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过表达IL-8受体对脐带源间充质干细胞生物活性的影响

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石河子大学学报（自然科学版） 2018年第3期36卷 293-299页

作者：王飒王文强李秋实慕晓玲石河子大学医学院/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002

目的探究腺病毒介导的IL-8受体过表达对脐带源间充质干细胞生物活性的影响。方法本研究利用含有IL-8RA和IL-8RB的c DNA和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒载体(p Ad-IL-8RA-GFP、p Ad-IL-8RB-GFP和p Ad-Null-GFP)分别转染分离培养的P... 详细信息

目的探究腺病毒介导的IL-8受体过表达对脐带源间充质干细胞生物活性的影响。方法本研究利用含有IL-8RA和IL-8RB的c DNA和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒载体(p Ad-IL-8RA-GFP、p Ad-IL-8RB-GFP和p Ad-Null-GFP)分别转染分离培养的P3-5代脐带源间充质干细胞,倒置荧光显微镜观察GFP的表达,流式细胞仪检测干细胞标签蛋白CD29、CD44、CD34、HLA-DR的表达,CCK-8实验检测转染后细胞的增殖能力,粘附实验及Transwell趋化实验观察过表达IL-8RA/B的脐带源间充质干细胞的迁移能力。结果脐带源间充质干细胞形态均一、生长状态良好;干细胞特异性相关蛋白CD29、CD44阳性表达,CD34、HLA-DR阴性表达;与对照组比较,IL-8RA/B过表达的脐带源间充质干细胞的增殖能力无明显改变,但是过表达IL-8RA/B的间充质干细胞粘附在损伤内皮上以及迁移到小室下方的细胞数目更多。结论以上结果表明IL-8RA/B的过表达不影响脐带源间充质干细胞的增殖能力,但是能够促进脐带源间充质干细胞向IL-8趋化和向损伤内皮细胞粘附。

关键词：人脐带源间充质干细胞 IL-8RA/B 腺病毒细胞迁移或粘附

CDH18基因对宫颈癌细胞增殖和迁移的影响

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石河子大学学报（自然科学版） 2024年第3期42卷 349-357页

作者：妥静程豪政赵先董杨柳王乐者湘漪魏冰燕潘泽民石河子大学医学院/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832002

目的研究Ⅱ型钙粘蛋白18(Cadherin 18,CDH18)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌SiHa、HeLa和C33A细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用qRT-PCR、Western blot实验检测宫颈癌组织和细胞中CDH18的mRNA和蛋白质表达水平;分别构建过表达和敲低C... 详细信息

目的研究Ⅱ型钙粘蛋白18(Cadherin 18,CDH18)在宫颈癌中的表达及其对宫颈癌SiHa、HeLa和C33A细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用qRT-PCR、Western blot实验检测宫颈癌组织和细胞中CDH18的mRNA和蛋白质表达水平;分别构建过表达和敲低CDH18基因表达的质粒;在稳定转染质粒的宫颈癌细胞中,利用CCK-8、Transwell和划痕实验分析过表达及降低CDH18基因对SiHa、HeLa和C33A细胞增殖和迁移的影响。结果高危型HPV阳性的宫颈组织和细胞中CDH18蛋白质和mRNA表达水平均显著低于正常宫颈组织和细胞(P实验结果显示:过表达CDH18基因促进SiHa、HeLa和C33A细胞的增殖和迁移能力(P<0.01);敲低CDH18基因抑制了SiHa、HeLa和C33A细胞的增殖和迁移能力(P<0.05)。结论 CDH18基因在高危型HPV阳性宫颈癌组织和细胞中低表达,在高危型HPV阴性宫颈癌组织细胞中高表达;其过表达能够促进宫颈癌细胞的增殖和迁移。

关键词：宫颈癌 CDH18基因增殖迁移

高甲基化相关的CCL5低表达促进肝癌细胞增殖及免疫抑制

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石河子大学学报（自然科学版） 2023年第2期41卷 245-251页

作者：杨小凤林若琳王小鹏朱丽侯隽王良海石河子大学医学院/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000

目的肝细胞癌的进展与免疫微环境的失调密切相关。趋化因子在招募免疫细胞进入肿瘤组织的过程中起着重要作用。本文探讨了CCL5在肝癌进展中的作用。方法通过GEO数据库分析CCL5在肝癌组织中的表达及与患者预后的关联,通过免疫组织化学染... 详细信息

目的肝细胞癌的进展与免疫微环境的失调密切相关。趋化因子在招募免疫细胞进入肿瘤组织的过程中起着重要作用。本文探讨了CCL5在肝癌进展中的作用。方法通过GEO数据库分析CCL5在肝癌组织中的表达及与患者预后的关联,通过免疫组织化学染色检测CCL5在肝癌患者临床标本中的表达情况,通过TCGA数据库分析CCL5与免疫浸润的相关性及表达量异常的原因。结果CCL5在肝细胞癌组织中表达下降并与患者预后不良相关。CCL5低表达与肝癌组织中的免疫细胞浸润减少有关,而过表达CCL5能够抑制肝癌细胞的增殖。启动子DNA高甲基化引起了CCL5在肝癌组织中的低表达。结论高甲基化相关的CCL5低表达能够促进肝癌免疫抑制及肿瘤细胞的增殖,CCL5可作为肝癌的一个预后指标和潜在治疗靶点。

关键词：肝癌趋化因子 CCL5 免疫浸润增殖

NGF中和抗体、DAPT对食管癌Eca109细胞p75^(NTR) 核表达及细胞增殖、侵袭能力的影响

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安徽医科大学学报 2022年第10期57卷 1536-1541页

作者：邓江华李秋实朱兵兵陈晶晶慕晓玲石河子大学医学院新疆地方与民族高发病教育部重点实验室石河子832000

目的探究神经生长因子(NGF)中和抗体、γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对食管癌Eca109细胞p75神经营养因子受体(p75^(NTR))核表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法采用免疫荧光细胞化学技术,检测NG... 详细信息

目的探究神经生长因子(NGF)中和抗体、γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸-t-丁酯(DAPT)对食管癌Eca109细胞p75神经营养因子受体(p75^(NTR))核表达及细胞增殖、侵袭能力的影响。方法采用免疫荧光细胞化学技术,检测NGF中和抗体、DAPT处理Eca109细胞前后p75^(NTR)、Ki67的表达变化;分别采用CCK-8法和Transwell细胞侵袭实验,检测NGF中和抗体、DAPT单独或联合处理Eca109细胞前后其增殖能力及侵袭能力的变化。结果免疫荧光细胞化学技术检测结果显示NGF中和抗体、DAPT处理细胞后,p75^(NTR)核表达的细胞数量均减少,且NGF中和抗体和DAPT联合处理细胞后,p75^(NTR)核表达的细胞数量最少,差异有统计学意义(P实验结果显示NGF中和抗体、DAPT处理细胞后,细胞增殖、侵袭能力较处理前均相应减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论NGF中和抗体、DAPT抑制p75^(NTR)的核转移,降低p75^(NTR)的核表达率,减弱细胞增殖、侵袭能力。

关键词：食管癌Eca109细胞 NGF中和抗体 γ-分泌酶抑制剂DAPT p75^(NTR)

IL18RAP表达与肝癌患者预后及CD8^(+)T细胞浸润的相关性分析

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石河子大学学报（自然科学版） 2024年第5期42卷 631-637页

作者：杨春付春雪王良海侯隽石河子大学医学院/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000

目的探讨IL18RAP基因与肝癌患者预后和肿瘤微环境中CD8^(+)T细胞浸润的相关性以及作为肿瘤标志物的可能性。方法癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)用于评估IL18RAP基因在肝癌中的表达。单因素Cox分析、多因素COX分析和生存... 详细信息

目的探讨IL18RAP基因与肝癌患者预后和肿瘤微环境中CD8^(+)T细胞浸润的相关性以及作为肿瘤标志物的可能性。方法癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)用于评估IL18RAP基因在肝癌中的表达。单因素Cox分析、多因素COX分析和生存分析揭示IL18RAP基因的预后价值。KEGG、GO和Hallmark富集分析寻找与IL18RAP基因相关的功能通路。免疫浸润分析探究IL18RAP基因与22种免疫细胞浸润的关系。通过单细胞测序数据库与免疫组化验证IL18RAP基因与CD8^(+)T细胞浸润的相关性。结果IL18RAP在肝癌组织中表达下调,其低表达与肝癌患者的不良预后相关。功能富集分析显示IL18RAP的表达与免疫功能通路相关。免疫浸润、单细胞测序和免疫组化表明IL18RAP高表达于CD8^(+)T细胞。结论IL18RAP低表达与肝癌患者的不良预后相关,可能影响了抗肿瘤免疫的CD8^(+)T细胞。

关键词：肝癌 IL18RAP基因免疫浸润 CD8^(+)T细胞预后

B族Ⅰ型清道夫受体SR-B1、ER、PR、Ki-67在Ⅰ型子宫内膜样癌中表达的相关性分析

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石河子大学学报（自然科学版） 2019年第4期37卷 507-512页

作者：王超谢燕娟郑秀妍沈西华江滕牛肖贾薇庞丽娟邹泓石河子大学医学院/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室

目的检测分析Ⅰ型子宫内膜样癌组织和增生改变子宫内膜组织中B族Ⅰ型清道夫受体(SR-B1)、ER、PR及Ki-67蛋白的表达,探讨其在Ⅰ型子宫内膜样癌中的表达及临床意义。方法选取福尔马林固定石蜡包埋的80例Ⅰ型子宫内膜样癌组织和47例增生改... 详细信息

目的检测分析Ⅰ型子宫内膜样癌组织和增生改变子宫内膜组织中B族Ⅰ型清道夫受体(SR-B1)、ER、PR及Ki-67蛋白的表达,探讨其在Ⅰ型子宫内膜样癌中的表达及临床意义。方法选取福尔马林固定石蜡包埋的80例Ⅰ型子宫内膜样癌组织和47例增生改变子宫内膜组织样本,免疫组化Envision法检测SR-B1、ER、PR、Ki-67蛋白表达,结合临床病理资料,分析SR-B1、ER、PR和Ki-67蛋白在Ⅰ型子宫内膜样癌中的表达及与临床病理特征的关系。结果(1)Ⅰ型子宫内膜样癌中SR-B1、Ki-67的阳性表达率为67.6%(50/74)、61.6%(45/73),较对照增生改变子宫内膜27.3%(12/44)、40.5%(17/42)高表达,差异具有统计学意义(P子宫内膜样癌组织中ER、PR阳性表达率分别为67.1%(49/73)、83.1%(59/71),较对照增生改变子宫内膜97.8%(44/45)、100%(42/42)低表达,差异有统计学意义(P子宫内膜样癌中,SR-B1蛋白的表达与ER、PR、Ki-67之间呈正相关,具有统计学意义(P子宫内膜样癌的表达随FIGO分级的升高而降低,差异具有统计学意义(P0.05)。结论:SR-B1的过表达可能参与Ⅰ型子宫内膜样癌的发生发展,ER的低表达可能提示肿瘤分化较差。

关键词： Ⅰ型子宫内膜样癌 SR-B1 ER PR Ki-67

致绵羊脑炎型肠球菌溶血素CylA基因的克隆及序列测定

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中国预防兽医学报 2007年第4期29卷 281-284页

作者：韩素娟剡根强周霞王静梅马贵军新疆石河子大学动物科技学院/新疆地方病与民族高发病省部共建实验室新疆石河子832003

以致绵羊脑炎型肠球菌(Enterococcus)染色体DNA为模板,PCR扩增溶血素CylA的结构基因,将PCR产物克隆于pMD19-T载体,对PCR产物进行测序鉴定。与已发表的肠球菌溶血素CylA基因序列比较,同源性达99.3%。

关键词：绵羊脑炎型肠球菌溶菌素 CylA基因克隆测序

肌酸激酶CKBB在氧化应激压力下的降解机制

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石河子大学学报（自然科学版） 2022年第3期40卷 362-369页

作者：赵艳春孙悦张婷王铁鹏石河子大学医学院/新疆地方与民族高发病教育部重点实验室新疆石河子832000

目的神经元中的肌酸激酶CKBB是维持细胞正常能量代谢平衡的关键调节蛋白,它对神经退变神经元内的氧化应激压力敏感且含量随病变发生而降低,但其蛋白水平改变的原因尚未阐明。方法采用过氧化氢处理SH-SY5Y神经细胞,研究CKBB在氧化应激... 详细信息

目的神经元中的肌酸激酶CKBB是维持细胞正常能量代谢平衡的关键调节蛋白,它对神经退变神经元内的氧化应激压力敏感且含量随病变发生而降低,但其蛋白水平改变的原因尚未阐明。方法采用过氧化氢处理SH-SY5Y神经细胞,研究CKBB在氧化应激条件下的降解机制。使用MTT法对细胞活力进行检测,利用Hoechst33342染色细胞核表征细胞生存状态。使用Western blot法对CKBB的含量进行检测。分别使用自噬抑制剂Bafilomycin A1及蛋白酶体抑制剂MG-132处理细胞,验证CKBB具体降解途径。采用激光共聚焦显微镜检测胞内RFP-LC3,GFP-CKBB共定位情况。使用免疫沉淀法抓取CKBB蛋白,对泛素化修饰进行检测。结果在过氧化氢处理下CKBB含量明显下降,使用自噬抑制剂及蛋白酶体抑制剂处理对CKBB的含量均有明显挽回作用。过氧化氢处理,促进CKBB与LC3共定位,并导致CKBB泛素化修饰水平显著升高。结论 CKBB在过氧化氢处理的氧化应激条件下,经由自噬及蛋白酶体两条途径发生蛋白降解。

关键词：肌酸激酶氧化应激神经退行性疾病自噬蛋白酶体

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高效抑制O型口蹄疫病毒shRNA分子的筛选与验证

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中国兽医学报 2012年第1期32卷 13-17,22页

作者：马铈委陈创夫乔军新疆地方与民族发病教育部重点实验室新疆石河子832003 石河子大学动物科技学院新疆石河子832003

针对O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease veirus,FMDV)基因组高度保守的VP1和3D区段,选取了120个干扰靶位,根据RNAi技术原理,构建了包括对照在内的82个shRNA表达质粒;通过细胞攻毒试验,提取细胞毒液RNA,然后RT-PCR,最后real-time PC... 详细信息

针对O型口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease veirus,FMDV)基因组高度保守的VP1和3D区段,选取了120个干扰靶位,根据RNAi技术原理,构建了包括对照在内的82个shRNA表达质粒;通过细胞攻毒试验,提取细胞毒液RNA,然后RT-PCR,最后real-time PCR检测病毒和shRNA的表达量。结果显示,干扰质粒组基因表达抑制率为63%～96.8%,其中pSiRe-Zs-VP1-54和pSiRe-Zs-3D-12等2个表达质粒抑制效率最好,分别为96.8%和87%,表明这2个表达质粒能够明显抑制FMDV的复制。

关键词：口蹄疫病毒 RNAi shRNA序列筛选