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五苓散汤剂保护血脑屏障改善小鼠脑出血后脑水肿的作用和机制

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中国实验方剂学杂志 2024年

作者：陶大梅李惠红郑晓清邓云飞魏伟薛偕华福建中医药大学康复医学院福建中医药大学附属康复医院福建省认知功能康复重点实验室福建省康复技术重点实验室

目的：研究五苓散治疗小鼠脑出血（ICH）后脑水肿的作用，并探讨其可能的机制。方法：采用胶原酶注射尾状核法建立ICH小鼠模型，随机分为假手术组，ICH组，五苓散低、高剂量(3.69、11.07 g·㎏-1)造模前干预组，五苓散高剂量(11.07 g·... 详细信息

目的：研究五苓散治疗小鼠脑出血（ICH）后脑水肿的作用，并探讨其可能的机制。方法：采用胶原酶注射尾状核法建立ICH小鼠模型，随机分为假手术组，ICH组，五苓散低、高剂量(3.69、11.07 g·㎏-1)造模前干预组，五苓散高剂量(11.07 g·㎏-1)造模后干预组。各组小鼠于ICH模型建立后进行改良神经功能评分（mNSS）和小动物核磁T2序列扫描检测脑出血体积；采用Y迷宫、旷场、水迷宫实验对各组小鼠进行神经行为学检测；苏木素-伊红（HE）染色观察脑组织病理改变情况；免疫组化观察脑组织水通道蛋白4（AQP4）、神经元核抗原（NeuN）、神经胶质细胞原纤维酸性蛋白（GFAP）表达情况；Western blot检测血肿部位AQP4和闭合蛋白-5（Claudin-5）、闭锁小带蛋白-1（ZO-1）表达情况。结果：与假手术组相比，ICH组mNSS评分、脑出血体积和水迷宫逃避潜伏期均显著增加（P中心路程与总路程之比均显著减少（P中心路程与总路程之比显著增加（P<0.05），五苓散干预可减轻ICH后脑组织病理改变，AQP4、GFAP阳性细胞所占比例较ICH组显著减少（P<0.05），NeuN阳性细胞所占比例显著增加（P<0.05），AQP4蛋白表达量显著减少（P<0.05），Claudin-5、ZO-1蛋白表达量显著增加（P<0.05）。结论：五苓散干预能够减少小鼠ICH后神经功能评分和脑出血体积，增加Claudin-5和ZO-1的表达，同时降低AQP4的表达，从而有效改善ICH后的神经功能缺损、血脑屏障受损以及脑水肿，发挥脑保护作用。

关键词：五苓散脑出血(ICH) 脑水肿水通道蛋白4(AQP4) 血脑屏障(BBB)

土鳖虫含药血清干预骨髓间充质干细胞的蛋白组学差异

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中国组织工程研究 2013年第1期17卷 98-105页

作者：仲卫红齐振熙福建中医药大学附属康复医院福建省福州市350003 福建中医药大学福建省福州市350003

背景:国内外学者对股骨头缺血性坏死做了大量研究,但股骨头缺血性坏死的确切发病机制仍未完全清楚。目的:探讨土鳖虫含药血清干预骨髓间充质干细胞后抑制成脂分化和促进成骨分化的靶位蛋白或相关蛋白。方法:第3代骨髓间充质干细胞分为... 详细信息

背景:国内外学者对股骨头缺血性坏死做了大量研究,但股骨头缺血性坏死的确切发病机制仍未完全清楚。目的:探讨土鳖虫含药血清干预骨髓间充质干细胞后抑制成脂分化和促进成骨分化的靶位蛋白或相关蛋白。方法:第3代骨髓间充质干细胞分为空白对照组、激素组、土鳖虫组,分别用含空白血清、地塞米松磷酸钠注射液、土鳖虫含药血清+地塞米松磷酸钠注射液的DMEM培养基干预。3组干预6d后运用同位素标记相对和绝对定量技术(iTRAQ)标记3组样本的蛋白,二维液相色谱质谱仪(2DLC-MS/MS)鉴定蛋白并进行相对定量分析。结果与结论:以激素组为对照,在空白对照组中共有15种蛋白质出现显著的表达上调,12种出现下调蛋白;在土鳖虫组中共有16种蛋白质出现显著的表达上调,14种出现显著下调。其中Hspa1L和PrxⅤ蛋白可能是土鳖虫抗细胞凋亡的作用靶点。Serpinh1和ADP/ATP translocase 1蛋白可能是土鳖虫促进成骨分化的作用靶点。

关键词：干细胞骨髓干细胞干细胞与中医药土鳖虫分化含药血清二维液相色谱质谱仪差异蛋白质组学细胞凋亡省级基金

电针对脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力及海马组织脑源性神经营养因子和神经营养素受体p75表达的影响

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中国康复理论与实践 2015年第9期21卷 1020-1024页

作者：李晓洁林如辉陶静赵从快俞坤强李春燕彭洪卫陈立典福建中医药大学康复医学院福建福州市350122 福建中医药大学中西医结合研究院福建福州市350122 福建中医药大学福建福州市350122

目的探讨电针治疗脑卒中后认知障碍的可能机制。方法 45只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为假手术组(n=15)、模型组(n=15)和电针组(n=15)。模型组、电针组用线栓法制备左侧局灶性脑缺血1.5 h再灌注模型。电针组电针神庭、百会穴7 d。采用... 详细信息

目的探讨电针治疗脑卒中后认知障碍的可能机制。方法 45只Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为假手术组(n=15)、模型组(n=15)和电针组(n=15)。模型组、电针组用线栓法制备左侧局灶性脑缺血1.5 h再灌注模型。电针组电针神庭、百会穴7 d。采用Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;Longa评分法观察大鼠神经功能缺损情况;HE染色观察大鼠海马神经元形态结构变化;免疫印迹法检测大鼠缺血侧海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、神经营养素受体p75(p75NTR)蛋白表达。结果与模型组相比,电针组逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越平台次数显著增加(P<0.001);神经功能缺损评分明显减少(P<0.01);缺血侧海马区细胞损伤较轻,BDNF表达明显升高(P<0.01),p75NTR蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论电针能够改善脑缺血再灌注大鼠学习记忆能力,其机制可能与上调大鼠海马组织中BDNF蛋白和下调p75NTR蛋白表达水平有关。

关键词：脑缺血再灌注学习记忆电针脑源性神经营养因子神经营养素受体p75 大鼠

三叶青叶指纹图谱研究及8种酚类成分含量测定

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中国中药杂志 2016年第21期41卷 3975-3981页

作者：范世明徐惠龙谢心月蔡碧雅邹福贤许文谢志森黄心平福建中医药大学药学院福建福州350122 福建中医药大学生物医药研发中心福建福州350122 福州集珍园生物科技有限公司福建福州350001

采用超高效液相色谱建立三叶青叶指纹图谱,并同时测定8种酚类成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆苷、异牡荆苷)的含量,为三叶青叶质量评价提供依据。采用UHPLC法,Welch UHPLC Ultimate XB-C18色... 详细信息

采用超高效液相色谱建立三叶青叶指纹图谱,并同时测定8种酚类成分(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异荭草苷、荭草苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆苷、异牡荆苷)的含量,为三叶青叶质量评价提供依据。采用UHPLC法,Welch UHPLC Ultimate XB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,2.7μm),流动相为乙腈-0.1%甲酸(含5%甲醇)水梯度洗脱,流速0.4 m L·min^(-1),柱温30℃,采用国家药典委员会"相似度评价软件2004AB"处理分析,建立41批不同产地三叶青叶的指纹图谱,共标定15个共有峰并对不同产地进行聚类分析,然后选择其中8个主要的酚类成分作为定量指标,建立UHPLC同时测定8种主要酚类成分含量的方法,经方法学验证该研究建立的三叶青叶指纹图谱和8种酚类成分含量测定方法简便有效、灵敏、准确,可为综合评价三叶青叶的质量提供参考。

关键词：三叶青叶 UHPLC 指纹图谱含量测定

桂枝加葛根含药血清干预纤维环细胞的蛋白组学差异

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中国组织工程研究 2014年第11期18卷 1718-1723页

作者：仲卫红李宇涛郑其开叶佳佳林建平王诗忠福建中医药大学附属康复医院国家中医药管理局中医康复技术三级实验室福建中医药大学省级中医药重点研究室脊柱与骨关节运动功能康复研究室福建省康复技术工程研究中心福建省福州市350003 福建中医药大学福建省福州市350003 福建生物工程职业技术学院福建省福州市350003

背景:研究表明纤维环破裂是颈椎病椎间盘退变的诱发因素。课题组既往研究表明桂枝加葛根汤治疗颈椎病的疗效是肯定的,但有关桂枝加葛根汤干预纤维环细胞的差异蛋白组学研究尚未见报道。目的:从差异蛋白组学的角度,分析桂枝加葛根汤对椎... 详细信息

背景:研究表明纤维环破裂是颈椎病椎间盘退变的诱发因素。课题组既往研究表明桂枝加葛根汤治疗颈椎病的疗效是肯定的,但有关桂枝加葛根汤干预纤维环细胞的差异蛋白组学研究尚未见报道。目的:从差异蛋白组学的角度,分析桂枝加葛根汤对椎间盘纤维环细胞作用的靶位蛋白或相关蛋白。方法:体外培养SD大鼠纤维环细胞,将传3代纤维环细胞随机分为桂枝加葛根汤组和空白组,分别加入含自制桂枝加葛根汤血清的培养液以及含生理盐水血清的培养液干预。运用同位素标记相对和绝对定量技术标记2组样本的蛋白,二维液相色谱质谱仪(2D LC-MS/MS)鉴定蛋白并进行相对定量分析。结果与结论:以空白组作为对照,在桂枝加葛根组干预纤维环细胞后血小板衍生生长因子A、骨形态发生蛋白2、胰岛素样生长因子1、聚集蛋白聚糖核心蛋白、转化生长因子β3、白细胞介素1β蛋白表达上调;同时碱性成纤维生长因子、Ⅰ型胶原α1链蛋白表达下调。提示桂枝加葛根汤对纤维环细胞的退变有修复作用。

关键词：组织构建组织工程纤维环细胞颈椎桂枝加葛根汤含药血清二维液相色谱质谱仪差异蛋白质组学福建省自然科学基金

经颅直流电刺激改善慢性期脑卒中手功能障碍的脑机制研究

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经颅直流电刺激改善慢性期脑卒中手功能障碍的脑机制研究

作者：唐朝正福建中医药大学

学位级别：硕士

目的通过对进入平台期(发病时间>6个月)的严重脑卒中手功能障碍患者进行双侧经颅直流电刺激(tDCS)联合功能性电刺激治疗(FET)干预,观察该康复范式是否能进一步促进偏瘫患者手功能的恢复,并利用功能磁共振成像技术(fMRI)探索康复干预后... 详细信息

目的通过对进入平台期(发病时间>6个月)的严重脑卒中手功能障碍患者进行双侧经颅直流电刺激(tDCS)联合功能性电刺激治疗(FET)干预,观察该康复范式是否能进一步促进偏瘫患者手功能的恢复,并利用功能磁共振成像技术(fMRI)探索康复干预后脑卒中手功能障碍患者静息态脑网络的功能连接变化,以明确中枢性tDCS刺激改善患者手功能障碍的脑重组机制,从而为tDCS治疗慢性期脑卒中手功能障碍提供基于脑机制的理论依据和刺激参考方案。方法依托上海市第三康复医院和向社会公开招募,将筛选后符合诊断标准及纳入标准的38例慢性期脑卒中手功能障碍患者按中心电话随机方式分为2组,最终完成全部数据采集的患者共30例,其中试验组(tDCS联合FET治疗)15例,对照组(sham tDCS联合FET治疗)15例。两组患者均不限制其常规康复治疗,但在基本资料中予以记录。试验组给予20分钟双侧tDCS刺激(阳极置于患侧M1区,阴极置于健侧M1区)和60分钟FET训练,对照组给予20分钟sham tDCS刺激和60分钟FET训练,以上治疗均是每天1次,4周内一共完成20次联合康复干预。治疗前2-4周、治疗前和治疗后4周分别采用改良Fugl-Meyer上肢运动功能评分(mFMA-UE)、改良Ashworth评分(MAS)和Broetz手功能测试(BHFT)对两组患者进行临床评估。同时采用3T西门子磁共振设备分别于干预前后进行fMRI检查,观察康复治疗后患者静息态下脑网络的功能连接变化。结果(1)两组患者治疗前的一般资料及mFMA-UE评分、MAS评分和BHFT评分对比,差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗前2-4周的自发性恢复观察期,所有患者干预前的两次mFMA-UE评分和MAS评分自身前后对比,差异也均无统计学意义(P>0.05)。(2)康复干预4周后,两组患者治疗后的mFMA-UE评分、MAS评分和BHFT评分均较治疗前不同程度改善,差异具有统计学意义(P康复干预4周后,两组患者治疗后的mFMA-UE评分、MAS评分和BHFT评分组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。但试验组患者治疗前后mFMA-UE评分和BHFT评分的差值均比对照组患者提高更明显,差异有统计学意义(P0.05)。(4)纳入分析的30例被试(每组各15例)均完成干预前后2次fMRI检查。干预结束后网络内功能连接分析发现,与治疗前相比,试验组左侧(本研究中指患侧)感觉运动网络(1SMN)内同侧额中回和对侧楔前叶功能连接增强且背侧感觉运动网络(dSMN)内双侧小脑后叶功能连接也增强;对照组腹侧感觉运动网络(vSMN)内左侧顶下小叶功能连接增强,感觉运动网络(SMN)内左侧额下回功能连接增强但右侧舌回功能连接减弱。干预结束后网络间功能连接分析发现,与治疗前相比,试验组lSMN与小脑网络(CN)功能连接增强但与执行控制网络(ECN)功能连接减弱;对照组右侧感觉运动网络(rSMN)与1SMN和dSMN功能连接均减弱但与vSMN功能连接增强。(5)康复干预4周后,试验组左侧额中回功能连接的增加值与mFMA-UE评分的改善程度正相关(r=0.54,P=0.04);两组患者治疗前左侧小脑后叶的功能连接强度与康复干预后mFMA-UE评分的改善程度负相关(r=-0.43,P=0.02),且治疗前lSMN与rSMN的功能连接强度与干预后BHFT评分的改善程度正相关(r=0.51,P康复干预后获得的mFMA-UE评分改善也越多。

关键词：脑卒中手功能障碍经颅直流电刺激功能性电刺激治疗功能磁共振成像

福州市社区康复资源及脑卒中患者康复现况研究

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福州市社区康复资源及脑卒中患者康复现况研究

作者：刘薇福建中医药大学

学位级别：硕士

第一部分社区卫生服务中心康复资源现况目的：通过对福州市社区卫生服务中心康复资源的人力、物力、财力等基本情况进行调查,对目前福州市社区康复现况与存在的问题进行初步探讨,为促进福州市社区康复的总体发展提供客观的依据和建议。... 详细信息

第一部分社区卫生服务中心康复资源现况目的：通过对福州市社区卫生服务中心康复资源的人力、物力、财力等基本情况进行调查,对目前福州市社区康复现况与存在的问题进行初步探讨,为促进福州市社区康复的总体发展提供客观的依据和建议。方法：本研究采用整群分层抽样的方法,从福州31个社区卫生服务中心里,整群分层抽取9个社区卫生服务中心,以这9个社区卫生服务中心的负责人、财务人员和康复科的工作人员为调查对象,采用问卷调查、现场调查收集资料的方法,采集原始数据,并使用SPSS软件对原始数据进行直线相关分析和动态数列分析。结果：2010年-2012年福州市社区康复科的年门诊量在不断扩大,社区卫生服务中心最常用的服务种类为传统康复,现代康复设备的使用率均康复设备的使用率各个社区卫生服务中心从80%参差不齐,社区中康复最主要治疗的疾病类型是脊柱骨关节相关疾病。并无社区服务中心配备康复治疗师和康复护士,康复医师的专业情况以针灸推拿学专业最多,无康复医学或康复治疗学专业,康复医师中兼职康复医师的比重占总体比重的33.3%;2010年-2012年社区卫生服务中心康复科的收入呈现逐年递增的趋势,康复医师的工资待遇也是逐年递增的。结论：福州市社区康复科的年门诊量在不断扩大,社区卫生服务中心对康复的投入也在逐年增加,但也存在社区康复科门诊量总体人数较少、医院与社区的双向转诊善未全面实现、康复专业背景的专业人才引进困难、社区康复技术力量薄弱、社区康复服务网络不完善等问题。第二部分脑卒中社区康复情况现况调查目的：通过对福州市脑卒中患者出院后的功能障碍、日常生活能力、家居改造状况、康复状况及急性期后未接受社区康复的原因进行调查,对目前福州市脑卒中患者社区康复需求现况进行初步探讨,为脑卒中社区康复的开展提供建议。方法：对福州市440位出院脑卒中进行调查,用Barthel量表及自制的《脑卒中患者基本信息收集表》及《脑卒中患者社区康复状态评估表》对其功能障碍、日常生活能力、家居改造状况、康复状况及急性期后未接受社区康复的原因进行评估。结果：440位脑卒中出院的患者中,63.2%的患者仍残留不同程度功能障碍,且接受过社区康复的患者仅为5.5%。脑卒中患者的BI评分中,75.5%日常生活完全自理、20.9%轻度功能障碍、3.9%中度功能障碍、2.0%重度功能障碍。脑卒中的出院患者41.1%有运动功能障,28.2%有平衡功能障碍,18.6%有言语功能障碍,15.9%有吞咽功能障碍;脑卒中患者中6.4%对家居环境进行了改造;脑卒中患者有47.0%接受过康复服务,41.5%患者接受过医院康复,5.5%患者接受过社区康复,社区康复中以传统康复治疗为主。结论：福州市脑卒中患者出院后仍需要进一步的社区康复,应提高居民对社区康复医疗水平的信任度,加大社区康复宣传力度,促进居民对康复的认识,推广脑卒中患者家居环境的改造。

关键词：脑卒中社区康复资源调查

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中医认知功能理论体系的构建

中医杂志 2016年第1期57卷 12-15页

作者：陈玉鹏林丹红陈立典福建中医药大学中医学院福建省福州市350122 福建中医药大学研究生院福建中医药大学

从《黄帝内经》气、精、神学说,形神合一,五神脏理论出发,阐述认知功能以脏腑为用即认知功能以脏腑精气为基础;并从阳气养神的认识、督为阳脉之海的调节作用等角度,论述督脉通过调节机体的阳气成为脏腑生理功能与认知功能的枢纽;基于以... 详细信息

从《黄帝内经》气、精、神学说,形神合一,五神脏理论出发,阐述认知功能以脏腑为用即认知功能以脏腑精气为基础;并从阳气养神的认识、督为阳脉之海的调节作用等角度,论述督脉通过调节机体的阳气成为脏腑生理功能与认知功能的枢纽;基于以上进一步提出,以"脏腑为用、督脉为枢"为初步思路来构建中医认知功能理论体系。

关键词：认知功能神督脉阳气

畲药十二时辰复方治疗糖尿病足药效机制及外用软膏剂研制

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畲药十二时辰复方治疗糖尿病足药效机制及外用软膏剂研制

作者：刘思延福建中医药大学

学位级别：硕士

糖尿病足是糖尿病最常见的严重并发症之一,其治疗是国内外的热点与难点。糖尿病足导致的截肢率及病死率处于较高水平。有文献报道新发的糖尿病足经治疗后5年生存率仅为50%0%。中医药在治疗过程中积累了丰富的临床经验,特别是外治法在治... 详细信息

糖尿病足是糖尿病最常见的严重并发症之一,其治疗是国内外的热点与难点。糖尿病足导致的截肢率及病死率处于较高水平。有文献报道新发的糖尿病足经治疗后5年生存率仅为50%0%。中医药在治疗过程中积累了丰富的临床经验,特别是外治法在治疗糖尿病足领域中具有巨大优势和潜力。本课题建立大鼠糖尿病足溃疡创面模型,探讨畲药“十二时辰”复方高、中、低剂量组对大鼠创面愈合、病理改变方面的影响。以Wnt信号通路为切入点,研究十二时辰复方促进糖尿病足溃疡创面修复的机制。并研制十二时辰复方外用软膏剂,以便于携带及应用。本论文主要分为三个章节:第一章十二时辰复方对大鼠糖尿病足创面愈合的影响将SPF级雄性wistar大鼠随机分为空白对照组和糖尿病组。通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠产生高血糖,空腹血糖应≥16.7 mmol/L。对高血糖大鼠进行足部皮肤切除,建立大鼠糖尿病足溃疡模型;空白对照组大鼠未注射STZ并进行足部皮肤切除术。糖尿病足溃疡模型大鼠随机分为模型对照组、阳性对照组、十二时辰复方高、中、低剂量组,每组20只;空白对照组为进行皮肤切除的20只正常大鼠。治疗周期14天,于给药第3天、7天、10天、14天观察各组大鼠的创面愈合情况,测量并计算创面愈合率。空白对照组的平均创面愈合率分别为45.89%、68.89%、80.57%、94.63%,模型对照组分别为23.98%、43.90%、56.01%、75.78%,空白对照组愈合率显著高于模型对照组(p研究将上述大鼠分别于给药的第3天、第7天、第10天3个时间点各组随机取5只,采集溃疡创面组织后处死。将采集到的组织样品分别进行HE染色观察创面组织形态学结构,Western blot检测β-连环素(β-catenin)、糖原合成激酶-3β(GSK-3β)蛋白表达水平。结果表明:***染色观察:与空白对照组相比较,模型对照组创面炎症持续时间久,中剂量组在三个剂量组中效果最佳,成纤维细胞和新生血管出现时间早且数量多,肉芽组织成熟速度较模型对照组快,促进创面愈合情况与阳性对照组无显著性差异。2.β-catenin、GSK-3β蛋白表达:给药第3天、7天、10天,与空白对照组相比,模型对照组的β-catenin蛋白表达水平较低,GSK-3β蛋白表达水平较高,有统计学差异(p研究比较不同基质的软膏剂处方的稳定性,选出最佳基质处方进行单因素考察,在此基础上采用Box-Behnken设计,选出最佳软膏基质配比;以药物与基质的不同比例制备药膏,确定十二时辰复方软膏剂的最佳含药量,并观察软膏剂的外观性状。结果表明,最佳基质配方为以聚山梨酯为乳化剂的O/W型基质,最佳基质的配比为单硬脂酸甘油酯:吐温-80:白凡士林(0.8:4:3)。综上所述,十二时辰复方能够有效促进大鼠糖尿病足溃疡创面愈合,其中中剂量组效果最佳。且其促愈大鼠糖尿病足的机制与抑制Wnt通路有关,能够升高β-catenin蛋白表达,降低GSK-3β蛋白表达,并初步研制十二时辰外用软膏剂。

关键词：十二时辰软膏剂糖尿病足 Wnt通路机制研究