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TRPV1参与蜂胶对溃疡性结肠炎结肠组织的保护作用

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中南大学学报（医学版） 2023年第2期48卷 182-190页

作者：王静钱臻卢泰愚李瑞瑞李慧张浩孙丽王海华皖南医学院基础医学院生理学教研室安徽芜湖241002 皖南医学院临床医学院安徽芜湖241002 皖南医学院研究生学院安徽芜湖241002

目的:溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)是一类以结肠黏膜及黏膜下层炎症、溃疡、糜烂为主的炎症性肠病(inflammatory bowel disease,IBD)。瞬时受体电位香草酸1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)是内脏痛及炎症性肠病的重要介质。本研究旨在探讨水溶性蜂胶(water soluble propolis,WSP)对UC结肠炎症组织的保护作用,以及TRPV1在其中的作用。方法:将雄性SD大鼠随机分成6组(n=8):正常对照(normal control,NC)组、UC组、低剂量蜂胶(low-WSP,L-WSP)组、中剂量蜂胶(middle-WSP,M-WSP)组、高剂量蜂胶(high-WSP,H-WSP)组和柳氮磺胺吡啶(salazosulfapyridine,SASP)组。NC组大鼠自由饮水,其余组大鼠自由饮用4%右旋糖酐硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)溶液7 d后复制UC模型。在UC模型复制成功基础上,L-WSP、M-WSP、H-WSP组每天分别给予50、100、200 mg/kg的WSP灌胃处理7 d,SASP组每天给予100 mg/kg的SASP灌胃7 d。每天同一时间测量各组大鼠体重,观察其粪便性状和便血情况,行大鼠的疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分。采用比色法检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)的水平,ELISA法检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的变化,HE染色观察结肠病理学变化,蛋白质印迹法、免疫组织化学和免疫荧光实验观察结肠组织中TRPV1的表达情况。结果:自由饮用DSS的各组动物出现体重下降、食欲下降、状态低迷、拖尾便血等症状,表明造模成功。与NC组相比,其余各组大鼠服用DSS后DAI评分均增加(均P<0.05)。与NC组相比,UC组大鼠血清和结肠组织中MDA、IL-6、TNF-α表达水平均升高(均P<0.01),WSP和SASP用药后MDA、IL-6、TNF-α表达水平均降低(均P<0.01)。UC组大鼠结肠组织结构明显被破环,炎性浸润,H-WSP和SASP组结肠组织明显改善,炎性浸润缓解。与NC组相比,UC组大鼠结肠组织TRPV1的表达水平升高(均P<0.01),WSP和SASP组结肠组织TRPV1的表达水平降低。结论:WSP可以缓解DSS诱导的UC大鼠结肠组织的炎症状态,其机制可能与抑制炎症因子释放,下调TRPV1或TRPV1脱敏等机制有关。

关键词：瞬时受体电位香草酸1 溃疡性结肠炎蜂胶炎性介质

生物信息数据库分析INHBA在结直肠癌中的表达及临床意义

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电子科技大学学报 2022年第2期51卷 295-304页

作者：曹慧刘馨莲张录顺成都医学院基础医学院病理学与病理生理学教研室成都610500

抑制素βA作为转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员,在不同肿瘤中具有促癌或抗癌作用。通过生物信息数据库分析了INHBA在结直肠癌中的表达水平及临床意义。结果显示INHBA在结直肠癌中明显高表达,且其高表达与结直肠癌的临床分期、T分期和... 详细信息

抑制素βA作为转化生长因子-β(TGF-β)超家族成员,在不同肿瘤中具有促癌或抗癌作用。通过生物信息数据库分析了INHBA在结直肠癌中的表达水平及临床意义。结果显示INHBA在结直肠癌中明显高表达,且其高表达与结直肠癌的临床分期、T分期和N分期呈正相关。INHBA基因启动子的甲基化水平在结肠腺癌和直肠腺癌中都显著降低。生存分析显示,INHBA高表达的结直肠癌患者预后不良。此外,INHBA表达水平与肿瘤微环境中的绝大多数免疫细胞浸润水平呈正相关,尤其是巨噬细胞。同时,INHBA高表达与癌相关成纤维细胞(CAFs)和血管内皮细胞(VECs)高浸润水平也是密切相关。因此,INHBA在结直肠癌中高表达,参与结直肠癌的进展,有望成为预后和治疗的潜在标志物。

关键词：结直肠癌数据库 INHBA 预后肿瘤微环境

白桦脂酸改善脓毒症大鼠心血管功能与AKT/mTOR及AKT/AMPK通路调控自噬有关

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第6期39卷 840-847页

作者：孟祥飞周心如黄婧陈梦园柳丽娟施璐佳陈慈爱钱令波杭州医学院基础医学与法医学院生理学教研室杭州310053

白桦脂酸(betulinic acid,BA)对脓毒症动物的诸多器官发挥保护作用。然而,白桦脂酸是否能改善脓毒症大鼠的心血管功能,其机制如何,尚不清楚。本研究给予雄性SD大鼠灌胃白桦脂酸(25 mg/kg/d,5 d)预处理后,腹腔注射脂多糖(lipopolysacchar... 详细信息

白桦脂酸(betulinic acid,BA)对脓毒症动物的诸多器官发挥保护作用。然而,白桦脂酸是否能改善脓毒症大鼠的心血管功能,其机制如何,尚不清楚。本研究给予雄性SD大鼠灌胃白桦脂酸(25 mg/kg/d,5 d)预处理后,腹腔注射脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(10 mg/kg)诱导脓毒症。腹腔注射LPS 6 h,对大鼠进行心功能超声检测,HE染色检测心肌组织形态,酶联免疫吸附法测定血清心肌损伤标志物(cTnI、CK-MB)和炎症因子(TNF-α、IL-1β和IL-6),Western印迹测定心肌组织自噬相关蛋白质p62与LC3Ⅱ、AKT自噬通路相关蛋白质表达。结果发现,白桦脂酸预处理显著提高了脓毒症大鼠左心室射血分数和左室短轴缩短率(P<0.05),改善了心肌组织结构,也明显降低了血清cTnI、CK-MB、TNF-α、IL-1β和IL6水平(P<0.05);白桦脂酸明显减少了脓毒症大鼠心肌p62表达(P<0.01)并增加了LC3Ⅱ表达(P<0.001),显著下调了p-AKT(Thr308)、p-AMPKα(Ser485/491)、p-mTOR(Ser2448)和p-S6K(Thr389)表达(P<0.05),明显上调了p-AMPKα(Thr172)和p-ULK1(Ser317)表达(P<0.01)。上述结果表明,白桦脂酸抑制脓毒症大鼠心功能障碍可能与下调AKT/mTOR及AKT/AMPK调控的自噬抑制通路有关。

关键词：白桦脂酸脓毒症心功能障碍自噬

Janus激酶3通过影响钙池操纵性钙通道促进乳腺癌细胞的迁移

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生理学报 2019年第6期71卷 874-882页

作者：刘夏魏婷高招娣赵修粱吴慧晴严静济宁医学院基础医学院生理学教研室新乡医学院基础医学院生理学与神经生物学教研室

本研旨在探讨Janus激酶3 (JAK3)对乳腺癌细胞迁移能力的影响以及其作用机制。利用si RNA (si JAK3)沉默乳腺癌MCF-7细胞JAK3的表达,用划痕实验检测细胞迁移能力,用荧光钙成像技术检测钙池操纵性钙通道(store-operatedcalcium channel,SO... 详细信息

本研旨在探讨Janus激酶3 (JAK3)对乳腺癌细胞迁移能力的影响以及其作用机制。利用si RNA (si JAK3)沉默乳腺癌MCF-7细胞JAK3的表达,用划痕实验检测细胞迁移能力,用荧光钙成像技术检测钙池操纵性钙通道(store-operatedcalcium channel,SOCC)活性,用Westernblot和RT-PCR检测钙池操纵性钙内流(store-operatedcalciumentry,SOCE)过程中的重要分子Orai1和STIM1表达水平。结果显示,SOCC抑制剂2-APB对MCF-7细胞的迁移能力有抑制作用。si JAK3转染可显著抑制MCF-7细胞的迁移能力,降低SOCC活性,下调Orai1和STIM1的m RNA和蛋白表达水平。在JAK3沉默细胞中过表达Orai1或STIM1,可使MCF-7细胞迁移力恢复。上述结果提示,JAK3通过影响SOCC促进乳腺癌细胞的迁移。

关键词： Ca2+ 钙池操纵性钙内流 Orai1 Janus激酶3

阿尔茨海默病小鼠模型中TRPC3通过上调ZO-1和LRP-1蛋白表达清除β淀粉样蛋白沉积

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中国医科大学学报 2022年第12期51卷 1116-1120页

作者：张舒蕾张丽艳李珍慧安一鸣高翔宇沈阳医学院基础医学院病理生理学教研室沈阳110034

目的探讨阿尔茨海默病(AD)小鼠模型中经典瞬时受体电位通道3 (TRPC3)和血脑屏障(BBB)在β淀粉样蛋白(Aβ)沉积清除中的关系。方法将60只小鼠随机分为假手术组、模型组、二酰基甘油类似物(OAG)组和吡啶化合物(Pyr3)组,每组15只。侧脑... 详细信息

目的探讨阿尔茨海默病(AD)小鼠模型中经典瞬时受体电位通道3 (TRPC3)和血脑屏障(BBB)在β淀粉样蛋白(Aβ)沉积清除中的关系。方法将60只小鼠随机分为假手术组、模型组、二酰基甘油类似物(OAG)组和吡啶化合物(Pyr3)组,每组15只。侧脑室注射Aβ1-42建立AD小鼠模型。OAG组和Pyr3组小鼠分别连续21 d腹腔注射TRPC3激动剂OAG和抑制剂Pyr3。应用Morris水迷宫实验检测小鼠行为学,伊文思蓝(EB)染色检测小鼠BBB通透性,Western blotting检测小鼠紧密连接蛋白(ZO-1)、Aβ转运受体低密度脂蛋白受体相关蛋白1 (LRP-1)表达水平,ELISA测定小鼠海马和血清Aβ1-42浓度。结果与假手术组比较,模型组小鼠学习记忆能力下降(P <0.001),EB含量增加(P <0.05),ZO-1、LRP-1蛋白表达下降(均P <0.01),脑组织和血清Aβ浓度均升高(P <0.01,P <0.05);与模型组比较,OAG组小鼠的学习记忆能力明显改善(P <0.05),EB含量下降(P <0.05),ZO-1、LRP-1蛋白表达增加(均P <0.05),脑组织Aβ浓度下降(P <0.05),血清Aβ浓度升高(P <0.05)。结论 AD小鼠中,TRPC3可能通过恢复BBB通透性和功能,上调ZO-1和LRP-1蛋白表达,加快脑组织对Aβ沉积的清除,从而改善AD行为学症状。

关键词：阿尔茨海默病经典瞬时受体电位通道3 低密度脂蛋白受体相关蛋白1 β淀粉样蛋白

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“自愿零手机”雨课堂教学模式的探索与思考

中国多媒体与网络教学学报(上旬刊) 2023年第4期 46-49页

作者：丁凤枝李晶周萍萍李敏王海华皖南医学院基础医学院生理学教研室

雨课堂“课前-课中-课后”的智慧教学模式提高教学质量，受到各大高校的追捧。部分高校要求线上签到，通过记录课中答题情况作为平时成绩，促进师生之间的互动。雨课堂的这种“课中”模式对于手机的依赖性过高，对于一些自制力差的学生... 详细信息

雨课堂“课前-课中-课后”的智慧教学模式提高教学质量，受到各大高校的追捧。部分高校要求线上签到，通过记录课中答题情况作为平时成绩，促进师生之间的互动。雨课堂的这种“课中”模式对于手机的依赖性过高，对于一些自制力差的学生来说，难以专心学习。“自愿零手机”雨课堂模式可能能为数字化教学提供新的思路。

关键词：生理学雨课堂零手机课堂教学改革

子宫内膜糖原代谢在胚胎着床中的作用研究进展

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生理学报 2022年第2期74卷 255-264页

作者：马永丹王翊丞岳利民四川大学华西基础医学与法医学院生理学教研室成都610041

糖原的合成与分解可动态调节体内葡萄糖含量以维持细胞内变化的能量需求。胰岛素作为体内唯一降血糖的激素,通过作用于磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B (Akt)信号通路,促进葡萄糖转运体转位以促进糖... 详细信息

糖原的合成与分解可动态调节体内葡萄糖含量以维持细胞内变化的能量需求。胰岛素作为体内唯一降血糖的激素,通过作用于磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B (Akt)信号通路,促进葡萄糖转运体转位以促进糖原合成,也可抑制糖异生以降低血糖。而子宫内膜糖代谢有其特殊性,不发生糖异生,尚未被利用的葡萄糖均以糖原形式储存。子宫内膜的糖原代谢除受经典糖代谢激素调控外,还受卵巢激素调控。子宫内膜在着床窗口期发生的与着床有关的功能活动都需要葡萄糖供给能量。着床前子宫内膜上皮细胞内大量葡萄糖合成糖原,在着床窗口期分解为葡萄糖,以满足增加的能量需求,保证胚胎着床的顺利进行。糖尿病时子宫内膜糖原代谢受损,糖原合成或分解异常可导致胚胎着床失败、早期流产。本文就子宫内膜的糖原代谢及其在胚胎着床中的作用等方面进行综述,以期为胚胎着床的研究及不孕诊断和治疗提供新思路。

关键词：糖原胰岛素子宫内膜胚胎着床糖尿病

二甲双胍可能通过Hippo-YAP通路抑制HER 2阳性乳腺癌细胞的增殖和促进凋亡

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南方医科大学学报 2022年第5期42卷 740-746页

作者：徐钰徐婷熊远锋黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的观察二甲双胍对HER-2阳性乳腺癌细胞株SKBR3增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法分别用0、20、40、60、80、100、120μmol/L二甲双胍处理乳腺癌细胞株SKBR3,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;结晶紫染色观察其对细胞集落形成... 详细信息

目的观察二甲双胍对HER-2阳性乳腺癌细胞株SKBR3增殖、凋亡的影响,并探讨其可能的机制。方法分别用0、20、40、60、80、100、120μmol/L二甲双胍处理乳腺癌细胞株SKBR3,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响;结晶紫染色观察其对细胞集落形成的影响;计算IC50值。以该浓度二甲双胍处理细胞,与空白对照相比,流式细胞术检测细胞凋亡和周期的改变;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测YAP、TAZ、EGFR、CTGF、CYR61、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin及Fibronectin等关键基因的mRNA水平表达;Westernblotting实验检测YAP、TAZ蛋白水平的表达;免疫荧光观察二甲双胍对SKBR3细胞中YAP/TAZ核易位的改变。结果CCK-8和细胞克隆实验显示二甲双胍对SKBR3细胞增殖活力具有明显的抑制作用(P<0.05),呈浓度和时间依赖性。与对照组相比,二甲双胍处理后的SKBR3细胞凋亡明显增加;G1期细胞比例增多,而G2/M期细胞比例减少。Ncadherin、Vimentin和Fibronectin的表达降低,而E-cadherin的表达上调(P<0.05)。qRT-PCR和Westernblotting检测结果显示,二甲双胍处理后YAP、TAZ、EGFR、CTGF和CYR61的表达明显下调(P<0.05)。免疫荧光实验显示:实验组较对照组的YAP或TAZ,其荧光的定位更多地聚集于胞浆,而细胞核中荧光的量明显的减少。结论二甲双胍能抑制HER-2阳性乳腺癌细胞SKBR3的增殖,促进其凋亡和上皮-间质转化,其机制可能与抑制YAP/TAZ的表达和核定位有关。

关键词：二甲双胍 HER-2阳性型乳腺癌 SKBR3细胞 Hippo-YAP通路

粉尘螨变应原Der f 1 mRNA对小鼠特异性免疫治疗的实验研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2014年第4期32卷 268-273页

作者：姜玉新尹康靳文杰吴露依李朝品皖南医学院基础医学院生理学教研室芜湖241002 皖南医学院临床医学院芜湖241002 皖南医学院基础医学院医学寄生虫学教研室芜湖241002

目的探讨粉尘螨变应原Derf1mRNA疫苗对哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果。方法 50只BALB/c小鼠随机分为5组(10只/组),分别为PBS组、Derf1变应原致敏组、Derf1变应原免疫治疗组、β-actin mRNA免疫治疗组和Derf1 mRNA免疫治疗组。分别于第0... 详细信息

目的探讨粉尘螨变应原Derf1mRNA疫苗对哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果。方法 50只BALB/c小鼠随机分为5组(10只/组),分别为PBS组、Derf1变应原致敏组、Derf1变应原免疫治疗组、β-actin mRNA免疫治疗组和Derf1 mRNA免疫治疗组。分别于第0、第7和第14天,PBS组小鼠腹腔注射PBS,其余4组小鼠则腹腔注射10μg Der f 1进行致敏,建立小鼠哮喘模型。自第21天起,除PBS组小鼠雾化吸入PBS,其他4组小鼠均雾化吸入100μg/ml Der f 1变应原,30 min/次,1次/d,连续7 d,观察并记录小鼠哮喘发作情况。5组小鼠于最后1次雾化吸入致敏2周后,背部皮下分别注射100μl PBS、1μg Der f1(维持致敏)、10μg Derf1(免疫治疗)、2μgβ-actin mRNA和2μg Derf1mRNA,1次/周,连续3周。最后1次皮下注射后2周处死小鼠。收集各组小鼠的支气管肺泡灌洗液(BALF),ELISA法检测γ干扰素(IFN-γ)和白介素13(IL-13)水平,并计数嗜酸粒细胞(EOS);收集各组小鼠脾组织,分离脾细胞,除PBS组外,其他4组均加入10μg/ml Der f 1培养72 h,ELISA法检测脾细胞培养上清液中IFN-γ和IL-13水平;取各组小鼠眼球血,ELISA法检测血清中总IgE以及变应原特异性IgE(sIgE)、IgG1(sIgG1)和IgG2a(sIgG2a)抗体水平。HE染色观察各组小鼠肺组织切片。结果除PBS组外,其他4组小鼠雾化吸入致敏后,均出现急性哮喘发作症状。小鼠BALF中,Der f 1 mRNA免疫治疗组和Der f 1免疫治疗组的IFN-γ水平分别为(897.56±105.73)和(864.48±70.62)pg/ml,均明显高于Derf1变应原致敏组[(209.05±52.28)pg/ml]和β-actin mRNA免疫治疗组[(219.47±64.72)pg/ml](P<0.01);两者IL-13水平分别为(241.64±31.41)和(321.94±41.07)pg/ml,则明显低于Derf1变应原致敏组[(520.62±43.77)pg/ml]和β-actin mRNA免疫治疗组[(507.22±42.26)pg/ml](P<0.01);两者EOS数量分别为(1.33±0.44)×105和(1.48±0.39)×105个/ml,均明显低于Derf1变应原致敏组[(3.54±0.52)×105个/ml]和β-actin mRNA免疫治疗组[(2.98±0.53)×105个/ml](P<0.01)。脾细胞培养上清的ELISA检测结果显示,Der f 1 mRNA免疫治疗组和Der f 1免疫治疗组的IFN-γ水平分别为(420.91±69.92)和(334.92±43.72)pg/ml,明显高于Der f 1变应原致敏组[(123.75±15.48)pg/ml]和β-actin mRNA免疫治疗组[(128.84±59.00)pg/ml](P<0.01);两者IL-13水平[(268.51±40.42)和[(285.26±62.21)pg/ml]则显著低于Der f 1变应原致敏组[(613.89±51.54)pg/ml]和β-actin mRNA免疫治疗组[(524.05±39.12)pg/ml](P<0.01)。血清中抗体水平的ELISA检测结果显示,Der f 1 mRNA免疫治疗组的总IgE、sIgE和sIgG1抗体水平分别为(33.72±9.78)、(22.76±8.09)和(17.87±7.59)ng/ml,均显著低于Der f 1变应原致敏组[(94.34±11.66)、(65.67±9.47)和(75.18±9.52)ng/ml]和β-actin mRNA免疫治疗组[(86.48±10.26)、(62.36±8.35)和(69.51±8.98)ng/ml](P<0.01);其sIgG2a抗体水平为(7.74±0.88)ng/ml,则明显高于Der f 1变应原致敏组[(2.81±1.17)ng/ml]和β-actin mRNA免疫治疗组[(1.06±0.11)ng/ml](P<0.01)。肺组织切片HE染色镜检结果显示,与Der f 1变应原致敏组相比,Der f 1 mRNA免疫治疗组小鼠的气道上皮和肺泡上皮细胞结构基本完整,炎症细胞浸润明显减少。结论 Derf1mRNA疫苗可有效纠正Th1/Th2失衡。

关键词：粉尘螨变应原 mRNA疫苗特异性免疫治疗