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骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤的研究现状

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中国修复重建外科杂志 2007年第5期21卷 507-511页

作者：陈少强林建华福建医科大学人体解剖学与组织胚胎学系福州350004 福建医科大学附属第一医院骨科

目的综述有关骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的新进展。方法广泛查阅近年来国内外相关文献,对MSCs生物学特性、移植治疗SCI的实验研究、移行机制、治疗机制和存在的问... 详细信息

目的综述有关骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)的新进展。方法广泛查阅近年来国内外相关文献,对MSCs生物学特性、移植治疗SCI的实验研究、移行机制、治疗机制和存在的问题进行讨论和分析。结果动物实验和临床研究表明,MSCs移植治疗SCI已有很大进展,移植治疗后,移植细胞能向损伤部位移行,并能分化为神经样细胞和分泌神经营养物质,具有促进损伤脊髓修复和神经功能恢复的作用,但也存在许多问题。结论MSCs移植治疗SCI是一种行之有效的方法,但仍有许多问题有待解决。

关键词：脊髓损伤骨髓间充质干细胞移植脊髓修复

MT2受体介导褪黑素对小鼠前胃癌细胞的抑制作用

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解剖学报 2014年第3期45卷 344-349页

作者：徐丽金清东宫喜刘卉周瑞祥莆田学院基础医学院生理学教研室福建莆田351100 福建医科大学人体解剖学与组织学胚胎学系神经生物学研究中心福州350004

目的探讨褪黑素(MLT)通过褪黑素膜受体MT2抑制小鼠前胃癌(MFC)细胞增殖及其与丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)-Akt信号通路的关系。方法应用siRNA技术沉默MT2表达,观察褪黑素对小鼠前胃癌细胞的抑制作用及ERK1/2、Ak... 详细信息

目的探讨褪黑素(MLT)通过褪黑素膜受体MT2抑制小鼠前胃癌(MFC)细胞增殖及其与丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)、磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)-Akt信号通路的关系。方法应用siRNA技术沉默MT2表达,观察褪黑素对小鼠前胃癌细胞的抑制作用及ERK1/2、Akt的磷酸化的影响。结果 ***介导的MT2沉默能明显拮抗褪黑素对胃癌细胞增殖的抑制作用;2.沉默MT2可部分阻断褪黑素抑制ERK1/2、Akt磷酸化的作用。结论褪黑素可通过MT2受体抑制ERK1/2、Akt的磷酸化从而抑制胃癌细胞增殖。

关键词：褪黑素小鼠前胃癌细胞褪黑素膜受体MT2 Akt ERK1 2 实时定量聚合酶链反应小鼠

大鼠ferroportin 1过表达慢病毒载体构建及其转染PC12细胞

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神经解剖学杂志 2012年第2期28卷 157-163页

作者：林清赵小贞林凌冯俊生王玮福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系福州350108 福建医科大学神经生物学研究中心福州350108

目的:构建含大鼠ferroportin 1(FP1,膜铁转运蛋白1)基因和EGFP(绿色荧光蛋白)基因的过表达慢病毒载体并转染PC12细胞。方法:化学合成含有目的基因FP1的质粒,将酶切获得的目的基因连接入线性化慢病毒载体,构建重组质粒PGC-FU-FP1并进行... 详细信息

目的:构建含大鼠ferroportin 1(FP1,膜铁转运蛋白1)基因和EGFP(绿色荧光蛋白)基因的过表达慢病毒载体并转染PC12细胞。方法:化学合成含有目的基因FP1的质粒,将酶切获得的目的基因连接入线性化慢病毒载体,构建重组质粒PGC-FU-FP1并进行测序鉴定;鉴定正确的阳性克隆采用Lipofectamine2000转染293T细胞,通过荧光显微镜和Western Blot检测FP1表达情况;在脂质体介导下将PGC-FU-FP1、pHelper1.0和pHelper2.0三质粒系统共转染入293T细胞,包装产生慢病毒,并通过实时荧光定量PCR法检测病毒滴度。以重组慢病毒载体质粒PGC-FU-FP1转染PC12细胞,荧光显微镜下观察EGFP的表达,实时荧光定量PCR和Western Blot法分别检测FP1mRNA和蛋白表达情况。结果:FP1基因序列经测序后与GeneBank报道的序列完全一致;重组质粒PGC-FU-FP1中携带有正确的FP1基因并能在293T细胞中表达;病毒滴度为2×108TU/ml。荧光显微镜、实时荧光定量PCR和Western Blot法证实目的基因FP1能被重组慢病毒高效导入PC12细胞并得到过表达。结论:成功构建携带FP1基因的慢病毒载体,并获得FP1基因修饰的PC12基因工程细胞。为进一步研究FP1在帕金森病中的作用及基因治疗奠定基础。

关键词： FP1 慢病毒载体转染 PC12细胞大鼠

M16添加硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ无法克服昆明小鼠早胚体外发育2-细胞阻滞

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中国组织化学与细胞化学杂志 2009年第1期18卷 77-83页

作者：史河秀林翠英谢美容张卫玉吕俊杰王世鄂福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系神经生物学研究中心福州350004

目的观察硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ(Peroxiredoxin Ⅱ,PrxII)是否可以克服昆明(Kunming)小鼠早胚体外发育2-细胞阻滞。方法取昆明小鼠1-细胞胚置于含PrxII蛋白的M16培养液中培养,观察PrxII对昆明小鼠早胚发育潜能和2-细胞胚内活性氧自由基... 详细信息

目的观察硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ(Peroxiredoxin Ⅱ,PrxII)是否可以克服昆明(Kunming)小鼠早胚体外发育2-细胞阻滞。方法取昆明小鼠1-细胞胚置于含PrxII蛋白的M16培养液中培养,观察PrxII对昆明小鼠早胚发育潜能和2-细胞胚内活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)水平的影响;同时比较昆明和B6C3F1小鼠1-细胞胚在M16中各自的发育情况;激光扫描共聚焦显微镜分别检测比较昆明与B6C3F1小鼠体外培养2-细胞胚内ROS水平以及昆明小鼠体外培养与体内发育2-细胞胚内ROS水平。结果M16培养液中添加PrxII蛋白(1nmol/L和100nMol/L)可以明显降低昆明小鼠体外培养2-细胞胚内ROS水平(P0.05)。结论M16培养液中添加PrxII可以明显降低2-细胞胚内ROS水平,但并不能克服2-细胞阻滞。与昆明小鼠体内发育2-细胞和B6C3F1体外发育2-细胞胚相比,体外培养昆明小鼠2-细胞胚内ROS水平并不升高,这些结果提示昆明小鼠体外培养出现2-细胞阻滞的原因并非是胚内ROS水平升高引起。

关键词：硫氧还蛋白过氧化物酶Ⅱ 2-细胞阻滞早胚活性氧自由基小鼠

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黄芪注射液对大鼠脑出血后神经的保护作用

解剖学报 2010年第3期41卷 353-357页

作者：张海宇马全瑞张焱张莲香王登科孙征王效军秦毅宁夏医科大学人体解剖学与组织学胚胎学系宁夏医科大学医学科学技术研究中心银川750004

目的探讨黄芪对大鼠脑出血灶周围凋亡神经元的保护作用。方法用Ⅶ型胶原酶脑内注入法制作大鼠脑出血模型,对各组大鼠进行神经功能评分,用免疫组织化学法检测Bcl-2和Bax蛋白表达,透射电镜观察大鼠脑出血灶周围神经元的超微结构,并对神经... 详细信息

目的探讨黄芪对大鼠脑出血灶周围凋亡神经元的保护作用。方法用Ⅶ型胶原酶脑内注入法制作大鼠脑出血模型,对各组大鼠进行神经功能评分,用免疫组织化学法检测Bcl-2和Bax蛋白表达,透射电镜观察大鼠脑出血灶周围神经元的超微结构,并对神经突触进行定量分析。结果与模型组比较,各治疗组Bcl-2的阳性表达均明显升高(P0.05)。神经元超微结构观察,正常组神经元超微结构正常;模型组神经元超微结构严重破坏;各黄芪治疗组神经元超微结构与模型组相比明显好转。其中出血后0h、6h治疗组的神经元超微结构好于出血后24h治疗组。神经突触定量分析显示,与模型组相比,各治疗组神经突触的数量明显增多(P神经元,增强神经突触功能,减少神经元凋亡,并且早期用药效果较好。

关键词：脑出血黄芪神经突触免疫组织化学大鼠

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松果体及其褪黑素影响胸腺T细胞发育周期

解剖学报 2005年第1期36卷 70-75页

作者：周瑞祥魏建恩刘卉黄云梅谢美容林建银福建医科大学人体解剖学与组织胚胎学系福州350004 福建医科大学分子医学研究中心福州350004

目的　探讨松果体对胸腺分化发育时细胞周期的影响。　方法　选用清洁级SD大鼠 ,分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除、松果体摘除 +褪黑素腹腔注射 7 5mg kg组和松果体摘除 +褪黑素腹腔注射15mg kg组。术后 4、8周取材。用ABC法... 详细信息

目的　探讨松果体对胸腺分化发育时细胞周期的影响。　方法　选用清洁级SD大鼠 ,分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除、松果体摘除 +褪黑素腹腔注射 7 5mg kg组和松果体摘除 +褪黑素腹腔注射15mg kg组。术后 4、8周取材。用ABC法染胸腺cyclinA、cyclinE阳性细胞 ,计算机图像分析仪测量各阳性细胞面积及其染色强度。以碘化丙啶 (PI)一步插入性DNA定量荧光染色法 ,流式细胞术测定胸腺T淋巴细胞不同细胞周期的分布状况。以RT PCR法检测褪黑素对胸腺细胞周期依赖性激酶 1β表达的影响。　结果　松果体摘除对胸腺cyclinE表达的影响甚于对cyclinA的影响 ,促进cyclinE的合成 ,松果体摘除后胸腺细胞周期的变化表现为G1 期减少 ,S期和G2 +M期百分比增多。补充褪黑素后上述改变有所恢复 ,但与剂量不成线性关系 ,且对皮髓质影响有所不同。褪黑素能促进胸腺细胞表达细胞周期依赖性激酶 1β。　结论　松果体摘除能显著影响胸腺细胞分化发育 ,补充褪黑素能缓解相关影响。

关键词：松果体胸腺细胞细胞周期流式细胞术 RT-PCR 大鼠

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大鼠急性脊髓损伤后NeuroD的时空表达

解剖学杂志 2015年第4期38卷 434-437页

作者：王锋简国坚王玮福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系福州350108 福建医科大学基础医学院神经生物学研究中心福州350108

目的:探讨神经源性分化因子NeuroD在大鼠急性脊髓损伤过程中的表达及意义.方法:以改良Allen''s法建立急性脊髓损伤(SCI)大鼠模型,以假手术组为对照,应用免疫组织化学、半定量RT-PCR、免疫印迹分别检测脊髓损伤后不同时间点NeuroD的表达... 详细信息

目的:探讨神经源性分化因子NeuroD在大鼠急性脊髓损伤过程中的表达及意义.方法:以改良Allen''s法建立急性脊髓损伤(SCI)大鼠模型,以假手术组为对照,应用免疫组织化学、半定量RT-PCR、免疫印迹分别检测脊髓损伤后不同时间点NeuroD的表达变化.结果:NeuroD特异性表达于脊髓灰质,与对照组相比,急性脊髓损伤后3d,NeuroD mRNA的相对表达量明显增加,5d达到峰值,7d后回落;Neurod的蛋白相对表达量则在急性脊髓损伤5d后明显升高,持续至第7天,14d明显回落.结论:急性脊髓损伤可上调NeuroD表达水平,提示NeuroD参与了急性脊髓损伤后的病理过程.

关键词：大鼠脊髓损伤 NeuroD

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胸腺细胞凋亡的死亡信号表达

解剖学杂志 2006年第2期29卷 171-173,212页

作者：周瑞祥黄云梅刘卉魏建恩谢美蓉林静林建银福建医科大学人体解剖学与组织胚胎学系福建医科大学分子医学研究中心福州350004

目的:探讨胸腺细胞凋亡过程中死亡信号通路的存在依据及其意义。方法:选用2月龄清洁级SD大鼠,用ABC法检测胸腺细胞Fas/FasL、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-12表达,用RT-PCR法检测培养胸腺细胞的TNF-β和Caspase-3表达。结果:Fas在胸... 详细信息

目的:探讨胸腺细胞凋亡过程中死亡信号通路的存在依据及其意义。方法:选用2月龄清洁级SD大鼠,用ABC法检测胸腺细胞Fas/FasL、Caspase-3、Caspase-8、Caspase-12表达,用RT-PCR法检测培养胸腺细胞的TNF-β和Caspase-3表达。结果:Fas在胸腺皮、髓质细胞弥散均匀分布,FasL阳性细胞较少,Caspase-3主要分布于皮质胸腺细胞,Caspase-8则分布于胸腺髓质,Caspase-12在皮、髓质胸腺细胞均匀分布,RT-PCR检测显示胸腺细胞均表达TNF-β和Caspase-3。结论:大鼠胸腺内存在完整的细胞凋亡死亡信号通路的各种成分。死亡信号通路在胸腺细胞凋亡过程中可能扮演重要角色。

关键词：胸腺细胞凋亡 Fas/FasL 半胱天冬酶

酸枣仁皂甙A对急性高眼压大鼠视网膜缺氧诱导因子表达的影响

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解剖学杂志 2013年第1期36卷 65-69页

作者：林延王玮林志雄吴云霞厦门市第一医院眼科厦门361003 福建医科大学人体解剖学组织学胚胎学系福州350004

目的：研究急性高眼压下大鼠视网膜缺氧诱导因子的表达变化；酸枣仁皂甙A对急性高眼压大鼠视网膜缺氧诱导因子（HIF-1α）的影响。方法：建立大鼠急性高眼压模型。造模后，每天给药1次至取材，对模型给药组和对照给药组分别从大鼠尾静脉... 详细信息

目的：研究急性高眼压下大鼠视网膜缺氧诱导因子的表达变化；酸枣仁皂甙A对急性高眼压大鼠视网膜缺氧诱导因子（HIF-1α）的影响。方法：建立大鼠急性高眼压模型。造模后，每天给药1次至取材，对模型给药组和对照给药组分别从大鼠尾静脉按20mg/kg剂量注射酸枣仁皂甙A。各组分别于造模后6、 24、 48、 72h取材，H-E染色观察各组视网膜的结构变化；RT-PCR检测HIF-1α mRNA在各组视网膜上的表达。结果：H-E染色显示，造模后，随着时间延长，视网膜神经节细胞排列紊乱，神经纤维层水肿，内界膜破裂不连续；注射酸枣仁皂甙A后，视网膜的结构变化有所改善。RT-PCR检测视网膜上的HIF-1α mRNA表达：各模型组随着造模后时间的延长，HIF-1α mRNA均值逐渐升高，并在48h达到峰值，与空白对照组和空白给药组比较差异有统计学意义；模型给药组的HIF-1α mRNA均值比模型组低，差异有统计学意义。结论：HIF-1α是急性高眼压内早期变化的因子；酸枣仁皂甙A可改善急性高眼压大鼠视网膜的结构；酸枣仁皂甙A可降低24、 48、 72h急性高眼压大鼠视网膜上HIF-1α的表达。

关键词：酸枣仁皂甙A 急性高眼压视网膜缺氧诱导因子