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褪黑素体内外对小鼠前胃癌细胞的增殖抑制与凋亡诱导作用

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解剖学报 2011年第6期42卷 792-797页

作者：刘卉蒋继浩徐丽宫喜周瑞祥福建医科大学人体解剖学与组织学胚胎学系神经生物学研究中心福州350004

目的探讨褪黑素(MLT)在体内外对小鼠前胃癌(MFC)细胞的增殖抑制与凋亡诱导作用。方法体内实验:建立荷胃癌小鼠模型,随机分为5组:A.正常对照组;B.荷瘤空白对照组:每日注射生理盐水100 mg/kg;C.小剂量褪黑素组:荷瘤成功后(接种第6天起)每... 详细信息

目的探讨褪黑素(MLT)在体内外对小鼠前胃癌(MFC)细胞的增殖抑制与凋亡诱导作用。方法体内实验:建立荷胃癌小鼠模型,随机分为5组:A.正常对照组;B.荷瘤空白对照组:每日注射生理盐水100 mg/kg;C.小剂量褪黑素组:荷瘤成功后(接种第6天起)每日腹腔注射MLT 25 mg/kg;D.中剂量MLT组:每日腹腔注射MLT 50 mg/kg;E.大剂量MLT组:每日腹腔注射MLT 100 mg/kg。褪黑素连续注射1周后完整剥离小鼠瘤体并测量其重量体积。体外实验:建立不同浓度褪黑素对胃癌细胞干预模型,运用荧光双标染色,流式细胞术、CCK-8等方法检测褪黑素对小鼠前胃癌细胞增殖抑制和凋亡诱导作用。结果与荷瘤空白对照组相比,褪黑素体内明显下调瘤体的重量体积;与空白对照组相比,褪黑素体外明显抑制胃癌细胞增殖活性,细胞凋亡率增加,并使细胞周期阻滞在G2/M期,并呈剂量依赖性。结论褪黑素在体内外均能抑制小鼠前胃癌细胞的增殖活性,并呈时间-剂量依赖性,该作用与促细胞凋亡和细胞周期G2/M期阻滞有关。

关键词：褪黑素前胃癌细胞增殖流式细胞术小鼠

松果体及其褪黑素对大鼠胸腺细胞死亡信号通路的影响

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解剖学报 2006年第3期37卷 303-308页

作者：周瑞祥黄云梅刘卉魏建恩谢美容林静林建银福建医科大学人体解剖学与组织学胚胎学系神经生物学研究中心福建医科大学分子医学研究中心福州350004

目的探讨松果体及其褪黑素对胸腺细胞死亡信号通路的影响。方法选用清洁级SD大鼠,分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除组、松果体摘除+褪黑素腹腔注射7.5 mg/(kg.d)组和松果体摘除+褪黑素腹腔注射15 mg/(kg.d)组。术后4、8周取材... 详细信息

目的探讨松果体及其褪黑素对胸腺细胞死亡信号通路的影响。方法选用清洁级SD大鼠,分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除组、松果体摘除+褪黑素腹腔注射7.5 mg/(kg.d)组和松果体摘除+褪黑素腹腔注射15 mg/(kg.d)组。术后4、8周取材。运用免疫细胞化学ABC法染胸腺Fas/FasL、caspase_8、caspase_12阳性细胞,计算机图像分析测量阳性细胞面积及其染色强度。以RT-PCR法检测褪黑素干预原代培养胸腺细胞TNF-β的表达。结果松果体摘除后胸腺细胞Fas染色显示阳性细胞面积显著增大,术后4周皮质阳性细胞面积增加,有统计学意义,术后8周其差异继续扩大。FasL染色结果与Fas类似。松果体摘除后胸腺细胞caspase_8阳性细胞面积术后8周无论皮质还是髓质均显著增加,对caspase_12影响不明显。补充褪黑素后,松果体摘除造成的各种参数的影响逐渐减弱。褪黑素处理后大鼠培养胸腺细胞TNF-β的表达明显减弱。结论松果体能通过影响胸腺细胞死亡信号通路从而调控大鼠胸腺细胞的凋亡,补充褪黑素能缓解相关影响。

关键词：松果体褪黑素 Fas/FasL Caspase 凋亡胸腺 RT-PCR 大鼠

活化的小胶质细胞在大鼠海马神经元缺氧损伤中的作用

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解剖学报 2009年第5期40卷 737-742页

作者：柯荔宁赵小贞徐剑文王玮福建医科大学人体解剖学与组织学胚胎学系福州350004

目的探讨缺氧诱导活化的小胶质细胞在SD大鼠海马神经元缺氧损害中的作用机制。方法建立共培养体系,应用原位缺口末端标记(TUNEL)法、化学发光法探讨不同组别神经元生长状况以及Caspase-3活性;采用免疫荧光法、格里斯试剂法(Griess Reage... 详细信息

目的探讨缺氧诱导活化的小胶质细胞在SD大鼠海马神经元缺氧损害中的作用机制。方法建立共培养体系,应用原位缺口末端标记(TUNEL)法、化学发光法探讨不同组别神经元生长状况以及Caspase-3活性;采用免疫荧光法、格里斯试剂法(Griess Reagent)、还原WST-1法、酶联免疫吸咐测定(ELISA)等方法检测各组培养液中NO、O2-以及TNF-α的表达水平。结果缺氧12h,N9细胞培养液可抑制常规培养的神经元生长增殖活力,同时可加重由缺氧抑制的共培养体系中神经元活力;既可诱导常规培养的神经元凋亡,又可促进共缺氧培养的神经元凋亡;较之于单纯神经元培养系和常规共培养系,共缺氧培养系的培养液中NO、O2-、TNF-α3类应激性神经毒性因子产量最高。结论小胶质细胞活化在缺氧诱发的神经元损害中发挥了重要的作用,其活化后产生的神经毒性分子是效应分子。

关键词：小胶质细胞N9 海马神经元缺氧损伤原位缺口末端标记大鼠

缺氧缺血对O-2A祖细胞膜铁转运蛋白1表达的影响

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解剖学报 2013年第3期44卷 324-329页

作者：林清张更邱荣晖王玮福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系神经生物学研究中心福州350108

目的观察膜铁转运蛋白1(FPN1)在O-2A祖细胞缺氧缺血损伤后的表达变化,探讨其在O-2A祖细胞缺氧缺血损伤中的作用。方法体外培养O-2A祖细胞,以特异性抗体A2B5鉴定,观察FPN1在O-2A祖细胞上的定位表达;以糖氧剥夺(OGD)法建立缺氧缺血细胞模... 详细信息

目的观察膜铁转运蛋白1(FPN1)在O-2A祖细胞缺氧缺血损伤后的表达变化,探讨其在O-2A祖细胞缺氧缺血损伤中的作用。方法体外培养O-2A祖细胞,以特异性抗体A2B5鉴定,观察FPN1在O-2A祖细胞上的定位表达;以糖氧剥夺(OGD)法建立缺氧缺血细胞模型,CCK8法检测细胞存活率;应用免疫荧光染色法、实时荧光定量PCR法和Western blotting法观察FPN1在细胞缺氧缺血后的表达变化。结果 FPN1定位表达于O-2A祖细胞的细胞膜、细胞质和突起;OGD3h、6h、12h及24h细胞存活率呈时间依赖性降低(P学意义(P<0.05)。结论 O-2A祖细胞缺氧缺血损伤后FPN1表达明显下调,细胞存活率显著降低,提示FPN1可能参与O-2A祖细胞的缺氧缺血损伤过程。

关键词：膜铁转运蛋白1 缺氧缺血实时定量一聚合酶链反应免疫印迹法 O-2A祖细胞

新生大鼠缺氧缺血脑白质损伤模型学习记忆能力的变化

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解剖学报 2016年第6期47卷 738-743页

作者：林凌张更林巧梅林清福建医科大学基础医学院人体解剖学与组织学胚胎学系神经生物学研究中心福州350122

目的通过缺氧、缺血法建立新生大鼠脑白质损伤(WMI)模型,评价大鼠各个生长时期的学习记忆能力及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达变化。方法新生4日龄SD大鼠100只随机分为对照组和缺氧、缺血WMI组,应用HE染色法观察脑组织病理学改变。于术后4周、... 详细信息

目的通过缺氧、缺血法建立新生大鼠脑白质损伤(WMI)模型,评价大鼠各个生长时期的学习记忆能力及髓鞘碱性蛋白(MBP)表达变化。方法新生4日龄SD大鼠100只随机分为对照组和缺氧、缺血WMI组,应用HE染色法观察脑组织病理学改变。于术后4周、8周与12周分别观察大鼠神经行为学和学习记忆能力改变,并应用免疫荧光染色法和Western blotting法观察MBP在大鼠脑内的定位定量表达变化。结果 HE染色显示,WMI组大鼠出现缺氧、缺血脑白质损伤病理改变。WMI组大鼠神经行为学及学习记忆能力较对照组减弱,差异具有统计学意义(P学意义(P学习记忆能力均减弱,MBP蛋白表达均减少,推测学习记忆能力减弱可能与MBP蛋白表达减少有关。

关键词：脑白质损伤学习记忆髓鞘碱性蛋白免疫荧光免疫印迹法大鼠

褪黑素的抗胃癌效应及其引起的Bcl-2、Bax、p21和p53的表达变化

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生理学报 2014年第6期66卷 723-729页

作者：徐丽金清东宫喜刘卉周瑞祥莆田学院基础医学院生理学教研室莆田351100 福建医科大学人体解剖学与组织胚胎学系神经生物学研究中心福州350004 福建医科大学人体解剖学与组织胚胎学系神经生物学研究中心福州350004

为了探讨褪黑素体内抗小鼠胃癌作用及其机制,本研究应用小鼠胃癌(murine foregastric carcinoma,MFC)细胞建立荷胃癌小鼠模型,不同浓度褪黑素干预后,运用实时荧光定量RT-PCR、免疫印迹等方法检测Bcl-2,Bax,p21,p53的表达变化。结果显示:... 详细信息

为了探讨褪黑素体内抗小鼠胃癌作用及其机制,本研究应用小鼠胃癌(murine foregastric carcinoma,MFC)细胞建立荷胃癌小鼠模型,不同浓度褪黑素干预后,运用实时荧光定量RT-PCR、免疫印迹等方法检测Bcl-2,Bax,p21,p53的表达变化。结果显示:(1)褪黑素能够缩小荷胃癌小鼠的肿瘤体积,减轻肿瘤重量,达到抗胃癌作用;(2)褪黑素在抑制胃癌生长过程中下调肿瘤组织Bcl-2表达,上调Bax、p21和p53表达。以上结果表明,褪黑素可通过促进胃癌细胞凋亡从而实现体内抑制胃癌生长作用。

关键词：胃癌褪黑素小鼠胃癌细胞 Bcl-2 Bax p21 p53

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海洋中药治疗骨质疏松的用药规律及作用机制

中国组织工程研究 2025年第17期29卷 3713-3723页

作者：赖越林轩徐淼刘欢沈剑粦黄文华广东医科大学第一临床医学院广东省湛江市524023 莆田学院环境与生物工程学院福建省莆田市351100 福建医科大学基础医学院福建省福州市350100 西南医科大学附属中医医院骨科四川省泸州市646000 莆田学院附属医院中心实验室福建省莆田市351100 南方医科大学基础医学院人体解剖学国家重点学科广东省数字医学与生物力学重点实验室广东省医学3D打印应用转化工程技术研究中心广东省广州市510515

背景:海洋中药为治疗骨质疏松提供了一种潜在有效且不易产生不良反应的方法。目的:应用数据挖掘和网络药理学方法分析并探讨中医临床治疗骨质疏松的用药规律及作用机制。方法:采用数据挖掘和网络药理学方法,对国家知识产权局批准的治疗... 详细信息

背景:海洋中药为治疗骨质疏松提供了一种潜在有效且不易产生不良反应的方法。目的:应用数据挖掘和网络药理学方法分析并探讨中医临床治疗骨质疏松的用药规律及作用机制。方法:采用数据挖掘和网络药理学方法,对国家知识产权局批准的治疗骨质疏松的海洋中药专利处方进行用药模式和作用机制研究,并特别关注这些处方中的核心中药成分,利用超高效液相色谱串联质谱对牡蛎-续断-淫羊藿组成的复方药组核心成分进行全面的鉴定分析。结果与结论:①从国家知识产权局(SIPO)网站建立到2024-04-01,检索发现381项骨质疏松治疗的授权专利,共鉴定出48首含有海洋中药的中成药处方,这些处方包含183味中药,其中13种海洋中药用药频次共574次,单首专利组方中用药味数2-41种不等;②牡蛎是最常用的海洋中药,续断、淫羊藿、地黄、杜仲是最常用的非海洋中药;关联规则分析确定了牡蛎、续断和淫羊藿为核心药物群;网络药理学分析显示该核心药组治疗骨质疏松的核心靶点包括ALB、AKT1、TP53、PPARG和SRC;核心药组发挥疗效的核心成分为谷甾醇、甘草素、臭山羊碱、木犀草素、山奈酚;③GO与KEGG富集分析显示,Rap1/丝裂原活化蛋白激酶信号通路在核心药物组的骨质疏松作用机制中起着重要作用;④分子对接结果显示核心成分与核心靶点之间存在良好的相互作用;⑤超高效液相色谱串联质谱检测复方药组核心成分为木犀草素、谷甾醇、山奈酚等,与网络药理学鉴定的药物成分相符合;对复方药组成分进行定量分析得出,黄酮类化合物、萜类化合物以及生物碱这3类物质在药物成分占比中较大。

关键词：骨质疏松海洋中药数据挖掘网络药理学分子对接

松果体及褪黑素对大鼠胸腺巨噬细胞酪氨酸激酶受体B表达的影响

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解剖学杂志 2009年第6期32卷 758-761页

作者：刘卉林晋魏建恩郑琳周瑞祥福建医科大学人体解剖与组织学胚胎学系神经生物学研究中心福州350004

目的：研究松果体摘除及补充褪黑素对大鼠胸腺巨噬细胞酪氨酸激酶受体B（trkB）表达的影响。方法：选用2月龄清洁级SD大鼠，分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除组、松果体摘除＋褪黑素注射7．5mg·kg^-1·d^-1组和松果体摘除＋... 详细信息

目的：研究松果体摘除及补充褪黑素对大鼠胸腺巨噬细胞酪氨酸激酶受体B（trkB）表达的影响。方法：选用2月龄清洁级SD大鼠，分为正常对照组、假手术对照组、松果体摘除组、松果体摘除＋褪黑素注射7．5mg·kg^-1·d^-1组和松果体摘除＋褪黑素腹腔15mg·kg^-1·d^-1组，术后4、8周取材。应用trkB和单克隆抗体EDl免疫荧光双标显色法观察分析松果体摘除及补充外源性褪黑素后胸腺巨噬细胞trkB表达的变化。结果：与对照组相比，松果体摘除术后4周胸腺双阳性细胞表达减弱，补充褪黑素后无变化。术后8周松果体摘除组与对照组相比无明显差异，而低剂量组双阳性细胞表达异常增高，高剂量组恢复正常。各组平均灰度无明显差异。结论：松果体及褪黑素在影响胸腺细胞分化发育过程中，胸腺巨噬细胞表达的trkB也随之发生变化，其与胸腺细胞表达的trkB共同作用参与胸腺细胞分化发育。胸腺神经内分泌微环境的分泌调节是松果体及褪黑素保护胸腺细胞的通路之一。

关键词：松果体褪黑素胸腺巨噬细胞酪氨酸激酶受体B 大鼠

RT-PCR法检测神经源性分化因子mRNA在大鼠脑发育过程中的表达

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解剖学报 2014年第1期45卷 26-30页

作者：郭玮刘晓艳柯荔宁李玉宇林凌徐剑文福建医科大学人体解剖学与组织学胚胎学系神经生物中心福州350108

目的观察大鼠不同发育时期脑内神经源性分化因子(NeuroD)mRNA表达量的变化,探讨其对神经细胞的分化和成熟发挥的作用。方法提取不同发育阶段大鼠不同脑组织中的mRNA,RT-PCR法反转录扩增NeuroD和β-actin,利用凝胶成像系统检测其相对表... 详细信息

目的观察大鼠不同发育时期脑内神经源性分化因子(NeuroD)mRNA表达量的变化,探讨其对神经细胞的分化和成熟发挥的作用。方法提取不同发育阶段大鼠不同脑组织中的mRNA,RT-PCR法反转录扩增NeuroD和β-actin,利用凝胶成像系统检测其相对表达量。结果 NeuroD在受孕7.5d(E7.5)时出现表达,在E10.5和E21.5时分别达到两次高峰,平均吸光度值为20437.88±598.28和14482.23±1134.49,表达水平显著高于其他各组(P胚胎发育的晚期,脑组织形态进一步完善和成熟的过程中NeuroD达到第二次表达高峰,与鼠脑的发育过程相符。推测NeuroD对鼠脑的早期神经细胞分化以及晚期细胞的成熟均起一定作用。

关键词：神经源性分化因子碱性螺旋-环-螺旋神经发育神经分化反转录-聚合酶链反应大鼠