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基于FAK/PI3K/Akt/mTOR信号通路探讨五倍子鞣质乳膏促进大鼠的皮肤伤口愈合作用机制

中国中药杂志 2025年第2期50卷 480-495页

作者：易文颜紫依石孟琼张颖刘杰易倩唐海明刘义稳三峡大学第一临床医学院宜昌市中心人民医院湖北宜昌443000 三峡大学基础医学院肿瘤微环境与免疫治疗湖北省重点实验室湖北宜昌443002 三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室药食同源大健康产品开发利用宜昌市重点实验室湖北宜昌443002 湖北恒安芙林药业股份有限公司湖北宜昌443199 五峰赤诚生物科技股份有限公司湖北宜昌443413

研究五倍子鞣质乳膏(tannins from Galla chinensis cream,TGCC)对大鼠鼠尾皮肤伤口的影响及作用机制。将雄性SD大鼠随机分为空白(control)组、模型(model)组、model+TGCC低剂量(每只50 mg)组、model+TGCC高剂量(每只100 mg)组和model+TGC+FAK抑制剂(Y15)乳膏(每只100 mg+10 mg)组,每组10只。在成功构建鼠尾皮肤损伤模型后,给药组在其创面分别涂抹相应的药物,control组和model组以同样方法分别涂抹与TGCC组相同量的乳膏基质,涂抹完成后在伤口周缘包扎无菌纱布。每天3次,连续28 d。记录在干预3、7、11、14、21、28 d创面愈合情况,计算伤口愈合率和愈合时间。末次给药次日收集大鼠血清与鼠尾皮肤伤口组织进行血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、肌酐(creatinine,CREA)、尿素、活性氧(reactive oxygen species,ROS)、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-4、IL-10、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α及鼠尾皮肤伤口组织中过氧化氢酶(catalase,CAT)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC)、血小板内皮细胞黏附分子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,CD31)、白细胞分化抗原34(leukocyte differentiation antigen 34,CD34)的活性检测,苏木精-伊红、Masson和天狼猩红染色观察鼠尾皮肤伤口组织组织形态学改变,计算表皮厚度、成纤维细胞数、血管数量、胶原纤维、Ⅰ型胶原纤维(typeⅠcollagen,COLⅠ)、COLⅢ含量;实时荧光定量PCR法检测皮肤伤口组织中角蛋白(keratin,KRT)10、KRT14、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor,FGF)、表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)、CD31、CD34、基质金属蛋白酶(matrix metallopeptidase,MMP)-2、MMP-9、COLⅠ、COLⅢ、连接蛋白(Desmin)、成纤维细胞特异蛋白1(fibroblast specific protein 1,FSP1)、IFN-γ、IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10 mRNA表达,Western blot法测定鼠尾皮肤伤口组织中KRT10、KRT14、VEGF、FGF、EGF、MMP-2、MMP-9、COLⅠ、COLⅢ、Desmin、FSP1、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)、磷酸化黏着斑激酶(phosphorylated focal adhesion kinase,p-FAK)、磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylin-ositol-3-kinase,PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达。结果显示,TGCC可显著提高大鼠鼠尾创面愈合速率,缩短创面愈合时间,降低皮肤损伤大鼠血清中ROS和皮肤伤口组织中MDA、MPO、LDH水平及血清IFN-γ、IL-1β、IL-6、TNF-α含量和皮肤伤口组织中IFN-γ、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA表达水平,升高伤口组织中CAT、GSH、SOD、T-AOC活性和血清中IL-4、IL-10水平及伤口组织中IL-4、IL-10 mRNA表达;抑制炎性细胞浸润,增加表皮厚度、成纤维细胞数、血管数和胶原纤维、COLⅠ、COLⅢ含量,升高伤口组织中表皮分化标志物(KRT10和KRT14)、内皮细胞标志物(CD31和

关键词：五倍子鞣质乳膏氧化损伤炎症反应黏着斑激酶/磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白信号通路

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RNA干扰抑制HepG_2-N10细胞系中HBV基因表达及复制

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世界华人消化杂志 2006年第12期14卷 1172-1177页

作者：潘金水任建林程通董菁黄松洁施华秀厦门大学附属中山医院消化内科福建省厦门市361004 福建省分子医学病毒研究中心厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建省厦门市361004 厦门大学附属中山医院厦门市临床检验中心福建省厦门市361004

目的:评估以U6启动子作为启动序列(pSilencer2.0-U6)载体介导的小RNA干扰片段在培养细胞株中抑制HBV复制的效应.方法:将针对HBV基因组不同区域(S,X及C区)的核苷酸序列插入至pSilencer载体中,并将重组后的pSilencer质粒(分别为pS,pX及pC... 详细信息

目的:评估以U6启动子作为启动序列(pSilencer2.0-U6)载体介导的小RNA干扰片段在培养细胞株中抑制HBV复制的效应.方法:将针对HBV基因组不同区域(S,X及C区)的核苷酸序列插入至pSilencer载体中,并将重组后的pSilencer质粒(分别为pS,pX及pC)载体转染入HepG2-N10细胞株(可稳定表达HBsAg、HBeAg及adw2亚型Dane颗粒)中.以ELISA法检测病毒抗原,以逆转录-聚合酶链反应法(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)检测病毒mRNA,并以荧光定量PCR法检测分泌入培养基的共价闭合环状DNA(covalentclosedcircularDNA,cccDNA).结果:质粒载体介导的RNA干扰能明显抑制培养基中HBsAg及HBeAg的表达.并且RT-PCR法检测显示病毒mRNA也被降解了,从而减少了蛋白表达及病毒逆转录复制的模板.荧光定量PCR法检测显示分泌入培养基的cccDNAs明显下降(HBVDNAlog10:pS:4.00±0.13;pC:4.08±0.10;pX:4.28±0.06;pN:5.05±0.07;HepG2-N10:4.74±0.06;HepG2:病毒复制,并且RNA干扰可能为HBV的治疗带来巨大的变化.

关键词：乙肝病毒 RNA干扰病毒复制

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H5N1禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂对不同现场标本的检测比较

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病毒学报 2007年第2期23卷 91-95页

作者：陈毅歆罗海峰徐飞海葛胜祥陈自敏郭永利王嘉罗文新吴婷张军陈鸿霖管轶夏宁邵厦门大学国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建省医学分子病毒学研究中心厦门361005 汕头大学医学院汕港联合流感中心汕头515031

利用H5亚型禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂“H5-HA（Ag）Dot-ELISA（H5-Dot）”对来自陆禽、水禽的484份气管拭子、泄殖腔拭子和粪便拭子标本进行检测，结果：①不同采集方式的H5N1阳性标本的检出率高低有别，气管拭子的检出率最高... 详细信息

利用H5亚型禽流感病毒血凝素抗原快速检测试剂“H5-HA（Ag）Dot-ELISA（H5-Dot）”对来自陆禽、水禽的484份气管拭子、泄殖腔拭子和粪便拭子标本进行检测，结果：①不同采集方式的H5N1阳性标本的检出率高低有别，气管拭子的检出率最高，泄殖腔拭子次之，粪便拭子最低（P〈0．05），因此建议现场采样时应尽可能采集气管拭子标本；②陆禽标本检出率显著高于水禽标本（P〈0．05），对病毒培养阳性的陆禽气管拭子检出率达80％（95％CI：70．6％～87．8％），对水禽气管拭子标本的检出率为38％（95％CI：26．9％～49．4％），可能与标本中病毒滴度高低有关；③有症状与无症状陆禽标本的检出率无显著差异。另外，H5-Dot试剂对333份非H5病毒气管拭子标本的特异性为99．4％（95％CI：97．9％～99．9％）。这些结果表明，H5-Dot是一种较为可靠的H5亚型禽流感病毒早期快速检测方法，在缺乏仪器设施和高素质专业技术人员的H5N1禽流感病毒防控第一线具有重要推广价值。

关键词：禽流感病毒 H5N1 血凝素抗原快速检测拭子宿主

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虫草属真菌经植物环节“宿主跳跃”的初步研究

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厦门大学学报（自然科学版） 2010年第5期49卷 717-720页

作者：林筱王增福黄耀坚钱晓鸣厦门大学生命科学学院厦门大学医学院福建厦门361005 细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室(厦门大学)

从酿酒葡萄(Vitis vinifera L.)和番荔枝(Annona squamosa L.)中分离并鉴定两株植物内生来源的虫草属真菌和一株拟青霉,并就已知昆虫、块菌来源的虫草属真菌ITS分子序列建立了在不同宿主体内的虫草属真菌系统发育树,重现了其物种在协同... 详细信息

从酿酒葡萄(Vitis vinifera L.)和番荔枝(Annona squamosa L.)中分离并鉴定两株植物内生来源的虫草属真菌和一株拟青霉,并就已知昆虫、块菌来源的虫草属真菌ITS分子序列建立了在不同宿主体内的虫草属真菌系统发育树,重现了其物种在协同进化历程中在不同宿主体内发育的现象.发现虫草属真菌在进化过程中除了昆虫与块菌外可能还经由植物的"宿主跳跃"环节.

关键词：内生真菌虫草属真菌宿主跳跃

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基于人DNA甲基化的宫颈癌及癌前病变机器学习预测模型构建与初步验证

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中华肿瘤杂志 2025年第2期47卷 193-200页

作者：杨源周航王亚坤戴钰皮若及章华黄紫玥吴婷杨敬红陈汶厦门大学公共卫生学院、国家传染病诊断试剂与疫苗工程技术研究中心厦门361102 国家癌症中心、国家肿瘤临床医学研究中心、中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院流行病学研究室北京100021 首都医科大学附属北京中医医院疾控处北京100010 绵阳市妇幼保健院妇幼健康管理科绵阳621000

目的利用人基因的甲基化特征,构建预测宫颈癌及癌前病变的机器学习预测模型。方法对2014年4月至2015年3月来自中国医学科学院肿瘤医院、天津市中心妇产科医院、河南省新密妇幼保健院、四川大学华西第二附属医院和山西长治医学院附属和... 详细信息

目的利用人基因的甲基化特征,构建预测宫颈癌及癌前病变的机器学习预测模型。方法对2014年4月至2015年3月来自中国医学科学院肿瘤医院、天津市中心妇产科医院、河南省新密妇幼保健院、四川大学华西第二附属医院和山西长治医学院附属和平医院的224例宫颈脱落细胞标本进行人DNA甲基化检测,通过CpG高密度、高关联、高甲基化基因片段筛选和LASSO回归算法,筛选出与宫颈癌病变相关的高甲基化基因片段。以宫颈上皮内瘤变2级(CIN2)及以上病变为研究结局,以144例门诊患者标本为训练集,构建随机森林(RF)、朴素贝叶斯(NB)和支持向量机(SVM)3种机器学习预测模型,以80例参与宫颈癌筛查项目女性的宫颈脱落细胞标本为验证集对预测模型进行验证。以组织学诊断结果为金标准,比较3种机器学习预测模型与HPV检测和细胞学诊断对CIN2及以上病变的检出效能。结果训练集144例中,HPV阳性34例,阳性率为23.61%。细胞学诊断为无上皮内病变或恶性细胞(NILM)37例,不能明确意义的非典型鳞状上皮细胞(ASC-US)及以上病变107例。组织学诊断为未见宫颈上皮内病变或宫颈良性病变28例,CIN131例,CIN218例,CIN331例,鳞癌36例。从45个基因中筛选出7个高甲基化基因片段,构建了RF、NB和SVM机器学习预测模型。验证集80例中,HPV阳性28例,阳性率为35.00%。细胞学诊断为NILM 65例,ASC-US及以上病变15例。组织学诊断为未见宫颈上皮内病变或宫颈良性病变39例,CIN110例,CIN210例,CIN311例,鳞癌10例。在验证集中,RF模型、NB模型、SVM模型、HPV检测和细胞学诊断CIN2及以上病变的受试者工作特征曲线下面积(AUC)分别为0.90、0.88、0.82、0.68和0.45。DeLong检验显示,RF模型、NB模型和SVM模型的AUC差异无统计学意义(两两比较均P>0.05),RF模型、NB模型的AUC高于HPV检测(均P细胞学诊断(均P学习预测模型中,NB模型对CIN2及以上病变的预测效能良好,或可用于女性的宫颈癌及癌前病变筛查。

关键词：子宫颈肿瘤甲基化甲基化单倍型负荷机器学习朴素贝叶斯模型

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一个包含HCVIRES的高效真核双顺反子表达载体的构建

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中国人兽共患病杂志 2005年第9期21卷 783-787,832页

作者：欧山海吴婷何水珍伍小路郑舟张军夏宁邵厦门大学福建省医学分子病毒学研究中心厦门361005

In this paper, a new eukaryotic bi-cistronic expression vector containing Hepatitis C Virus(HCV) internal ribosome entry site (IRES) expressing two foreign genes from one mRNA was constructed. The sequence starting from the 5’ untranslated region of 18nt to 32nt in HCV core coding region was cloned and then the encephalomyocarditis virus (ECMV) IRES sequence in the commercial vector pIRES was substituted to construct a new vector pCVIR. Green fluorescent protein (GFP) and Hepatitis B virus surface antigen (HBsAg) coding genes were inserted up-stream and down-stream of IRES sequence. The fluorescence intensity of GFP and HBsAg were determined by flow cytometry and ELISA respectively., thus, the expression efficiency of the two vectors, pCVIR and pIRES could be compared. The experimental results showed that the vector pCVIR could translate the GFP and HBsAg genes down-stream of its HCV IRES sequence more efficiently without impairing the expression of genes up-stream of IRES sequence than the vector *** is concluded that a new eukaryotic bi-cistronic expression vector containing HCV IRES was constructed successfully by the method described above.

关键词：丙型肝炎病毒内部核糖体进入位点真核表达载体双顺反子

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人乳头瘤病毒核酸检测方法及应用

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病毒学报 2025年第1期 245-256页

作者：陈子玉李慧莹张晓光李淑英华北理工大学基础医学院河北省慢性疾病基础医学重点实验室中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所

高危型人乳头瘤病毒（High-risk human papillomavirus,HR-HPV）持续感染可引起宫颈上皮内瘤样病变（Cervical intraepithelial neoplasia,CIN）和宫颈癌的发生。除细胞学检查外，HPV核酸检测是WHO推荐用于宫颈癌初筛的首选方法。HR-HP... 详细信息

高危型人乳头瘤病毒（High-risk human papillomavirus,HR-HPV）持续感染可引起宫颈上皮内瘤样病变（Cervical intraepithelial neoplasia,CIN）和宫颈癌的发生。除细胞学检查外，HPV核酸检测是WHO推荐用于宫颈癌初筛的首选方法。HR-HPV核酸检测的引入可以提高CIN2+的检出率和宫颈癌筛查方案的效率。本文旨在对目前HPV核酸检测方法进行归纳总结，为宫颈癌筛查计划提供参考。

关键词：人乳头瘤病毒宫颈癌分子检测

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基因Ⅰ、Ⅳ型戊型肝炎病毒高灵敏度通用引物的设计和初步应用

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病毒学报 2005年第3期21卷 181-187页

作者：葛胜祥郭清顺李少伟张军夏宁邵福建省医学分子病毒学研究中心厦门大学361005

设计针对国内流行的戊型肝炎病毒(HEV)基因Ⅰ、Ⅳ型,在这两型序列的保守区域设计了一套RT-PCR引物--E引物,并将E引物与目前较常用的3对通用引物(Meng、ConORF1和ConORF2引物)比较了检测基因Ⅰ、Ⅳ型HEV的灵敏度.对基因Ⅰ型HEV,E引物能... 详细信息

设计针对国内流行的戊型肝炎病毒(HEV)基因Ⅰ、Ⅳ型,在这两型序列的保守区域设计了一套RT-PCR引物--E引物,并将E引物与目前较常用的3对通用引物(Meng、ConORF1和ConORF2引物)比较了检测基因Ⅰ、Ⅳ型HEV的灵敏度.对基因Ⅰ型HEV,E引物能检出的稀释度为105,参考引物能检出的稀释度为102～104;对基因Ⅳ型HEV,E引物能检出的稀释度为102,参考引物能检出的稀释度为101～102.在17份HEV-IgM阳性血清中,E引物检出5份,检出率为29.4%;参考引物只能检出1份或2份,检出率最高为11.8%.E引物在33份HEV-IgM阳性的隐性感染血清中检出6份,阳性率18.2%;在79份HEV-IgM阳性的临床肝炎血清中检出36份,阳性率45.6%.以上结果初步表明,对于在国内流行的基因Ⅰ、Ⅳ型HEV,E引物的检测灵敏度要高于目前常用的通用引物.

关键词：戊型肝炎病毒基因Ⅰ型基因Ⅳ型聚合酶链反应通用引物设计 PCR

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ARMS实时PCR基因分型特异性的研究

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厦门大学学报（自然科学版） 2005年第B06期44卷 135-139页

作者：郑薇薇梁基选李庆阁厦门大学生命科学学院生物医学系细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室厦门大学医学院抗癌研究中心福建厦门361005

以原癌基因Kras基因12位密码子的4种基因型(野生型为GGT,突变型为AGT、TGT、CGT)质粒DNA为研究模型,采用SYBRGreenⅠ为实时PCR指示剂,进行ARMS实时PCR基因分型特异性的研究.结果表明:在和模板匹配的ARMS引物3′端附近引入故意错配碱基,... 详细信息

以原癌基因Kras基因12位密码子的4种基因型(野生型为GGT,突变型为AGT、TGT、CGT)质粒DNA为研究模型,采用SYBRGreenⅠ为实时PCR指示剂,进行ARMS实时PCR基因分型特异性的研究.结果表明:在和模板匹配的ARMS引物3′端附近引入故意错配碱基,将ARMS引物浓度稀释10倍,并对传统三步PCR循环进行改良,即根据目的产物和引物二聚体的熔点差异,在传统延伸步骤之后增加一步恒温80℃检测荧光步骤,可消除引物二聚体的影响,使ARMS引物的特异性增强,得到清晰的基因分型结果.实验表明这种基于SYBRGreenⅠ的ARMS实时PCR基因分型方法,无需合成探针,实验设计简单,是一种快速、简便、经济、特异性好的基因分型方法,可推广用于其他基因的分型,并可望成为应用于临床的基因诊断技术之一.

关键词：基因分型特异性 PCR 实时 Green 引物二聚体基因诊断技术 SYBR 分型方法 ras基因质粒DNA 原癌基因研究模型引物浓度模板匹配实验设计 GGT 野生型基因型密码子 12位 AGT 突变型 TGT 指示剂 R基因传统碱基错配

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急性肾损伤中巨噬细胞调控机制进展

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中国临床药理学与治疗学 2025年第1期30卷 110-117页

作者：段宇鑫张燕妮柏艺俞瑾瑶孙佳怡王泽洁李玲叶啟发武汉大学中南医院武汉大学肝胆疾病研究院武汉大学移植医学中心国家人体捐献器官获取质量控制中心移植医学技术湖北省重点实验室湖北武汉430071

急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是一种以肾排泄功能迅速下降为特征的综合征,其发病机制尚不明确。研究表明,巨噬细胞是AKI炎症反应的主要参与者,调控组织的损伤和再生修复。AKI炎症期间巨噬细胞可通过分子及信号通路活化为不同功... 详细信息

急性肾损伤(acute kidney injury,AKI)是一种以肾排泄功能迅速下降为特征的综合征,其发病机制尚不明确。研究表明,巨噬细胞是AKI炎症反应的主要参与者,调控组织的损伤和再生修复。AKI炎症期间巨噬细胞可通过分子及信号通路活化为不同功能表型,调控不同分子及信号通路,决定AKI的进展。本文综述了近五年来巨噬细胞活化及参与调控AKI的多种分子信号通路,确定巨噬细胞在AKI中的作用机制,为以巨噬细胞为治疗靶点的研究提供思路。

关键词：急性肾损伤巨噬细胞感应介质巨噬细胞衍生介质信号通路

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