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单细胞转录组测序技术在骨质疏松症研究中的应用与进展

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2812-2821页

作者：孙成涛孙广江戚晓楠程茗姚啸生辽宁中医药大学辽宁省沈阳市110847 辽宁中医药大学附属第二医院骨伤一科辽宁省沈阳市110034 辽宁中医药大学附属医院骨伤一科辽宁省沈阳市110032 中国医科大学沈阳市第四人民医院辽宁省沈阳市110031

背景:骨质疏松导致的脆性骨折发病率逐年上升,亟需探索其病理生理、潜在生物标志物、治疗靶点及有效药物。骨微环境中存在多种细胞,对骨代谢的维持至关重要。近几年,单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术被开发用于表征单个细胞的转录组,并逐... 详细信息

背景:骨质疏松导致的脆性骨折发病率逐年上升,亟需探索其病理生理、潜在生物标志物、治疗靶点及有效药物。骨微环境中存在多种细胞,对骨代谢的维持至关重要。近几年,单细胞RNA测序(scRNA-seq)技术被开发用于表征单个细胞的转录组,并逐步应用到骨质疏松症防治的研究。目的:综述单细胞转录组测序技术在骨质疏松症研究中的应用与进展。方法:由第一作者使用计算机检索Web of Science,PubMed和中国知网数据库中2009-2023年出版的文献,英文检索词为:“single-cell RNA sequencing,bone marrow derived stromal cells,osteoblasts,osteocytes,osteoclasts,immune cells,Bone marrow vascular endothelial cells”;中文检索词为:“单细胞转录组测序,骨髓间充质干细胞,成骨细胞,骨细胞,破骨细胞,免疫细胞,骨髓血管内皮细胞”;通过阅读筛选相关文献,最终纳入89篇文献进行综述分析。结果与结论:①单细胞转录组测序技术能够深入了解细胞发育、增殖、分化的轨迹及其调控机制。②影响骨密度的候选基因主要富集在骨髓间充质干细胞亚群,其中Sox9是关键的转录因子。③成骨细胞不同亚群中差异表达Runx2控制骨髓间充质干细胞向成骨细胞方向分化。④破骨细胞分化过程中RAB38与组蛋白修饰和转录调控动态变化有关。⑤单细胞层面研究证实,骨微环境中存在多种细胞间通讯,破骨细胞可能通过CD160-TNFRSF14配体-受体结合进行细胞间通讯;中性粒/单核细胞与成骨细胞间可能通过RESISTIN通路进行交互;浆样树突状细胞与成骨细胞系通过表皮生长因子通路进行交流;均可以为靶点预测和药物研发提供方向。⑥新的骨髓毛细血管内皮细胞亚群,称为S型内皮细胞,完全起源于骨骺次级骨化中心,甚至比H型血管更具有可塑性。⑦文章从细胞角度总结单细胞转录组测序技术在表征不同骨组织细胞的分化命运和分化轨迹、识别新的细胞亚群、鉴定细胞调控因子及明确细胞间通讯的研究进展,为探讨骨质疏松症的病理机制、筛选潜在诊断标志物、预测治疗靶点及探究药物作用机制提供细胞层面的信息。⑧未来单细胞测序技术将向单细胞多组学(基因组、蛋白组学及代谢组学)方向及结合其他诸如空间转录组技术为骨组织细胞变化提供更有价值的信息。

关键词：单细胞转录组测序骨质疏松骨代谢骨髓间充质干细胞骨细胞破骨细胞骨免疫学骨髓血管内皮细胞

涂片阳性/Xpert阴性结果早期预测临床标本中存在非结核分枝杆菌的可靠性

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中国防痨杂志 2025年第1期47卷 61-65页

作者：赵悦王昊然程美锦王伟梁瑞霞黄海荣首都医科大学附属北京胸科医院国家结核病临床实验室北京101149 河南省胸科医院医学检验科郑州450000 河南省胸科医院结核内科郑州450000

目的:评估涂片阳性/Xpert阴性结果用于早期预测临床标本中存在非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)的可靠性。方法:回顾性分析河南省胸科医院2019年1月至2024年4月新发肺部疾病就诊且涂片显微镜检查报告阳性结果的患者和... 详细信息

目的:评估涂片阳性/Xpert阴性结果用于早期预测临床标本中存在非结核分枝杆菌(non-tuberculous mycobacteria,NTM)的可靠性。方法:回顾性分析河南省胸科医院2019年1月至2024年4月新发肺部疾病就诊且涂片显微镜检查报告阳性结果的患者和分离培养鉴定出NTM的患者的实验室检查资料。分析涂片阳性/Xpert阴性结果作为患者分离鉴定出NTM预测指标的准确性。对研究期间培养鉴定为NTM的患者,分析其获得涂片阳性/Xpert阴性结果的比例,了解此预测指标的敏感度;分析涂片阳性的结核病患者中出现Xpert检测阴性结果的比例,了解预测指标的特异度。结果:在纳入的涂片阳性患者中,8.22%(202/2458)的患者同期开展的Xpert检测结果为阴性。在148例涂片阳性/Xpert阴性结果且具有同期培养鉴定结果的患者中,138例(93.24%)培养鉴定出NTM,表明涂片阳性/Xpert阴性结果早期预测临床标本中存在NTM具有良好的准确性。增加γ-干扰素释放试验阴性结果的附加条件后,预测的准确性达到100.00%(73/73),但预测敏感度大幅降低(37.61%,44/117)。在分离鉴定为NTM病的患者中,涂片阳性/Xpert阴性结果预测NTM存在的敏感度为39.78%(109/274),而在涂阳结核病患者中,该指标的特异度为99.56%(2256/2266)。结论:在疑似结核病患者中,涂片阳性/Xpert阴性结果是一项早期、可靠的NTM分离预测指标。

关键词：非典型性细菌分枝杆菌属诊断,鉴别预测

负载骨形态发生蛋白2水凝胶诱导牙髓干细胞的成骨分化

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中国组织工程研究 2025年第16期29卷 3301-3310页

作者：伊斯拉尔古丽·麦麦提贾森刘佳新疆医科大学第一附属医院(附属口腔医院)儿童口腔科-口腔预防科新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054 西安医学院口腔医学院陕西省西安市710021 新疆维吾尔自治区口腔医学研究所新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市830054

背景:前期研究证明,甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶支架可促进人牙髓干细胞的增殖及分化。水凝胶负载骨形态发生蛋白2被认为是骨修复中有前景的材料。目的:观察负载不同质量浓度骨形态发生蛋白2的甲基丙烯酸酐改性明... 详细信息

背景:前期研究证明,甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶支架可促进人牙髓干细胞的增殖及分化。水凝胶负载骨形态发生蛋白2被认为是骨修复中有前景的材料。目的:观察负载不同质量浓度骨形态发生蛋白2的甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶对人牙髓干细胞成骨向分化的诱导作用。方法:制备含0,50,100,200μg/mL骨形态发生蛋白2的甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶,分别记为GelMA/TDM、BMP-2(50 ng/mL)GelMA/TDM、BMP-2(100 ng/mL)GelMA/TDM、BMP-2(200 ng/mL)GelMA/TDM,检测复合水凝胶对骨形态发生蛋白2的体外缓释性能。采用改良组织块酶消化法提取人牙髓干细胞,分别接种于4种水凝胶表面,采用CCK-8法检测细胞增殖,DAPI染色检测细胞黏附;对各组水凝胶表面的人牙髓干细胞进行成骨诱导,进行碱性磷酸酶染色、碱性磷酸酶活性检测与茜素红染色,采用RT-PCR法检测相关成骨基因(Runx2、骨形态发生蛋白2、骨桥蛋白、骨钙素、Ⅰ型胶原)表达。结果与结论:①甲基丙烯酸酐改性明胶/经处理牙本质基质复合水凝胶可持续释放骨形态发生蛋白2长达21 d,在第3-6天释放较快,第6天之后释放趋于平稳;②4种水凝胶均可促进人牙髓干细胞的增殖,其中以BMP-2(100 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶的作用最明显;相较于GelMA/TDM复合水凝胶,BMP-2-GelMA/TDM复合水凝胶可促进人牙髓干细胞的黏附,其中以BMP-2(200 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶的作用最明显;③相较于GelMA/TDM复合水凝胶,BMP-2-GelMA/TDM复合水凝胶可提升碱性磷酸酶活性、钙结节含量与相关成骨基因表达,综合分析显示BMP-2(100 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶的作用更明显;④结果表明,BMP-2(100 ng/mL)-GelMA/TDM复合水凝胶促进牙髓干细胞成骨向分化的能力更明显。

关键词：人牙髓干细胞骨形态形成蛋白2 细胞增殖细胞分化组织工程牙髓-牙本质再生

影响牙髓干细胞成骨及成牙本质分化的相关物理因素及作用机制

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中国组织工程研究 2025年第7期29卷 1531-1540页

作者：孙玉婷吴家媛张剑遵义医科大学口腔医学院贵州省遵义市563000

背景:牙髓干细胞是口腔颌面部组织工程中极具应用潜力的干细胞之一,较骨髓间充质干细胞具有采集方便、伦理问题少以及增殖分化潜能高等优势。目前,除了生物化学等因素外,物理刺激对于牙髓干细胞的成骨/成牙本质分化也起着关键性的作用... 详细信息

背景:牙髓干细胞是口腔颌面部组织工程中极具应用潜力的干细胞之一,较骨髓间充质干细胞具有采集方便、伦理问题少以及增殖分化潜能高等优势。目前,除了生物化学等因素外,物理刺激对于牙髓干细胞的成骨/成牙本质分化也起着关键性的作用。目的:综述影响牙髓干细胞成骨/成牙本质分化的相关物理因素以及可能涉及的信号传导通路作用机制,寻找影响其分化的最佳诱导条件。方法:检索PubMed和中国知网数据库,以“牙髓干细胞,成骨分化,成牙本质分化,低氧,机械力,激光,磁场,微重力”为中文检索词,以“dental pulp stem cells(DPSCs),osteogenesis differentiation,odontoblastic differentiation,hypoxia,mechanical force,laser therapy,magnetic fields,microgravity”为英文检索词,选取与影响牙髓干细胞成骨/成牙本质分化相关物理因素有关的79篇文献进行综述。结果与结论:(1)微环境中直接或间接的物理信号在调控牙髓干细胞定向分化方面展现出了广阔的应用前景。低氧、力学刺激(动静水压力、机械牵张力及剪切力等)、激光、微重力和磁场等相关物理因素对牙髓干细胞的影响以促进成骨/成牙本质分化为主,因口颌系统拥有复杂的力学环境,力学刺激是细胞环境改变的关键物理因素,同时也是组织工程的一个前沿领域,深入探讨牙髓干细胞对力学环境的响应为口腔疾病的诊断及治疗提供新思路。(2)因该领域比较“年轻”,相关因素涉及的设备参数尚未统一,相关结果存在不一致性,未能达成共识,之后应进一步探索及优化相关物理因素的最佳诱导参数及作用条件。(3)支架材料作为组织工程的三要素之一,在牙髓干细胞成骨/成牙本质分化方面也起到了促进作用,同时也推动了材料学的发展及临床技术的进步。(4)其中涉及到的信号通路有Notch,Wnt,MAPK等,关于物理刺激如何调控牙髓干细胞行为的相关生物学基础尚未明确,未来将进一步探究其具体作用机制,为物理因素影响下的牙髓再生及骨组织工程提供新思路。

关键词：牙髓干细胞成骨分化成牙本质分化物理因素力学因素信号通路干细胞组织工程

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脑卒中患者团体心理治疗的成本-效果分析

中国康复医学杂志 2015年第4期30卷 374-377页

作者：林秀瑶许云辉孔东燕朱达斌福建医科大学附属泉州市第一医院康复科 362000

脑卒中是临床常见病和多发病,具有较高的发病率、死亡率和致残率。其高致残率常导致患者丧失了生活自理和工作的能力,给患者家庭和社会带来沉重的经济负担。在我国,脑卒中的发病率逐年增加,其每年的医疗费用达100亿元人民币,给个人、家... 详细信息

脑卒中是临床常见病和多发病,具有较高的发病率、死亡率和致残率。其高致残率常导致患者丧失了生活自理和工作的能力,给患者家庭和社会带来沉重的经济负担。在我国,脑卒中的发病率逐年增加,其每年的医疗费用达100亿元人民币,给个人、家庭和社会造成了沉重的经济负担,其中治疗费用所占比例最大[1]。同时,由于脑卒中患者的偏瘫、失语等症状是突然发生的,缺少一个逐渐适应的过程,极易导致脑卒中后抑郁症,因此,应尽早采取相应的心理干预措施。国内外已有应用团体心理治疗对脑卒中患者作用的研究，本研究将以往研究中病例所花费的所有成本整理并统计数据，从卫生经济学角度采用成本一效果分析探究此干预方法是否为经济、有效的康复治疗方案。

关键词：成本-效果分析团体心理治疗脑卒中患者脑卒中后抑郁症经济负担卫生经济学生活自理医疗费用

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组织工程化口腔黏膜等效物的血管化特征

中国组织工程研究 2025年第22期29卷 4748-4760页

作者：石丽娟韦建张旋何凌霄江小茜聂敏海陈佳娜刘旭倩西南医科大学附属口腔医院牙周黏膜病科四川省泸州市646000 口颌面修复重建和再生泸州市重点实验室四川省泸州市646000 西南医科大学口腔医学研究所四川省泸州市646000

背景:前期研究中三维细胞重建组织工程化口腔黏膜等效物结构类似于正常口腔黏膜,即存在类上皮样结构、类固有层样结构、类血管腔样结构,并已初步实现了等效物的血管化建立,但其血管化特征尚不十分明确。目的:采用血管内皮细胞特异性标... 详细信息

背景:前期研究中三维细胞重建组织工程化口腔黏膜等效物结构类似于正常口腔黏膜,即存在类上皮样结构、类固有层样结构、类血管腔样结构,并已初步实现了等效物的血管化建立,但其血管化特征尚不十分明确。目的:采用血管内皮细胞特异性标志物表达谱关联激光捕获显微切割系统靶向获取血管化口腔黏膜等效物的血管样结构,评价其成血管能力,揭示其血管化特征。方法:分别从人牙龈上皮组织和固有层组织原代培养人牙龈上皮细胞、人牙龈成纤维细胞、人牙龈间充质干细胞,人牙龈间充质干细胞经单克隆扩增培养后诱导分化形成血管内皮样细胞。将人牙龈上皮细胞、人牙龈成纤维细胞、血管内皮样细胞分层负载于脱细胞血管基质-0.25%类人Ⅰ型胶原支架上,构建血管化口腔黏膜等效物。将血管化口腔黏膜等效物(实验组)与脱细胞血管基质-0.25%类人Ⅰ型胶原支架(对照组)分别植入裸鼠背部皮下,14 d后两组切口表面涂布生物胶,实验组生物胶表面接种人牙龈上皮细胞,对照组不接种细胞,继续饲养14 d后取材,利用形态学观察口腔黏膜等效物分层结构;采用较为全面的血管内皮细胞特异性标志物表达谱对口腔黏膜等效物中的新生血管样结构进行免疫组化、免疫荧光标记,进行血管化特征分析;采用激光捕获显微切割系统靶向捕获免疫组化特异性标记的口腔黏膜等效物中新生血管样结构,靶向分析其血管化特征。结果与结论:(1)形态学观察显示口腔黏膜等效物细胞层次清晰,结构类似于正常口腔黏膜,即存在类上皮样结构、类固有层样结构、类血管腔样结构,类血管腔样结构内存在散在红细胞;(2)口腔黏膜等效物组中EdU Apollo示踪种子细胞结果显示:EdU Apollo 488标记的人牙龈上皮细胞呈绿色荧光表达;DAPI标记的人牙龈成纤维细胞呈蓝色荧光表达,体内形成类固有层样结构;Ed U Apollo 567标记的血管内皮样细胞呈红色荧光表达,体内形成类血管样结构;(3)血管内皮细胞特异性标志物表达谱免疫荧光标记血管结构显示,与正常口腔黏膜相比,口腔黏膜等效物中CD31、CD51、CD54、CD105、Tie-2、VWF、血管内皮生长因子受体1、血管内皮生长因子受体2表达升高(P0.05);(4)与特异性标记的口腔黏膜血管结构相比,激光捕获显微切割系统靶向捕获的口腔黏膜等效物血管样结构中CD51、CD54、CD105、Tie-2、VWF、血管内皮生长因子受体1、血管内皮生长因子受体2表达升高(P0.05);(5)结果表明,通过三维细胞分层重建的口腔黏膜等效物能够实现良好的血管化,其血管化特征符合新生血管生成的免疫学功能及特点;血管化助力三维细胞分层重建的口腔黏膜等效物再生。

关键词：脱细胞血管基质血管内皮样细胞三维细胞重建血管化口腔黏膜等效物激光捕获显微切割系统

CT影像组学特征预测食管癌调强放疗放射性肺炎的价值

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中华放射肿瘤学杂志 2023年第11期32卷 978-983页

作者：李凯新毛润芝高炳宗陈雅云蔡文杰福建医科大学附属泉州市第一医院放疗科泉州362000

目的建立包含治疗前CT影像组学特征的食管癌调强放疗放射性肺炎(RP)的预测模型,并评价其应用价值。方法前瞻性分析2019年1月—2021年12月在福建医科大学附属泉州市第一医院连续入组的267例(前206例为训练集,后61例为验证集)食管癌调强... 详细信息

目的建立包含治疗前CT影像组学特征的食管癌调强放疗放射性肺炎(RP)的预测模型,并评价其应用价值。方法前瞻性分析2019年1月—2021年12月在福建医科大学附属泉州市第一医院连续入组的267例(前206例为训练集,后61例为验证集)食管癌调强放疗患者的临床资料,提取放疗定位CT的双肺影像组学特征。通过单因素分析选择可能预测症状性RP的变量,分别采用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)、极致梯度提升(XGboost)、支持向量机(SVM)三种机器学习算法筛选影像组学特征,选择最佳的分类器组成影像组学标签(RS),并分别建立临床、影像组学以及联合预测模型。通过受试者操作特征曲线(ROC)的曲线下面积(AUC)、校准曲线以及决策曲线分析比较三种模型的预测效能和临床获益情况,并在验证集中验证。多变量分析采用logistic回归进行评估;不同ROC曲线采用DeLong检验进行比较。结果与RP独立相关的因素包括心血管疾病、食管最小内径、辅助化疗以及影像组学标签。临床、影像组学与联合预测模型的AUC,训练集分别为0.772、0.745与0.842,验证集分别为0.851、0.811与0.901。决策曲线分析显示联合预测模型的临床获益优于临床预测模型。结论治疗前CT的影像组学特征具有提高食管癌调强放疗RP预测模型预测效能的潜力。

关键词：食管肿瘤调强放射疗法放射性肺炎 CT 影像组学

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自组装短肽水凝胶治疗肿瘤的作用

中国组织工程研究 2025年第22期29卷 4795-4803页

作者：贺欢欢田诗佳陈罗英刘燕飞遵义医科大学附属医院细胞工程重点实验室贵州省遵义市563000 遵义医科大学组织损伤修复与再生医学省部共建协同创新中心贵州省遵义市563000

背景:自组装短肽水凝胶具有良好的生物相容性、可控的物理化学性质和释放性能,在组织工程、药物输送和生物传感等领域具有广泛的应用潜力。目的:总结近年来自组装短肽水凝胶在肿瘤治疗中的研究进展。方法:以“自组装短肽,水凝胶,缓释载... 详细信息

背景:自组装短肽水凝胶具有良好的生物相容性、可控的物理化学性质和释放性能,在组织工程、药物输送和生物传感等领域具有广泛的应用潜力。目的:总结近年来自组装短肽水凝胶在肿瘤治疗中的研究进展。方法:以“自组装短肽,水凝胶,缓释载体,抗肿瘤,肿瘤治疗;Self-assembling peptide,hydrogel,sustained release,antitumor,tumor therapy”为检索词,检索中国知网、PubMed、Elsevier ScienceDirect数据库2000-2024年发表的相关文献,最终纳入81篇文献进行综述。结果与结论:自组装短肽水凝胶作为一种新型的生物活性材料,可以作为缓释药物载体负载多种抗肿瘤药物、免疫抑制剂等,靶向肿瘤部位、诱导肿瘤细胞死亡、降低药物使用剂量、提高肿瘤部位药物蓄积量,从而降低毒副作用和多药耐药性的产生概率。此外,具有天然活性的抗肿瘤水凝胶能够不依赖于药物直接杀伤肿瘤细胞,单独使用能够最大限度避免抗肿瘤药物的毒副作用。

关键词：自组装短肽水凝胶药物缓释抗肿瘤组织工程

VEST气道清除系统配合专职气道管理小组应用于肝移植术患者的效果

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医学理论与实践 2025年第1期 138-140页

作者：刘小春福建医科大学附属第一医院

目的：探讨VEST气道清除系统配合专职气道管理小组应用于肝移植术患者的效果。方法：选取我院2022年1月—2023年12月收治的74例肝移植手术患者，将2022年度收治的37例患者纳入对照组，给予常规人工叩击排痰及气道管理，另将2023年度收治... 详细信息

目的：探讨VEST气道清除系统配合专职气道管理小组应用于肝移植术患者的效果。方法：选取我院2022年1月—2023年12月收治的74例肝移植手术患者，将2022年度收治的37例患者纳入对照组，给予常规人工叩击排痰及气道管理，另将2023年度收治的37例患者纳入观察组，给予VEST气道清除系统配合专职气道管理小组干预，比较两组的肺功能、气道湿化情况、肺部感染及肺不张发生率。结果：干预后，两组的1s用力呼气量（FEV1）、用力肺活量（FVC）值均较干预前高，且观察组较对照组高（P康复时间。

关键词： VEST气道清除系统专职气道管理小组肝移植肺功能气道湿化