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基于干扰素基因刺激因子的特异性靶向Dickkopf相关蛋白1的肿瘤疫苗对多发性骨髓瘤的抗肿瘤免疫应答

新乡医学院学报 2024年第10期41卷 911-918页

作者：肖蓬莉郭淑利王慧睿毛慧云安万花郑州大学附属洛阳中心医院血液科河南洛阳471009

目的探讨干扰素基因刺激因子(STING)激动剂ADU-S100是否可增强壳聚糖(CS)纳米颗粒介导的包含肿瘤特异性抗原Dickkopf相关蛋白1(DKK1)的DNA疫苗对多发性骨髓瘤(MM)的抗肿瘤免疫应答。方法应用复合物共沉淀法制备CS-DNA纳米颗粒。采用Zeta... 详细信息

目的探讨干扰素基因刺激因子(STING)激动剂ADU-S100是否可增强壳聚糖(CS)纳米颗粒介导的包含肿瘤特异性抗原Dickkopf相关蛋白1(DKK1)的DNA疫苗对多发性骨髓瘤(MM)的抗肿瘤免疫应答。方法应用复合物共沉淀法制备CS-DNA纳米颗粒。采用Zetasizer Nano-ZS激光粒度分析仪检测CS-DNA纳米颗粒的粒度和Zeta电位,分别通过凝胶阻滞分析和Western blot评估CS-DNA纳米颗粒的DNA保护效果和体内DNA表达效率。利用表达人DKK1(hDKK1)基因的慢病毒建立稳定表达hDKK1的MPC-11细胞(MPC-11-hDKK1),并将MPC-11-hDKK1细胞皮下接种于小鼠建立肿瘤模型。将荷瘤小鼠随机分为对照组(肌内注射CS-pcDNA3.1)、ADU-S100免疫组(皮下注射ADU-S100)、CS-pDKK1免疫组(肌内注射CS-pDKK1)和ADU-S100/CS-pDKK1联合免疫组(肌内注射CS-pDKK1+皮下注射ADU-S100),每组5只。各组荷瘤小鼠按照相应的免疫方案以10 d为间隔免疫3次。每周测量肿瘤大小。肿瘤细胞MPC-11-hDKK1接种后第42天,测量各免疫组小鼠的肿瘤重量;流式细胞术检测各免疫组小鼠脾脏中CD11c^(+)树突状细胞(DC)、CD8^(+)CD11c^(+)DC和主要组织相容性复合物Ⅱ类(MHCⅡ)+CD11c^(+)DC亚群的占比。采用重组hDKK1蛋白体外刺激各组小鼠的脾细胞,应用流式细胞术检测各免疫组CD8^(+)T淋巴细胞中EdU+细胞占比,并应用乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性检测试剂盒测定各组细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的杀伤效应。结果CS-DNA纳米颗粒的粒径和Zeta电位分别约为(204.3±2.31)nm和(15.47±1.01)mV。凝胶阻滞分析表明,CS纳米颗粒包裹的DNA可被完全阻滞。Western blot分析表明,CS-DNA纳米颗粒可在体内有效表达。MPC-11-hDKK1细胞中DKK1蛋白的相对表达量显著高于MPC-11-Ctrl细胞(P0.05);接种后第21、28、35、42天,ADU-S100免疫组,CS-pDKK1免疫组和ADU-S100/CS-pDKK1联合免疫组小鼠的肿瘤体积均显著低于对照组(P<0.05);ADU-S100/CS-pDKK1联合免疫组小鼠肿瘤体积显著低于ADU-S100免疫组和CS-pDKK1免疫组(P<0.05)。肿瘤细胞MPC-11-hDKK1接种后第42天,ADU-S100免疫组、CS-pDKK1免疫组和ADU-S100/CS-pDKK1联合免疫组小鼠的肿瘤质量均显著低于对照组(P<0.05);ADU-S100/CS-pDKK1联合免疫组小鼠的肿瘤质量显著低于ADU-S100免疫组和CS-pDKK1免疫组(P<0.05)。ADU-S100免疫组、CS-pDKK1免疫组和ADU-S100/CS-pDKK1联合免疫组小鼠脾脏中CD11c^(+)DC、CD8^(+)CD11c^(+)DC、MHCII+CD11c^(+)DC亚群占比显著高于对照组(P<0.05);ADU-S100/CS-pDKK1联合免疫组小鼠脾脏中CD11c^(+)DC、CD8^(+)CD11c^(+)DC、MHCII+CD11c^(+)DC亚群占比显著高于ADU-S100免疫组和CS-pDKK1免疫组(P<0.05)。ADU-S100免疫组、CS-pDKK1免疫组、ADU-S100/CS-pDKK1联合免疫组的CTL杀伤效应及CD8^(+)T淋巴细胞中EdU+细胞占比均显著高于对照组(P<0.05);ADU-S100/CS-pDKK1联合免疫组的CTL杀伤效应及CD8^(+)T淋巴细胞中EdU+细胞占比均显著高于ADU-S100免疫组和CS-pDKK1免疫组(P<0.05)。结论STING激动剂ADU-S100可显著提高CS-pDKK1纳米颗粒疫苗对MM的抗肿瘤免疫应答,该疫苗策略为MM提供了一种潜在的治疗方法。

关键词：干扰素基因刺激因子激动剂壳聚糖纳米颗粒 DNA疫苗抗肿瘤免疫多发性骨髓瘤

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芦可替尼通过骨髓源性外泌体抑制原发性骨髓纤维化的血管新生

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海军军医大学学报 2024年第4期45卷 454-461页

作者：梁嘉怡李琼琼陆丽娜成志勇王素云深圳市龙华区中心医院血液内科深圳518000 保定市第一医院血液内科保定071000

目的探究芦可替尼能否在外泌体层面通过抑制血管新生减缓原发性骨髓纤维化(PMF)发展。方法采集3例初诊PMF患者治疗前(初诊组)和芦可替尼治疗3个月后(芦可替尼组)及3例原发免疫性血小板减少症患者(对照组)的骨髓液,提取外泌体。采用蛋白... 详细信息

目的探究芦可替尼能否在外泌体层面通过抑制血管新生减缓原发性骨髓纤维化(PMF)发展。方法采集3例初诊PMF患者治疗前(初诊组)和芦可替尼治疗3个月后(芦可替尼组)及3例原发免疫性血小板减少症患者(对照组)的骨髓液,提取外泌体。采用蛋白质印迹法检测外泌体中促血管新生相关因子的蛋白质表达水平。将外泌体与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养24 h后,采用CCK-8法检测HUVEC的增殖活力,采用流式细胞术检测HUVEC细胞周期分布,采用划痕实验和Transwell侵袭实验检测HUVEC的迁移和侵袭能力,采用qPCR和蛋白质印迹法检测HUVEC中侵袭增殖相关因子的mRNA和蛋白质表达水平。结果与对照组相比,初诊组外泌体中血管内皮生长因子(VEGF)、VEGF受体1(VEGFR1)、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、环氧合酶-2(COX-2)表达水平均增加(均P<0.01);芦可替尼组VEGF、VEGFR1、HIF-1α、COX-2表达水平均低于初诊组(均P<0.01)。与初诊组外泌体共培养的HUVEC增殖、迁移和侵袭能力相较于对照组均增强(均P<0.05),而与芦可替尼组外泌体共培养的HUVEC增殖、迁移和侵袭能力较初诊组下降(均P<0.05)。与初诊组外泌体共培养的HUVEC中S期细胞占比高于对照组,与芦可替尼组外泌体共培养的HUVEC中S期细胞占比低于初诊组。与对照组相比,与初诊组外泌体共培养的HUVEC中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、局部黏着斑激酶(FAK)、增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA和蛋白质表达水平均较高(均P<0.01);与芦可替尼组外泌体共培养的HUVEC中MMP-2、MMP-9、FAK、PCNA mRNA和蛋白质表达水平均较初诊组下降(均P<0.01)。结论体外实验中,PMF初诊患者骨髓源性外泌体可通过血管新生机制促进PMF进展,芦可替尼能够在外泌体层面抑制血管新生从而发挥PMF治疗作用。

关键词：原发性骨髓纤维化外泌体血管新生芦可替尼

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多发性骨髓瘤的预后与免疫生物标志物

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第7期40卷 642-647页

作者：王蕊张连生李莉娟兰州大学第二医院血液科甘肃兰州730000

多发性骨髓瘤(MM)是一种具有高度异质性的血液系统恶性肿瘤。MM复杂的细胞遗传学变化、免疫细胞浸润以及基因突变,共同促进MM细胞增殖、存活和对药物杀伤的耐药性。因此了解MM的肿瘤生物学特征,探究MM的预后与免疫生物标志物,有助于改... 详细信息

多发性骨髓瘤(MM)是一种具有高度异质性的血液系统恶性肿瘤。MM复杂的细胞遗传学变化、免疫细胞浸润以及基因突变,共同促进MM细胞增殖、存活和对药物杀伤的耐药性。因此了解MM的肿瘤生物学特征,探究MM的预后与免疫生物标志物,有助于改善MM患者的预后。中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)、淋巴细胞/单核细胞比值(LMR)、血小板/单核细胞比值(PLR)等免疫生物标志物对于MM风险分层及治疗反应评估有着重要意义。目前,新的MM预后生物标志物正在被探究,以期为MM诊疗提供新的思路。

关键词：多发性骨髓瘤预后生物标志物个体化治疗综述

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异基因造血干细胞移植联合地西他滨维持治疗成功救治范可尼贫血进展为急性髓系白血病1例报告

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临床儿科杂志 2024年第1期42卷 75-79页

作者：戴银亮何海龙范丽艳李捷卢俊肖佩芳凌婧郑佳佳杜智卓胡绍燕苏州大学附属儿童医院血液科江苏苏州215025

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后序贯地西他滨用于治疗范可尼贫血(FA)进展为急性髓系白血病(AML)患儿的可行性及有效性。方法回顾分析1例FA进展为AML患儿接受同胞弟弟作为供体的单倍体移植,移植后予地西他滨维持治疗。结果... 详细信息

目的探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后序贯地西他滨用于治疗范可尼贫血(FA)进展为急性髓系白血病(AML)患儿的可行性及有效性。方法回顾分析1例FA进展为AML患儿接受同胞弟弟作为供体的单倍体移植,移植后予地西他滨维持治疗。结果患儿生后6岁出现贫血,8岁确诊范可尼贫血,按照再生障碍性贫血治疗(环孢素、安雄)6年无效,且进行性三系下降,血小板无效输注,骨髓检查诊断为AML。骨髓二代基因测序检测,仍然表现为FANCA基因c.3348+1G>A纯合变异。遂予FLAG方案(氟达拉滨+阿糖胞苷+粒细胞集落刺激因子)化疗后桥接以TBI为基础的清髓性预处理方案,+15天粒细胞及血小板植入,移植后给予患者减量环孢素,保持Ⅱ度皮排排异直至移植后1年,移植后6个月开始予每2个月予地西他滨,共计6次,同时监测WT1的表达水平。现已经移植后近6年,患儿无事件生存中。结论allo-HSCT后联合地西他滨序贯治疗能够有效治疗FA进展为AML。

关键词：范可尼贫血急性髓系白血病造血干细胞移植地西他滨儿童

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腰背痛久治不愈背后的陷阱——多发性骨髓瘤

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健康世界 2024年第3期31卷 35-36页

作者：陈湘磊山东省潍坊市益都中心医院血液科

腰背痛是中老年人群的常见不适症状。说到腰背痛,您首先想到了哪种疾患?是腰椎间盘突出、骨质疏松、腰肌劳损、泌尿系结石,还是骶骼关节炎?腰背痛患者的首诊科室往往是骨科,但如果经过理疗、牵引、外用膏药、口服止痛药物治疗后,腰背痛... 详细信息

腰背痛是中老年人群的常见不适症状。说到腰背痛,您首先想到了哪种疾患?是腰椎间盘突出、骨质疏松、腰肌劳损、泌尿系结石,还是骶骼关节炎?腰背痛患者的首诊科室往往是骨科,但如果经过理疗、牵引、外用膏药、口服止痛药物治疗后,腰背痛仍不缓解,那可能是因为诊断是“吃骨头的肿瘤”一一多发性骨髓瘤,进而来到血液科进一步诊断。

关键词：腰背痛多发性骨髓瘤中老年人群血液科泌尿系结石腰椎间盘突出骨质疏松不适症状

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艾盐包联合穴位贴敷、耳穴压豆对血液肿瘤化疗患者生活质量及不良反应的影响

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新中医 2024年第6期56卷 142-145页

作者：李红方文娟周丽丽叶文燕丽水市中心医院血液科浙江丽水323000

目的:观察艾盐包联合穴位贴敷、耳穴压豆对血液肿瘤化疗患者生活质量及不良反应的影响。方法:选取接受化疗治疗的150例血液肿瘤患者为研究对象,随机分为观察组及对照组各75例。2组均给予盐酸托烷司琼注射液、异甘草酸镁注射液、人血白... 详细信息

目的:观察艾盐包联合穴位贴敷、耳穴压豆对血液肿瘤化疗患者生活质量及不良反应的影响。方法:选取接受化疗治疗的150例血液肿瘤患者为研究对象,随机分为观察组及对照组各75例。2组均给予盐酸托烷司琼注射液、异甘草酸镁注射液、人血白蛋白等常规治疗,观察组加用艾盐包联合穴位贴敷、耳穴压豆治疗。比较2组临床疗效、化疗不良反应发生情况,以及2组治疗前后Herth希望量表(HHI)、生活质量测定量表(QLICP-LE)评分变化。结果:观察组总有效率为80.00%,对照组为62.67%,2组比较,差异有统计学意义(P0.05),观察组恶心呕吐总发生率为46.67%,对照组为66.67%,2组比较,差异有统计学意义(P血液肿瘤患者的化疗态度及生存信念,降低恶心呕吐发生率,改善生活质量,临床疗效确切。

关键词：血液肿瘤化疗穴位贴敷耳穴压豆生活质量不良反应

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欧洲放线菌病1例

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中华皮肤科杂志 2024年第4期57卷 365-366页

作者：王聪聪解燕燕鹏荣罗莹赵国伟淄博市中心医院皮肤科淄博255000 淄博市中心医院检验科淄博255000

患者男,86岁,因背部结节伴疼痛1个月就诊。患者1个月前无明显诱因背部出现结节,初起为鸡蛋黄大小,表面微红,有触痛,后皮损逐渐增大。患者自行口服头孢氨苄和甲硝唑并外用聚维酮碘溶液、酒精,效果欠佳,红肿加重,疼痛加剧。患者有糖尿病... 详细信息

患者男,86岁,因背部结节伴疼痛1个月就诊。患者1个月前无明显诱因背部出现结节,初起为鸡蛋黄大小,表面微红,有触痛,后皮损逐渐增大。患者自行口服头孢氨苄和甲硝唑并外用聚维酮碘溶液、酒精,效果欠佳,红肿加重,疼痛加剧。患者有糖尿病病史半年,未规律控制;脑梗死病史4年,现左侧肢体活动不利;有青霉素过敏史。体检:生命体征平稳,左侧肢体活动受限,肌力3级,浅表淋巴结未触及肿大。

关键词：聚维酮碘溶液放线菌病头孢氨苄鸡蛋黄浅表淋巴结甲硝唑生命体征肌力

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外周血淋巴细胞亚群在淋巴瘤不同EB病毒感染状态患者中的预后价值

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中华检验医学杂志 2024年第7期47卷 763-769页

作者：沈子园李宇杰胡灵灵刘慧桑威徐州医科大学附属医院血液科徐州221002 安徽省宣城中心医院宣城242099 徐州医科大学附属医院病理科徐州221002

目的:探究外周血淋巴细胞亚群在淋巴瘤EB病毒(EBV)感染不同状态患者中的预后价值。方法:回顾性队列研究。选取2012年11月至2023年8月在徐州医科大学附属医院初诊确诊的333例淋巴瘤患者,其中弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组185例,NK/T细胞... 详细信息

目的:探究外周血淋巴细胞亚群在淋巴瘤EB病毒(EBV)感染不同状态患者中的预后价值。方法:回顾性队列研究。选取2012年11月至2023年8月在徐州医科大学附属医院初诊确诊的333例淋巴瘤患者,其中弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组185例,NK/T细胞淋巴瘤(NKTCL)组100例,霍奇金淋巴瘤(HL)组48例。收集患者一般临床资料及实验室指标检测结果,采用流式细胞术检测淋巴细胞亚群比例、实时定量聚合酶链法检测EBV-DNA。通过查阅病例和电话随访,记录患者生存情况。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,比较各组生存情况,Cox比例风险模型进行淋巴瘤生存时间相关因素分析。结果:NKTCL组中EBV-DNA阳性患者占73.0%(73/100),高于DLBCL组的43.8%(81/185)和HL组的35.4%(17/48)(P均<0.001)。Kaplan-Meier生存曲线显示,DLBCL组CD19+B细胞和CD16+CD56+NK细胞水平异常(高于或低于正常参考范围)患者、DLBCL组EBV-DNA阴性的IgA和CD19+B细胞水平异常患者、DLBCL组EBV-DNA阳性的CD16+CD56+NK细胞水平异常患者的总体生存率均低于其正常水平患者(P均<0.05)。多因素Cox回归分析结果表明,CD19+B细胞水平异常是DLBCL组患者独立不良预后的影响因素(HR=2.098,95%CI 1.181~3.727,P=0.011),EBV-DNA阳性(HR=17.623,95%CI 2.397~129.565,P=0.048)和Ann Arbor分期(Ⅲ/Ⅳ期)(HR=2.770,95%CI 1.335~5.750,P=0.006)是NKTCL患者不良预后的影响因素。结论:外周血淋巴细胞亚群在淋巴瘤不同EBV感染状态患者中存在差异,且CD19+B细胞水平可作为DLBCL患者独立预后的影响因素。

关键词：淋巴瘤 EB病毒淋巴细胞亚群

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华氏巨球蛋白血症：抗CD19嵌合抗原受体T细胞疗法治疗的挑战性病例（英文）

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Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology) 2024年第8期 719-723页

作者：杨杨顾晓琳何静松胡永仙蔡真浙江大学医学院第一附属医院血液科骨髓移植中心浙江省舟山市普陀人民医院血液科

华氏巨球蛋白血症（WM）是一种罕见的小淋巴细胞、浆细胞样淋巴细胞和浆细胞肿瘤，会累及骨髓，甚至累及淋巴结和脾，通常与克隆性Ig M球蛋白血症相关。尽管WM通常伴有惰性临床病程，但却无法治愈。本研究报告了一个具有挑战性的WM案例... 详细信息

华氏巨球蛋白血症（WM）是一种罕见的小淋巴细胞、浆细胞样淋巴细胞和浆细胞肿瘤，会累及骨髓，甚至累及淋巴结和脾，通常与克隆性Ig M球蛋白血症相关。尽管WM通常伴有惰性临床病程，但却无法治愈。本研究报告了一个具有挑战性的WM案例。该患者在化疗、免疫治疗和布鲁顿酪氨酸激酶（BTK）抑制剂治疗后出现复发/难治性病变，并累及髓外，但在CD19定向嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗后病情得到改善。此外，我们还回顾了文献中报道的CAR-T细胞治疗WM病例。本案例中的患者已接受一年多的随访，其病情仍保持良好的部分缓解状态，这表明CAR-T细胞疗法具有作为复发/难治性WM替代方案的潜力。人们迫切希望进行更大规模的临床研究来评估这种疗法的有效性和安全性。

关键词：华氏巨球蛋白血症嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗复发和难治性

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为提升IPTR患者血小板输注后CCI值建立分级规避HLA抗体对应抗原方法及HLAMatchmaker的应用研究

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中国实验血液学杂志 2024年第1期32卷 242-249页

作者：高素青徐筠娉罗畅如李大成彭龙刘通邹琼彩深圳市血液中心输血医学研究所深圳市第二人民医院血液科广东深圳518040

目的:建立分级规避HLA抗体MFI阈值对应抗原方法,联合应用HLAMatchmaker表位计算法,选择供患者表位最小错配评分值,评估两种方法为免疫性血小板输注无效(Immune platelet transfusion refractoriness,IPTR)患者选择HLA相容性血小板供者,... 详细信息

目的:建立分级规避HLA抗体MFI阈值对应抗原方法,联合应用HLAMatchmaker表位计算法,选择供患者表位最小错配评分值,评估两种方法为免疫性血小板输注无效(Immune platelet transfusion refractoriness,IPTR)患者选择HLA相容性血小板供者,在提升血小板输注后校正增加值(CCI)的应用价值。方法:采用SPRCA法完成51例IPTR患者的7807次血小板交叉配型实验,判断其免疫反应阴/阳性结果。采用Luminex单抗原流式微珠法检测患者的HLA-I类抗体,获得不同特异性抗体对应HLA-I类抗原MFI值,并将其分组及分级,强阳性组(MFI>4000,1级)、中阳性组(1000中阳性组>弱阳性组)。强阳性和中阳性组与阴性对照组之间的SPRCA实验免疫反应阳性结果检出数存在统计学差异(P0.05)。设置强阳性组为相应特异性HLA位点对应抗原1级规避阈值,中阳性组为2级规避阈值,弱阳性组为3级规避阈值,在供者血小板紧缺情况下,可以不需要规避弱阳性组。规避1和2级HLA-I类抗体对应供者抗原及选择HLAMatchmaker表位错配评分数≤7血小板供者策略,24 h内CCI值均>4.5×109/L,均可获得临床血小板输注有效。结论:在为IPTR患者选择HLA-I类相容性供者时,分级规避HLA-I类抗体对应供者抗原,综合选择供受者HLAMatchmaker表位错配评分数≤7,经血小板交叉配型实验确认为阴性结果的供者选择策略,对提升IPTR患者血小板计数具有一定实际应用价值。

关键词：血小板人类白细胞抗原抗体表位 HLAMatchmaker

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