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促卵合剂调控AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF通路改善卵泡发育不良大鼠氧化应激及凋亡的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：胡莹莹丁珊珊林雪娟卓祖顺张梦婷朱龙李红陈莹魏佳吕绍光福建中医药大学福建省立医院福建中医药大学中医证研究基地

目的：探讨促卵合剂通过调控腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/缺氧诱导因子-1/血管内皮生长因子(AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF)通路改善卵泡发育不良(FM)大鼠氧化应激及凋亡的作用机制。方法：将48只雌性SD大鼠随机分为正常组8只，... 详细信息

目的：探讨促卵合剂通过调控腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/缺氧诱导因子-1/血管内皮生长因子(AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF)通路改善卵泡发育不良(FM)大鼠氧化应激及凋亡的作用机制。方法：将48只雌性SD大鼠随机分为正常组8只，造模组40只，造模组大鼠连续灌胃雷公藤多苷混悬液(75mg·kg-1)30d进行造模，造模后随机分为模型组、克罗米芬组(4.5mg·kg-1)、促卵合剂低、中、高剂量组(8.1、16.2、32.4g·kg-1)，每组8只。相应剂量药物给药，正常组及模型组灌胃等体积灭菌水，连续干预14d。巴氏染色检测各组大鼠动情周期变化；苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织病理学及卵泡计数；酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定血清促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)及雌二醇(E2)含量；化学荧光法检测卵巢组织中活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)含量；末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测卵巢颗粒细胞凋亡率；免疫组织化学法检测卵巢组织Bcl-2关联X的基因(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)基因表达；实时荧光定量PCR法(q-PCR)和蛋白免疫印迹法(WB)检测卵巢组织AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF mRNA及蛋白表达。结果：与正常组比较，模型组大鼠动情周期紊乱，次级、成熟卵泡减少，闭锁卵泡增多，FSH及LH含量、ROS含量、Bax表达、卵巢颗粒细胞凋亡率、AMPK mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01)，E2含量、SOD含量、Bcl-2表达、mTOR、HIF-1、VEGF mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01)。与模型组相比，克罗米芬组及促卵合剂高、中剂量组次级卵泡和成熟卵泡增加，闭锁卵泡显著减少，FSH及LH含量、ROS含量、Bax表达、细胞凋亡、AMPK mRNA表达及蛋白表达降低(P<0.05、P<0.01)，E2含量、SOD含量、Bcl-2表达、mTOR、HIF-1、VEGF mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05、P<0.01)。结论：促卵合剂可能通过调控AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF通路来抑制氧化应激减少颗粒细胞凋亡，促进卵泡正常发育成熟，减少卵泡闭锁，保护卵巢功能，进而对FM发挥治疗作用。

关键词：卵泡发育不良促卵合剂氧化应激凋亡腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/缺氧诱导因子-1/血管内皮生长因子(AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF)通路

基于CiteSpace对治疗血管性痴呆的可视化分析

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中国中药杂志 2022年第22期47卷 6235-6248页

作者：杨一涵程静饶婷江一静陈进城杨珊莉福建中医药大学福建福州350122 福建中医药大学附属康复医院福建福州350003

我国血管性痴呆患者数量庞大,而定期回顾治疗血管性痴呆相关领域的研究重点,对促进治疗血管性痴呆发展十分必要。该研究检索了中国知网(CNKI)与Web of Science数据库自2012年1月1日至2021年12月31日收录的研究治疗血管性痴呆的国内外文... 详细信息

我国血管性痴呆患者数量庞大,而定期回顾治疗血管性痴呆相关领域的研究重点,对促进治疗血管性痴呆发展十分必要。该研究检索了中国知网(CNKI)与Web of Science数据库自2012年1月1日至2021年12月31日收录的研究治疗血管性痴呆的国内外文献,使用CiteSpace 5.7.R2软件对国家、机构、作者、关键词及期刊等内容进行可视化展示,并对治疗血管性痴呆研究的现状及发展趋势进行分析,以发现研究重点、演化路径及发展趋势,为今后研究提供辅助与参考。经过筛选最终纳入中文文献2 579篇,英文文献453篇。结果显示,年度发文量呈现波动上升趋势;发表相关文献最多的国家是中国,而中心性最大的是英国;发表中文和英文文献量最多的作者是胡跃强和LIU Cun-zhi;发表中文和英文文献量最多的机构是广西中医药大学和首都医科大学;中心性最高与被引频次最高的英文杂志是《Anal Biochem》《Stroke》;中文文献关键词分析显示治疗血管性痴呆研究集中在治疗后患者活动能力的观察,研究较多的治疗方法是西药、中药与针刺治疗,基础研究的重点是氧化应激、血管新生和细胞凋亡等;英文文献关键词分析显示治疗血管性痴呆的研究重点集中在改善血管性痴呆患者的记忆功能,基础研究的重点是细胞自噬、神经再生和氧化应激等。该研究总结发现中西医结合治疗血管性痴呆为未来研究的热点趋势。

关键词： CiteSpace 血管性痴呆可视化分析知识图谱

基于BDNF/TrkB通路探讨电针对脑缺血再灌注大鼠学习记忆功能及突触可塑性的影响

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中国针灸 2024年

作者：程静杨一涵陈进城饶婷江一静杨珊莉福建中医药大学第一临床医学院福建中医药大学附属康复医院福建中医药大学康复医学院福建省康复技术重点实验室

目的：观察电针“百会”“四神聪”对脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠缺血侧海马脑源性神经营养因子（BDNF）/ 酪氨酸激酶受体B（TrkB）通路、突触素（SYN）表达及白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）含量的影响，探究电针... 详细信息

目的：观察电针“百会”“四神聪”对脑缺血再灌注损伤（CIRI）大鼠缺血侧海马脑源性神经营养因子（BDNF）/ 酪氨酸激酶受体B（TrkB）通路、突触素（SYN）表达及白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）含量的影响，探究电针对CIRI后学习记忆功能的影响及作用机制。方法：将48只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组和非穴组，每组12只。模型组、电针组和非穴组大鼠采用改良ZeaLonga线栓法制备CIRI模型。电针组予电针“四神聪”“百会”，疏密波，频率2 Hz/10 Hz，电流强度1 mA；非穴组电针双侧肋下非经非穴点，电针参数同电针组。两组干预均每次30 min，每天1次，持续7 d。干预期间，于每日固定时间测量大鼠体质量；于干预第1、3、7天观察各组大鼠神经功能缺损情况。干预前后采用小动物磁共振成像技术测量大鼠脑梗死体积。干预后，采用Morris水迷宫评价大鼠学习记忆功能；HE染色观察大鼠海马形态学；免疫组化法检测大鼠海马SYN阳性表达；Western blot法检测大鼠海马BDNF、TrkB、SYN蛋白表达；ELISA法检测海马IL-1β、IL-18含量。结果：干预第2～7天，与假手术组比较，模型组大鼠体质量下降（P<0.01）；与模型组和非穴组比较，电针组大鼠体质量增加（P<0.01）。干预第1天，与假手术组比较，模型组、电针组和非穴组大鼠神经功能评分降低（P<0.01）；干预第3、7天，模型组大鼠神经功能评分低于假手术组（P<0.01）；干预第7天，电针组大鼠神经功能评分低于模型组与非穴组（P<0.05）。航行实验第2、3、4天，与假手术组比较，模型组大鼠逃避潜伏期延长（P<0.05）；与模型组比较，电针组大鼠逃避潜伏期缩短（P<0.05）。航行实验第2、4天，与非穴组比较，电针组大鼠逃避潜伏期缩短（P<0.05）。与假手术组比较，模型组大鼠穿越平台次数减少（P<0.01）；与模型组和非穴组比较，电针组大鼠穿越平台次数增加（P<0.01）。模型组、电针组和非穴组大鼠左侧脑室出现明显高信号梗死灶，与模型组和非穴组比较，电针组大鼠脑梗死体积占比下降（P<0.01）。模型组与非穴组大鼠神经元细胞排列疏散且紊乱、胞质深染且胞核固缩；电针组大鼠神经元细胞数目、排列情况趋于假手术组，胞质深染及胞核固缩现象相对减轻。与假手术组比较，模型组缺血侧海马SYN阳性表达及BDNF、TrkB、SYN蛋白表达减少（P<0.01，P<0.05），IL-1β、IL-18含量升高（P<0.01）；与模型组和非穴组比较，电针组大鼠缺血侧海马SYN阳性表达及BDNF、TrkB、SYN蛋白表达增加（P<0.01，P<0.05），IL-1β、IL-18含量下降（P<0.01）。结论：电针“百会”“四神聪”可能通过激活BDNF/TrkB信号通路转导，减轻神经炎性反应，促进突触可塑性恢复来改善CIRI大鼠学习记忆功能。

关键词：脑缺血再灌注电针学习记忆障碍突触可塑性脑源性神经营养因子(BDNF)/酪氨酸激酶受体B(TrkB)通路

基于神经血管单元稳态探讨巨刺法改善大脑中动脉闭塞大鼠运动功能机制的研究

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中国康复医学杂志 2022年第8期37卷 1009-1017页

作者：胡梦艺石丽红杨珊莉饶婷游咏梅江一静福建中医药大学福建省福州市350122 福建中医药大学附属康复医院福建省康复技术重点实验室成都中医药大学

目的:基于神经血管单元稳态探讨巨刺法改善大脑中动脉闭塞模型(MCAO)大鼠运动功能的机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组(IS组)、模型组(IC组)、巨刺组(ON组)、非穴组(FON组)(各12只)。其中IC组、ON组及FON组大鼠制备MCAO模型... 详细信息

目的:基于神经血管单元稳态探讨巨刺法改善大脑中动脉闭塞模型(MCAO)大鼠运动功能的机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组(IS组)、模型组(IC组)、巨刺组(ON组)、非穴组(FON组)(各12只)。其中IC组、ON组及FON组大鼠制备MCAO模型,成模后ON组接受电针健侧“曲池”和“足三里”,FON组取穴位置的旁开5mm处电针干预7天,IS组和IC组不进行电针干预,仅进行模拟抓取。使用改良神经功能缺损评分(mNSS)评测各组大鼠神经功能;应用CatWalk步态分析对比各组大鼠运动功能;应用小动物磁共振成像系统行弥散张量成像(diffusion tensor imaging,DTI)扫描,使用DTI衍生参数测量运动皮质、纹状体神经传导束各向异性分数比值(ratio fractional anisotropy,rFA);应用TTC染色观察脑梗死体积,应用免疫荧光法检测脑缺血侧运动皮质神经元核蛋白(neuronal nuclei,NeuN)的表达变化;应用免疫组织化学法检测血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1,PECAM-1/CD31)、胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、钙结合蛋白(ionized calcium binding adapter molecule 1,Iba1)表达变化;应用Western Blot法检测闭锁连接蛋白-1(zonula occludens 1,ZO-1)及闭合蛋白(Occludin)的表达变化。结果:干预7天后,与IC组相比,ON组大鼠神经功能评分、mNSS评分降低(P<0.05);与IC组、FON组相比,ON组的平均运动速度加快、足印最大接触面积增加(P<0.05);与IC组、FON组相比,ON组的梗死体积减少、rFA值相对增加(P<0.05);与IC组、FON相比,ON组的NeuN阳性细胞表达明显升高(P<0.05);与IC组、FON组相比,ON组的CD31表达显著升高、GFAP和Iba1的表达显著降低(P<0.05);与IC组、FON组相比,ON组的ZO-1、Occludin蛋白表达均显著升高(P<0.05)。CatWalk步态参数、免疫荧光、免疫组化与Western Blot检测结果改善有一致性。结论:巨刺法改善MCAO大鼠运动功能,其机制可能与修复神经血管单元稳态有关。

关键词：卒中巨刺运动功能神经血管单元阳明经穴

富含组织细胞的横纹肌母细胞性肿瘤临床病理及分子遗传学分析

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中华病理学杂志 2022年第5期51卷 425-430页

作者：游治杰孔令英王晨陈小岩陈新俞训彬福建省立金山医院(福建省立医院南院)病理科福州350028 福建中医药大学附属人民医院病理科福州350004 福建医科大学省立临床医学院福建省立医院病理科福州350001

目的:探讨富含组织细胞的横纹肌母细胞性肿瘤(histiocyte-rich rhabdomyoblastic tumor,HRRMT)的临床病理特征、分子遗传学特点、诊断及鉴别诊断。方法:收集2020—2021年福建省立医院及福建中医药大学附属人民医院共2例HRRMT的临床资料... 详细信息

目的:探讨富含组织细胞的横纹肌母细胞性肿瘤(histiocyte-rich rhabdomyoblastic tumor,HRRMT)的临床病理特征、分子遗传学特点、诊断及鉴别诊断。方法:收集2020—2021年福建省立医院及福建中医药大学附属人民医院共2例HRRMT的临床资料,观察其组织病理学及免疫组织化学染色,基于二代测序技术分析其遗传学改变,并复习文献。结果:2例大体均表现为界限清楚的实性结节,质软。镜下均见肿瘤具有含淋巴细胞聚集的纤维性假包膜,局部侵犯周围骨骼肌组织,肿瘤细胞呈梭形至上皮样,伴大量泡沫样组织细胞浸润,未见坏死及核分裂象。免疫表型上,肿瘤细胞表达结蛋白,至少表达1个骨骼肌标记(Myogenin或MyoD1),h-caldesmon、间变性淋巴瘤激酶(ALK)及平滑肌肌动蛋白(SMA)阴性,Ki-67阳性指数<5%。二代测序检测发现,其中1例具有KRAS(G12D)突变及MSH3(Q470 *)突变。结论:HRRMT是新近描述的一种恶性潜能不确定的骨骼肌肿瘤,诊断及鉴别诊断依赖于形态学及免疫组织化学染色,暂未发现特异性分子遗传学改变。

关键词：软组织肿瘤遗传学诊断,鉴别

加味涤痰汤调控miR-149对慢性间歇低氧大鼠肝损伤的影响

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中国中医药信息杂志 2024年

作者：王春桔陈沁吴润华伍娟刘丹刘赟杨眉峰福建中医药大学临床技能教学中心福建中医药大学中西医结合学院

目的探讨加味涤痰汤调控miR-149对慢性间歇低氧大鼠肝损伤的影响及作用机制。方法将18只雄性大鼠随机分为对照组、模型组和加味涤痰汤组，每组6只。模型组和加味涤痰汤组于低氧箱中造模，造模期间加味涤痰汤组予加味涤痰汤灌胃，连续1... 详细信息

目的探讨加味涤痰汤调控miR-149对慢性间歇低氧大鼠肝损伤的影响及作用机制。方法将18只雄性大鼠随机分为对照组、模型组和加味涤痰汤组，每组6只。模型组和加味涤痰汤组于低氧箱中造模，造模期间加味涤痰汤组予加味涤痰汤灌胃，连续12周。HE染色观察肝组织病理变化，电镜观察肝组织超微结构，TUNEL染色观察肝细胞凋亡情况，检测肝组织丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量，RT-qPCR和Western blot检测肝组织miR-149、转录激活因子（ATF）6、葡萄糖调节蛋白-78(GRP78)、C/EBP同源蛋白（CHOP）mRNA和蛋白表达。分析肝组织ATF6 mRNA和miR-149 mRNA表达相关性。结果与对照组比较，模型组大鼠肝组织少量炎性细胞浸润，肝细胞排列不规则、不同程度水肿，内质网扩张，核糖体脱落，线粒体膜破裂，肝细胞凋亡率升高（P<0.05），肝组织ALT、AST、MDA含量升高（P<0.05）,SOD含量降低（P<0.05）,miR-149 mRNA表达降低（P<0.05）,ATF6、GRP78、CHOP mRNA和蛋白表达升高（P<0.05）；与模型组比较，加味涤痰汤组大鼠肝组织未见明显水肿及炎性细胞浸润，肝细胞排列规则，内质网稍扩张，核糖体分布较均匀，线粒体膜相对完整，肝细胞凋亡率降低（P<0.05），肝组织ALT、AST、MDA含量降低（P<0.05）,SOD含量升高（P<0.05）,miR-149 mRNA表达升高（P<0.05）,ATF6、GRP78、CHOP mRNA和蛋白表达降低（P<0.05）。且ATF6 mRNA与miR-149 mRNA水平呈显著负相关（r=-0.766）。结论加味涤痰汤可能通过调控miR-149/ATF6通路抑制慢性间歇低氧大鼠肝脏氧化应激反应，改善肝损伤。

关键词：加味涤痰汤慢性间歇性缺氧肝损伤 miR-149 内质网应激

代谢综合征痰证模型大鼠血清及肝组织能量代谢变化特征研究

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中医杂志 2022年第17期63卷 1679-1684页

作者：魏佳曾华霖林书颖乔世杰邵岩飞李灿东高碧珍福建省立医院福建省福州市350001 福建中医药大学上海交通大学医学院附属瑞金医院

目的探讨代谢综合征(MS)痰证形成的机制及病理基础。方法50只大鼠随机分为空白组12只和造模组38只。造模组大鼠运用高糖高脂高盐饲养法建立MS痰证大鼠模型。共24只大鼠造模成功,随机分为模型组和二陈汤组各12只。二陈汤组予以二陈汤5.3 ... 详细信息

目的探讨代谢综合征(MS)痰证形成的机制及病理基础。方法50只大鼠随机分为空白组12只和造模组38只。造模组大鼠运用高糖高脂高盐饲养法建立MS痰证大鼠模型。共24只大鼠造模成功,随机分为模型组和二陈汤组各12只。二陈汤组予以二陈汤5.3 g/kg灌胃,模型组及空白组予以生理盐水10 ml/kg灌胃,均每日1次,连续4周。采用分光光度法分别于造模0周、4周、8周、12周检测空白组与造模组血浆乳酸含量。给药后空白组、模型组、二陈汤组采用ELISA法检测血清及肝组织三磷酸腺苷(ATP)水平,采用ELISA法及Real-Time PCR检测肝组织柠檬酸合成酶(CS)、肉毒碱脂酰转移酶I(CPT-1)、乳酸脱氢酶(LDH)、低氧诱导因子1α(HIF-1α)水平及mRNA表达情况。结果造模期间,空白组与造模组乳酸水平比较差异具有统计学意义,造模第8周和第12周,造模组大鼠乳酸含量较空白组升高(P<0.05)。给药后,与空白组比较,模型组和二陈汤组大鼠血清及肝组织ATP的含量升高(P<0.05),模型组大鼠肝组织LDH、CS、CPT-1、HIF-1α水平均升高(P<0.05);与模型组比较,二陈汤组大鼠血清及肝组织ATP的含量,肝CPT-1 mRNA表达及肝LDH、CPT-1、HIF-1α水平均明显降低(P<0.05)。结论能量失衡促进MS痰证发生发展,能量代谢途径改变是MS痰证形成的病理基础。

关键词：代谢综合征痰证能量代谢二陈汤

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者胰岛素抵抗发生机制及治疗研究进展

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新乡医学院学报 2023年第10期40卷 986-990页

作者：刘丹吴润华陈乃洁李璟怡魏敏陈沁福建中医药大学中西医结合学院福建福州350122 福建中医药大学临床技能教学中心福建福州350122

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是一种常见的慢性疾病,近年来其与2型糖尿病的关系被很多学者关注。胰岛素抵抗是将T2DM与OSAHS联系起来的关键因素。OSAHS的慢性间歇性缺氧和睡眠碎片化激活交感神经系统和下丘脑-垂体-肾上腺轴,... 详细信息

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)是一种常见的慢性疾病,近年来其与2型糖尿病的关系被很多学者关注。胰岛素抵抗是将T2DM与OSAHS联系起来的关键因素。OSAHS的慢性间歇性缺氧和睡眠碎片化激活交感神经系统和下丘脑-垂体-肾上腺轴,引起全身炎症和自噬等,促进胰岛素抵抗的发展,进展为葡萄糖耐量减低,并最终导致T2DM。但OSAHS和胰岛素抵抗之间的具体通路尚不明确,需要进一步研究来验证。本文针对OSAHS患者胰岛素抵抗的发生机制以及治疗措施方面的研究进展做一综述,以期为OSAHS患者胰岛素抵抗的临床和基础研究提供参考。

关键词：阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征胰岛素抵抗糖耐量减低糖尿病

温针灸对膝骨关节炎大鼠软骨细胞凋亡及MiR-27a介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响

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中华物理医学与康复杂志 2024年第2期46卷 105-111页

作者：吴福春陈晓婷余德标陈捷金星福建医科大学省立临床医学院福建省立医院福州350001 福建中医药大学康复医学院福州350122

目的:观察温针灸对早期膝骨关节炎(KOA)模型大鼠软骨细胞凋亡及miR-27a介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。方法:采用随机数字表法将50只SD大鼠分为对照组、模型组、温针灸组、抑制剂组及抑制剂+温针灸组(简称联合组),每组10只大鼠。... 详细信息

目的:观察温针灸对早期膝骨关节炎(KOA)模型大鼠软骨细胞凋亡及miR-27a介导的PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响。方法:采用随机数字表法将50只SD大鼠分为对照组、模型组、温针灸组、抑制剂组及抑制剂+温针灸组(简称联合组),每组10只大鼠。于造模前3 d对抑制剂组及联合组大鼠给予局部miR-27a抑制剂药物干预;除对照组以外,其余各组大鼠均通过局部注射木瓜蛋白酶方法制成早期KOA大鼠模型。待造模完成后,联合组及温针灸组大鼠均给予内、外侧膝眼穴温针灸治疗,每次治疗30 min,共治疗14 d。模型组及抑制剂组大鼠则同期在固定器上制动30 min。于干预2周后采用苏木精-伊红(HE)染色观察各组大鼠软骨组织病理学改变,采用TUNEL法检测软骨细胞凋亡情况,采用ELISA法检测软骨组织白介素(IL)-1β和IL-6水平;采用WB技术检测软骨组织p-PI3K、p-AKT、p-mTOR、PI3K、AKT、mTOR、LC3-Ⅱ及Beclin1蛋白表达,采用qRT-PCR技术检测软骨组织中miR-27a含量。结果:干预结束后发现温针灸组软骨细胞形态较模型组明显改善,抑制剂组及联合组软骨细胞形态较温针灸组进一步改善;温针灸组软骨细胞凋亡率明显低于模型组( P0.05);温针灸组、抑制剂组和联合组IL-1β、IL-6、LC3-Ⅱ、Beclin1、miR-27a蛋白表达及mRNA水平均较模型组明显降低( P0.05)。结论:温针灸可能通过下调miR-27a表达,促进PI3K/AKT/mTOR信号通路激活,能抑制早期KOA模型大鼠软骨细胞过度自噬及凋亡,有助于减轻关节炎症反应及损伤,延缓关节退变进程。

关键词：膝骨关节炎温针灸自噬 miR-27a PI3K/AKT/mTOR信号通路