检索结果-南通市图书馆

加味补阳还五汤调控大网膜脂肪干细胞旁分泌防治术后腹腔粘连的体外研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

北京中医药大学学报 2024年第2期47卷 223-237页

作者：郑敏麟王亚楠范文江詹倩倩福建中医药大学中西医结合学院福州350122 福建中医药大学中西医结合研究院

目的明确加味补阳还五汤调控大网膜脂肪干细胞(ADSCs)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子⁃β1(TGF⁃β1)的作用机制,探讨该作用对腹膜间皮细胞TGF⁃β1/Sma和Mad相关蛋白(Smad)3信号通路及其下游上皮-间充质转化(EMT)、细胞外基质... 详细信息

目的明确加味补阳还五汤调控大网膜脂肪干细胞(ADSCs)旁分泌肝细胞生长因子(HGF)和转化生长因子⁃β1(TGF⁃β1)的作用机制,探讨该作用对腹膜间皮细胞TGF⁃β1/Sma和Mad相关蛋白(Smad)3信号通路及其下游上皮-间充质转化(EMT)、细胞外基质的影响,为临床防治术后腹腔粘连(PAA)提供依据。方法用0、5、10、20 g/L加味补阳还五汤培养ADSCs取得其条件培养基,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测以上各浓度的培养基中HGF、TGF⁃β1含量变化。制作中药培养基(以上述最佳质量浓度的加味补阳还五汤培养的ADSCs培养基)、普通培养基(正常ADSCs培养基)、低HGF培养基(低表达HGF的ADSCs培养基),ELISA法检测不同培养基干预腹膜间皮细胞前后HGF的含量。3种培养基分别干预TGF⁃β1诱导的腹膜间皮细胞EMT模型,运用蛋白质印迹法(Western blotting)、免疫荧光(IF)、qPCR方法,检测腹膜间皮细胞的TGF⁃β1/Smad信号通路相关蛋白、EMT相关蛋白和纤维连接蛋白(FN)的表达水平。结果与加味补阳还五汤0 g/L相比,加味补阳还五汤5、10、20 g/L中HGF含量增加(P普通培养基组>低HGF培养基组;各组培养基均可升高E⁃cad表达(P普通培养基组>低HGF培养基组。结论大网膜中ADSCs旁分泌HGF水平低下,可能是容易发生PAA的重要因素之一;加味补阳还五汤可能主要通过促进ADSCs旁分泌HGF,减少其旁分泌TGF⁃β1,从上游阻断TGF⁃β1/Smad3信号通路,从而抑制腹膜间皮细胞EMT,减少FN等细胞外基质沉积,最终防治PAA。

关键词：加味补阳还五汤术后腹腔粘连腹膜间皮细胞脂肪间充质干细胞肝细胞生长因子上皮-间充质转化

石斛合剂含药血清对高糖诱导小鼠足细胞损伤的保护作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国实验方剂学杂志 2024年第5期30卷 65-71页

作者：陈勇林晓晖张捷平郑燕芳庄舒婷余文珍福建中医药大学中西医结合学院福州350122 福建中医药大学药学院福州350122

目的:探讨石斛合剂含药血清对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及作用机制。方法:体外培养小鼠肾小球足细胞(MPC5),筛选高糖造模浓度和时间及石斛合剂含药血清最佳给药浓度;将细胞分为正常组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+10%空白血清)、模型... 详细信息

目的:探讨石斛合剂含药血清对高糖诱导的小鼠足细胞损伤的影响及作用机制。方法:体外培养小鼠肾小球足细胞(MPC5),筛选高糖造模浓度和时间及石斛合剂含药血清最佳给药浓度;将细胞分为正常组(5.5 mmol·L^(-1)葡萄糖+10%空白血清)、模型组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖+10%空白血清)、石斛合剂含药血清组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖+10%石斛合剂含药血清),铁死亡抑制剂(Fer-1)组(30 mmol·L^(-1)葡萄糖+10%空白血清+1μmol·L^(-1)Fer-1)。采用试剂盒检测细胞中Fe^(2+)、乳酸脱氢酶(LDH)水平;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞谷胱甘肽(GSH)、过氧化脂质(LPO)含量;荧光探针检测活性氧(ROS)水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测足细胞中肾母细胞瘤基因-1(WT-1)、结蛋白(Desmin)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)m RNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测足细胞中WT-1、Desmin、ACSL4和GPX4蛋白表达水平。结果:与空白组比较,30 mmol·L^(-1)高糖干预48 h可显著降低足细胞活力(P<0.01),10%石斛合剂含药血清改善高糖诱导的足细胞活力最为显著(P<0.01)。与正常组比较,模型组足细胞内Fe^(2+)、LDH、LPO、ROS水平及Desmin、ACSL4 m RNA和蛋白表达显著升高(P<0.01),GSH水平及WT-1、GPX4 m RNA和蛋白表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,石斛合剂含药血清组足细胞内Fe^(2+)、LDH、LPO、ROS水平及Desmin、ACSL4 m RNA和蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01),GSH水平及WT-1、GPX4 m RNA和蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:石斛合剂含药血清对高糖诱导的足细胞损伤具有保护作用,与其抑制铁死亡有关。

关键词：石斛合剂糖尿病肾病足细胞铁死亡

肠道菌群-胆汁酸在骨质疏松骨代谢紊乱中的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国骨质疏松杂志 2024年第5期30卷 761-767页

作者：陈宇航许云腾张欣梁辉强卓俊宽王珊珊福建中医药大学中西医结合学院福建福州350122 福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122

骨质疏松症是常见的骨代谢疾病之一,其发病机制涉及广泛且复杂的相互作用。骨质疏松症的发生发展与肠道菌群失调和胆汁酸水平改变存在密切联系。肠道菌群能通过免疫、内分泌等机制调节骨代谢,亦能代谢生成次级胆汁酸进而重塑胆汁酸池。... 详细信息

骨质疏松症是常见的骨代谢疾病之一,其发病机制涉及广泛且复杂的相互作用。骨质疏松症的发生发展与肠道菌群失调和胆汁酸水平改变存在密切联系。肠道菌群能通过免疫、内分泌等机制调节骨代谢,亦能代谢生成次级胆汁酸进而重塑胆汁酸池。胆汁酸作为肠道菌群的一种代谢产物,可通过结合多种胆汁酸受体参与调节骨代谢,亦可逆向影响肠道菌群结构。本文从系统生物学的角度出发并详细阐述肠道菌群、胆汁酸与骨质疏松症之间的内在联系、肠道菌群和胆汁酸的互作特点以及肠道菌群-胆汁酸失衡对骨质疏松症的影响,旨在为骨质疏松症的防治提供新思路。

关键词：骨质疏松症肠道菌群胆汁酸骨代谢

大网膜ADSCs旁分泌HGF与加味补阳还五汤抑制腹膜间皮细胞EMT的相关性的体外研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华中医药学刊 2024年

作者：郑敏麟王亚楠范文江詹倩倩福建中医药大学中西医结合学院福建中医药大学中西医结合研究院

目的：通过体外研究，探讨加味补阳还五汤抑制的腹膜间皮细胞（PMC）上皮-间充质转化（EMT）防治术后腹腔粘连（PAA）的作用，是否主要通过促进大网膜脂肪干细胞（ADSCs）旁分泌HGF。方法：实验1明确加味补阳还五汤抑制PMC的EMT作用，... 详细信息

目的：通过体外研究，探讨加味补阳还五汤抑制的腹膜间皮细胞（PMC）上皮-间充质转化（EMT）防治术后腹腔粘连（PAA）的作用，是否主要通过促进大网膜脂肪干细胞（ADSCs）旁分泌HGF。方法：实验1明确加味补阳还五汤抑制PMC的EMT作用，是该方对PMC的直接作用，还是通过调控大网膜中的脂肪干细胞（ADSCs）旁分泌的间接作用：使用加味补阳还五汤与加味补阳还五汤培养ADSCs后制取其条件培养基（以下称“中药培养基”）分别干预EMT模型的PMC，WesternBlot法检测EMT相关的蛋白E-cadherin、α-SMA的表达水平。实验2明确加味补阳还五汤抑制PMC的EMT作用，是否与大网膜中的脂肪干细胞（ADSCs）旁分泌肝细胞生长因子(HGF)相关：用低表达HGF的ADSCs条件培养基（以下称“低HGF培养基”）、正常ADSCs条件培养基（以下称“普通培养基”）、中药培养基等3种培养基干预PMC，并检测以下指标：⑴用ELISA法检测在干预PMC之前和之后，3种培养基中HGF的含量。⑵WesternBlot法、qPCR法、IF法检测干预后各组PMC的EMT相关蛋白表达水平，划痕实验检测各组PMC的迁移能力。结果：实验1加味补阳还五汤与中药培养基对EMT相关指标的影响：与模型组相比，加味补阳还五汤组上调E-Cad的蛋白表达（P＜0.05），下调α-SMA的蛋白表达（P＜0.05）；中药培养基组显著上调了E-Cad的蛋白表达（P＜0.01），显著下调α-SMA的蛋白表达（P＜0.01）。与加味补阳还五汤组相比，中药培养基组上调E-Cad的蛋白表达（P＜0.05），显著下调α-SMA的蛋白表达（P＜0.01）。实验2⑴作用于PMC前后，3种不同的培养基中HGF含量的比较：作用于PMC前，相比于普通培养基，低HGF培养基中含量显著降低（P＜0.01），中药培养基中含量显著增加（P＜0.01）。作用于PMC后，各培养基组含量均显著性下降。⑵EMT相关蛋白表达情况：综合WesternBlot、qPCR、IF结果，与模型组相比，各培养基组均可升高E-Cad表达（P＜0.05或P＜0.01），降低α-SMA、VIM表达（P＜0.05或P＜0.01），各培养基组均可抑制PMC的EMT，效果依次为中药培养基组＞普通培养基组＞低HGF培养基组。⑶发生EMT的细胞迁移能力变化情况：干预24h、48h后，与模型组相比，各组愈合率均有显著下降（P＜0.01），各组培养基均可降低EMT模型的R的迁移能力，效果依次为中药培养基组＞普通培养基组＞低HGF培养基组。⑷EMT相关蛋白表达与HGF含量相关性分析：E-Cad蛋白表达量与HGF含量呈正相关性（P＜0.05），α-SMA、VIM蛋白表达量与HGF含量呈负相关性（P＜0.05或P＜0.01）。结论：加味补阳还五汤抑制PMC的EMT防治PAA的疗效可能是多靶点的，既有对PMC的直接作用，也有通过增强大网膜中的ADSCs旁分泌HGF的间接作用，而后者更为主要。

关键词：加味补阳还五汤术后腹腔粘连腹膜间皮细胞脂肪间充质干细胞肝细胞生长因子上皮-间充质转化

淫羊藿苷通过Caveolin-1/Hippo信号通路促进BMSCs成骨分化改善骨代谢紊乱的机制研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国中药杂志 2024年

作者：韩一旦张海凤许云腾钟玉环王晓宁俞允严媛丽王珊珊李西海福建中医药大学中西医结合研究院福建中医药大学中西医结合学院福建中医药大学科学技术处福建省中西医结合老年性疾病重点实验室

该实验以“肾藏精主骨生髓”为指导，通过体内体外实验，探究淫羊藿苷（icariin，ICA）通过小窝蛋白（caveolin-1，Cav1）调控大鼠骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells，BMSCs）成骨分化机制，旨在为中医药防治绝经后骨质疏... 详细信息

该实验以“肾藏精主骨生髓”为指导，通过体内体外实验，探究淫羊藿苷（icariin，ICA）通过小窝蛋白（caveolin-1，Cav1）调控大鼠骨髓间充质干细胞（bone mesenchymal stem cells，BMSCs）成骨分化机制，旨在为中医药防治绝经后骨质疏松症提供理论依据。采用全骨髓贴壁法获取4周龄SD雌性大鼠原代细胞。流式细胞术检测表面标志物CD29、CD90、CD11b、CD45表达；成骨成脂分化检测分化潜能。CCK-8检测ICA对细胞活性影响；茜素红染色验证ICA对矿化结节形成影响。慢病毒沉默Cav1构建稳转细胞株。茜素红染色观察沉默Cav1对成骨分化影响。Western blot检测Cav1、Hippo/TAZ、成骨指标Runt相关转录因子2（runt-related transcription factor 2，RUNX2）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）蛋白表达。结果显示，通过全骨髓贴壁法成功获取原代细胞，阳性表达大鼠BMSCs表面标志物，具有成骨成脂多向分化潜能。CCK-8结果和茜素红染色结果显示1×10-7mol·L-1为ICA最佳干预浓度（P<0.05）。成骨诱导分化过程中，ICA抑制Cav1表达（P<0.05），促进TAZ表达（P<0.05）。茜素红染色证明沉默Cav1明显促进BMSCs成骨分化；ICA干预后TAZ表达激活，成骨指标ALP、RUNX2表达升高。综上所述，沉默Cav1显著促进BMSCs成骨分化，ICA通过抑制Cav1调控Hippo/TAZ信号通路促进BMSCs成骨分化。

关键词：绝经后骨质疏松症淫羊藿苷骨髓间充质干细胞成骨分化 Caveolin-1 Hippo/TAZ

加味涤痰汤对慢性间歇低氧大鼠心肌铁死亡的影响

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

北京中医药大学学报 2024年第10期 1427-1437页

作者：王奕锦陈沁吴润华林凡陈丽丽伍娟王春桔杨眉峰福建中医药大学中西医结合学院福建中医药大学临床技能教学中心

目的基于磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路探讨加味涤痰汤对慢性间歇低氧大鼠心肌铁死亡的影响及其机制。方法将30只8周龄雄性SD大鼠以随机数字表法分为正常对照组、低氧干预组、加味涤痰汤干预组，每组10只。低氧... 详细信息

目的基于磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路探讨加味涤痰汤对慢性间歇低氧大鼠心肌铁死亡的影响及其机制。方法将30只8周龄雄性SD大鼠以随机数字表法分为正常对照组、低氧干预组、加味涤痰汤干预组，每组10只。低氧干预组和加味涤痰汤干预组采用间歇低氧箱造模，每天干预8 h。每日干预前后予以灌胃，加味涤痰汤干预组药物剂量为16.38 g/kg,其余组予生理盐水，持续12周。HE染色观察心肌组织形态学；透射电镜观察心肌细胞线粒体超微结构；生化法检测心肌组织Fe2+、丙二醛（MDA）含量；蛋白质印迹法检测心肌组织磷酸化PI3K（p-PI3K）、PI3K、磷酸化Akt（p-Akt）、Akt、核因子E2相关因子2（Nrf2）、谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）、溶质载体家族7成员11（SLC7A11）、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4（ACSL4）蛋白表达。DMEM高糖培养基培养大鼠心肌细胞（H9c2）;超高效液相色谱检测加味涤痰汤药物成分；CCK-8检测不同质量浓度加味涤痰汤干预下的细胞存活率。将细胞分为常氧组、铁死亡诱导剂组、铁死亡诱导剂+加味涤痰汤干预组，采用蛋白质印迹法检测p-Akt、GPX4蛋白表达；常氧组、低氧干预12 h组、低氧干预12 h+740Y-P组检测p-PI3K、GPX4蛋白表达；常氧组、低氧干预6 h组、低氧干预12 h组、低氧干预12 h+加味涤痰汤低、中、高剂量组（药物质量浓度分别为5、10和20 g/L）,检测p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、GPX4蛋白表达。结果与正常对照组比较，低氧干预组大鼠心肌细胞排列紊乱、肿胀，线粒体排列混乱、膜密度增高、嵴断裂，同时伴有空泡变性；与低氧干预组比较，加味涤痰汤干预组心肌细胞排列较为整齐，未见明显肿胀，线粒体形态较为规则。与正常对照组比较，低氧干预组MDA、Fe2+含量升高，p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值降低，SLC7A11、GPX4、Nrf2表达减少，ACSL4表达升高（P<0.05）;与低氧干预组比较，加味涤痰汤干预组MDA、Fe2+含量降低，p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值升高，SLC7A11、GPX4、Nrf2表达升高，ACSL4表达降低（P<0.05）。超高效液相色谱检测加味涤痰汤含有DL-水苏碱、D-（+）-苹果酸、腺苷等。与加味涤痰汤0、1.25、2.50、5.00和20.00 g/L组比较，10.00 g/L组的细胞存活率增高（P<0.05）。与常氧组比较，铁死亡诱导剂组的p-Akt、GPX4表达降低（P<0.05）;与铁死亡诱导剂组比较，铁死亡诱导剂+加味涤痰汤干预组p-Akt、GPX4表达升高（P<0.05）;与常氧组比较，低氧干预12 h组的p-PI3K、GPX4表达减少（P<0.05）;与低氧干预12 h组比较，低氧干预12 h+740Y-P组p-PI3K、GPX4表达升高（P<0.05）;与常氧组比较，低氧干预6 h组、低氧干预12 h组的GPX4表达减少，p-Akt/Akt、p-PI3K/PI3K值均降低（P<0.05）;与低氧干预6 h组、低氧干预12 h组比较，低氧干预12 h+加味涤痰汤低、中、高剂量组的p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt值升高，GPX4表达升高（P<0.05）。结论加味涤痰汤可能通过调节PI3K/Akt信号通路改善大鼠心肌铁死亡，从而对慢性间歇低氧大鼠心脏损伤起到一定的保护作用。

关键词：加味涤痰汤磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B 慢性间歇低氧心肌铁死亡大鼠

栝楼桂枝汤调控TLR3通路对小胶质细胞活化诱导的神经细胞损伤的保护作用研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国医院药学杂志 2024年第4期44卷 398-403页

作者：胡海霞钟兴华林心君朱晓勤福建中医药大学科技创新与转化中心福建中医药大学中西医结合研究院福建中医药大学中西医结合学院福建福州350122

目的:探讨栝楼桂枝汤通过TLR3(toll-like receptor 3)信号通路抑制小胶质细胞活化介导的炎症反应发挥神经细胞保护作用的分子机制。方法:栝楼桂枝汤预处理后,分别使用脂多糖刺激BV2细胞建立炎症模型和BV2细胞的条件性培养基(microglia-c... 详细信息

目的:探讨栝楼桂枝汤通过TLR3(toll-like receptor 3)信号通路抑制小胶质细胞活化介导的炎症反应发挥神经细胞保护作用的分子机制。方法:栝楼桂枝汤预处理后,分别使用脂多糖刺激BV2细胞建立炎症模型和BV2细胞的条件性培养基(microglia-conditioned media, MCM)干预HT22细胞制备神经细胞损伤模型。CCK-8(cell counting kit-8)法测定细胞活力;ELISA法检测细胞培养上清中的细胞因子;通过免疫荧光实验检测TLR3及TRIF(toll/interleukin receptor domain-containing adaptor-inducing IFNβ)蛋白的表达情况;采用DNA-binding ELISA法检测转录因子IRF3(interferon regulatory factor 3)的活化水平;细胞TLR3 siRNA(small interfering RNA)转染实验验证栝楼桂枝汤的作用靶点;采用Western blot法检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达水平;采用Caspase-9活性测定法测定其活性。结果:栝楼桂枝汤可显著减轻MCM诱导的HT22细胞损伤,并上调脂多糖刺激的BV2细胞上清中IFN-β的含量,下调IL-8的含量。同时,栝楼桂枝汤显著增加TLR3通路相关蛋白的表达水平并促进IRF3的活化水平,且敲低TLR3表达后,栝楼桂枝汤对抗炎因子IL10无促进作用。此外,栝楼桂枝汤可使经MCM干预后HT22细胞的Bcl-2表达增加,Bax表达下降,Caspase-9活性降低。结论:栝楼桂枝汤可能通过激活TLR3信号通路调节小胶质细胞活化后的炎症反应,抑制神经细胞凋亡,进而缓解神经细胞损伤。

关键词：栝楼桂枝汤小胶质细胞 TLR3信号通路炎症反应神经细胞凋亡

加味补阳还五汤抑制腹膜间皮细胞上皮-间充质转换防治术后腹腔粘连的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

世界科学技术-中医药现代化 2024年第6期26卷 1458-1470页

作者：郑敏麟范文江王亚楠詹倩倩福建中医药大学中西医结合学院福州350122 福建中医药大学中西医结合研究院福州350122

目的探讨加味补阳还五汤治疗术后腹腔粘连(Postoperative abdominal adhesions,PAA)的疗效和机制。方法将108只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、透明质酸钠组、加味补阳还五汤组。模型组、透明质酸钠组及加味补阳还五汤组进行PAA模... 详细信息

目的探讨加味补阳还五汤治疗术后腹腔粘连(Postoperative abdominal adhesions,PAA)的疗效和机制。方法将108只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、透明质酸钠组、加味补阳还五汤组。模型组、透明质酸钠组及加味补阳还五汤组进行PAA模型造模,透明质酸钠阳性对照组。分别于术后7、14、28天分批处死,在损伤部位进行目视评分,取材并进行苏木素-伊红染色、马松染色并进行粘连评级,扫描电镜观察腹膜间皮细胞的超微结构。应用免疫组织化学法观察粘连部位的上皮-间充质转换(EMT)相关细胞标志蛋白E-cadherin及α-SMA的表达情况。结果①加味补阳还五汤防治PAA的疗效评价:加味补阳还五汤组Diamod目视粘连积分降低(P<0.05),HE染色和Masson染色粘连等级降低(P<0.05)。②腹膜间皮细胞损伤修复情况:扫描电镜显示加味补阳还五汤组视野内能见到铺路状腹膜间皮细胞,表明加味补阳还五汤组能改善PAA盲肠浆膜侧腹膜间皮细胞的损伤。③腹膜间皮细胞EMT相关指标表达情况:加味补阳还五汤组E-Cadherin蛋白表达增多(P<0.05),α-SMA蛋白表达减少(P<0.05)。结论加味补阳还五汤及透明质酸钠均能有效防治PAA,其疗效可能是通过减轻腹膜间皮细胞EMT实现的。

关键词：术后腹腔粘连加味补阳还五汤上皮间充质转换 E-钙黏蛋白 α-平滑肌肌动蛋白

加味补阳还五汤对术后腹腔粘连TGF-β1/Smad3通路和腹膜间皮细胞上皮-间充质转化的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华中医药学刊 2024年第5期42卷 20-27,I0007-I0013页

作者：郑敏麟范文江王亚楠詹倩倩福建中医药大学中西医结合学院福建福州350122 福建中医药大学中西医结合研究院福建福州350122

目的探讨加味补阳还五汤对术后腹腔粘连转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)/Smad3通路和腹膜间皮细胞的上皮-间充质转化的影响。方法将108只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、透明质酸钠组、加味补阳还五汤... 详细信息

目的探讨加味补阳还五汤对术后腹腔粘连转化生长因子β1(transforming growth factor-beta1,TGF-β1)/Smad3通路和腹膜间皮细胞的上皮-间充质转化的影响。方法将108只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、透明质酸钠组、加味补阳还五汤组。模型组、透明质酸钠组及加味补阳还五汤组进行术后腹腔粘连模型造模,透明质酸钠为阳性对照组,在手术造模后,一次性腹腔喷洒1%的透明质酸钠凝胶,0.5mL/kg。加味补阳还五汤组术后第2天开始灌胃,灌胃剂量为19.5g/(kg·d)。分别于术后7、14、28d分批将动物处死,每次每组处死9只大鼠。在损伤部位取材:应用免疫组织化学法观察粘连部位的纤维化通路相关蛋白TGF-β1、Smad3、Smad7的表达情况;以及其下游胶原沉积相关蛋白Ⅰ型胶原(CollagenⅠ,Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ,Col-Ⅲ)的表达情况和上皮-间充质转化(Epithelialmesenchy-maltransition,EMT)相关的蛋白E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smoothmuscleactin,α-SMA)的表达情况。结果①不同组别间,术后7、14、28d3个时间节点,TGF-β1/Smad3纤维化通路相关蛋白表达情况:与正常组比较,模型组TGF-β1蛋白表达增多(均为P<0.01);与模型组比较,透明质酸钠组和加味补阳还五汤组TGF-β1蛋白表达减少(均为P<0.05)。与正常组比较,模型组Smad3蛋白表达增多(均为P<0.05);与模型组比较,透明质酸钠组和加味补阳还五汤组Smad3蛋白表达减少(P<0.05)。与正常组比较,模型组Smad7蛋白表达减少(均为P<0.01);与模型组比较,透明质酸钠组和加味补阳还五汤组Smad7蛋白表达增多(均为P<0.05)。②胶原沉积情况:术后7、14、28d3个时间节点,Col-Ⅰ蛋白表达存在差异:与正常组比较,模型组Col-Ⅰ蛋白表达增多(均P<0.01);与模型组比较,透明质酸钠组和加味补阳还五汤组Col-Ⅰ蛋白表达减少(均P<0.01)。与正常组比较,模型组Col-Ⅲ蛋白表达增多(均P<0.01);与模型组比较,透明质酸钠组和加味补阳还五汤组Col-Ⅲ蛋白表达减少(均P<0.01)。③EMT相关指标表达情况:不同组别间,术后7、14、28d3个时间节点,E-Cadherin蛋白表达存在差异:与正常组比较,模型组E-Cadherin蛋白表达减少(均P<0.05);与模型组比较,透明质酸钠组和加味补阳还五汤组E-Cadherin蛋白表达增多(均P<0.05)。与正常组比较,模型组α-SMA蛋白表达增多(均P<0.01);与模型组比较,透明质酸钠组和加味补阳还五汤组α-SMA蛋白表达减少(均P<0.05)。结论加味补阳还五汤防治术后腹腔的机制可能是通过抑制TGF-β1/Smad3通路相关蛋白TGF-β1、Smad3蛋白、促进Smad7蛋白的表达抑制纤维化;促进E-Cadherin蛋白、减少α-SMA蛋白表达,减轻腹膜间皮细胞的EMT,抑制Col-Ⅰ、Col-Ⅲ的表达减少细胞外基质的沉积,从而减轻腹膜粘连。

关键词：术后腹腔粘连加味补阳还五汤纤维化上皮-间充质转化 TGF-β1/Smad3