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促卵合剂调控AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF通路改善卵泡发育不良大鼠氧化应激及凋亡的作用机制

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中国实验方剂学杂志 2024年第16期30卷 76-84页

作者：胡莹莹丁珊珊林雪娟卓祖顺张梦婷朱龙李红陈莹魏佳吕绍光福建中医药大学福州350122 福建中医药大学中医证研究基地福州350122 福建省立医院福州350001

目的:探讨促卵合剂通过调控腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/缺氧诱导因子-1/血管内皮生长因子(AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF)通路改善卵泡发育不良(FM)大鼠氧化应激及凋亡的作用机制。方法:将48只雌性SD大鼠随机分为正常组8只,造模... 详细信息

目的:探讨促卵合剂通过调控腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/缺氧诱导因子-1/血管内皮生长因子(AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF)通路改善卵泡发育不良(FM)大鼠氧化应激及凋亡的作用机制。方法:将48只雌性SD大鼠随机分为正常组8只,造模组40只,造模组大鼠连续灌胃雷公藤多苷混悬液(75 mg·kg^(-1))30 d进行造模,造模后随机分为模型组、克罗米芬组(4.5 mg·kg^(-1))、促卵合剂低、中、高剂量组(8.1、16.2、32.4 g·kg^(-1)),每组8只。相应剂量药物给药,正常组及模型组灌胃等体积灭菌水,连续干预14 d。巴氏染色检测各组大鼠动情周期变化;苏木素-伊红(HE)染色观察卵巢组织病理学及卵泡计数;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清促卵泡激素(FSH)、黄体生成素(LH)及雌二醇(E2)含量;化学荧光法检测卵巢组织中活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;原位末端标记法(TUNEL)检测卵巢颗粒细胞凋亡率;免疫组化法检测卵巢组织B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测卵巢组织AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF mRNA及蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠动情周期紊乱,次级、成熟卵泡减少,闭锁卵泡增多,血清FSH及LH含量,卵巢组织ROS含量、Bax表达、卵巢颗粒细胞凋亡率、AMPK mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.01),E2含量、SOD活性、Bcl-2表达、mTOR、HIF-1、VEGF mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,克罗米芬组及促卵合剂高、中剂量组次级卵泡和成熟卵泡增加,闭锁卵泡显著减少,血清FSH及LH含量、卵巢组织ROS含量、Bax表达、细胞凋亡、AMPK mRNA及蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),E2含量、SOD活性、Bcl-2、mTOR、HIF-1、VEGF mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01)。结论:促卵合剂可能通过调控AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF通路来抑制氧化应激减少颗粒细胞凋亡,促进卵泡正常发育成熟,减少卵泡闭锁,保护卵巢功能,进而对FM发挥治疗作用。

关键词：卵泡发育不良促卵合剂氧化应激凋亡腺苷酸活化蛋白激酶/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白/缺氧诱导因子-1/血管内皮生长因子(AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF)通路

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基于核酸适配体的比色生物传感器研究进展

分析试验室 2024年第3期43卷 433-442页

作者：黄丽珊胡奕津范申张红艳福建中医药大学药学院福州350122

核酸适配体因能与目标物特异性结合而被用作生物识别元件,广泛用于生物传感器的研究。基于适配体的比色生物传感器,因简便、经济且直观可视等特点,在环境保护、医疗诊断和食品安全等领域备受青睐。随着生物技术和纳米技术的迅速发展,结... 详细信息

核酸适配体因能与目标物特异性结合而被用作生物识别元件,广泛用于生物传感器的研究。基于适配体的比色生物传感器,因简便、经济且直观可视等特点,在环境保护、医疗诊断和食品安全等领域备受青睐。随着生物技术和纳米技术的迅速发展,结合不同显色途径和信号放大方法,已建立了多种操作简便、特异性强、灵敏度高的基于适配体的比色传感方法,为现场快速检测技术的发展提供了新思路和新选择。识别元件、信号探针及信号放大策略都是影响比色生物传感器准确性和灵敏度的重要因素,纳米材料和放大策略的选择及设计非常重要。本文主要基于酶催化和等离子体共振比色原理,介绍了近年来比色适配体传感器的研究进展,为高灵敏比色生物传感器的研究和应用提供参考。

关键词：核酸适配体比色生物传感器传感模式综述

基于转录组学和代谢组学联合分析草珊瑚萜类化合物生物合成的组织特异性分布

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生物工程学报 2024年第2期40卷 542-561页

作者：吴迪张燕燕林楠魏艺聪福建中医药大学药学院福建福州350122

本研究旨在探究草珊瑚叶和根中萜类化合物的组织特异性分布差异,解析其药效品质差异形成的分子机制。采用液相色谱-质谱联用技术(liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS)和Illumina HiSeq~(TM)高通量测序技术获得草珊瑚[Sarca... 详细信息

本研究旨在探究草珊瑚叶和根中萜类化合物的组织特异性分布差异,解析其药效品质差异形成的分子机制。采用液相色谱-质谱联用技术(liquid chromatography-mass spectrometry, LC-MS)和Illumina HiSeq~(TM)高通量测序技术获得草珊瑚[Sarcandra glabra(thunb) naka]叶和根的代谢组学和转录组学数据。代谢组学结果表明参与叶和根中萜类合成的差异代谢物有50个,包括法尼西基半胱氨酸、甘油醛-3-磷酸、甲羟戊酸-5-磷酸等。转录学结果表明差异代谢酶基因有57条,包括ACTC、HMGCR、MVK、DXS与KS等,并预测了MYB、C2H2、AP2/ERF-ERF等7个转录因子参与调控草珊瑚不同组织部位中萜类的合成和积累差异。实时荧光定量PCR(quantitative real-time polymerase chain reaction, qRT-PCR)结果显示,随机选取的8个参与萜类合成的酶基因在草珊瑚不同组织部位中的表达趋势与转录组学测序结果一致。本研究有助于阐明草珊瑚叶和根临床疗效差异形成的分子机制,同时为草珊瑚的资源开发利用奠定基础。

关键词：草珊瑚萜类代谢组学转录组学

载紫杉醇的大黄酸偶联物胶束在荷瘤小鼠体内药效学研究

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中国药学杂志 2024年第7期59卷 605-611页

作者：陆伟利欧阳惠枝许雪雅李崇仙郑雅玲王晓颖徐伟福建中医药大学药学院福州350122

目的研究载紫杉醇(paclitaxel, PTX)的D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS)修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物胶束(PTX/TPGS-CR胶束)在荷瘤小鼠体内的药效学。方法测定PTX/TPGS-CR胶束的pH值及渗透压。采用Balb/c小鼠建立4T1皮下移... 详细信息

目的研究载紫杉醇(paclitaxel, PTX)的D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(TPGS)修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物胶束(PTX/TPGS-CR胶束)在荷瘤小鼠体内的药效学。方法测定PTX/TPGS-CR胶束的pH值及渗透压。采用Balb/c小鼠建立4T1皮下移植瘤模型,以Taxol^(■)作为阳性对照,以肿瘤生长曲线、抑瘤率等为主要考察指标,通过观察小鼠的体质量变化、脏器指数、病理组织HE染色切片,测定各组肿瘤组织样品P-糖蛋白(P-gp)蛋白表达情况,考察PTX/TPGS-CR胶束的安全性和有效性。结果 PTX/TPGS-CR胶束溶液的pH值与0.9%氯化钠注射液的pH值相近(5.0~7.0),渗透压为736.6~757.2 kPa。Taxol^(■)和PTX/TPGS-CR胶束低、中、高剂量组的抑瘤率分别为29.91%、20.87%、41.06%及41.84%。PTX/TPGS-CR胶束制剂的抑瘤效果优于同剂量Taxol^(■)(P<0.05),且对抑瘤效果显示剂量依赖性特征。给药期间,同等剂量下PTX/TPGS-CR胶束组小鼠体质量、器官未受到明显的影响,证明其安全性良好;肿瘤组织P-gp表达结果显示TPGS-CR胶束具有抑制P-gp表达的作用。结论 PTX/TPGS-CR胶束制剂是一种高效、低毒的纳米制剂;其具有良好的抑瘤效果,能降低PTX的毒副作用;并能通过抑制P-gp表达从而提高肿瘤细胞对PTX的敏感性,有利于肿瘤的治疗。

关键词：紫杉醇聚合物胶束大黄酸偶联物药效学

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红景天苷对缺血性脑损伤大鼠的作用

中国药理学通报 2024年第5期40卷 873-880页

作者：吴青青吴慧玲周彬彬余正双杨泽霖赖文芳洪桂祝福建中医药大学药学院福建福州350122

目的基于超高效液相色谱-电喷雾-串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)技术研究红景天苷(salidroside,Sal)的血脑屏障(blood brain barrier,BBB)穿透性,并通过网络药理学、分子对接技术和动物实验探讨Sal治疗缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)的作... 详细信息

目的基于超高效液相色谱-电喷雾-串联质谱(UPLC-ESI-MS/MS)技术研究红景天苷(salidroside,Sal)的血脑屏障(blood brain barrier,BBB)穿透性,并通过网络药理学、分子对接技术和动物实验探讨Sal治疗缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)的作用靶点及机制。方法利用UPLC-ESI-MS/MS技术研究Sal的BBB穿透性;运用多个数据库预测Sal的作用靶点和IS的疾病靶点,构建PPI网络并筛选核心靶点,进行GO和KEGG富集分析,并通过分子对接技术和动物实验进行验证。结果Sal给药正常大鼠和MCAO大鼠后,血浆和脑组织中均检测到Sal原形和代谢物酪醇;网络药理学共筛选出Sal治疗IS的作用靶点191个,GO功能富集分析主要涉及蛋白水解、细胞迁移的正调控等生物过程;KEGG通路分析提示PI3K-Akt、MAPK、FOXO等信号通路在Sal治疗IS过程中发挥关键作用;分子对接结果显示,Sal与对接的核心靶点均有良好的结合能力;动物实验结果表明,Sal可以明显改善MCAO大鼠的神经功能损伤,明显增加缺血侧Nissl阳性细胞的数量,促进核心靶点VEGF、EGFR和IGF1蛋白的表达,抑制IL-6和MMP9蛋白的表达。结论Sal能够穿透BBB,进入中枢神经系统发挥药理作用;网络药理学预测了Sal治疗IS的核心靶点,包括VEGFA、EGFR、IL-6、MMP9、IGF1、CASP3、ALB、SRC,通过动物实验验证了Sal对部分核心靶点的作用,为今后临床进一步探讨Sal治疗IS的作用机制提供参考依据。

关键词：红景天苷缺血性脑卒中网络药理学分子对接 VEGF

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豨莶草提取物对脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用

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中国药理学通报 2024年第1期40卷 70-75页

作者：吴慧玲吴青青陈景泉周彬彬余正双杨泽霖赖文芳洪桂祝福建中医药大学药学院福建福州350122

目的研究豨莶草提取物对脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用,并探讨其作用机制。方法 SD大鼠60只,线栓法制备大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型,实验分为假手术(Sham)组,模型(MCAO)组,豨莶草低剂量(XXC-L)、... 详细信息

目的研究豨莶草提取物对脑缺血/再灌注大鼠的神经保护作用,并探讨其作用机制。方法 SD大鼠60只,线栓法制备大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)模型,实验分为假手术(Sham)组,模型(MCAO)组,豨莶草低剂量(XXC-L)、中剂量(XXC-M)、高剂量(XXC-H)组,连续给药7天。mNSS评估大鼠神经功能损伤,MRI检测大鼠缺血侧脑梗死体积,Nissl染色检测Nissl阳性细胞数;Western blot检测Bax、Bcl-2、NeuN蛋白表达;免疫荧光染色检测Tunel、NeuN;RT-qPCR检测IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达。结果豨莶草提取物能显著降低MCAO大鼠mNSS评分和缺血侧脑梗死体积(P<0.05,P<0.01),促进缺血侧脑组织Nissl阳性细胞数和NeuN表达、抑制Tunel阳性细胞数(P<0.01);同时,豨莶草提取物能抑制IL-1β、TNF-α、IL-6mRNA及Bax蛋白,促进Bcl-2、NeuN蛋白(P<0.01)。结论豨莶草提取物对MCAO大鼠具有神经保护作用。

关键词：豨莶草提取物脑缺血/再灌注凋亡 NeuN mNSS评分神经保护

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基于中药整体成分的参白纳米混悬剂大鼠体内药代动力学分析

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中国实验方剂学杂志 2024年第2期30卷 164-171页

作者：刘伟婷简凤娇黄可心李孝栋福建中医药大学药学院福州350122

目的:明确参白纳米混悬剂中药物整体成分大鼠体内药代动力学测定方法的科学性,为多成分复杂体系中药制剂的体内研究提供方法指导和理论依据。方法:采用吸波面积法(AUAWC)测定不同时间大鼠血浆中参白汤剂与参白纳米混悬剂中总皂苷和总多... 详细信息

目的:明确参白纳米混悬剂中药物整体成分大鼠体内药代动力学测定方法的科学性,为多成分复杂体系中药制剂的体内研究提供方法指导和理论依据。方法:采用吸波面积法(AUAWC)测定不同时间大鼠血浆中参白汤剂与参白纳米混悬剂中总皂苷和总多糖等为主的整体成分药物浓度,高效液相色谱法(HPLC)测定个体成分人参皂苷Rg1的药物浓度,并进行方法学验证。将获得整体成分的药代动力学参数与人参皂苷Rg1的药代动力学参数比较,评价2种制剂的体内运行特点。结果:AUAWC与HPLC的方法学考察均符合要求。AUAWC分析显示,参白汤剂组与参白纳米混悬剂组中整体成分房室拟合均呈一室模型,半衰期(t_(1/2))分别为2.43 h和2.04 h,参白纳米混悬剂的相对生物利用度为138.99%;HPLC检测显示,参白汤剂组和参白纳米混悬剂组中人参皂苷Rg1呈二室模型,分布半衰期(t_(1/2α))分别为0.13 h和2.55 h,消除半衰期(t_(1/2β))分别为14.28 h和3.85 h,参白纳米混悬剂相对生物利用度为127.49%。与参白汤剂比较,参白纳米混悬剂中整体成分和人参皂苷Rg1的达峰时间(t_(max))、达峰浓度(C_(max))与药-时曲线下面积(AUC)增加。结论:建立的AUAWC可用于中药制剂整体成分药代动力学的研究,与HPLC测得的个体成分结果具有互补性,可为中药新剂型的体内研究提供有益借鉴。

关键词：中药整体成分参白纳米混悬剂吸波面积法高效液相色谱法(HPLC) 药代动力学抗肿瘤生物利用度

基于转录-代谢组学联合分析红茶对胃生物节律的影响

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食品与发酵工业 2024年

作者：李加鹏丁启航和书宇沈志清福建中医药大学体育部福建中医药大学中西医结合研究院福建中医药大学附属人民医院

该研究主要探讨红茶干预小鼠胃组织和胃内容物代谢的差异变化，分析其对饱、空腹小鼠胃生物节律的影响。采用红茶对6周龄C57BL/6饱、空腹小鼠分别进行生理盐水和红茶提取物灌胃（450 mg/kg），30 min后取小鼠胃组织和胃内容物进行RNA测... 详细信息

该研究主要探讨红茶干预小鼠胃组织和胃内容物代谢的差异变化，分析其对饱、空腹小鼠胃生物节律的影响。采用红茶对6周龄C57BL/6饱、空腹小鼠分别进行生理盐水和红茶提取物灌胃（450 mg/kg），30 min后取小鼠胃组织和胃内容物进行RNA测序和代谢物检测，检测红茶干预不同状态下小鼠胃组织在转录组和代谢组层面的差异变化。结果发现，饱腹组红茶干预后，有907基因表达上调，810基因表达下调；空腹组红茶干预后，有748基因表达上调，864基因表达下调；对两组差异基因分别进行KEGG通路富集分析提示：生物节律、脂代谢、糖代谢等相关通路都存在显著差异，对生物节律通路相关核心基因进行检测发现饱腹组或空腹组红茶干预后生物钟基因Nr1d2、Per2、Per3表达显著上调，Arntl表达显著下调；胃内容物代谢：红茶干预后，饱腹组小鼠中的上调代谢物有1 355种，下调代谢物有1 393种，空腹组小鼠胃中的上调代谢物1 324种，下调代谢物1 378种，差异代谢物均被显著富集在氨基酸生物合成途径、嘌呤途径等。上述结果表明，红茶干预可能通过调控氨基酸生物合成途径影响小鼠的生物节律，进而调控小鼠胃节律运动、代谢等生物进程，最终起到胃助消化等功能的作用。

关键词：红茶 RNA测序胃功能代谢生物节律

铁抑素-1对糖尿病中晚期小鼠肝肾组织的保护作用

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中国生物化学与分子生物学报 2024年第6期40卷 848-856页

作者：王欢朱铭星吴止境陈伟文郑燕芳黄鸣清福建中医药大学药学院福州350122 福建中医药大学中医学院福州350122

糖尿病是一种发病率高且并发症多的代谢性疾病,其中2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)占比较大。目前研究表明,T2DM伴随着肝、肾等脏器损伤引起并发症,严重危害人体健康。铁死亡通过芬顿反应产生大量活性氧(reactive oxygen spe... 详细信息

糖尿病是一种发病率高且并发症多的代谢性疾病,其中2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)占比较大。目前研究表明,T2DM伴随着肝、肾等脏器损伤引起并发症,严重危害人体健康。铁死亡通过芬顿反应产生大量活性氧(reactive oxygen species,ROS),ROS累积会激活缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α),从而引发血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)水平升高,铁死亡抑制剂——铁抑素-1(ferrostatin-1,Fer-1)具有强抗氧化能力,所以基于缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子(HIF-1α/VEGF)信号通路,探讨Fer-1对糖尿病中晚期小鼠肝、肾组织的保护作用。实验以21~22周龄db/db小鼠作为糖尿病中晚期模型,铁死亡抑制剂Fer-1为干预药物。db/m小鼠为空白对照组,连续4周测量体重、血糖,实验中还对各组小鼠进食量、饮水量进行记录;测定血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)水平,测定肝肾组织中ROS、谷胱甘肽(glutathione,GSH)活性以及尿蛋白含量,并用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色处理肝、肾组织切片,光镜观察病理学形态,再通过Western印迹法分别检测肝、肾组织中HIF-1α、VEGF和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)蛋白质水平。在db/db组小鼠中发现,Fer-1(1 mg·kg^(-1),ig)可明显减少进食量和饮水量,降低小鼠血清中的ALT、AST水平、肝肾组织中ROS生成量以及尿蛋白水平,显著升高GSH活性,显著改善了肝、肾的病理组织状况,并且明显抑制肝肾组织中HIF-1α和VEGF蛋白质指标、提高GPX4蛋白水平。Fer-1虽不能改变糖尿病小鼠的体重和降低血糖,但能对糖尿病中晚期小鼠的肝、肾组织发挥保护作用,其作用机制可能与HIF-1α/VEGF和GPX4有关。

关键词：铁抑素-1 糖尿病肝肾损伤铁死亡 db/db小鼠 HIF-1α/VEGF

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