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基于16S rRNA测序探讨穿山龙总皂苷对高尿酸血症大鼠的作用及机制

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中华中医药杂志 2024年第1期39卷 163-167页

作者：刘树民卢意轩秀秀张楠修海南王天雨于栋华黑龙江中医药大学中医药研究院哈尔滨150040

目的:探讨穿山龙总皂苷对高尿酸血症大鼠肠道菌群的影响。方法:将63只大鼠随机分成空白组(n=10)和造模组(n=53),10%酵母饲料饲养和灌胃氧嗪酸钾溶液造模14 d,将成模大鼠随机分成模型组,穿山龙总皂苷低、中、高剂量组及别嘌醇组,各10只。... 详细信息

目的:探讨穿山龙总皂苷对高尿酸血症大鼠肠道菌群的影响。方法:将63只大鼠随机分成空白组(n=10)和造模组(n=53),10%酵母饲料饲养和灌胃氧嗪酸钾溶液造模14 d,将成模大鼠随机分成模型组,穿山龙总皂苷低、中、高剂量组及别嘌醇组,各10只。第15天开始给药,持续2周。采用全自动化生化仪分析检测血尿酸、肌酐、尿素氮的含量,进一步采用16S rRNA测序检测肠道菌群变化。结果:各给药组均能显著降低尿酸水平(P<0.01),其中穿山龙总皂苷高剂量组能降低尿素氮水平(P<0.05),调节肠道菌群物种丰度及均匀度,回调变形菌门丰度,减小拟杆菌门丰度,增加乳酸杆菌属、Ruminococcaceae_Ruminococcus丰度,降低拟杆菌属和Parabacteroides属丰度。结论:穿山龙总皂苷能够显著降低高尿酸血症大鼠尿酸水平,推测其作用机制可能与调控肠道菌群紊乱有关。

关键词：穿山龙总皂苷高尿酸血症肠道菌群 16S rRNA 尿酸

通督活血汤结合刺络放血治疗退行性腰椎管狭窄症临床效果及对患者腰椎功能影响观察

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中华中医药学刊 2024年

作者：熊雨墨李梓宸李瑛肖强兵王丽华胡昊丰瑞兵乔杰胡彦湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院针灸科洪湖市中医医院(湖北中医药大学附属洪湖中医医院)骨伤三科湖北省中医院/湖北中医药大学附属医院/湖北省中医药研究院骨伤诊疗中心湖北中医药大学针灸骨伤学院

目的观察通督活血汤结合刺络放血治疗退行性腰椎管狭窄症临床效果及对患者腰椎功能影响。方法将我院收治的90例退行性腰椎管狭窄症患者（2020年1月～2023年2月收治）纳入本次实验研究，将患者以随机数字表法分为中医组与对照组，各组45... 详细信息

目的观察通督活血汤结合刺络放血治疗退行性腰椎管狭窄症临床效果及对患者腰椎功能影响。方法将我院收治的90例退行性腰椎管狭窄症患者（2020年1月～2023年2月收治）纳入本次实验研究，将患者以随机数字表法分为中医组与对照组，各组45例，对照组患者西医治疗，中医组患者在对照组治疗基础上结合中医方案（通督活血汤结合刺络放血）治疗，治疗过程中对照组患者脱落1例，中医组患者脱落2例，观察各组数据：临床治疗效果、治疗前后患者中医症候总积分以及步行距离变化、日本骨科学会腰椎功能评分（JapaneseOrthopaedicAssociationScores)，JOA）及腰痛奥斯威斯指数量表（OswestryDisabilityIndex，ODI）评分变化、血清肿瘤坏子因子α（Tumournecrosisfactor-α，TNF-α）及白细胞介素-1α（Interleukin-1α，IL-1α）水平变化、血液流变学指标（血细胞比容、纤维蛋白原、血浆黏度、全血低切黏度以及全血高切黏度）变化、治疗不良反应。结果中医组患者治疗总有效率为95.35%，对照组患者治疗总有效率为81.82%，前者更高，P＜0.05；治疗前，各组患者中医症候总积分以及步行距离、JOA评分以及ODI评分、TNF-α水平及IL-1α水平、血液流变学指标（血细胞比容、纤维蛋白原、血浆黏度、全血低切黏度以及全血高切黏度）比较，P＞0.05，各组患者经治疗后中医症候总积分以及步行距离、JOA评分以及ODI评分、TNF-α水平及IL-1α水平、血液流变学指标（血细胞比容、纤维蛋白原、血浆黏度、全血低切黏度以及全血高切黏度）均明显改善，而中医组患者治疗后中医症候总积分以及步行距离、JOA评分以及ODI评分、TNF-α水平及IL-1α水平、血液流变学指标（血细胞比容、纤维蛋白原、血浆黏度、全血低切黏度以及全血高切黏度）均优于对照组，P＜0.05；中医组与对照组患者不良反应率分别为，均较低4.66%、2.27%，且症状轻微，P＞0.05。结论通督活血汤结合刺络放血治疗退行性腰椎管狭窄症临床效果显著，患者症状改善，恢复较好，腰椎功能改善，不良反应少，本次治疗安全、可行，值得应用。

关键词：退行性腰椎管狭窄症刺络放血通督活血汤治疗效果腰椎功能血液流变学

中医药通过调控内质网应激治疗肺纤维化的作用机制研究进展

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中药药理与临床 2024年

作者：孙梦迪张飞宇高鑫陈平平王宇刘树民黑龙江中医药大学黑龙江中医药大学中医药研究院

肺纤维化是一种以细胞外基质过度沉积为特征的慢性间质性肺疾病，起病隐匿，预后较差，平均生存期仅2-3年，目前仍缺乏有效治疗措施。肺纤维化的发病机制虽未完全阐明，但大量研究已证实，肺纤维化与内质网应激有关。内质网应激能够加... 详细信息

肺纤维化是一种以细胞外基质过度沉积为特征的慢性间质性肺疾病，起病隐匿，预后较差，平均生存期仅2-3年，目前仍缺乏有效治疗措施。肺纤维化的发病机制虽未完全阐明，但大量研究已证实，肺纤维化与内质网应激有关。内质网应激能够加剧肺泡上皮细胞的凋亡，促使上皮-间充质转化的发生，从而引起肺纤维化。因此，抑制内质网应激成为治疗肺纤维化新的研究方向。现代医学的药物开发仍然多局限于“单靶点-单分子药物”模式，对于肺纤维化这种病因复杂的疾病往往难以达到预期效果，而中药治疗肺纤维化具有多靶点、毒副作用小、无明显药物依赖性等优势，具有较大开发潜力。该文就内质网应激的三条通路及其导致肺纤维化的因素，以及中药的干预作用进行综述，阐述红景天、人参、丹参、沙苑子、小青龙汤、瓜蒌薤白汤等中药有效成分及复方调控内质网应激的作用机制，以期为中医药通过干预内质网应激治疗肺纤维化提供理论依据和研究方向。

关键词：肺纤维化内质网应激未折叠蛋白反应中药中药复方

整合生物信息学与实验验证解析黄芪-莪术药对抗肝癌配伍机制

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中草药 2024年第1期55卷 114-126页

作者：鲍宁陈子超刘名玉赵春芹李肖张振山东中医药大学中医药创新研究院山东济南250355 山东中医药大学药学院山东济南250355 山东中医药大学实验中心山东济南250355

目的整合生物信息学、网络药理学及分子对接技术预测黄芪-莪术药对抗肝癌配伍机制,并进行细胞实验验证。方法利用R软件包Limma分析GEO数据库中肝癌基因表达数据,筛选肝癌靶点;通过TCMSP数据库结合文献报道,筛选潜在活性成分;采用TCMSP、... 详细信息

目的整合生物信息学、网络药理学及分子对接技术预测黄芪-莪术药对抗肝癌配伍机制,并进行细胞实验验证。方法利用R软件包Limma分析GEO数据库中肝癌基因表达数据,筛选肝癌靶点;通过TCMSP数据库结合文献报道,筛选潜在活性成分;采用TCMSP、SEA和SwissTargetPrediction数据库进行成分靶点预测,筛选抗肝癌靶点;对靶点进行京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析;构建蛋白质-蛋白质相互作用网络、成分-靶点网络、关键成分-靶点-通路网络,并结合网络贡献指数,筛选关键肝癌靶点、关键抗肝癌成分及其靶点、核心抗肝癌成分及其靶点;使用Autodock Vina软件对核心成分与核心靶点进行分子对接;通过细胞实验,验证所预测成分抗肝癌活性及其作用机制。结果预测得到黄芪-莪术抗肝癌活性成分33个,抗肝癌靶点180个,关键肝癌靶点112个;筛选后得到关键成分29个,对应靶点15个;KEGG通路分析显示关键成分主要通过协同影响细胞周期、细胞衰老、p53信号通路等发挥配伍作用;进一步筛选得到核心成分6个(黄芪中黄芪皂苷Ⅱ、黄芪甲苷、芒柄花素,莪术中莪术醇、姜黄素、双去甲氧基姜黄素),对应靶点5个[细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclin-dependent kinase 1,CDK1)、DNA拓扑异构酶2A(topoisomerase 2A,TOP2A)、极光激酶B(aurora B,AURKB)、检查点蛋白激酶1(check point kinase 1,CHEK1)、AURKA]。细胞实验结果显示,黄芪-莪术药对6个核心成分均对HepG2细胞增殖具有显著的抑制作用(P<0.01),且黄芪皂苷Ⅱ与双去甲氧基姜黄素具有协同增效作用;黄芪皂苷Ⅱ与双去甲氧基姜黄素可通过下调细胞周期相关蛋白表达水平(P<0.05、0.01),进而阻滞细胞周期。结论黄芪-莪术药对的多种活性成分通过作用于相同或不同靶点抑制细胞周期、p53信号通路等相同或不同相关信号关通路,从而发挥协同配伍抗肝癌作用。

关键词：黄芪莪术肝癌配伍机制生物信息学网络药理学细胞周期黄芪皂苷Ⅱ 双去甲氧基姜黄素

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补阳还五汤抗动脉粥样硬化的作用机制

时珍国医国药 2024年第1期35卷 93-96页

作者：谢谢丁砚兵陈小敏湖北中医药大学湖北武汉430065 湖北省中医药研究院湖北武汉430065

目的探讨补阳还五汤抗动脉粥样硬化作用机制。方法将60只健康家兔随机分为正常对照组、模型组、立普妥组[5mg/(kg·d)]、补阳还五汤低、中、高剂量组[0.89g/(kg·d)、1.78g/(kg·d)、3.56g/(kg·d)],每组10只。造模成功后连续给药干... 详细信息

目的探讨补阳还五汤抗动脉粥样硬化作用机制。方法将60只健康家兔随机分为正常对照组、模型组、立普妥组[5mg/(kg·d)]、补阳还五汤低、中、高剂量组[0.89g/(kg·d)、1.78g/(kg·d)、3.56g/(kg·d)],每组10只。造模成功后连续给药干预并观察8周。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组颈动脉血管的结构变化;采用酶联免疫吸附测定法检测各组相关炎症因子及抗炎因子的水平变化;采用蛋白免疫印迹法检测各组相关炎症信号通路的蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组家兔血管壁组织结构明显紊乱,可见内皮细胞损伤及相关其它炎症反应;与模型对照组比较,各给药组动脉组织粥样硬化病理损伤均有不同程度改善;在炎症因子(IL-1β、TNF-α及MMP-9)表达方面,与正常对照组相比,模型对照组家兔的炎症因子表达量均有增加(P<0.05),而相关抗炎症因子IL-10、IL-4及TGF-β表达量呈下降水平(P<0.05);在与模型对照组相比较,阿托伐他汀组及补阳还五汤低剂量组、中剂量组和高剂量组中上述炎症因子的表达量都有降低(P<0.05),而相关抗炎因子的表达量显著增加(P<0.05);在炎症信号通路的检测中,与正常对照组相比较,NF-κB的蛋白表达量明显上升,而LXRα的蛋白表达量明显下降。与模型对照组相比较,阿托伐他汀组、补阳还五汤低剂量组、中剂量组和高剂量组中NF-κB的蛋白表达量明显降低,而LXRα的蛋白表达量都明显升高。结论补阳还五汤对家兔动脉粥样硬化具有一定抑制作用,其作用机制可能通过降低炎症因子IL-1β、TNF-α及MMP-9的表达从而抑制炎症反应,上调IL-10、IL-4及TGF-β等抗炎因子水平,并多环节调控LXRα/NF-κB信号通路保护动脉血管免受炎症损伤有关。

关键词：动脉粥样硬化炎症反应 LXRα/NF-κB信号通路补阳还五汤

基于性状-化学-活性的黑西洋参炮制过程分析

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中草药 2024年第19期55卷 6566-6576页

作者：杨紫琪徐梦丹张雪晶刘小康杨玉婷梁淑芸郭云龙蔡广知贡济宇长春中医药大学药学院长春中医药大学吉林省人参科学研究院

目的研究黑西洋参Panacis Quinquefolii Radix炮制过程中外观颜色和皂苷成分的变化，结合西洋参不同蒸烘样品的心脏保护活性，确定黑西洋参最佳蒸烘次数，为其炮制及质量评价提供参考。方法制备西洋参不同蒸烘次数样品，使用色差仪测... 详细信息

目的研究黑西洋参Panacis Quinquefolii Radix炮制过程中外观颜色和皂苷成分的变化，结合西洋参不同蒸烘样品的心脏保护活性，确定黑西洋参最佳蒸烘次数，为其炮制及质量评价提供参考。方法制备西洋参不同蒸烘次数样品，使用色差仪测定西洋参生晒及不同蒸烘样品的色度值；采用HPLC法建立西洋参生晒及不同蒸烘样品HPLC指纹图谱，测定样品中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、20（S）-Rg3、20（R）-Rg3、Rk1、Rg5和5-羟甲基糠醛（5-hydroxymethylfurfural,5-HMF）及苯并芘9种指标成分含量；参照《中国药典》2020年版方法测定醇浸出物；利用Origin 2022软件对上述成分含量与色度值进行相关性分析；运用聚类分析确定黑西洋参的炮制节点；并基于斑马鱼模型评价西洋参不同蒸烘次数样品的心脏保护活性，确定黑西洋参最佳蒸烘次数。结果黑西洋参炮制过程中，不同蒸烘次数所得样品粉末的色度L*、b*和Eab*值总体呈下降趋势，a*值呈先上升后下降趋势，ΔE*ab值呈上升趋势；人参皂苷Rg1、Re含量呈先上升后下降的趋势；人参皂苷Rb1含量在第2次蒸制后有所下降，随后呈先上升后下降的趋势；人参皂苷20（S）-Rg3、20（R）-Rg3、Rk1、Rg5和5-HMF含量前6次蒸烘过程呈上升趋势，第7次蒸烘后略有下降，随后再次上升；浸出物含量变化较为波动，主要呈下降趋势；西洋参蒸烘样品的色度L*、a*、b*、Eab*、ΔEab*值与人参皂苷Rg1、Re、Rb1、20（S）-Rg3、20（R）-Rg3、Rk1、Rg5和5-HMF 8种成分含量均具显著相关性（P研究黑西洋参炮制过程、筛选及验证工艺的新模式，色度结合人参皂苷Rg1、Re、Rb1、20（S）-Rg3、20（R）-Rg3、Rk1、Rg5含量测定可用于控制黑西洋参的质量。

关键词：西洋参黑西洋参性状-化学-活性心脏保护活性炮制过程颜色皂苷 HPLC 指纹图谱人参皂苷 5-羟甲基糠醛苯并芘

芒柄花素诱导肺癌细胞焦亡并抑制PD-L1介导的免疫逃逸

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药物评价研究 2024年第5期47卷 971-981页

作者：张振勇李肖李保宏邹艺璇刘君秋陈子超张振山东中医药大学中医药创新研究院山东济南250355 山东中医药大学实验中心山东济南250355

目的探究芒柄花素抑制非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞的作用机制。方法MTT法、细胞划痕和克隆形成实验考察芒柄花素(20~100μmol·L^(−1))对A549细胞增殖、迁移和克隆形成的抑制作用;A549细胞预孵育芒柄花素24 h后,使用Hoechst 33342细胞... 详细信息

目的探究芒柄花素抑制非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞的作用机制。方法MTT法、细胞划痕和克隆形成实验考察芒柄花素(20~100μmol·L^(−1))对A549细胞增殖、迁移和克隆形成的抑制作用;A549细胞预孵育芒柄花素24 h后,使用Hoechst 33342细胞核染色定位,加入经过Dil标记的Jurkat细胞(人T淋巴细胞白血病细胞)共培养30 min,使用激光共聚焦拍摄2种细胞的共定位图像;建立A549-Jurkat细胞共培养模型,MTT和结晶紫染色法检测芒柄花素对A549细胞活性的影响;试剂盒法检测A549细胞线粒体膜电位(JC-1染色)和谷胱甘肽(GSH)水平探究芒柄花素对线粒体应激的诱导作用;Western blotting法考察芒柄花素对A549细胞线粒体应激后非经典焦亡相关蛋白和PD-L1蛋白表达的影响。结果与对照组比较,芒柄花素显著抑制A549细胞的增殖、迁移和克隆形成能力(P<0.01、0.001),增强细胞共培养模型中T细胞的募集和杀伤作用(P<0.01、0.001);芒柄花素可诱导A549细胞线粒体应激,诱导线粒体膜电位下降,显著降低细胞GSH水平(P<0.05、0.01),显著上调bcl-2相关x蛋白(BAX)、裂解的半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)、穿孔素蛋白E(Gasdermin E)-N蛋白表达诱导细胞焦亡(P<0.01、0.001),同时显著下调p-磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、核因子κB(NF-κB)、细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)蛋白表达抑制免疫逃逸(P<0.05、0.001)。结论芒柄花素具有诱导NSCLC细胞焦亡并阻断免疫逃逸的作用,其机制为一方面可通过诱导A549细胞线粒体应激,促进细胞焦亡招募T细胞,增强肿瘤免疫;另一方面抑制p-PI3K/Akt/NF-κB信号轴,进而降低PD-L1蛋白表达,抑制A549细胞免疫逃逸。

关键词：芒柄花素非小细胞肺癌线粒体应激细胞焦亡细胞程序性死亡-配体1(PD-L1) 免疫逃逸

肠道菌群与肌肉减少症患者骨骼肌蛋白质代谢的研究进展

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中国微生态学杂志 2024年第6期36卷 742-744,F0003页

作者：向青胡悦柳维林福建中医药大学康复产业研究院福建福州350122 福建中医药大学康复医学院

近年来的研究认为肠道菌群可影响骨骼肌的质量和功能,并提出了“肠-肌轴”理论。随着世界人口老龄化的日趋严重,肌肉减少症越来越受到人们的关注,成为严重损害老年人健康的疾病之一。临床研究发现,肌肉减少症患者肠道菌群的多样性降低,... 详细信息

近年来的研究认为肠道菌群可影响骨骼肌的质量和功能,并提出了“肠-肌轴”理论。随着世界人口老龄化的日趋严重,肌肉减少症越来越受到人们的关注,成为严重损害老年人健康的疾病之一。临床研究发现,肌肉减少症患者肠道菌群的多样性降低,有益菌显著减少,有害菌大量增加。调节肠道菌群可改善肌肉减少症患者的骨骼肌质量和功能。肠道菌群代谢产物,如氨基酸、脂多糖和短链脂肪酸等对骨骼肌蛋白质的代谢具有调控作用,通过多种途径调节骨骼肌蛋白质的合成与分解。因此,本文对肌肉减少症患者肠道菌群的变化及其代谢产物对骨骼肌蛋白质的调控作用进行综述,以期为肌肉减少症的临床治疗提供新的思路。

关键词：肌肉减少症肠道菌群骨骼肌蛋白质代谢

基于代谢组学方法探讨芹菜素对高脂血症小鼠的肝脏保护作用及机制

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中药新药与临床药理 2024年第9期35卷 1344-1351页

作者：江洁怡汤瑞茵张靖年陈伟韬贾德政肖观林广东省中医药工程技术研究院广东省中医药研究开发重点实验室广东广州510095 广州中医药大学第五临床医学院广东广州510095

目的基于代谢组学方法探讨芹菜素对高脂血症小鼠的肝脏保护作用及机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、非诺贝特组(26.0 mg·kg^(-1))和芹菜素组(12.5 mg·kg^(-1)),每组6只,灌胃给药,每日1次,连续给药5 d。给药... 详细信息

目的基于代谢组学方法探讨芹菜素对高脂血症小鼠的肝脏保护作用及机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为4组,分别为正常组、模型组、非诺贝特组(26.0 mg·kg^(-1))和芹菜素组(12.5 mg·kg^(-1)),每组6只,灌胃给药,每日1次,连续给药5 d。给药第3天,采用单次肌肉注射0.12 g·mL^(-1)浓度的Triton WR-1339(5 mL·kg^(-1))诱导急性高脂血症小鼠模型。采用全自动酶标仪检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量;HE染色法观察肝脏组织病理变化。采用UPLC-Q-TOF-MS/MS分析小鼠肝脏组织样品,通过主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析筛选差异代谢物。将差异代谢物的质谱信息通过HMDB、METLIN以及KEGG等在线数据库结合相关文献鉴定出潜在差异代谢物。将已鉴定的潜在差异化合物导入MetaboAnalyst平台进行代谢通路分析。结果与正常组比较,模型组小鼠的血清TC、TG水平显著升高(P0.05);肝脏组织脂肪病变得到明显改善,脂肪空泡和炎性细胞浸润均明显减少。共筛选出35个潜在差异性标志物,芹菜素给药后有26个具有回调趋势。差异代谢物共影响了8条代谢通路,其中2条主要代谢通路(P<0.05)分别为泛酸盐和辅酶A(CoA)生物合成、花生四烯酸代谢。结论芹菜素对高脂血症小鼠具有一定肝脏保护作用,其作用机制可能与调控肝脏炎症反应及脂质代谢相关通路有关。

关键词：芹菜素高脂血症肝脏保护作用代谢组学炎症反应脂质代谢小鼠