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拉伸条件下聚二甲基硅氧烷表面粗糙度对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

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中国组织工程研究 2025年第10期29卷 1981-1989页

作者：胡泽遵杨反磊徐浩罗宗平苏州大学附属第一医院骨科研究所江苏省苏州市215000

背景:研究表明,机械刺激对骨髓间充质干细胞的谱系特异性分化至关重要。然而,机械拉伸条件下不同粗糙度表面的骨髓间充质干细胞成骨分化情况尚不清楚。目的:探讨拉伸条件下聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)表面粗糙度对骨髓... 详细信息

背景:研究表明,机械刺激对骨髓间充质干细胞的谱系特异性分化至关重要。然而,机械拉伸条件下不同粗糙度表面的骨髓间充质干细胞成骨分化情况尚不清楚。目的:探讨拉伸条件下聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)表面粗糙度对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及作用机制。方法:通过不同目砂纸(120目、1 000目和10 000目)在PDMS表面构建3种不同粗糙度的形貌(PDMS-120M、PDMS-1000M和PDMS-10000M),与空气接触的PDMS表面作为对照组。采用RT-q PCR检测静态条件下和拉伸条件下(0%,2%,4%,6%拉伸幅度)不同粗糙度PDMS表面的骨髓间充质干细胞中成骨相关基因表达。采用RT-q PCR、Western blot检测2%拉伸条件下不同粗糙度表面骨髓间充质干细胞中SIRT1、成骨相关基因和蛋白表达,采用碱性磷酸酶染色、茜素红染色观察2%拉伸条件下不同粗糙度PDMS表面骨髓间充质干细胞的成骨分化能力。结果与结论:(1)静态条件下粗糙度为(13.51±2.11)μmPDMS-1000M表面的骨髓间充质干细胞成骨基因表达最高;(2)相对光滑PDMS表面的骨髓间充质干细胞在4%拉伸幅度条件下有更好的成骨分化效果,而PDMS-1000M表面的骨髓间充质干细胞在2%拉伸幅度条件下有更好的成骨分化效果;(3)在2%拉伸幅度条件下,粗糙度为(13.51±2.11)μm PDMS-1000M表面的骨髓间充质干细胞有更好的成骨分化效果,可能与激活SIRT1信号通路有关。

关键词：骨髓间充质干细胞成骨分化机械刺激机械拉伸粗糙度信号通路 SIRT1

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不同密度和补饲量对苜蓿地放养静原鸡产蛋性能、蛋品质及鸡蛋营养成分的影响

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饲料研究 2025年 36-41页

作者：罗琰高博刘盛楠王胜明郭海龙石福岳邹军甘肃省畜牧兽医研究所农业农村部畜禽资源(羊)评价利用重点实验室静宁绿洲生态农业科技发展有限公司

试验旨在研究苜蓿地放养条件下不同密度和补饲量对静原鸡的产蛋性能、蛋品质及鸡蛋营养成分的影响。采用3×3双因素试验设计，选取280日龄、体重相近、健康的静原鸡1 050只，设置放养密度分别为50 （A1）、100 （A2）、150只/300 m2（A... 详细信息

试验旨在研究苜蓿地放养条件下不同密度和补饲量对静原鸡的产蛋性能、蛋品质及鸡蛋营养成分的影响。采用3×3双因素试验设计，选取280日龄、体重相近、健康的静原鸡1 050只，设置放养密度分别为50 （A1）、100 （A2）、150只/300 m2（A3），补饲量分别为50%（B1）、70%（B2）、90%（B3），每组3个重复，每个重复3个小区，对照组150只静原鸡为笼养。预试期7 d，正式试验期60 d。结果显示，A1B2组的产蛋率和平均蛋重高于除对照组外的其他组，料蛋比最低，A1B2组鸡蛋的蛋壳强度、蛋壳厚度、蛋白高度、哈氏单位、蛋黄色泽和蛋黄比率最高，蛋形指数和蛋黄重高于除对照组外的其他组，A1B2组鸡蛋的蛋白质、脂肪、灰分和磷脂含量最高，A1B2组的水分和胆固醇含量最低。研究表明，综合考虑产蛋性能、蛋品质和鸡蛋营养成分的结果，苜蓿地放养条件下适宜于蛋用静原鸡的放养密度为50只/300 m2、补饲量为70%。

关键词：静原鸡密度补饲量产蛋性能蛋品质

基于非洲猪瘟病毒D250R蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立

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中国兽医科学 2025年

作者：朱文青徐丽华刘佳畦邬雨倩金子安吴旭琪袁秀芳周继勇郑肖娟浙江大学动物医学中心农业农村部动物病毒学重点实验室浙江省农业科学院畜牧兽医研究所

D250R是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)感染早期表达的具有脱帽酶活性的非结构蛋白。本研究构建了pET-32a-D250R重组原核表达质粒，经IPTG诱导和镍亲和纯化成功获得原核细胞表达的重组蛋白His-D250R，该蛋白和真核细胞... 详细信息

D250R是非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)感染早期表达的具有脱帽酶活性的非结构蛋白。本研究构建了pET-32a-D250R重组原核表达质粒，经IPTG诱导和镍亲和纯化成功获得原核细胞表达的重组蛋白His-D250R，该蛋白和真核细胞表达的重组蛋白Flag-D250R均能被ASFV标准阳性血清识别，证明D250R蛋白是ELISA抗体检测方法的潜在靶标。在此基础上，以纯化的重组蛋白为免疫原制备鼠源多克隆抗体，该抗体ELISA效价大于1∶409 600。Western-blot试验表明该抗体与Flag-D250R和His-D250R均具有良好的反应性，证明His-D250R蛋白具有良好的抗原性。进一步以His-D250R蛋白为包被抗原，通过对抗原包被、封闭、抗体孵育、底物反应等条件的优化，建立间接ELISA抗体检测方法。其阴阳性临界值为0.359，检测PRV、PRRSV、PCV2、CSFV等阳性血清结果均呈阴性反应，灵敏度达1∶3 200，批内和批间重复性试验的变异系数均小于10%，与商品化试剂盒符合率达98.8%。上述结果表明，基于His-D250R蛋白建立的间接ELISA抗体检测方法特异性、敏感性、重复性良好，具备一定临床应用价值，可以为非洲猪瘟诊断方法开发提供重要支持。

关键词：非洲猪瘟病毒 D250R蛋白原核表达多克隆抗体间接ELISA

WRKY转录因子在水稻抗逆基因工程中的应用进展

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中国稻米 2025年第1期 61-67+73页

作者：段俊枝燕照玲齐红志张会芳陈海燕杨翠苹王楠卓文飞河南省农业科学院农业信息技术研究所

水稻在其生长过程中经常面临各种非生物胁迫（包括干旱、高盐度、低温及高温等）和生物胁迫（如病虫害），严重影响其正常生长发育。WRKY转录因子家族作为植物界中最为庞大的转录因子家族之一，在调控植物生长发育及应对非生物胁迫和生... 详细信息

水稻在其生长过程中经常面临各种非生物胁迫（包括干旱、高盐度、低温及高温等）和生物胁迫（如病虫害），严重影响其正常生长发育。WRKY转录因子家族作为植物界中最为庞大的转录因子家族之一，在调控植物生长发育及应对非生物胁迫和生物胁迫方面发挥着关键作用。本文综述了WRKY转录因子的结构特点及其在水稻抗非生物胁迫（干旱、高盐、低温、高温等）、生物胁迫（稻瘟病、白叶枯病、纹枯病、稻飞虱等）基因工程中的应用进展，旨在为WRKY转录因子在水稻及其他作物抗逆性遗传改良中的应用提供理论基础和实践指导。

关键词：水稻 WRKY转录因子干旱高盐度温度胁迫稻瘟病白叶枯病纹枯病稻飞虱

饲粮能量和蛋白水平对思南黄牛淘汰母牛生产性能、养分表观消化率及经济效益的影响

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饲料研究 2025年 11-15页

作者：曾茂芹覃涛英裴成江付薇周丽韩永芬贵州省草业研究所贵州金农富平生态农牧科技有限公司

试验旨在探究饲粮能量和蛋白水平对思南黄牛淘汰母牛生产性能、养分表观消化率及经济效益的影响。选取36头体况良好、体重（225±10） kg的思南黄牛淘汰母牛，随机分为3组，每组12个重复，每个重复1头牛。A组（低能低蛋白组）、B组（中... 详细信息

试验旨在探究饲粮能量和蛋白水平对思南黄牛淘汰母牛生产性能、养分表观消化率及经济效益的影响。选取36头体况良好、体重（225±10） kg的思南黄牛淘汰母牛，随机分为3组，每组12个重复，每个重复1头牛。A组（低能低蛋白组）、B组（中能中蛋白组）、C组（高能高蛋白组）综合净能分别为5.85、6.50、7.15 MJ/kg，蛋白水平分别为12.11%、13.45%、14.80%。预试期14 d，正试验期90 d。结果显示，C组的平均日增重和平均日干物质采食量最高，A组的料重比显著低于其他组（P0.05）。A组的利润显著高于其他组（P研究表明，饲粮综合净能为5.85 MJ/kg、蛋白水平为12.11%时，思南黄牛淘汰母牛的生产性能和经济收益较好。

关键词：能量和蛋白水平思南黄牛淘汰母牛生产性能经济效益

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食用菌高温胁迫应答相关研究进展

北方园艺 2025年

作者：卢方马银鹏王雷孙尧张介驰黑龙江省科学院微生物研究所黑龙江省科学院高技术研究院

从食用菌响应高温胁迫的农艺性状变化、生理响应机制、基因表达调控、代谢途径重编程等多个方面总结了近年来在食用菌抵御高温胁迫领域的重要研究进展，发现了多个关键基因和代谢通路的调控机制，并提出了加强温度适应性育种及栽培技术... 详细信息

从食用菌响应高温胁迫的农艺性状变化、生理响应机制、基因表达调控、代谢途径重编程等多个方面总结了近年来在食用菌抵御高温胁迫领域的重要研究进展，发现了多个关键基因和代谢通路的调控机制，并提出了加强温度适应性育种及栽培技术优化的建议，旨在为食用菌的生产和应用提供更为科学有效的支持，推动高温胁迫下的食用菌产业可持续发展。

关键词：食用菌高温胁迫多组学

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武汉地区油蟠桃病毒种类的小RNA测序鉴定

园艺学报 2025年

作者：刘勇王富荣王会良艾小艳朱炜张杨甘志猛龚林忠何华平湖北省农业科学院果树茶叶研究所果树种质创新与利用湖北省重点实验室

为明确侵染湖北武汉地区油蟠桃的病毒种类，采用小RNA测序技术对采集的5份病害样品进行了鉴定分析。结果表明样品中含有桃黄症相关病毒（peach associated luteovirus，PaLV）、桃病毒D（peach virus D，PeVD）和桃潜隐花叶类病毒（peac... 详细信息

为明确侵染湖北武汉地区油蟠桃的病毒种类，采用小RNA测序技术对采集的5份病害样品进行了鉴定分析。结果表明样品中含有桃黄症相关病毒（peach associated luteovirus，PaLV）、桃病毒D（peach virus D，PeVD）和桃潜隐花叶类病毒（peach latent mosaic viroid，PLMVd）。采用RT-PCR技术对测序结果进行了验证，获得的PaLV、PeVD和PLMVd基因序列（GenBank登录号：OP244073、OP244074和OP244075）与GenBank中相应的PaLV分离物T01-2（MK361479）、PeVD分离物T02-1（MK361476）和PLMVd分离物HUEI-Ob166/1-1（MW046337）的核苷酸序列一致性为92.15% ～ 98.59%。进一步利用PaLV、PeVD、PLMVd及其他6种桃病毒特异性引物对109份油蟠桃样品进行RT-PCR检测，仅检测到PLMVd、PaLV和PeVD，检出率依次为33.94%、29.36%和5.50%。PLMVd可能为侵染油蟠桃的优势类病毒。病毒和类病毒复合侵染率为22.93%，高于单一的侵染率，表明复合侵染可能是油蟠桃上病毒、类病毒侵染的主要形式。

关键词：油蟠桃病毒类病毒小RNA测序 RT-PCR

三种大鼠椎间盘细胞提取、鉴定及在单层和微团培养中的基质表达

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中国组织工程研究 2025年第12期29卷 2528-2535页

作者：胡思远陈建权苏州大学苏州医学院骨科研究所江苏省苏州市215031

背景:目前获得椎间盘原代细胞的方法大多较繁琐,且缺少同时提取纤维环、终板与髓核原代细胞的相关报道,因此找到同时提取3种细胞的方法十分关键。目的:探索一种同时提取并培养大鼠来源3种椎间盘细胞(纤维环、终板与髓核)的方法,对之进... 详细信息

背景:目前获得椎间盘原代细胞的方法大多较繁琐,且缺少同时提取纤维环、终板与髓核原代细胞的相关报道,因此找到同时提取3种细胞的方法十分关键。目的:探索一种同时提取并培养大鼠来源3种椎间盘细胞(纤维环、终板与髓核)的方法,对之进行鉴定并探究单层与微团培养对细胞外基质的影响。方法:取材自3周龄雄性SD大鼠椎间盘组织,从其中分离出软骨终板、髓核与纤维环组织。针对髓核及纤维环组织,先使用0.1%链酶蛋白酶E于37℃消化30 min,然后使用0.2%Ⅱ型胶原酶消化4 h来释放其中的细胞;针对终板组织,直接使用0.2%Ⅱ型胶原酶消化4 h来释放其中的细胞。将去除消化酶后的细胞接种于含有培养基的培养皿中,并观察细胞形态;通过实时定量荧光PCR与蛋白印迹实验检测各细胞标记物的表达水平;单层或微团培养大鼠原代纤维环细胞与软骨终板细胞,并采用阿尔新蓝与番红染色检测细胞外基质的表达能力。结果与结论:①3种椎间盘细胞均在培养4 d后开始贴附在皿底,并逐渐展现出增殖的活力;培养至第8天时,3种细胞增殖显著,形态均呈梭形,其中髓核细胞中存在多囊泡的脊索样细胞;②通过实时定量荧光PCR和/或蛋白免疫印迹实验发现原代髓核细胞中K19与Car3表达较高,原代纤维环细胞中Sparc与Bgn表达较高,原代软骨终板细胞中Pth1r与Lars2表达较高;③原代纤维环、软骨终板细胞微团培养后,经阿尔新蓝与番红染色证明这种培养方式相较于单层培养能够提高细胞外基质的表达能力;④结果表明,通过此次实验方法提取并培养获得的原代椎间盘细胞形态较好并具有较高的胞外基质表达水平,这一成果有望为科研人员提供一种新的科研工具,帮助科研人员更好地理解椎间盘生物学。

关键词：原代髓核细胞原代纤维环细胞原代终板细胞细胞提取细胞鉴定微团培养

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浙江近岸水域石首鱼科资源量估算

大连海洋大学学报 2025年

作者：金梓慧徐开达张洪亮周永东龙翔宇詹炜马文静徐菲浙江海洋大学海洋与渔业研究所浙江海洋大学水产学院浙江省海洋水产研究所农业部重点渔场渔业资源科学观测实验站浙江省海洋渔业资源可持续利用技术研究重点实验室浙江省农业科学院水生生物研究所

浙江近岸水域是主要经济鱼类的重要繁育场所，包括以大黄鱼（Larimichthys crocea）和小黄鱼（Larimichthys polyactis）为代表的营养价值较高的石首鱼科物种。为掌握该海域石首鱼科资源量状况，本研究根据2019—2021年每年春季（4月）... 详细信息

浙江近岸水域是主要经济鱼类的重要繁育场所，包括以大黄鱼（Larimichthys crocea）和小黄鱼（Larimichthys polyactis）为代表的营养价值较高的石首鱼科物种。为掌握该海域石首鱼科资源量状况，本研究根据2019—2021年每年春季（4月）、秋季（11月）浙江近岸水域（27 °00 ′-31 °00 ′N，120 °30 ′-123 °45 ′E）底拖网调查资料，采用扫海面积法等方法得到其优势度、生物量密度、尾数密度和现存资源量，分析研究调查海区主要经济石首鱼科的季节和空间数量分布变化情况。研究结果显示，浙江近岸石首鱼科三年平均生物量密度是140.7 kg/km2，秋季均高于春季，且南部区域最高；调查年份现存资源量从高到低的鱼种分别为鮸（Miichthys miiuy）、银姑鱼（Pennahia argentata）和小黄鱼；与历史资料相比，资源量整体逐渐好转。本研究阐述了浙江近岸石首鱼科资源密度和分布现状，研究结果可为浙江近海渔业资源的养护技术研发和可持续利用管理提供基础依据。

关键词：石首鱼科浙江近岸资源量扫海面积法