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NLRP6过表达通过AMPK/CPT1A/PGC1A通路促进肝细胞脂肪氧化分解改善非酒精性脂肪肝

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南方医科大学学报 2025年

作者：石情冉苏叶宋铃榆杨红王文娟刘晗琳刘琦贵州医科大学附属医院消化内科

目的研究核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6(NLRP6)在肝脏脂代谢及非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发展过程中的作用及机制。方法构建高脂饲料喂养（HFD）模型小鼠，分为对照组正常喂养、模型组高脂（脂质含量60%饮食）喂... 详细信息

目的研究核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6(NLRP6)在肝脏脂代谢及非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）发展过程中的作用及机制。方法构建高脂饲料喂养（HFD）模型小鼠，分为对照组正常喂养、模型组高脂（脂质含量60%饮食）喂养，6只/组，持续喂养16周。构建蛋氨酸-胆碱缺乏饮食（MCD）小鼠模型，分为对照组[喂养蛋氨酸-胆碱充足（MCS）饮食]和模型组（喂养蛋氨酸-MCD饮食）]，每组6只，持续喂养8周。使用HE染色及油红O染色鉴定模型是否造模成功，免疫组化染色（IHC）检测两种小鼠模型肝脏中NLRP6的表达。在正常人肝细胞系LO2细胞中使用腺病毒过表达NLRP6，或siRNA敲低NLRP6，使用棕榈酸（PA）构建NAFLD细胞模型，NLRP6过表达处理分组Ad-Vec组、Ad-NLRP6组、Ad-Vec+PA组、Ad-NLRP6+PA组；NLRP6敲低处理分组阴性对照（NC）组、sh-NLRP6组、NC+PA组、sh-NLRP6+PA组。采用甘油三酯（TG）试剂盒、油红染色、qPCR、Western blotting、ATP试剂盒和β-羟基丁酸试剂盒检测NLRP6对脂质代谢的影响及NLRP6对AMPK通路及使用AMPK抑制剂Compound C后AMPK通路的变化。结果在HFD、MCD饮食诱导NAFLD小鼠模型小鼠肝脏中NLRP6表达降低（P解代谢产物ATP、β-羟丁酸含量升高（P解作用被抑制关。结论 NLRP6通过AMPK/CPT1A/PGC1A促进肝细胞脂肪氧化分解，改善脂质沉积。

关键词：非酒精性脂肪肝 NLRP6 AMPK 脂肪酸氧化

金刚烷胺抗人呼吸道合胞病毒感染的体内外研究

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中国抗生素杂志 2025年

作者：陈芳张勇沈胡艳张平平林思宇侯长周张淋牟荣罗语思张科贵州医科大学基础医学院贵州省微生物组与传染性疾病防控重点实验室/病毒研究所/现代病原生物学特色重点实验室/人体寄生虫学教研室贵州中医药大学药学院贵州医科大学附属医院急诊ICU 贵州医科大学附属医院六盘水医院急诊科

目的研究离子通道阻断剂金刚烷胺在体内外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)感染的活性。方法以MTT方法测定金刚烷胺对HEp-2细胞的半数毒性浓度，分别将30、60、90和120μmol/L金刚烷胺加入已感染RSV的HE... 详细信息

目的研究离子通道阻断剂金刚烷胺在体内外抗人呼吸道合胞病毒(human respiratory syncytial virus, HRSV)感染的活性。方法以MTT方法测定金刚烷胺对HEp-2细胞的半数毒性浓度，分别将30、60、90和120μmol/L金刚烷胺加入已感染RSV的HEp-2细胞上清，通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)实验和免疫荧光实验评估金刚烷胺的体外抗病毒活性。将Balb/c小鼠分为Mock组、GZ08-18攻毒组、GZ08-18攻毒加10 mg/kg金刚烷胺治疗组、GZ08-18攻毒加20 mg/kg金刚烷胺治疗组和GZ08-18攻毒加50 mg/kg利巴韦林治疗组。通过小鼠体重变化、存活情况、肺指数、肺泡灌洗液病毒滴度、肺切片免疫荧光、肺组织病理损伤和炎症因子变化等评估金刚烷胺的体内抗病毒活性。结果体外实验qRT-PCR和免疫荧光结果显示不同浓度金刚烷胺处理后，病毒滴度与病毒融合蛋白表达均显著下降，且具量效依赖性。体内实验结果示，与GZ08-18攻毒组相比，金刚烷胺治疗后小鼠体重下降减缓，存活率显著提高，肺指数和病毒滴度在20 mg/kg金刚烷胺治疗组显著降低，肺组织切片病毒融合蛋白免疫荧光强度明显降低，相关炎症因子表达水平显著下调。肺组织病理切片的H&E染色结果示金刚烷胺明显抑制小鼠肺组织损伤。结论金刚烷胺在体内外均可显著抑制RSV感染。

关键词：人呼吸道合胞病毒金刚烷胺抗病毒离子通道

保肾方治疗气阴两虚、肾络瘀阻证糖尿病肾病Ⅳ期的随机对照试验

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中国实验方剂学杂志 2025年第3期 124-131页

作者：邱依婷洪双双刘芷秋孙欣如王悦芬刘梦超赵文景首都医科大学附属北京中医医院张炳厚全国名中医传承工作室

目的：评价保肾方治疗气阴两虚、肾络瘀阻证糖尿病肾病Ⅳ期（DNⅣ期）的临床疗效及安全性，探究其延缓肾功能进展的作用机制。方法：采用随机、对照、双盲、多中心临床试验设计，将94例气阴两虚、肾络瘀阻证DNⅣ期患者随机分为保肾方组... 详细信息

目的：评价保肾方治疗气阴两虚、肾络瘀阻证糖尿病肾病Ⅳ期（DNⅣ期）的临床疗效及安全性，探究其延缓肾功能进展的作用机制。方法：采用随机、对照、双盲、多中心临床试验设计，将94例气阴两虚、肾络瘀阻证DNⅣ期患者随机分为保肾方组和对照组，每组各47例，疗程12周。主要疗效指标为肾功能相关指标[尿微量蛋白与肌酐比值（UACR）、24 h尿蛋白（24 h-UTP）、血肌酐（SCr）、估算的肾小球滤过率（eGFR）]，次要疗效指标为高糖记忆、足细胞上皮间质转分化相关指标及中医证候评分。结果：与本组治疗前比较，治疗12周后保肾方组患者血清矫正晚期糖基化终末产物（lgAGEs）、结缔组织生长因子（CTGF）、Ⅳ型胶原蛋白（Col-Ⅳ）、AGEs受体（RAGE）、尿成纤维细胞特异蛋白-1(FSP-1)、UACR、24 h-UTP、糖化血红蛋白（HbAlc）水平均明显降低（P<0.05）,miR-21 mRNA有上升趋势，但差异无统计学意义；对照组患者SCr、UREA水平明显升高，尿FSP-1、eGFR、HbAlc水平明显降低（P<0.05）。与对照组治疗后比较，观察组患者血清矫正lgAGEs、CTGF、尿FSP-1、SCr、UACR、24 h-UTP水平明显降低，血清Col-Ⅳ、eGFR水平明显升高（P<0.05）。与对照组比较，保肾方组患者治疗前后SCr、eGFR、UACR、24 h-UTP差值差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：保肾方可有效改善气阴两虚、肾络瘀阻证DNⅣ期患者肾功能，降低尿蛋白水平，改善临床症状，机制可能与高糖记忆、足细胞上皮间质转分化相关。

关键词：糖尿病肾病保肾方高糖记忆足细胞上皮间质转分化随机对照试验晚期糖基化终末产物(AGEs) 晚期糖基化终末产物受体(RAGE)

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内热针疗法治疗早中期膝关节骨关节炎44例

中国针灸 2025年第01期 27-30页

作者：连佳伟赖喆蓥许建峰林瑞珠宁夏医科大学总医院康复医学科宁夏医科大学第一临床医学院银川市中医医院宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室宁夏医科大学总医院中医骨伤科

目的：观察内热针疗法治疗早中期膝关节骨关节炎（KOA）的临床疗效，并探究其对软骨厚度的影响。方法：招募44例早中期KOA患者采用内热针疗法治疗，穴取阿是穴（多位于髌下脂肪垫、髌韧带两侧、股四头肌肌腱处、内外侧副韧带附着处），... 详细信息

目的：观察内热针疗法治疗早中期膝关节骨关节炎（KOA）的临床疗效，并探究其对软骨厚度的影响。方法：招募44例早中期KOA患者采用内热针疗法治疗，穴取阿是穴（多位于髌下脂肪垫、髌韧带两侧、股四头肌肌腱处、内外侧副韧带附着处），每周1次，共治疗4周。比较患者治疗前后及治疗结束后3个月（随访）疼痛视觉模拟量表（VAS）评分、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎指数（WOMAC）评分、30 s椅立测试（30sCST）次数、股骨髁间软骨厚度及膝关节超声评分，并评定临床疗效。结果：与治疗前比较，患者治疗后VAS、WOMAC、膝关节超声评分降低（P病进展。

关键词：膝关节骨关节炎,早中期针刺内热针疗法软骨退变肌骨超声

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工程化间充质干细胞来源外泌体在靶向递送抗肿瘤药物中的应用与问题

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中国组织工程研究 2025年第23期29卷 4975-4983页

作者：王双敏汪显耀何志旭遵义医科大学免疫学教研室贵州省遵义市563000 遵义医科大学附属医院贵州省细胞工程重点实验室贵州省遵义市563000 遵义医科大学组织损伤修复与再生医学省部共建协同创新中心贵州省遵义市563000 遵义医科大学附属医院儿科贵州省遵义市563000

背景:间充质干细胞来源外泌体具有免疫原性低且肿瘤归巢能力强等优点,在靶向递送药物方面备受关注。但外泌体在到达靶细胞前易被体内循环迅速清除,此外,由于外泌体表面性质和摄取机制复杂,其靶向性并不十分明显,需要一定的工程化策略提... 详细信息

背景:间充质干细胞来源外泌体具有免疫原性低且肿瘤归巢能力强等优点,在靶向递送药物方面备受关注。但外泌体在到达靶细胞前易被体内循环迅速清除,此外,由于外泌体表面性质和摄取机制复杂,其靶向性并不十分明显,需要一定的工程化策略提高递送效率。目的:通过综述间充质干细胞来源外泌体工程化修饰的不同策略,了解提高外泌体递送效率的相关机制、临床前应用和面临的问题,为进一步临床应用提供理论依据。方法:检索中国知网、维普、万方、PubMed数据库从建库至2024年的相关文献,检索词为“间充质干细胞,外泌体,工程化外泌体,靶向递送,抗肿瘤药物”和“mesenchymal stem cells,exosomes,engineered exosomes,targeted delivery,antineoplastic agents”,筛选工程化间充质干细胞来源外泌体靶向递送抗肿瘤药物的文献,共计纳入85篇文献进行综述分析。结果与结论:(1)间充质干细胞来源外泌体的工程化修饰复杂多样,可通过显著增强外泌体对器官或组织靶向能力,增加血液循环中停留时间,以及降低外泌体中促肿瘤分子的表达,以此达到提高外泌体递送效率的效果;(2)间充质干细胞外泌体在目前的抗肿瘤治疗研究中递送传统和新型药物具有巨大前景;(3)当前仍然存在一些安全问题不能将其转化在临床中,未来的研究将进一步改进和深入研究递送机制,有望开发出更为高效和安全的治疗策略。

关键词：间充质干细胞外泌体工程化外泌体靶向递送抗肿瘤药

β-羟基丁酸改善β淀粉样蛋白1-42诱导小鼠海马神经元HT22细胞的能量障碍

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2713-2719页

作者：叶育采付朝晶李燕李欣儒柴世凡蔡红艳王昭君山西医科大学基础医学院生理学系细胞生理学教育部重点实验室山西省太原市030000 山西医科大学医学科学院山西省太原市030000 山西医科大学基础医学院微生物与免疫学教研室山西省太原市030000

背景:阿尔茨海默病患者存在严重的脑能量障碍,近年来基于酮体干预的脑能量拯救策略在阿尔茨海默病的治疗中越来越受到重视。目的:探讨β-羟基丁酸能否改善β淀粉样蛋白1-42(β-amyloid protein 1-42,Aβ_(1-42))诱导的小鼠海马神经元HT2... 详细信息

背景:阿尔茨海默病患者存在严重的脑能量障碍,近年来基于酮体干预的脑能量拯救策略在阿尔茨海默病的治疗中越来越受到重视。目的:探讨β-羟基丁酸能否改善β淀粉样蛋白1-42(β-amyloid protein 1-42,Aβ_(1-42))诱导的小鼠海马神经元HT22细胞能量障碍。方法:将HT22细胞分为4组,分别为对照组、β-羟基丁酸组、Aβ_(1-42)组、Aβ_(1-42)+β-羟基丁酸组。使用相应试剂盒检测HT22细胞的存活率、ATP水平、α-酮戊二酸脱氢酶活性、Na^(+)K^(+)-ATP酶活性、线粒体膜电位及活性氧水平。结果与结论:与对照组相比,Aβ_(1-42)组HT22细胞的存活率、ATP水平、α-酮戊二酸脱氢酶活性、Na^(+)K^(+)-ATP酶活性、线粒体膜电位均显著降低(P<0.05),活性氧水平显著升高(P<0.05)。与Aβ_(1-42)组相比,Aβ_(1-42)+β-羟基丁酸组HT22细胞的存活率、ATP水平、α-酮戊二酸脱氢酶活性、Na^(+)K^(+)-ATP酶活性、线粒体膜电位均显著升高(P<0.05),活性氧水平显著降低(P<0.05)。结果表明:β-羟基丁酸提高了线粒体生物能量功能和细胞存活率,最终改善了Aβ_(1-42)诱导的HT22细胞能量障碍。

关键词：阿尔茨海默病 HT22细胞 β-羟基丁酸线粒体生物能量功能能量障碍三磷酸腺苷

原子力显微镜观察体外纯化蛋白分子的表面结构

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中国药理学通报 2025年第1期41卷 193-199页

作者：陈昭颖方骁枫刘丹彦陈梦琴凌夕赵洁旻魏伟吴育晶安徽医科大学临床药理研究所抗炎免疫药物教育部重点实验室安徽合肥230032 安徽医科大学第二临床医学院安徽合肥230022

目的以课题组纯化获得的蛋白样本为观察对象,对比原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)及扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)的观察结果,并总结AFM观察生物大分子的主要问题和解决方法。方法将蛋白样本使用PBS稀释... 详细信息

目的以课题组纯化获得的蛋白样本为观察对象,对比原子力显微镜(atomic force microscope,AFM)及扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)的观察结果,并总结AFM观察生物大分子的主要问题和解决方法。方法将蛋白样本使用PBS稀释至15 nmol·L^(-1),分别固定于载玻片、硅片和云母片上烘干,制成固相观察样本,SEM样本在观察前镀铂,使用AFM及SEM观察蛋白质表面结构,计算样本高度,对比结果差异。结果带正电的蛋白样本在观察时由于AFM探针的斥力会向右偏移;云母片能很好地消除蛋白正电荷从而避免样本移动;PBS能为蛋白样本提供良好的稳定环境,但PBS盐结晶会干扰探针运行和成像清晰度;SEM样本需要镀铂后观察,无法达到AFM的精度。结论使用AFM和SEM均可在体外环境直接观察蛋白质结构,AFM能提供更高精度的观察结果;在蛋白样本稳定性允许的情况下首选超纯水为溶剂载体,乙醇等挥发性液体也可作为溶剂载体,AFM的应用可为药理学生物大分子互作研究提供一新途径。

关键词：原子力显微镜扫描电子显微镜受体结构蛋白质体外结构超微结构云母载体

肉苁蓉苯乙醇苷-光甘草定协同抗皮肤色素沉着功效

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精细化工 2025年

作者：刘璐瑶王宝娟李明杰胡君萍杨建华新疆医科大学药学院新疆医科大学第一附属医院药学部新疆药物临床研究重点实验室沙雅县人民医院药学科

为探究肉苁蓉苯乙醇苷（PhGs）和光甘草定（Gla）协同抑制皮肤色素沉着作用，通过体外酪氨酸酶活性抑制实验、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和2，2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐阳离子(ABTS+)自由基清除实验，初步筛选... 详细信息

为探究肉苁蓉苯乙醇苷（PhGs）和光甘草定（Gla）协同抑制皮肤色素沉着作用，通过体外酪氨酸酶活性抑制实验、1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）和2，2-联氮-二（3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸）二铵盐阳离子(ABTS+)自由基清除实验，初步筛选了PhGs和Gla的复配质量比。进一步构建了UVB诱导B16F10细胞色素沉着模型，以酪氨酸酶活性、黑色素含量为指标，评价了药物抑制黑色素的生成作用；构建了脂多糖（LPS）诱导HaCaT细胞炎症模型，以抑制白细胞介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）释放效果为指标，评价了药物的抗炎作用；构建偶氮二异丁脒盐酸盐（AAPH）诱导HaCaT细胞氧化应激模型，以提升超氧化物歧化酶（SOD）活力、过氧化氢酶（CAT）活力为指标，评价了药物的抗氧化作用。通过上述3种细胞模型综合筛选出最佳的PhGs和Gla复配质量比。结果表明，以m（PhGs）∶m（Gla）＝1∶1、5∶1、10∶1制备的PhGs/Gla（1∶1）、PhGs/Gla（5∶1）、PhGs/Gla（10∶1）磷酸盐缓冲溶液（PBS，pH=6.8）在抑制酪氨酸酶活性、抗氧化方面具有较好的抑制作用和协同效应。PhGs/Gla（5∶1）、PhGs/Gla（1∶1）和PhGs/Gla（10∶1）PBS溶液对酪氨酸酶抑制率（92.93%、94.37%和88.06%）；对DPPH自由基清除率分别为89.44%、88.72%和88.10%；对ABTS+自由基清除率分别为100.13%、100.01%和99.87%。当PhGs/Gla DMEM溶液质量浓度为25 μg/mL时，PhGs/Gla（1∶1）、PhGs/Gla（5∶1）、PhGs/Gla（10∶1） DMEM溶液未对B16F10和HaCaT细胞表现出细胞毒性；PhGs/Gla（1∶1） DMEM溶液的酪氨酸酶活性抑制能力更强（酪氨酸酶活性23.80%），黑色素含量（30.90%）显著降低；PhGs/Gla（1∶1） DMEM溶液抑制IL-6、TNF-α释放效果，以及增强SOD、CAT活力的能力最佳，表现出良好的PhGs和Gla复配协同性能，均优于单一用药，也高于PhGs/Gla（5∶1）、PhGs/Gla（10∶1） DMEM溶液。PhGs和Gla复配通过抑制黑色素生成、抗炎及抗氧化作用，协同发挥改善皮肤色素沉着药效。

关键词：肉苁蓉苯乙醇苷光甘草定协同作用抗皮肤色素沉着抗氧化抗炎医药原料

木犀草素改善脊髓损伤大鼠血清诱导的心肌细胞死亡

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中国组织工程研究 2025年第1期29卷 38-43页

作者：张稳稳徐梦如田园张立飞师姝王宁原媛王丽郝海虎山西中医药大学第一临床学院山西省晋中市030600 山西医科大学第三医院山西白求恩医院山西医学科学院骨科山西省太原市030000 山西医科大学基础医学研究中心山西省晋中市030600 山西医科大学基础医学院病理教研室山西省晋中市030600

背景:脊髓损伤导致的心功能不全是脊髓损伤患者死亡的重要原因,但具体机制并不清楚。因此,揭示脊髓损伤患者出现心功能不全的机制对于提高患者的生存质量和生存率有重要意义。目的:探讨木犀草素改善脊髓损伤大鼠血清诱导心肌细胞死亡的... 详细信息

背景:脊髓损伤导致的心功能不全是脊髓损伤患者死亡的重要原因,但具体机制并不清楚。因此,揭示脊髓损伤患者出现心功能不全的机制对于提高患者的生存质量和生存率有重要意义。目的:探讨木犀草素改善脊髓损伤大鼠血清诱导心肌细胞死亡的作用机制。方法:使用Allen’s冲击仪损伤雄性SD大鼠脊椎T9-T11,进行脊髓损伤造模,设置假手术组作为对照,取各组大鼠血清。将H9c2细胞分为空白对照组、假手术大鼠血清组、脊髓损伤大鼠血清组以及木犀草素预处理组,空白对照组为普通培养基培养,假手术大鼠血清组使用含体积分数10%假手术大鼠血清的培养基培养,脊髓损伤大鼠血清组使用含体积分数10%脊髓损伤大鼠血清的培养基培养,木犀草素预处理组预先使用含有终浓度为20μmol/L木犀草素的培养基培养心肌细胞4 h,之后更换含体积分数10%脊髓损伤大鼠血清的培养基培养,培养24 h后使用CCK-8法检测各组H9c2心肌细胞的存活率,采用Western blot检测各组H9c2心肌细胞自噬相关蛋白LC3及p62的蛋白表达。结果与结论:与空白对照组相比,假手术大鼠血清组细胞存活率无明显改变(P>0.05);与假手术大鼠血清组相比,脊髓损伤大鼠血清组细胞存活率显著降低(P<0.01),LC3蛋白表达显著降低(P<0.05),p62蛋白表达显著升高(P<0.05);与脊髓损伤大鼠血清组相比,木犀草素预处理组细胞存活率明显回升(P<0.0001),LC3蛋白表达显著升高(P<0.05),p62蛋白表达显著降低(P<0.05)。结果表明:木犀草素可能通过促进自噬进而改善脊髓损伤大鼠血清诱导的心肌细胞死亡。

关键词：脊髓损伤血清 H9c2细胞自噬木犀草素心功能不全