检索结果-南通市图书馆

表皮葡萄球菌VraSR生物信息学分析及VraR蛋白的原核表达

维普期刊数据库评论

在线全文

维普期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中国病原生物学杂志 2021年第10期16卷 1158-1162页

作者：乾莲陈红玲孟媛媛陈晓婷孙士正武有聪大理大学基础医学院病原生物学综合实验室云南大理671000 大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室

目的对表皮葡萄球菌VraSR进行生物信息学分析并原核表达VraR蛋白,为表皮葡萄球菌VraSR系统功能研究奠定基础。方法 PCR扩增表皮葡萄球菌SE1457菌株vraR基因,PCR片段经酶切后连入载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-vraR,并转化至大肠埃... 详细信息

目的对表皮葡萄球菌VraSR进行生物信息学分析并原核表达VraR蛋白,为表皮葡萄球菌VraSR系统功能研究奠定基础。方法 PCR扩增表皮葡萄球菌SE1457菌株vraR基因,PCR片段经酶切后连入载体pET28a,构建重组表达质粒pET28a-vraR,并转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中诱导表达。重组蛋白His;-VraR经Western blot鉴定后采用Ni-NTA柱纯化。采用DNAMAN、SMART、Megalign等软件对VraSR系统进行生物信息学分析。结果成功构建重组表达质粒pET28a-vraR,在22℃、0.5 mmol/L IPTG诱导12 h高效表达重组蛋白His;-VraR。分析重组His;-VraR序列,与金黄色葡萄球菌VraS/VraR核苷酸同源性皆为82%,氨基酸同源性分别为92%/94%,氨基酸组成差异主要存在VraS的胞外区和VraR的CheY结构域。结论成功表达并纯化表皮葡萄球菌VraR蛋白,生物信息学分析表皮葡萄球菌VraSR的功能,可能不同于金黄色葡萄球菌。

关键词：表皮葡萄球菌 VraSR 生物信息原核表达

大蒜素对小鼠脾细胞雌激素和雄激素受体影响的实验研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

天然产物研究与开发 2014年第6期26卷 961-966页

作者：刘灵燕董群皖南医学院微生物学与免疫学教研室芜湖241002

本研究旨在探讨大蒜素对小鼠脾细胞雌激素和雄激素受体的影响。将健康ICR清洁小鼠,按性别随机分成三组实验组和三组对照组。实验组分别连续灌服大蒜素14、21和28 d,对照组同期分别灌服等量生理盐水。采用RT-PCR法检测雌性各组小鼠脾细... 详细信息

本研究旨在探讨大蒜素对小鼠脾细胞雌激素和雄激素受体的影响。将健康ICR清洁小鼠,按性别随机分成三组实验组和三组对照组。实验组分别连续灌服大蒜素14、21和28 d,对照组同期分别灌服等量生理盐水。采用RT-PCR法检测雌性各组小鼠脾细胞雌激素受体(ERα和ERβ)的mRNA表达水平和雄性各组小鼠脾细胞雄激素受体(AR)的mRNA水平。实验结果显示,雌性小鼠连续灌服大蒜素第14和21 d时实验组ERαmRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05),第14 d时ERβmRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05)。雄性小鼠连续灌服大蒜素第14、21和28 d时实验组AR mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。综上提示大蒜素可增强小鼠脾细胞雌激素受体(ERα和ERβ)和雄激素受体(AR)mRNA的表达水平。

关键词：大蒜素雌激素受体雄激素受体

广谱抗生素对CT26荷瘤小鼠氟尿嘧啶化疗疗效的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2021年第12期41卷 934-943页

作者：吴艳红张治港徐爱萍朱涛刘辉左小炫唐晓磊皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室芜湖241002 皖南医学院临床医学院芜湖241002 皖南医学院细胞电生理研究室芜湖241002 皖南医学院第二附属医院基础实验室芜湖241000

目的研究结直肠癌荷瘤小鼠中广谱抗生素的使用及其诱导的抗生素耐药菌对氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)化疗疗效的影响及其中的抗肿瘤免疫相关机制。方法结直肠癌细胞CT26皮下荷瘤小鼠随机分成4组:荷瘤对照组,氨苄青霉素、链霉素和多黏... 详细信息

目的研究结直肠癌荷瘤小鼠中广谱抗生素的使用及其诱导的抗生素耐药菌对氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)化疗疗效的影响及其中的抗肿瘤免疫相关机制。方法结直肠癌细胞CT26皮下荷瘤小鼠随机分成4组:荷瘤对照组,氨苄青霉素、链霉素和多黏菌素处理的抗生素组,5-FU化疗组和抗生素^(+)5-FU组。监测记录小鼠肿瘤体积、体重。末次化疗后第7天,流式细胞术检测脾脏中免疫细胞亚群比例和与CT26共培养后增殖的CD8^(+)T细胞比例;16S rRNA测序分析肠道菌群组成,并分离培养各组小鼠肠系膜淋巴结中的细菌。用分离的细菌刺激骨髓来源的巨噬细胞,定量PCR法检测M1型和M2型巨噬细胞标志分子的表达,流式细胞术检测与细菌处理的巨噬细胞进行共培养的CD8^(+)T细胞的增殖。将分离自抗生素^(+)5-FU组的细菌和等体积PBS分别灌胃至进行5-FU化疗的CT26荷瘤小鼠,检测小鼠肿瘤大小、肠道菌群组成和与CT26共培养后增殖的CD8^(+)T细胞比例。结果抗生素^(+)5-FU组小鼠的肿瘤体积大于5-FU组,小鼠体重显著低于5-FU组。抗生素的使用对脾脏CD4^(+)T细胞、CD8^(+)T细胞、中性粒细胞的比例影响不显著,但促进单核细胞比例升高;抗生素^(+)5-FU组体外增殖的肿瘤特异性CD8^(+)T细胞比例下降,低于5-FU组。与对照组和5-FU组比较,抗生素的使用导致肠道菌群组成发生变化,菌群α多样性指数明显降低;从抗生素组、5-FU组和抗生素^(+)5-FU组小鼠的淋巴结中分别培养出大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌。奇异变形杆菌处理的骨髓来源的巨噬细胞显著表达M2型巨噬细胞标志分子精氨酸酶,且与该组巨噬细胞共培养后增殖的CD8^(+)T细胞比例下降。奇异变形杆菌灌胃后小鼠肠道菌群中有变形杆菌属细菌富集,对肿瘤生长没有明显影响,但体外增殖的肿瘤特异性CD8^(+)T细胞比例下降。结论广谱抗生素抑制化疗疗效及肿瘤特异性CD8^(+)T细胞的增殖,抗生素耐药菌可能在其中发挥作用。

关键词：肿瘤化疗抗生素 CD8+T细胞巨噬细胞肠道菌群

结核分枝杆菌PE22/PPE36融合蛋白对耻垢分枝杆菌表型及巨噬细胞功能影响的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病学报 2023年第6期39卷 523-532页

作者：杨雨婷李玉洁余海燕杨国平大理大学基础医学院医学微生物学与免疫学教研室大理671000 大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室大理671000

目的将结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)PE/PPE家族重组融合蛋白PE22/PPE36异源表达于耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)后,探讨其对Ms表型及巨噬细胞功能的影响,分析其在Mtb感染过程中发挥的作用。方法原核表达... 详细信息

目的将结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)PE/PPE家族重组融合蛋白PE22/PPE36异源表达于耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis,Ms)后,探讨其对Ms表型及巨噬细胞功能的影响,分析其在Mtb感染过程中发挥的作用。方法原核表达获取融合蛋白PE22/PPE36,纯化后免疫6~8周龄小鼠制备多克隆抗体;电击法构建重组菌Ms_PE22/PPE36及Ms_vec,并用所制备的多克隆抗体验证重组融合蛋白在Ms中的表达。将重组菌接种于2×YT培养基中观察其菌落形态及生长曲线;点板法及菌落计数法检测重组菌在H_(2)O_(2)、SDS、溶菌酶、NaNO_(2)、低pH、饥饿等压力条件下的存活情况,以分析PE22/PPE36融合蛋白对Ms表型的影响;重组菌侵染巨噬细胞ANA-1及RAW 264.7后,流式细胞术检测ANA-1细胞凋亡率,ELISA法检测ANA-1细胞TNF-α及IL-6分泌量,Griess法检测ANA-1及RAW 264.7细胞NO分泌量并用通道抑制剂检测所涉及的通路,菌落计数法检测重组菌在ANA-1及RAW 264.7细胞内的存活情况。结果与Ms_vec组相比,Ms_PE22/PPE36的菌落形态、生物膜形成及在溶菌酶、NaNO_(2)、低pH等压力条件下的存活率差异无统计学意义(溶菌酶:t 3 h=0.082,t 6 h=0.174,t 9 h=0.355;NaNO_(2):t 3 h=0.950,t 6 h=1.274;低pH:t 3 h=1.869,t 6 h=1.119,t 9 h=0.091;均P>0.05);在H_(2)O_(2)、SDS压力条件下存活率明显降低(H_(2)O_(2):t 6 h=4.35,t 8 h=4.80;SDS:t 4 h=10.43,t 6 h=2.793;均P0.05),在RAW 264.7细胞内的存活率明显降低(t_(48)h=5.509,t_(72)h=5.417;均P免疫应答。

关键词：结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌 PE22/PPE36融合蛋白巨噬细胞

LO-2细胞上清诱导人脐血干细胞向类肝细胞分化

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国应用生理学杂志 2014年第2期30卷 177-179页

作者：张义申元英大理学院基础医学院微生物学与免疫学教研室云南大理671000

目的:探讨体外培养人脐血单个核细胞向类肝细胞的分化。方法:收集LO-2细胞培养上清液加入培养基培养分离出的脐血单个核细胞,连续10 d检测甲胎蛋白(AFP)的表达情况,细胞传代后无诱导剂(LO-2细胞培养上清液)情况下检测白蛋白(ALB)表达情... 详细信息

目的:探讨体外培养人脐血单个核细胞向类肝细胞的分化。方法:收集LO-2细胞培养上清液加入培养基培养分离出的脐血单个核细胞,连续10 d检测甲胎蛋白(AFP)的表达情况,细胞传代后无诱导剂(LO-2细胞培养上清液)情况下检测白蛋白(ALB)表达情况。结果:培养6 d后AFP出现阳性结果,细胞传代后在无诱导剂的情况下ALB检测阳性。结论:在LO-2细胞上清的诱导下,脐血单个核细胞能够分化为类肝细胞。

关键词：脐血单个核细胞 LO-2细胞上清分化类肝细胞

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

医学微生物学实验教改及其考核制度的构建

生物学杂志 2016年第4期33卷 124-125,129页

作者：杨成刘辉皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室芜湖241002

医学微生物学实验作为医学微生物学的重要组成部分,它注重培养训练学生实践能力、解决问题的能力,因而,结合临床需要,以提高学生实践综合能力为目标,对实验教学进行改革。同时构建相应的考核制度对教改效果进行评价,以求提高和改善医学... 详细信息

医学微生物学实验作为医学微生物学的重要组成部分,它注重培养训练学生实践能力、解决问题的能力,因而,结合临床需要,以提高学生实践综合能力为目标,对实验教学进行改革。同时构建相应的考核制度对教改效果进行评价,以求提高和改善医学微生物实验教学质量。结果表明:改革提高了学生实践能力,锻炼了学生科研能力;考核系统能反映学生的实践能力和综合能力。

关键词：微生物实验教学实验改革考核

结核分枝杆菌ESX-1分泌系统与宿主巨噬细胞相互作用的研究进展

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病学报 2023年第12期39卷 1218-1225页

作者：余海燕杨国平大理大学基础医学院医学微生物学及免疫学教研室大理671000 大理大学云南省昆虫生物医药研发重点实验室大理671000

结核分枝杆菌(Mtb)侵入宿主细胞并在宿主细胞中持续存在是Mtb感染引起致病的重要原因。当Mtb感染宿主时,可与宿主巨噬细胞(M?)相互作用并调节M?的功能,影响机体的固有免疫和适应性免疫应答反应。ESX-1分泌系统作为Mtb的主要分泌系统,能... 详细信息

结核分枝杆菌(Mtb)侵入宿主细胞并在宿主细胞中持续存在是Mtb感染引起致病的重要原因。当Mtb感染宿主时,可与宿主巨噬细胞(M?)相互作用并调节M?的功能,影响机体的固有免疫和适应性免疫应答反应。ESX-1分泌系统作为Mtb的主要分泌系统,能将Mtb分泌的蛋白质转运到宿主细胞中,发挥毒力及免疫调节作用;某些分泌蛋白具有高度免疫原性,并是强有效的T细胞抗原,可作为结核疫苗设计及结核病诊断的重要抗原。对ESX-1分泌系统与M?相互作用过程的机制研究是分析Mtb毒力因子的致病机理及疫苗研发的途径之一。因此,本文对Mtb的ESX-1分泌系统组成以及分泌蛋白对M?调控作用进行综述,分析ESX-1分泌系统因子在Mtb与宿主相互作用中发挥的作用,对于开发新的结核疫苗和药物控制结核病至关重要。

关键词： ESX-1分泌系统巨噬细胞结核分枝杆菌

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

钉螺血淋巴细胞提取及其形态观察

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2013年第3期31卷 211-213页

作者：许勇黄春兰周书林刘辉皖南医学院医学一系皖南医学院医学寄生虫学教研室皖南医学院医学微生物学与免疫学教研室芜湖241002

利用软体组织破碎过滤法提取湖北钉螺(Oncomelania hupensis)血淋巴细胞,加入柠檬酸葡萄糖溶液作为抗凝剂,经吉氏染色和美兰染色后,用Motic B5计算机成像系统观察其形态。提取单只钉螺的血淋巴细胞,统计细胞数。结果共观察54个血淋巴细... 详细信息

利用软体组织破碎过滤法提取湖北钉螺(Oncomelania hupensis)血淋巴细胞,加入柠檬酸葡萄糖溶液作为抗凝剂,经吉氏染色和美兰染色后,用Motic B5计算机成像系统观察其形态。提取单只钉螺的血淋巴细胞,统计细胞数。结果共观察54个血淋巴细胞,可见3种形态:圆形有颗粒大细胞,直径(21.59～31.97)μm,细胞核呈卵圆形,有颗粒,核质比0.38±0.08,约占细胞总数35.95%(19/54);圆形无颗粒小细胞,直径(13.24～20.77)μm,细胞核呈卵圆形,无颗粒,核质比0.38±0.90,约占细胞总数51.63%(28/54);梭形细胞,大小(17.60～25.47)μm×(27.19～30.25)μm,细胞核呈长椭圆形,无颗粒,核质比0.44±0.20,约占细胞总数12.42%(7/54)。用过滤法提取单只钉螺血淋巴细胞均数约为19.46万个。该法是提取钉螺血淋巴细胞的一种有效方法。

关键词：湖北钉螺血淋巴细胞过滤法

云南新现蝙蝠SARS样冠状病毒密码子偏性及其聚类分析

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国人兽共患病学报 2018年第12期34卷 1079-1086页

作者：田明明魏雪玲杨兴宋秀锋李光华刘奇大理大学基础医学院病原生物学综合实验室医学微生物学与免疫学教研室大理671000

目的探索云南新现蝙蝠SARS样冠状病毒(SARSr-CoV)密码子偏性及其与SARS冠状病毒(SARS-CoV)及其他地区SARSr-CoV密码子偏性的进化关系。方法运用Lasergene、EMBOSS、CodonW等生物信息软件,以SARS-CoV为对照,对云南新现蝙蝠SARSr-CoV各蛋... 详细信息

目的探索云南新现蝙蝠SARS样冠状病毒(SARSr-CoV)密码子偏性及其与SARS冠状病毒(SARS-CoV)及其他地区SARSr-CoV密码子偏性的进化关系。方法运用Lasergene、EMBOSS、CodonW等生物信息软件,以SARS-CoV为对照,对云南新现蝙蝠SARSr-CoV各蛋白的编码序列进行密码子偏性分析,并基于此与不同时期报道的SARSr-CoV及SARS-CoV进行聚类分析。结果 11株云南新现蝙蝠SARSr-CoV各蛋白有效密码子数目均接近61,密码子偏性较弱;各蛋白偏性的密码子有差异,但均以A、U结尾的密码子为主。ENC-Plot、中性绘图分析与PR2规则分析均提示新现蝙蝠SARSrCoV在进化过程中主要受到自然选择因素的影响。基于密码子偏性的聚类分析发现,部分云南蝙蝠SARSr-CoV与SARSCoV关系极为密切。同时,其他云南SARSr-CoV分散聚类于其他地区的SARSr-CoV中。结论新报道的蝙蝠SARSr-CoV的密码子偏性与SARS-CoV相似度较高,在进化过程中主要受到自然选择因素的影响,跨种传播至人的风险较高。

关键词：冠状病毒密码子偏性分析聚类分析