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河豚毒素DNA适配子核心区域的识别

食品科学 2017年第4期38卷 260-264页

作者：邵碧英陈文炳刘正才缪婷玉彭娟杨方福建出入境检验检疫局福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001

用DNA folding form在线软件分析河豚毒素DNA适配子A3、G10的二级结构,根据二级结构,分别合成适配子A3、G10的各4个区域的5’端地高辛标记的序列。用丙烯酸-环氧乙烷珠子固定河豚毒素,测定抗地高辛碱性磷酸酶的适宜稀释倍数,用地高辛-... 详细信息

用DNA folding form在线软件分析河豚毒素DNA适配子A3、G10的二级结构,根据二级结构,分别合成适配子A3、G10的各4个区域的5’端地高辛标记的序列。用丙烯酸-环氧乙烷珠子固定河豚毒素,测定抗地高辛碱性磷酸酶的适宜稀释倍数,用地高辛-抗地高辛碱性磷酸酶系统检测各区域与河豚毒素的亲和力,识别出适配子的核心区域。结果表明,抗地高辛碱性磷酸酶的适宜工作浓度为2×104倍稀释;合成的适配子A3的4个区域中,A3-2区域与河豚毒素的亲和力最强,即适配子A3的核心区域为A3-2区域,实际上含有47个核苷酸;合成的适配子G10的4个区域中,G10-4区域与河豚毒素的亲和力最强,即适配子G10的核心区域为G10-4区域,实际上含有56个核苷酸。

关键词：河豚毒素适配子核心区域亲和力

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进境蜜蜂疫病传入风险分析

环境昆虫学报 2017年第1期39卷 134-143页

作者：张体银郑腾白泉阳王武军张志灯林素洁福建出入境检验检疫局福建省检验检疫技术研究重点实验室350001

为有效防范疫病传入,保护国内生态和环境安全,本文根据新西兰风险分析模型,从传入释放的可能性、定殖和扩散的可能性以及对经济和生态的潜在危害性3个方面对进境蜜蜂所可能携带的病毒、细菌、真菌、寄生物和敌害等危害进行风险分析。结... 详细信息

为有效防范疫病传入,保护国内生态和环境安全,本文根据新西兰风险分析模型,从传入释放的可能性、定殖和扩散的可能性以及对经济和生态的潜在危害性3个方面对进境蜜蜂所可能携带的病毒、细菌、真菌、寄生物和敌害等危害进行风险分析。结果表明,蜂群崩溃失调病Colony Collapse Disorder、美洲幼虫腐臭病American Foulbrood、欧洲幼虫腐臭病European Foulbrood、武氏蜂盾螨Acrapis woodi、小蜂螨Tropilaelaps spp.、狄斯瓦螨Varroa destructor、蚤蝇Apocephalus borealis和蜂巢小甲虫Small Hive Beetle(Aethina tumida Murray,SHB)等8种病虫害能给国内蜜蜂带来一定的风险,根据风险评估结果,提出了相应的风险管理措施。研究结果能为制定相应的检疫措施提供科学依据。

关键词：进境蜜蜂风险分析病毒细菌真菌寄生物敌害

以色列急性麻痹病毒(IAPV)RT-PCR检测方法的建立及应用

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中国兽医学报 2018年第6期38卷 1105-1108页

作者：张体银李丹丹郑腾白泉阳张志灯王武军于师宇福建出入境检验检疫局福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001 海南出入境检验检疫局检验检疫技术中心海南海口570311

为建立以色列急性麻痹病毒（Israeli acute paralysis virus，IAPV）特异性核酸检测方法，本研究以IAPV polvmerase polyprotein基因为靶基因设计合成1对特异性引物，建立了IAPV的RTPCR检测方法。结果显示，对蜜蜂的5种不同病毒进行RT-... 详细信息

为建立以色列急性麻痹病毒（Israeli acute paralysis virus，IAPV）特异性核酸检测方法，本研究以IAPV polvmerase polyprotein基因为靶基因设计合成1对特异性引物，建立了IAPV的RTPCR检测方法。结果显示，对蜜蜂的5种不同病毒进行RT-PCR检测，只有IAPV病毒检测结果为阳性，具有良好的特异性；对IAPV的最低检测限为10^3拷贝／μL，具有较高的灵敏度；利用该检测方法对来自福建省不同养蜂场的8份蜜蜂样品进行检测，3份样品为阳性，通过序列比对分析，同源性超过99％，进一步证实为IAPV。结果表明，所建立的IAPV RT-PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好，具有良好的实用性。

关键词：以色列急性麻痹病毒 RT-PCR polymerase polyprotein基因蜜蜂

含AOZ虾糜自然材料的实验室内快速获取方法

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食品与发酵工业 2015年第5期41卷 135-137页

作者：余孔捷林永辉刘正才黄杰陈旭东王丹红卢声宇福建出入境检验检疫局福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001

为快速获取含AOZ虾糜自然基体阳性材料以制备检测质量控制标准样品,建立了实验室内的自然材料获取方法。采用市售活虾在实验室条件下药浴,控制药浴液初始浓度和捞起时间,拍击式均质,密封包装和辐照灭菌等,成功获取均匀、稳定的含AOZ预... 详细信息

为快速获取含AOZ虾糜自然基体阳性材料以制备检测质量控制标准样品,建立了实验室内的自然材料获取方法。采用市售活虾在实验室条件下药浴,控制药浴液初始浓度和捞起时间,拍击式均质,密封包装和辐照灭菌等,成功获取均匀、稳定的含AOZ预期残留量虾糜自然基体阳性材料。

关键词：快速获取含AOZ虾糜自然材料

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进境甲壳类水生动物风险分析

中国兽医杂志 2016年第2期52卷 118-120页

作者：郑腾张体银井伟白泉阳王武军张志灯闫诚于师宇福建出入境检验检疫局福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001

我国是一个渔业大国,也是一个水产养殖大国,有数以百万计的人以渔业和水产养殖为生,然而水生动物疾病给水产养殖行业造成的经济损失越来越巨大,每年我国因渔业病害带来的经济损失达100多亿元。近年来我国从境外引进水产苗种逐年增多,随... 详细信息

我国是一个渔业大国,也是一个水产养殖大国,有数以百万计的人以渔业和水产养殖为生,然而水生动物疾病给水产养殖行业造成的经济损失越来越巨大,每年我国因渔业病害带来的经济损失达100多亿元。近年来我国从境外引进水产苗种逐年增多,随之而来的是一些新的水生动物疫病开始传人我国,这些新的水生动物疫病来到了新的气候环境,面对新的养殖结构,摆脱了其在源发地的一些天然控制机制的束缚,呈现出暴发式的流行,给我国的养殖业带来巨大的经济损失。

关键词：水产养殖水产苗种甲壳类气候环境风险分析桃拉综合征黄头病造血组织风险评估风险等级

超高效液相色谱-串联质谱法测定鳗鱼肌肉组织中6种喹诺酮类药物残留

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分析科学学报 2014年第6期30卷 863-867页

作者：刘正才余孔捷杨方张琼刘素珍福建出入境检验检疫局福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001

建立了快速测定鳗鱼肌肉中氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氟甲喹和恶喹酸6种喹诺酮类（QNs）药物残留的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法。样品经0.2mol/L磷酸盐缓冲液（PBS,pH=7.0）匀浆后,采用酸性乙腈（含0.2%... 详细信息

建立了快速测定鳗鱼肌肉中氧氟沙星、诺氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、氟甲喹和恶喹酸6种喹诺酮类（QNs）药物残留的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法。样品经0.2mol/L磷酸盐缓冲液（PBS,pH=7.0）匀浆后,采用酸性乙腈（含0.2%甲酸）提取,正己烷脱脂,用ACQUITY UPLC BHE C18柱（100×2.1 mm,1.7μm）,以乙腈-5mmol/L乙酸铵溶液（含0.2%甲酸）为流动相,用多反应监测（MRM）正离子扫描方式进行质谱检测,内标法定量。结果表明,该方法对以上6种喹诺酮类药物的线性范围为0.1-50μg/kg,相关系数（r）均大于0.9976;检出限为0.03-0.25μg/kg,定量限为0.1-0.8μg/kg,在1.0、2.0、10μg/kg 3个添加水平的回收率为84.8%-97.8%,相对标准偏差为4.5%-11.3%。该法简单、灵敏、特异性强,适用于鳗鱼肌肉中喹诺酮类药物多残留的检测。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱法喹诺酮类残留检测鳗鱼

气相色谱法测定食品包装材料中五种抗氧化剂迁移量

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分析试验室 2017年第9期36卷 1067-1070页

作者：邹哲祥李耀平林艳孙克强唐熙陈旻实吕水源李小晶福建出入境检验检疫局技术中心国家消费品安全检测重点实验室福建省检验检疫技术研究重点实验室福州350002 中山出入境检验检疫局中山528400

建立了气相色谱法(GC)测定塑料包装材料中5种抗氧化剂的迁移量的实验方法。水基模拟物(蒸馏水、3%乙酸水溶液、10%乙醇水溶液)经液液萃取处理后过滤膜上机测定,油脂模拟物(异辛烷)直接过滤膜上机测定。方法在蒸馏水、3%乙酸水溶液、10%... 详细信息

建立了气相色谱法(GC)测定塑料包装材料中5种抗氧化剂的迁移量的实验方法。水基模拟物(蒸馏水、3%乙酸水溶液、10%乙醇水溶液)经液液萃取处理后过滤膜上机测定,油脂模拟物(异辛烷)直接过滤膜上机测定。方法在蒸馏水、3%乙酸水溶液、10%乙醇水溶液和异辛烷中的回收率和相对标准偏差均较理想,适用于塑料包装材料中5种抗氧化剂迁移量的同时检测。

关键词：抗氧化剂迁移食品包装材料气相色谱

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肠炎沙门氏菌gDNA标准物质的研究

食品与生物技术学报 2015年第8期34卷 891-895页

作者：柯璐黄晓蓉林杰戴晓丽曾维扬张温玲福建出入境检验检疫局福建福州350001 福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001

作者对制备肠炎沙门氏菌核酸标准物质(g DNA)进行初探,共制备200支样品,每支约含有肠炎沙门氏菌g DNA 1μg。方差分析结果显示,F值为0.835 7,小于F0.05(14,30)=1.68,表明在95%显著性水平时,样品的g DNA含量均匀;稳定性试验表明样品在-2... 详细信息

作者对制备肠炎沙门氏菌核酸标准物质(g DNA)进行初探,共制备200支样品,每支约含有肠炎沙门氏菌g DNA 1μg。方差分析结果显示,F值为0.835 7,小于F0.05(14,30)=1.68,表明在95%显著性水平时,样品的g DNA含量均匀;稳定性试验表明样品在-20℃下保存12个月,g DNA含量维持在1μg/支,0.8 g/d L的琼脂糖凝胶电泳的目标条带清晰,以inv A基因为引物的PCR反应产物电泳条带清晰,样品均具有较好的稳定性。

关键词：肠炎沙门氏菌核酸标准物质

应用PCR技术快速鉴定熊蜂微孢子虫Nosema bombi

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中国兽医学报 2017年第9期37卷 1715-1719,1730页

作者：张体银刘蓓田国宁白泉阳郑腾王武军张志灯于师宇福建出入境检验检疫局福建省检验检疫技术研究重点实验室福建福州350001 福建农林大学蜂学学院福建福州350002 山东省潍坊出入境检验检疫局山东潍坊261041

基于熊蜂微孢子虫16SrRNA基因序列设计了1对引物,并对引物退火温度和引物浓度等反应条件进行了优化。对所建立方法的敏感性、特异性和稳定性进行了验证后,使用该方法对40份样品进行检测。结果显示,本研究建立了一种能够特异、敏感鉴定... 详细信息

基于熊蜂微孢子虫16SrRNA基因序列设计了1对引物,并对引物退火温度和引物浓度等反应条件进行了优化。对所建立方法的敏感性、特异性和稳定性进行了验证后,使用该方法对40份样品进行检测。结果显示,本研究建立了一种能够特异、敏感鉴定熊蜂微孢子虫的PCR方法,对熊蜂微孢子虫总DNA的敏感性达到2.86×10-5 mg/L,可以将熊蜂微孢子虫从西方蜜蜂微孢子虫和东方蜜蜂微孢子等其他可以感染熊蜂的寄生虫中区分出来,具有良好的特异性和稳定性。通过对40份熊蜂样品进行检测结果表明,整个检测过程可以在4h内完成并具有良好的适用性。本研究建立的熊蜂微孢子虫检测方法可用于进境熊蜂的检验检疫。

关键词：熊蜂微孢子虫 PCR 16S核糖体RNA 进境熊蜂