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脂肪间充质干细胞来源外泌体调节肝星状细胞自噬的机制

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中国组织工程研究 2025年第25期29卷 5296-5303页

作者：陈振坤朱世伟肖竞楠唐卫平南华大学附属第一医院肝胆胰外科湖南省衡阳市421001

背景:脂肪间充质干细胞可释放大量外泌体参与各种病理生理过程,关于脂肪间充质干细胞源性外泌体对肝星状细胞自噬的影响以及具体机制还有待于深入研究。目的:探讨脂肪间充质干细胞源性外泌体通过miR-15a-5p对肝星状细胞自噬的靶向调控... 详细信息

背景:脂肪间充质干细胞可释放大量外泌体参与各种病理生理过程,关于脂肪间充质干细胞源性外泌体对肝星状细胞自噬的影响以及具体机制还有待于深入研究。目的:探讨脂肪间充质干细胞源性外泌体通过miR-15a-5p对肝星状细胞自噬的靶向调控作用及分子机制。方法:收集8周龄雄性C57BL/6小鼠腹股沟区脂肪组织,使用胶原酶消化法分离提取脂肪间充质干细胞,使用超速离心法提取脂肪间充质干细胞源性外泌体;取小鼠肝脏组织,使用胶原酶灌注消化法和密度梯度离心法分离提取肝星状细胞。实验分2组:对照组肝星状细胞常规培养48 h,外泌体组将肝星状细胞与脂肪间充质干细胞源性外泌体共培养48 h。通过Western blot、RT-qPCR和免疫荧光染色观察外泌体对肝星状细胞增殖活化、自噬及纤维化标志物表达的影响。RT-qPCR及Western blot检测外泌体对肝星状细胞中miR-15a-5p以及下游信号通路Bcl-2、Beclin-1和Rubicon mRNA和蛋白表达的影响。结果与结论:①与对照组相比,外泌体组肝星状细胞中自噬标志物LC3-Ⅱ表达下降,自噬小体数目显著减少,脂滴重新生成,细胞体积减小同时增殖能力减弱,肝星状细胞活化明显受到抑制;②与对照组相比,外泌体组肝星状细胞中α-平滑肌动蛋白和Ⅰ型胶原蛋白表达显著下降(P<0.01),miR-15a-5p表达显著增高(P<0.01),同时其下游靶基因Bcl-2表达显著下降(P<0.01),而自噬基因Beclin-1和Rubicon表达显著增高(P<0.01)。结果提示:脂肪间充质干细胞源性外泌体通过miR-15a-5p靶向抑制肝星状细胞中Bcl-2表达,促进其下游自噬基因Beclin-1、Rubicon表达,从而抑制肝星状细胞自噬。

关键词：脂肪间充质干细胞外泌体肝星状细胞自噬 miR-15a-5p Bcl-2 Beclin-1 Rubicon

柚皮苷抑制骨质疏松大鼠骨组织的铁沉积及细胞凋亡

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中国组织工程研究 2025年第5期29卷 888-898页

作者：兰双笠向飞帆邓光慧肖喻琨阳运康梁杰西南医科大学附属医院肝胆外科四川省泸州市646000 西南医科大学附属医院骨与关节外科四川省泸州市646000

背景:有研究发现,铁代谢异常诱发的骨组织细胞异常凋亡在骨质疏松进展中发挥重要作用。目的:探讨柚皮苷对骨质疏松大鼠骨组织铁代谢与细胞凋亡的影响。方法:取50只2月龄雌性SD大鼠,采用随机数字表法分成5组,每组10只:除假手术组外,骨质... 详细信息

背景:有研究发现,铁代谢异常诱发的骨组织细胞异常凋亡在骨质疏松进展中发挥重要作用。目的:探讨柚皮苷对骨质疏松大鼠骨组织铁代谢与细胞凋亡的影响。方法:取50只2月龄雌性SD大鼠,采用随机数字表法分成5组,每组10只:除假手术组外,骨质疏松组、柚皮苷低剂量组、柚皮苷高剂量组、柚皮苷高剂量+DKK-1组均通过切除双侧卵巢建立骨质疏松模型。造模8周后,柚皮苷低剂量组、柚皮苷高剂量组分别灌胃给予100,400 mg/(kg·d)的柚皮苷,柚皮苷高剂量+DKK-1组灌胃给予400 mg/(kg·d)的柚皮苷+皮下注射25 mg/(kg·d)的Wnt1信号通路抑制剂DKK-1,连续给药7 d。给药结束后进行相关指标的检测。结果与结论:①与骨质疏松组相比,柚皮苷可提升大鼠骨密度及血清钙、超氧化物歧化酶水平(P<0.05),降低血清中骨钙素、丙二醛、磷水平(P<0.05),DKK-1可部分抑制柚皮苷的干预作用(P<0.05);②Micro-CT扫描、苏木精-伊红与TUNEL染色显示,与骨质疏松组相比,柚皮苷可显著改善大鼠骨微结构、降低细胞凋亡率,DKK-1可部分抑制柚皮苷的干预作用;③免疫荧光染色显示,与骨质疏松组相比,柚皮苷可降低胫骨组织内活性氧含量、抗酒石酸酸性磷酸酶的表达,提升碱性磷酸酶的表达(P<0.05),DKK-1可部分抑制柚皮苷的干预作用(P<0.05);④普鲁士蓝染色、免疫组化染色显示,与骨质疏松组相比,柚皮苷可降低骨组织与肝组织内的铁沉积、骨组织铁吸收相关蛋白受体1的表达(P<0.05),提升骨组织膜铁转运蛋白1的表达(P<0.05),DKK-1可部分抑制柚皮苷的干预作用(P<0.05);⑤胫骨标本PCR与Western blot检测显示,与骨质疏松组相比,柚皮苷可降低抗酒石酸酸性磷酸酶、铁吸收相关蛋白受体1和Bax的表达(P<0.05),提升碱性磷酸酶、膜铁转运蛋白1、Bcl-2、Wnt1和β-catenin的表达(P<0.05),DKK-1可部分抑制柚皮苷的干预作用(P<0.05);⑥结果表明,柚皮苷可通过减少骨组织中的铁沉积及细胞凋亡率抑制骨质疏松的进展,这可能与激活Wnt1信号通路有关。

关键词：柚皮苷骨质疏松铁代谢 Wnt1信号通路细胞凋亡

外科医师的创新之路：临床问题驱动的外科学发展

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中华外科杂志 2025年第1期63卷 24-27页

作者：彭淑牖浙江大学医学院附属第二医院肝胆胰外科杭州

外科是以手术为主要治病手段的一门学科, 学习外科手术技术的过程漫长而艰辛。在进行手术操作时, 提高操作的精准度、简化流程、提升患者术后的生活质量, 是外科医师不断追求的目标。作者及其团队在四十余年的临床实践中, 通过创新发明... 详细信息

外科是以手术为主要治病手段的一门学科, 学习外科手术技术的过程漫长而艰辛。在进行手术操作时, 提高操作的精准度、简化流程、提升患者术后的生活质量, 是外科医师不断追求的目标。作者及其团队在四十余年的临床实践中, 通过创新发明优化了诸多临床实践过程中发现的问题, 不仅推动了外科技术的发展, 提高了手术的安全性和效率, 还为年轻医师树立了典范。本文阐述了作者几个具有代表性的创新技术的设计灵感来源、设计过程及初步的临床效果, 希望鼓励更多的外科医师在临床实践中积极探索与思考, 发挥创新精神, 共同为我国外科事业的发展贡献力量。

关键词：外科手术外科器械多功能解剖器捆绑式胰腺消化道吻合外科创新

全反式维甲酸对多房棘球蚴原头节体外活性及生长的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第3期42卷 303-308,315页

作者：葛宇飞徐刚张宏伟李江张永国孙红杨婧张示杰石河子大学第一附属医院新疆石河子832000 石河子大学第一附属医院肝胆外科新疆石河子832000

目的探究全反式维甲酸(ATRA)对多房棘球蚴原头节体外活性及生长的影响。方法从保种沙鼠体内无菌剖取包囊,经过研磨、过滤、清洗获取活性良好的多房棘球蚴原头节。将原头节分为不同浓度ATRA组(10、25、50、100μmol/L组,添加对应终浓度... 详细信息

目的探究全反式维甲酸(ATRA)对多房棘球蚴原头节体外活性及生长的影响。方法从保种沙鼠体内无菌剖取包囊,经过研磨、过滤、清洗获取活性良好的多房棘球蚴原头节。将原头节分为不同浓度ATRA组(10、25、50、100μmol/L组,添加对应终浓度的ATRA)、二甲基亚砜(DMSO)组(DMSO终浓度为0.1%)和空白组(加入等量完全培养基),共干预9 d,伊红染色后于显微镜下观察其活力和形态变化,计算原头节的存活率并绘制存活率曲线。将原头节与大鼠肝癌RH35细胞共培养5~6周,获得多房棘球蚴微囊泡后,使用不同终浓度ATRA (10、100μmol/L)干预微囊泡9 d,显微镜下观察其活力和形态变化,同时设置DMSO组和空白组。干预原头节48 h后,分别使用EdU细胞成像检测原头节EdU阳性率,使用半胱天冬氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)试剂盒检测原头节中Caspase-3相对表达量;干预原头节24 h后,活性氧(ROS)检测试剂盒测定各组原头节ROS水平。两组样品的比较采用独立样本t检验,不同浓度ATRA组与DMSO组差异比较采用单因素方差分析(ANOVA)。结果 10、25、50、100μmol/L组中的死亡原头节体积明显缩小,可被伊红染液染成红色,随着时间延长和药物浓度升高出现轮廓模糊、透光性减弱、小钩脱落增多等。第4天时,10、25、50、100μmol/L组原头节存活率分别为(87.33±4.90)%、(74.00±2.08)%、(64.33±2.03)%、(53.33±1.86)%,均低于DMSO组[(95.67±1.20)%](F=98.41,P <0.05);第9天时,10、25、50、100μmol/L组原头节存活率仅为(62.00±2.64)%、(36.33±2.52)%、(7.67±1.53)%、0,均低于DMSO组[(85.67±2.08)%](F=1 154.34,P <0.05)。不同浓度的ATRA与多房棘球蚴微囊泡共培养9 d时,随ATRA浓度的升高,囊泡生长缓慢,囊内结构逐渐浑浊;空白组和DMSO组的微囊泡生发层和角质层结构完整。EdU细胞成像可见不同浓度ATRA组均呈现红色及蓝色荧光,10、 25、 50、 100μmol/L组原头节的EdU阳性率分别为(51.63±3.09)%、(42.09±1.36)%、(38.46±0.65)%、(25.23±1.32)%,均低于DMSO组[(58.32±0.91)%](F=168.59,P <0.05)。10、25、50、100μmol/L组的Caspase-3活性分别为(19.23±2.27)、(26.27±3.45)、(43.29±2.10)、(72.80±1.40) U/L,呈浓度依赖性升高,均高于DMSO组[(14.22±0.52) U/L](F=404.08,P <0.05)。不同浓度ATRA组ROS均可见绿色荧光,强于DMSO组,10、25、50、100μmol/L组荧光强度分别为260.96±2.52、282.10±7.40、330.30±12.46、346.10±6.39,均高于DMSO组(236.03±6.89)(F=80.53,P <0.05)。结论 ATRA对多房棘球蚴原头节体外活性及生长具有抑制作用,可诱导原头节内ROS显著积累,抑制原头节增殖活性、促进凋亡进程。

关键词：全反式维甲酸多房棘球蚴原头节增殖活性凋亡活性氧

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肝囊型棘球蚴病的自然衰亡病程

中华消化外科杂志 2023年第2期22卷 219-225页

作者：彭心宇张示杰吴向未张宏伟杨剑李江石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科石河子832002

肝囊型棘球蚴病(HCE)是全世界公共卫生问题。目前棘球蚴病的研究主要集中在病因学、流行病学、免疫学、影像学和治疗方案等方面,而忽视其自然衰亡病程的系统研究。现代影像学检查方法的普及使研究者能够获得HCE病程不同时期、不同影像... 详细信息

肝囊型棘球蚴病(HCE)是全世界公共卫生问题。目前棘球蚴病的研究主要集中在病因学、流行病学、免疫学、影像学和治疗方案等方面,而忽视其自然衰亡病程的系统研究。现代影像学检查方法的普及使研究者能够获得HCE病程不同时期、不同影像学特征及不同病理学状态的临床资料。笔者基于CT检查影像学特征和临床实践,探讨HCE的自然衰亡病程,为其诊断与治疗提供新思路。

关键词：囊型包虫病自然病程死亡胆瘘感染破裂

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肝包虫囊肿压迫下腔静脉的外科治疗

中华消化外科杂志 2021年第2期20卷 234-239页

作者：张宏伟吴向未张示杰阿布都瓦依提孙红彭心宇石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科新疆石河子832008

目的探讨肝包虫囊肿压迫下腔静脉的外科治疗。方法采用回顾性描述性研究方法。收集2013年5月至2018年5月石河子大学医学院第一附属医院收治的10例肝包虫囊肿压迫下腔静脉病人的临床资料;男7例,女3例;年龄为(46±5)岁,年龄范围为38~51岁... 详细信息

目的探讨肝包虫囊肿压迫下腔静脉的外科治疗。方法采用回顾性描述性研究方法。收集2013年5月至2018年5月石河子大学医学院第一附属医院收治的10例肝包虫囊肿压迫下腔静脉病人的临床资料;男7例,女3例;年龄为(46±5)岁,年龄范围为38~51岁。根据术中肝包虫囊肿与下腔静脉的贴合程度以及囊肿完整切除的难易程度,分别行外膜内外囊完整切除术、外膜内外囊次全切除术、外膜内外囊完整切除联合下腔静脉部分切除术。观察指标:(1)手术情况。(2)术后情况。(3)随访情况。采用门诊和电话方式进行随访,于术后3、6、12、24个月门诊随访1次。行彩色多普勒超声检查了解病人肝包虫囊肿复发及下腔静脉栓塞情况。随访终点为术后2年,随访次要终点为肝包虫囊肿复发。随访时间截至2020年5月。正态分布的计量资料以x±s表示。计数资料以绝对数表示。结果(1)手术情况:10例病人均顺利完成手术,7例行外膜内外囊完整切除术,2例行外膜内外囊次全切除术,1例行外膜内外囊完整切除联合下腔静脉部分切除术。10例病人术中无大出血及感染性休克发生。10例病人手术时间为(99±27)min;术中出血量为(99±48)mL。(2)术后情况:10例病人术后2~5 d拔除引流管,无术后出血、术后残腔感染、术后胆瘘发生,无围术期死亡病人,术后住院时间为(7.1±1.8)d。(3)随访情况:10例病人中,9例完成终点随访,随访时间内均无肝包虫囊肿复发及下腔静脉栓塞形成;1例病人于术后12个月,第3次随访失访,此病人术后3、6个月随访未发现肝包虫囊肿复发及下腔静脉栓塞。结论外膜内外囊完整切除术、外膜内外囊次全切除术、外膜内外囊完整切除联合下腔静脉部分切除术均能完整切除肝包虫囊肿。

关键词：棘球蚴病,肝下腔静脉压迫手术治疗治疗效果

肝细粒棘球蚴包囊急性破裂入胆道21例临床分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2020年第4期38卷 524-526,528页

作者：高宇吴向未阿布都瓦依提刘桂生石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科石河子832008

回顾性分析2015年12月-2018年11月石河子大学医学院第一附属医院行外囊次全切除术治疗的21例肝细粒棘球蚴包囊急性破裂入胆道患者的疗效。男性14例,女性7例;原发18例,复发3例。21例患者均为急性破裂,入院时均出现黄疸症状(14例为持续性... 详细信息

回顾性分析2015年12月-2018年11月石河子大学医学院第一附属医院行外囊次全切除术治疗的21例肝细粒棘球蚴包囊急性破裂入胆道患者的疗效。男性14例,女性7例;原发18例,复发3例。21例患者均为急性破裂,入院时均出现黄疸症状(14例为持续性进行性黄疸,7例为间歇性黄疸),且有寒战、高热、腹膜刺激征、恶心、呕吐等症状。4例患者在包囊破裂入胆道的同时还出现了原头节种植于腹腔的情况。患者手术平均耗时2.7 h,术中平均出血量75 ml。所有患者均于术中放置了T管,11例患者在放置T管的同时放置了腹腔引流管,3例患者在放置T管的同时放置了残腔引流管,3例患者同时放置了腹腔引流管、残腔引流管以及T管。1例患者于术后出现残腔感染,3例患者于术后出现胆漏,余均未出现相关并发症。随访1~3年,未见复发病例。外囊次全切除术治疗肝细粒棘球蚴包囊急性破裂入胆道效果较好。

关键词：肝细粒棘球蚴病包囊破裂外囊次全切除术胆道

阿苯达唑壳聚糖微球抗小鼠细粒棘球蚴药效实验研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2014年第3期32卷 188-192页

作者：梁闻王新春吴向未张示杰孙红马欣彭心宇石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科石河子832000

目的观察阿苯达唑壳聚糖微球(ABZ-CS-MPs)治疗感染细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)小鼠的效果。方法 220只雄性昆明小鼠,除20只作空白对照组外,其余小鼠各腹腔接种细粒棘球蚴原头节约5000个,于感染12周后将小鼠随机分为感染对照组(... 详细信息

目的观察阿苯达唑壳聚糖微球(ABZ-CS-MPs)治疗感染细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)小鼠的效果。方法 220只雄性昆明小鼠,除20只作空白对照组外,其余小鼠各腹腔接种细粒棘球蚴原头节约5000个,于感染12周后将小鼠随机分为感染对照组(n=20)、ABZ-CS-MPs组、阿苯达唑脂质体(L-ABZ)组和阿苯达唑片剂组,后3组按不同治疗剂量37.5、75.0和150.0mg/(kg·次)再分为3小组(每组20只小鼠),每鼠灌胃相应剂量药物,每周3次,每次间隔1d。感染对照组不作治疗。各组受治鼠于连续治疗12周后处死,称取各鼠细粒棘球蚴的囊湿重,计算各组的囊重抑制率。取各组小鼠肝脏进行大体形态观察。HE染色观察细粒棘球蚴组织病理变化。高效液相色谱法测定小鼠血液和肝组织中阿苯达唑主要代谢产物阿苯达唑亚砜(ABZSX)的浓度。结果 ABZ-CS-MPs组小鼠棘球蚴囊混浊、实变或钙化程度均较其他治疗组明显。各药物治疗组小鼠棘球蚴囊湿重均显著低于感染对照组[(3.19±2.94)g](P<0.05),ABZCS-MPs组囊湿重[低剂量至高剂量组分别为(0.28±0.28)、(0.24±0.22)和(0.20±0.19)g]显著低于阿苯达唑片剂组[(0.77±0.74)、(0.55±0.42)和(0.76±0.35)g](P<0.05)。ABZ-CS-MPs组小鼠棘球蚴囊重抑制率均为同剂量药物组中最高,低剂量组到高剂量组分别为91.1%、92.6%和93.7%。HE染色结果显示,75.0 mg/(kg·次)ABZ-CS-MPs组细粒棘球蚴组织Ⅰ和Ⅱ级病理变化的小鼠数量最多(15/18)。不同剂量ABZ-CS-MPs组和L-ABZ组细粒棘球蚴组织Ⅰ和Ⅱ级病理变化的小鼠数量均高于同剂量阿苯达唑片剂组(P<0.05)。高效液相色谱法结果显示,75.0和150.0 mg/(kg·次)ABZCS-MPs组小鼠血液中的ABZSX浓度[(0.83±0.39)和(0.80±0.50)μg/mL]显著高于同剂量L-ABZ组[(0.34±0.03)和(0.43±0.15)μg/mL]和阿苯达唑片剂组[(0.31±0.02)和(0.40±0.10)μg/mL](P<0.05);ABZ-CS-MPs组小鼠肝脏中的ABZSX浓度[低剂量组至高剂量组分别为(0.33±0.06)、(0.45±0.31)和(0.50±0.30)μg/g]显著高于阿苯达唑片剂治疗组[(0.04±0.02)、(0.07±0.04)和(0.04±0.03)μg/g](P<0.05),37.5mg/(kg·次)ABZ-CS-MPs组ABZSX浓度高于同剂量L-ABZ组[(0.14±0.19)μg/g](P<0.05)。结论阿苯达唑壳聚糖微球可明显抑制小鼠细粒棘球蚴囊湿重,并提高阿苯达唑主要代谢产物阿苯达唑亚砜在小鼠血液和肝脏中的浓度。

关键词：细粒棘球蚴阿苯达唑壳聚糖微球脂质体昆明小鼠

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骨桥蛋白与肝棘球蚴病关系的研究进展

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第4期29卷 310-313,318页

作者：张永国张示杰石河子大学医学院第一附属医院肝胆外科石河子832008

骨桥蛋白是一种带负电荷、具有亲水性的分泌型磷酸化糖蛋白,由多种组织细胞合成与分泌,存在于体内多种组织和细胞中。该蛋白结构上与多种基质蛋白相似,功能上具有细胞因子的特点,参与了机体多种病理过程。近年来的研究证实,骨桥蛋白在... 详细信息

骨桥蛋白是一种带负电荷、具有亲水性的分泌型磷酸化糖蛋白,由多种组织细胞合成与分泌,存在于体内多种组织和细胞中。该蛋白结构上与多种基质蛋白相似,功能上具有细胞因子的特点,参与了机体多种病理过程。近年来的研究证实,骨桥蛋白在肝棘球蚴的外囊中大量表达,并在其形成过程中起重要作用。

关键词：骨桥蛋白棘球蚴病肝脏