合预测术后感染的曲线下面积分别为0.813、0.780、0.885(P<0.05)。血清PCT和SAA联合检测预测术后感染的灵敏度80.36%,特异度85.26%。结论外伤性ICH患者术后感染病原菌以革兰阴性菌(肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌)和革兰阳性菌(D型溶血性链球菌)为主,血清PCT联合SAA检测对外伤性ICH患者术后发生感染有较好的预测价值。

关键词：外伤性脑出血术后感染降钙素原淀粉样蛋白A 血清预测价值

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EGR1在前列腺癌组织中的表达及临床意义

现代肿瘤医学 2025年第1期 85-89页

作者：燕德伦沈靖巩幼洁马志厚朱娅男余娜华浩铭黄岩王红群蚌埠医科大学附属蚌埠市第三人民医院外科蚌埠医科大学附属蚌埠市第三人民医院病理科蚌埠市第二人民医院病理科蚌埠市中医院病理科

目的:探讨早期生长应答因子1(early growth response gene 1,EGR1)在前列腺癌组织中的表达及意义。方法:使用免疫组化方法检测EGR1在前列腺癌组织中的表达情况，显微镜下观察，并统计分析。结果:EGR1在前列腺癌中的阳性率30.7%(23/75),... 详细信息

目的:探讨早期生长应答因子1(early growth response gene 1,EGR1)在前列腺癌组织中的表达及意义。方法:使用免疫组化方法检测EGR1在前列腺癌组织中的表达情况，显微镜下观察，并统计分析。结果:EGR1在前列腺癌中的阳性率30.7%(23/75),其表达与AR呈负相关，也观察到在部分凋亡细胞中表达。EGR1在正常组织的表达低于前列腺癌组织(P<0.05),部分腺泡/导管的基底细胞阳性，在部分间质纤维细胞中阳性。结论:EGR1可能与前列腺癌的发生发展及凋亡相关。EGR1可能与基底细胞发育及纤维细胞的生长有关。

关键词：前列腺癌 EGR1 AR 基底细胞分化

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新型超声快速处理活检标本保存不同年限对DNA质量的影响

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2655-2660页

作者：石晨曦朱卫东李三恩李秀明师逢丁亚云苏州大学附属第一医院病理科江苏省苏州市215000 苏州市立医院本部皮肤科江苏省苏州市215000

背景:新型超声组织处理技术越来越多地被用来进行分子生物学分析,研究新型超声处理不同存储年限组织DNA的质量,对进一步分子检测的标本质控具有重要意义。目的:探讨新型超声处理活检标本存储不同年限对DNA质量的影响,以期为分子检测探... 详细信息

背景:新型超声组织处理技术越来越多地被用来进行分子生物学分析,研究新型超声处理不同存储年限组织DNA的质量,对进一步分子检测的标本质控具有重要意义。目的:探讨新型超声处理活检标本存储不同年限对DNA质量的影响,以期为分子检测探索最佳的标本存储时间。方法:收集40例乳腺穿刺小活检组织,采用超声技术制作石蜡标本,按照存储年限分为4组:3-5年组及>5年组,每组10例,对石蜡标本进行切片,每张切片厚3μm,切片10-15张,提取DNA后通过Nanophotometer N60超微量分光光度计和Qubit 4.0荧光计检测DNA的质量浓度,记录A_(260)/A_(280)比值判定DNA的纯度,利用全自动毛细管电泳核酸分析仪(Qsep 100)检测DNA片段完整性,以评估DNA片段的质量。结果与结论:4组样本A_(260)/A_(280)均值在1.8-2.0之间,达到纯度要求,无明显差异。4组样本的DNA质量浓度(Qubit浓度)均值分别为30.39,14.33,2.52,1.95 ng/μL;DNA的平均N/Q比值分别为6.48,14.18,24.56,29.86;DNA质量数均值分别为5.64,1.76,1.24,0.80;大片段占比均值分别为56.08%,17.72%,12.68%,7.90%。PCR检测内控基因Ct均值分别为15.32,17.09,18.39,21.24。与二代测序等检测要求,5年内样本仅可尝试进行PCR等检测,存储超过5年的样本不建议进行后续分子检测。

关键词：超声处理存储年限 DNA质量片段完整性降解程度二代测序

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