检索结果-南通市图书馆

LFn-PSCA融合蛋白的表达和生物活性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2006年第10期26卷 929-932页

作者：于少洋易绍琼徐俊杰葛猛付玲于长明李冠霖陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究大肠杆菌中表达的炭疽毒素致死因子氨基端与前列腺干细胞抗原(PSCA)融合蛋白的生物活性。方法分别扩增炭疽毒素致死因子LF(lethal factor)N端254个氨基酸(LFn)的基因片段和PSCA氨基酸29～100的基因片段,将两片段先后克隆进分泌... 详细信息

目的研究大肠杆菌中表达的炭疽毒素致死因子氨基端与前列腺干细胞抗原(PSCA)融合蛋白的生物活性。方法分别扩增炭疽毒素致死因子LF(lethal factor)N端254个氨基酸(LFn)的基因片段和PSCA氨基酸29～100的基因片段,将两片段先后克隆进分泌型载体pAS22中,构建成表达质粒pAS-LFn-PSCA,在大肠杆菌中表达,并对融合蛋白进行纯化和活性检测。结果实现了融合蛋白LFn-PSCA的分泌型表达。纯化后纯度可达90％以上。体外试验显示LFn-PSCA对小鼠巨噬细胞无毒性,并保留了LFn与保护性抗原结合的活性。结论在大肠杆菌中实现了LFn-PSCA的分泌型表达,为继续进行以炭疽毒素为载体增强机体免疫应答的研究打下基础。

关键词：致死因子前列腺干细胞抗原融合蛋白

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

蜱中玫瑰单胞菌菌株的分离与鉴定

中华微生物学和免疫学杂志 2009年第1期29卷 29-32页

作者：邱尔臣张芳刘玮吴晓明杨红曹务春军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的确定从蜱中分离的、使用常规方法不能鉴定的3株粉红色细菌的分类学位置。方法使用16SrDNA序列分析和同源性检索方法及细菌的形态学、生化特性及脂肪酸分析等鉴定方法。结果3株细菌为粉红色的革兰阴性需氧小球杆菌，最适生长温度为3... 详细信息

目的确定从蜱中分离的、使用常规方法不能鉴定的3株粉红色细菌的分类学位置。方法使用16SrDNA序列分析和同源性检索方法及细菌的形态学、生化特性及脂肪酸分析等鉴定方法。结果3株细菌为粉红色的革兰阴性需氧小球杆菌，最适生长温度为37℃，在含有5％以上NaCl的培养基中不能生长。该菌能发酵葡萄糖、利用棕檬酸盐，接触酶试验阳性、脲酶试验阳性、紫外（UV）吸收试验阳性。主要脂肪酸成分为C16：0、C17：0、C18：1 ω9c和C19：0cyc。16SrDNA序列分析和同源性检索发现3株细菌与颈玫瑰单胞菌（Roseomonas cervicalis）同源性最高，达99．1％。结论这3株细菌在分类学上属于玫瑰单胞菌（Roseomonas），但是和已经报道的种都不相同，可能是一个变种。蜱可能是其潜在的媒介宿主。

关键词：玫瑰单胞菌草原革蜱分离鉴定

炭疽毒素保护性抗原和LFn介导的增强型绿色荧光蛋白进入HeLa细胞的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2008年第2期28卷 158-161页

作者：易绍琼于少洋于婷任声权刘树玲杨秀旭董大勇陈薇军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究炭疽毒素保护性抗原（protective antigen，PA）和致死因子（lethal factor，LF）N端254个氨基酸（LFn）在辅助增强型绿包荧光蛋白（EGFP）进入细胞中的作用。方法分别扩增炭疽毒素的基因片段和EGFP的基因全长，将两片段先后克... 详细信息

目的研究炭疽毒素保护性抗原（protective antigen，PA）和致死因子（lethal factor，LF）N端254个氨基酸（LFn）在辅助增强型绿包荧光蛋白（EGFP）进入细胞中的作用。方法分别扩增炭疽毒素的基因片段和EGFP的基因全长，将两片段先后克隆至pET-21a（＋），构建成重组表达质粒pET-LFn-EGFP，在大肠杆菌中诱导表达，并对融合蛋白LFn-EGFP进行纯化。利用荧光共聚焦显微镜和流式细胞术研究LFn-EGFP融合蛋白进入细胞的情况。结果获得较高纯度的融合蛋白LFn-EG-FP，纯度可达90％以上，体外实验显示该融合蛋白保留了LFn与PA结合的活性，并且能够进入到HeLa细胞中。结论LFn-EGFP蛋白本身电会以未知的机制进入细胞，在PA辅助时，LFn-EGFP进入细胞的效率会有所增加。

关键词：致死因子炭疽毒素保护性抗原增强型绿色荧光蛋白 HeLa细胞炭疽杆菌

H221Y突变在HIV-1B ＇亚型毒株中的流行状况及突变模式

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2012年第4期92卷 250-253页

作者：李韩平郭伟刘永健鲍作义李林庄道民刘思扬王晓林李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的探讨人类免疫缺陷病毒（ HIV）逆转录酶区H221Y突变在抗病毒治疗失败人群HIV-1B’亚型毒株中的流行状况及突变模式.方法提取我国中部地区多个省份1205例抗病毒治疗失败及158例未抗病毒治疗的艾滋病患者血浆样本RNA,扩增HIV B’亚... 详细信息

目的探讨人类免疫缺陷病毒（ HIV）逆转录酶区H221Y突变在抗病毒治疗失败人群HIV-1B’亚型毒株中的流行状况及突变模式.方法提取我国中部地区多个省份1205例抗病毒治疗失败及158例未抗病毒治疗的艾滋病患者血浆样本RNA,扩增HIV B’亚型毒株聚合酶区（pol区）基因序列提交斯坦福大学HIV-1耐药数据库,根据数据库比对结果,分析H221Y突变在2组人群中发生频率及发生模式.结果 H221Y突变在抗病毒治疗失败人群中流行率（6.59％）显著高于未治疗人群（0.60％）（x2=6.59,P=0.027）.该突变的发生常伴随逆转录酶区位点T215、M184、K103、Y181突变的出现,突变模式以TAMs/H221 Y/Y181C/I为主.5种抗病毒治疗方案中,齐多夫定（AZT）/去羟肌苷（ddI）/奈韦拉平（NVP）治疗方案的H221Y突变发生率显著高于其他4种治疗方案（14.6％比3.5％、4.9％、2.3％、2.6％,均P ＜0.01）.结论使用一线方案治疗失败的艾滋病患者中H221Y突变有一定流行,该突变的发生以特有的突变模式出现.

关键词： HIV-1 突变抗药性 H221Y

艾滋病病毒长期不进展者、缓慢进展者、高危暴露者以及正常人群APOBEC3G mRNA水平的差异

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华流行病学杂志 2008年第4期29卷 356-359页

作者：刘永健李林鲍作义刘思扬庄道民李韩平李敬云军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的检测我国中部地区艾滋病病毒（HIV）流行区4类不同人群APOBEC3G（hA3G）mRNA水平的差异并分析其与疾病进程的关系。方法采集研究人群的静脉全血标本，分离外周血单核细胞（PBMCs），冻存于液氮中；复苏PBMCs，提取总RNA，mRNA体外... 详细信息

目的检测我国中部地区艾滋病病毒（HIV）流行区4类不同人群APOBEC3G（hA3G）mRNA水平的差异并分析其与疾病进程的关系。方法采集研究人群的静脉全血标本，分离外周血单核细胞（PBMCs），冻存于液氮中；复苏PBMCs，提取总RNA，mRNA体外逆转录为eDNA，应用实时定量聚合酶链反应（PCR）检测不同人群血标本APOBEC3GmRNA的水平。结果HIV长期不进展者标本13份，其CD；T淋巴细胞计数平均为（716±169）个／弘1，平均感染时间为（12．5±2．3）年；HIV缓慢进展者标本48份，其CD；T淋巴细胞计数平均为（233±144）个／μ1，平均感染时间为（10．7±2．2）年。HIV长期不进展者APOBEc3GmRNA水平高于正常人群的水平；HIV缓慢进展者APOBEC3GmRNA水平高于高危人群和正常人群的水平。HIV长期不进展者和缓慢进展者的CD；T淋巴细胞数量与APOBEC3GmRNA水平无相关性。结论我国中部地区HIV流行区4类不同人群APOBEC3GmRNA水平存在差异，并且HIV长期不进展者和缓慢进展者CD；T淋巴细胞数量与APOBEC3GmRNA水平无相关性。

关键词：艾滋病病毒 APOBEC蛋白 mRNA水平

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

两株炭疽芽胞杆菌MLST新序列型(ST)

微生物学报 2012年第1期52卷 120-123页

作者：左庭婷李岩伟韩雪莲何君端青军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

【目的】2株炭疽芽胞杆菌(Bacillus anthracis)17003-14和17003-32的多位点序列分型(Multilocussequence typing,MLST)研究。【方法】选取***基因组7个常见管家基因位点glpF、gmk、ilvD、pta、pur、pycA和tpi进行PCR扩增、测序,与MLST数据库中的等位基因序列进行比对,确定菌株的序列型(sequence type,ST)。【结果】*** 17003-14和17003-32的等位基因编号分别为113、31、1、43、1、53、7和113、31、1、43、1、53、37,比对结果显示这2株细菌的等位基因编号组合未见报道。【结论】17003-14和17003-32为新ST菌株,已被MLST数据库确认,注册号(pubMLST id)分别为id-1053和id-1054。

关键词：炭疽芽胞杆菌多位点序列分型序列型基因分型

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

抗生素可替代品--噬菌体和益生菌会议

生物工程学报 2013年第2期29卷 247-250页

作者：裴广倩韩传银史套兴童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

1会议简介近年来，随着抗生素的滥用，细菌对抗生素的耐药性不断增强。据报道，目前有些国家肺炎链球菌耐药发生率达到25％；美国75％的细菌感染会对一种或多种抗生素产生耐药性；日本葡萄球菌分离株半数以上都具有多重耐药性。

关键词：抗生素益生菌噬菌体替代品多重耐药性细菌感染肺炎链球菌会议简介

采用高通量测序技术分析尾病毒目噬菌体基因组末端序列特点

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

病毒学报 2013年第1期29卷 39-43页

作者：李莎莎范航安小平范华昊姜焕焕米志强童贻刚军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

证明噬菌体高通量测序中高频出现的序列即是噬菌体基因组的末端序列。在T3噬菌体基因组末端连接特异性序列接头,然后进行高通量测序,同时将不加接头的T3基因组也进行高通量测序,对测序结果进行生物信息学比较分析。采用类似高通量测序... 详细信息

证明噬菌体高通量测序中高频出现的序列即是噬菌体基因组的末端序列。在T3噬菌体基因组末端连接特异性序列接头,然后进行高通量测序,同时将不加接头的T3基因组也进行高通量测序,对测序结果进行生物信息学比较分析。采用类似高通量测序技术分析N4样噬菌体的全基因组序列。加接头的序列与无接头序列中的高频序列完全一致,证明了高通量测序过程中得到的高频序列就是加接头的基因组末端序列,同时证明T4样噬菌体的末端具有序列特异性而非完全随机,此外我们还发现N4样噬菌体基因组左侧末端具有唯一序列,而其基因组右侧末端不均一。高通量测序技术方便快捷,可用于噬菌体基因组末端和全基因组序列的同时测定。

关键词：高通量测序噬菌体基因组末端序列

西尼罗病毒多表位基因的融合表达及其免疫保护作用研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华微生物学和免疫学杂志 2007年第11期27卷 1037-1040页

作者：刘志国朱晓光杨保安刘伯华祝庆余军事医学科学院微生物流行病研究所病原微生物生物安全国家重点实验室北京100071

目的研究西尼罗病毒（WNV）多表位基因的融合表达及其免疫保护作用。方法利用生物信息软件Biosun分析西尼罗全基因序列，确定表位基因片段并选择合适片段连接构成多表位基因。采用重叠PCR方法扩增该基因，构建多表位基因的原核重组表达... 详细信息

目的研究西尼罗病毒（WNV）多表位基因的融合表达及其免疫保护作用。方法利用生物信息软件Biosun分析西尼罗全基因序列，确定表位基因片段并选择合适片段连接构成多表位基因。采用重叠PCR方法扩增该基因，构建多表位基因的原核重组表达载体pET-43a-M，进行融合表达和纯化。将表达蛋白加弗氏佐剂免疫小鼠并进行攻毒试验，观察其保护作用。结果分子克隆和构建了原核重组表达质粒pET-43a-M，表达和纯化了融合蛋白Nus-M，该蛋白免疫后的小鼠能够部分抵御西尼罗病毒的攻击。结论构建的西尼罗病毒多表位基因能够在原核细胞内表达，表达产物有较弱的免疫保护反应，为该病毒多表位抗原的串联及多表位疫苗研究提供了试验资料，但需要进一步改进。

关键词：西尼罗病毒多表位基因免疫保护