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基于Nrf2/ROS信号通路探讨岩藻多糖对食管癌细胞增殖的抑制作用

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食品工业科技 2024年第11期45卷 316-322页

作者：马永超程琦吴华陆琼金少举漯河医学高等专科学校河南漯河462002

目的:探讨岩藻多糖对食管癌增殖的影响,并分析其机制。方法:MTT法分析细胞增殖抑制率,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针检测ROS水平,Western blot法分析Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2、Bax、caspase-3水平,研究岩藻... 详细信息

目的:探讨岩藻多糖对食管癌增殖的影响,并分析其机制。方法:MTT法分析细胞增殖抑制率,Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡,DCFH-DA探针检测ROS水平,Western blot法分析Nrf2、HO-1、NQO-1、Bcl-2、Bax、caspase-3水平,研究岩藻多糖对细胞增殖以及Nrf2/ROS信号通路的影响。裸鼠成瘤实验验证岩藻多糖对瘤体的瘤重、瘤体积及Nrf2、HO-1、NQO-1水平的影响。结果:1~16µg/mL岩藻多糖极显著抑制ECA109细胞增殖,48 h IC50为3.26µg/mL。与对照组(0.1%DMSO)相比,1、2、4µg/mL岩藻多糖处理后的ECA109细胞出现核凝聚、染色质不规则收缩、凋亡小体等明显的凋亡特征,(极)显著促进ECA109细胞凋亡,极显著下调Bcl-2表达水平,极显著上调Bax、Cleaved-caspase-3表达水平,极显著增加ROS水平,极显著降低Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平(P<0.05,P<0.01);Nrf2过表达能显著下调岩藻多糖抑制ECA109细胞增殖效果,显著下调ROS水平,显著上调Nrf2、HO-1、NQO-1蛋白水平(P<0.05)。体内实验显示,50、100 mg/kg岩藻多糖极显著抑制瘤体体积、瘤体质量,下调瘤体Nrf2、HO-1、NQO-1水平(P<0.05)。结论:岩藻多糖抑制ECA109细胞增殖,对体内移植瘤抑瘤效果显著,其机制与调控Nrf2/ROS信号通路有关。

关键词：岩藻多糖 Nrf2/ROS 信号通路食管癌细胞增殖移植瘤

光甘草定调节JAK2/STAT3信号通路对食管癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响

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药物评价研究 2024年第9期47卷 2049-2057页

作者：杨丽娜侯亚琼河南医学高等专科学校

目的探究光甘草定（GLA）对食管癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响并分析其是否与调节Janus蛋白酪氨酸激酶2（JAK2）/信号转导和转录激活因子3（STAT3）通路有关。方法 MTT法检测0、10、20、40、80、160、320μmol·L-1GLA对人食管... 详细信息

目的探究光甘草定（GLA）对食管癌细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移的影响并分析其是否与调节Janus蛋白酪氨酸激酶2（JAK2）/信号转导和转录激活因子3（STAT3）通路有关。方法 MTT法检测0、10、20、40、80、160、320μmol·L-1GLA对人食管癌细胞KYSE150存活率的影响，并计算半数抑制浓度(IC50)。确定80、40、20μmol·L-1为后续实验GLA浓度，并设置对照组、 GLA(80μmol·L-1)+Colivelin(0.5μmol·L-1,JAK2/STAT3通路激活剂)组、GLA(80μmol·L-1)+baricitini(10μmol·L-1,JAK2抑制剂)组，CCK8法检测细胞活力，集落形成实验检测细胞克隆能力，流式细胞仪检测细胞凋亡，Transwell实验检测细胞侵袭，伤口愈合实验检测细胞迁移，Westren blotting法检测JAK2/STAT3通路及增殖、迁移蛋白表达。建立食管癌裸鼠模型，随机分为模型组和GLA(50 mg·kg-1)组，每天ig给药1次，治疗3周后处死小鼠，分析肿瘤质量、体积，免疫组化染色分析组织中JAK2、STAT3阳性表达。结果与对照组比较，GLA组凋亡率显著升高（P<0.05），细胞活力、细胞克隆数、侵袭数、迁移率显著降低（P<0.05）。与GLA 80μmol·L-1组比较，GLA+Colivelin组凋亡率显著降低（P<0.05），细胞活力、细胞克隆数、侵袭数、迁移率显著升高（P<0.05）;GLA+baricitini组细胞凋亡率显著升高（P<0.05），活力、细胞克隆数、侵袭数、迁移率显著降低（P<0.05）。与对照组比较，GLA组细胞Bax蛋白表达显著升高（P<0.05）,p-JAK2、p-STAT3、c-MYC、 Ki67、基质金属蛋白酶9（MMP-9）表达显著降低（P<0.05）。与GLA 80μmol·L-1组比较，GLA+Colivelin组Bax蛋白表达显著降低（P <0.05）, p-JAK2、 p-STAT3、 c-MYC、 Ki67、MMP-9蛋白表达显著升高（P<0.05）;GLA+baricitini组Bax蛋白表达显著升高（P<0.05）,p-JAK2、p-STAT3、c-MYC、Ki67、MMP-9蛋白表达显著降低（P<0.05）。与模型组裸鼠比较，GLA组肿瘤质量和体积显著降低（P<0.05）,JAK2、STAT3阳性表达率显著降低（P<0.05）。结论 GLA可能抑制JAK2/STAT3通路，进而抑制食管癌细胞增殖、侵袭、迁移，并促进凋亡。

关键词：光甘草定 Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导和转录激活因子3通路食管癌凋亡迁移

富硒羊肚菌多糖的制备及其体外抗肿瘤活性探究

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食品工业科技 2024年第15期45卷 213-222页

作者：李贝贝王慧琴孙仪征郑州澍青医学高等专科学校河南郑州450064

本研究旨在优化提取和纯化富硒羊肚菌多糖(Se-MPS),并评估其抗肿瘤活性及其机制。采用单因素和响应面优化法,对富硒羊肚菌粗多糖的提取工艺进行优化。通过柱层析法对粗多糖进行纯化,并对其化学组成进行分析。使用HepG2细胞进行CCK-8试... 详细信息

本研究旨在优化提取和纯化富硒羊肚菌多糖(Se-MPS),并评估其抗肿瘤活性及其机制。采用单因素和响应面优化法,对富硒羊肚菌粗多糖的提取工艺进行优化。通过柱层析法对粗多糖进行纯化,并对其化学组成进行分析。使用HepG2细胞进行CCK-8试验、集落形成试验、划痕试验和Transwell试验来评价Se-MPS的抗肿瘤活性。采用RT-qPCR法、Western blot法和免疫荧光法评价Se-MPS的潜在抗肿瘤机制。单因素和响应面试验结果显示,富硒羊肚菌粗多糖提取的最佳工艺参数为:提取时间2.5 h、液料比45:1(mL/g)、提取温度82℃,得率为7.95%。纯化后,Se-MPS的总糖含量达到95.86%,硒含量高达76.07±0.32 mg/g。此外,Se-MPS显著降低了HepG2细胞的集落形成效率、细胞迁移率和侵袭细胞数目(P<0.05)。同时,Se-MPS抑制了PI3K/Akt通路传导,下调了葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)的mRNA表达,并降低了细胞的葡萄糖摄取量。研究结果表明,通过对提取时间、液料比及提取温度的优化,可改善富硒羊肚菌粗多糖得率。此外,通过调控PI3K/Akt通路,富硒羊肚菌多糖可发挥出较强的抗肿瘤活性。这项研究为富硒羊肚菌多糖的抗肿瘤活性提供了证据,并为相关功能性食品的开发提供了参考。

关键词：硒羊肚菌多糖化学组成响应面优化抗肿瘤活性

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六堡砖茶多糖制备及其免疫调节活性

食品工业科技 2024年第14期45卷 327-334页

作者：孙仪征王慧琴李贝贝郑州澍青医学高等专科学校河南郑州450064

目的:优化六堡砖茶多糖提取工艺,并进一步研究其免疫调节作用及其可能的调节机制。方法:采用单因素实验探究提取温度、料液比及乙醇浓度对茶多糖得率的影响,在此基础上与响应面试验相结合,对茶多糖提取工艺进行了优化。通过测定六堡砖... 详细信息

目的:优化六堡砖茶多糖提取工艺,并进一步研究其免疫调节作用及其可能的调节机制。方法:采用单因素实验探究提取温度、料液比及乙醇浓度对茶多糖得率的影响,在此基础上与响应面试验相结合,对茶多糖提取工艺进行了优化。通过测定六堡砖茶多糖对RAW264.7细胞的吞噬能力及NO释放量,检测核因子κB(Nuclear factor-κB,NF-κB)和AMP依赖的蛋白激酶(AMP-dependent protein kinase,AMPK)信号通路相关基因及蛋白表达,评价纯化后的茶多糖的体外免疫调节活性。结果:六堡砖茶多糖的最佳提取工艺为:提取温度91.11℃,料液比1:15.45(g/mL),乙醇浓度82.84%(v/v)。在此条件下,茶多糖得率为8.62%。细胞实验显示六堡砖茶多糖可显著增强RAW264.7细胞的吞噬能力及NO释放量(P<0.05),显著激活NF-κB和AMPK信号通路(P<0.05),显著上调诱导型一氧化氮合成酶(Inducible nitric oxide synthase,iNOS)、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)的mRNA表达水平(P<0.05)。其中,高剂量茶多糖效果更佳。结论:通过优化提取温度、料液比及乙醇浓度条件,可有效提高六堡砖茶多糖得率,并可通过激活NF-кB/AMPK通路发挥免疫调节作用。该研究结果为六堡砖茶多糖活性深入探究和应用提供了研究基础。

关键词：六堡砖茶茶多糖提取响应面优化免疫调节

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茯苓多糖通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控肝癌细胞自噬、化疗耐药的机制

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食品工业科技 2024年

作者：陈永芳李艳珂张淑静漯河医学高等专科学校

目的：探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide， PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法：对数期HepG-2/DDP细胞随机分组：对照组、PCP组(7.5、15、30 μg/mL PCP)、shNC 组、HCG11 siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰... 详细信息

目的：探讨茯苓多糖(Poria cocos polysaccharide， PCP)对肝癌细胞增殖、自噬和化疗耐药的影响及机制。方法：对数期HepG-2/DDP细胞随机分组：对照组、PCP组(7.5、15、30 μg/mL PCP)、shNC 组、HCG11 siRNA组(转染50 nmol/L HCG1干扰序列)、pcDNA组(转染2 μg pcDNA)、pcDNA3.1-HCG11组(转染2 μg pcDNA3.1-HCG11)、PCP组(30 μg/mL)和PCP+pcDNA3.1-HCG11 组(转染2 μg pcDNA3.1-HCG11+30 μg/mL PCP)。MTT检测肝癌细胞耐药情况和抑制率，Western blot检测Beclin-1、LC3 I和LC3 II水平，实时荧光定量PCR(Real time quantitative PCR，qRT-PCR)检测细胞株中LncRNA HCG11和miR-539-3p的水平，双荧光素酶报告实验检测LncRNA HCG11和miR-539-3p的靶向关系，裸鼠成瘤实验验证体内瘤体的瘤重、瘤体积及自噬相关蛋白水平。结果：4-128 μg/mL PCP抑制HepG-2/DDP细胞增殖，7.5、15、30 μg/mL的PCP能显著降低HepG-2/DDP细胞中MRP1、P-gp、Beclin-1、LC3II的水平，下调HCG11水平，增加miR-539-3p的表达水平(P<0.01)；与对照组比较，HCG11 siRNA 组HepG-2/DDP细胞HCG11相对表达水平、IC50(顺铂)、Beclin-1、LC3 II/ LC3 I比值显著降低，miR-539-3p水平和抑制率(顺铂)显著增加(P<0.01)；与PCP组比较，PCP+pcDNA3.1-HCG11处理组HCG11相对表达水平显著降低，Belin-1、LC3 II/LC3 I比值显著增加(P<0.01)；在不同浓度的顺铂处理下，与PCP组比较，PCP+pcDNA3.1+ HCG11 组抑制率显著降低(P<0.01)；与PCP组比较，PCP+ HCG11 shRNA 组肿瘤体积和肿瘤重量显著降低，Belin-1、LC3 II/LC3 I水平显著下调(P<0.05)。结论：PCP能通过LncRNA HCG11/miR-539-3p调控耐药和自噬，并影响肝癌细胞的增殖。

关键词：茯苓多糖 LncRNA HCG11 miR-539-3p 化疗耐药性自噬

牛蒡子苷元调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

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中国肿瘤生物治疗杂志 2024年第4期31卷 351-358页

作者：任丽洁刘孟媛史冠忠唐亮沧州医学高等专科学校口腔系河北沧州061000

目的:探究牛蒡子苷元(ARC)通过调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌(OSCC)HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其机制。方法:使用不同质量浓度的ARC处理人HSC-3细胞,CCK-8法检测ARC对细胞增殖活力的影响,以选择适宜的药物浓度。将HS... 详细信息

目的:探究牛蒡子苷元(ARC)通过调控Notch/Hes-1信号通路对口腔鳞状细胞癌(OSCC)HSC-3细胞增殖、凋亡和侵袭的影响及其机制。方法:使用不同质量浓度的ARC处理人HSC-3细胞,CCK-8法检测ARC对细胞增殖活力的影响,以选择适宜的药物浓度。将HSC-3细胞分为对照组、ARC-L组(10 mg/L ARC)、ARC-M组(20 mg/L ARC)、ARC-H组(40 mg/L ARC)和ARC-H+Jagged1/FC组(40 mg/L ARC+1.2μg/mL Jagged1/FC)。采用EdU法检测细胞增殖能力,划痕愈合实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测细胞的迁移、侵袭能力及细胞周期和细胞凋亡率,WB法检测增殖(c-Myc、cyclin D1)、凋亡(BAX、Bcl-2、survivin)、EMT(E-cadherin、vimentin、Snail)及Notch/Hes-1通路(Notch 1、Hes-1、NICD)相关蛋白的表达水平。结果:与0 mg/L相比,10~80 mg/L的ARC均能显著降低HSC-3细胞增殖活力(均P<0.05)。与对照组相比,ARC-L组、ARC-M组和ARC-H组HSC-3细胞EdU阳性率、划痕愈合率、侵袭细胞数、S期和G2/M期细胞占比及c-Myc、cyclin D1、Bcl-2、survivin、vimentin、Snail、Notch 1、Hes-1和NICD蛋白表达均显著降低(均P<0.05),细胞凋亡率、G0/G1期细胞占比及BAX、E-cadherin的蛋白表达均显著升高(均P<0.05),且呈浓度梯度依赖性。同时使用Notch激动剂Jagged1/FC,则可部分逆转ARC对HSC-3细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡及相关蛋白表达的作用(均P<0.05)。结论:ARC可能通过抑制Notch/Hes-1信号通路抑制OSCC细胞HSC-3增殖和侵袭并促进细胞凋亡。

关键词：牛蒡子苷元口腔鳞状细胞癌 HSC-3细胞增殖凋亡侵袭 Notch/Hes-1信号通路

头花蓼不同入药部位黄酮类成分治疗淋球菌感染的分子机制研究

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天然产物研究与开发 2024年

作者：杨杰张瑜郭步伐彭启伦叶茂易伟毕节医学高等专科学校重庆医药高等专科学校广州医科大学药学院

比较分析头花蓼茎、花及叶黄酮类成分治疗淋球菌感染作用机制的异同。本研究首先采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Orbitrap-HRMS）鉴定头花蓼茎、花及叶黄酮类化合物的种类和含量。然后，通过网络药理学比... 详细信息

比较分析头花蓼茎、花及叶黄酮类成分治疗淋球菌感染作用机制的异同。本研究首先采用超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法（UPLC-Q-Orbitrap-HRMS）鉴定头花蓼茎、花及叶黄酮类化合物的种类和含量。然后，通过网络药理学比较头花蓼不同入药部位峰面积比值大于0.1%的黄酮类成分治疗淋球菌感染靶点的差异。最后，利用AutoDock Vina软件对核心活性成分与关键靶点进行分子对接验证。经UPLC-Q-Orbitrap-HRMS结果证实，头花蓼花中黄酮类化合物分布的数量＞叶＞茎；头花蓼叶中黄酮类化合物分布的含量＞花＞茎，其中槲皮苷相对含量最高。网络药理学研究结果表明，头花蓼不同入药部位黄酮类成分治疗淋球菌感染的共有核心靶点为TNFα、PTGS2、MMP-9、MMP-2和EGFR。经分子对接验证，头花蓼茎、花及叶中相对含量最高的化合物槲皮苷与PTGS2对接的结合能均低于-10 kcal/mol。上述研究结果揭示头花蓼不同入药部位黄酮类成分种类和含量的差异以及头花蓼不同入药部位黄酮类成分通过多途径和多靶点治疗淋球菌感染，为头花蓼不同入药部位临床应用提供参考依据。

关键词：头花蓼不同入药部位淋球菌感染网络药理学 UPLC-Q-Orbitrap-HRMS 分子机制

NLRP3/ACS/Caspase-1信号通路在儿童腺病毒肺炎引发心肌应激损伤中的作用

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中华医院感染学杂志 2024年 2216-2220页

作者：王晓荣陈中慧聂建军李静邵雪飞南阳医学高等专科学校第一附属医院儿科南阳医学高等专科学校第一附属医院药学部南阳医学高等专科学校第一附属医院检验科南阳医学高等专科学校

目的探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)/凋亡相关斑点样蛋白(ASC)/半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)信号通路在儿童腺病毒肺炎引发心肌应激损伤中的作用。方法选取2021年1月—2023年1月于南阳医学高等专科学校第一附属医院就诊的腺病毒肺炎患儿11... 详细信息

目的探讨NOD样受体蛋白3(NLRP3)/凋亡相关斑点样蛋白(ASC)/半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)信号通路在儿童腺病毒肺炎引发心肌应激损伤中的作用。方法选取2021年1月—2023年1月于南阳医学高等专科学校第一附属医院就诊的腺病毒肺炎患儿112例为研究对象,根据有无心肌损伤分为无心肌损伤组76例、心肌损伤组36例,检测并比较两组病毒滴度、心肌酶谱水平、炎性因子、氧化应激因子、NLRP3通路相关mRNA、蛋白表达水平。结果病毒载量为4×100～6×100 copy/μg的患儿占比最高,无心肌损伤组和心肌损伤组分别为33例(43.42%)、28例(45.16%);与无心肌损伤组比较,心肌损伤组肌钙蛋白I(cTnⅠ)、肌红蛋白(Mb)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸盐脱氢酶(LDH)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)表达水平高,白细胞(WBC)计数、超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原(PCT)、白细胞介素(IL)-1β、IL-18、转化生长因子β(TGF-β)水平高,丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肤过氧化物酶(GSH-Px)水平高(P<0.05);NLRP3、ACS、Caspase-1的mRNA转录水平及蛋白相对表达水平高(P<0.05)。结论血清NLRP3、ACS、Caspase-1水平与腺病毒肺炎导致的心肌损伤相关指标相关,腺病毒可能是通过NLRP3/ACS/Caspase-1信号通路的激活介导氧化应激水平,参与病理损伤进程。

关键词：儿童腺病毒肺炎心肌损伤氧化应激 NOD样受体蛋白3/凋亡相关斑点样蛋白/半胱氨酸蛋白酶1

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伸缩式钻孔机器人动力学模型及仿真分析研究

机械设计与制造 2024年第8期402卷 333-338,345页

作者：许敏邵向阳漯河医学高等专科学校河南漯河462000

钻孔机器人在油矿井下作业环境中逐渐广泛应用,提出了一种由钻孔液驱动的新型伸缩式钻孔机器人。首先根据钻孔机器人驱动力的工作原理,建立了压差流体力学模型,在此基础上分别推导了钻孔机器人在空载和负载条件下的牵引力计算方程,从而... 详细信息

钻孔机器人在油矿井下作业环境中逐渐广泛应用,提出了一种由钻孔液驱动的新型伸缩式钻孔机器人。首先根据钻孔机器人驱动力的工作原理,建立了压差流体力学模型,在此基础上分别推导了钻孔机器人在空载和负载条件下的牵引力计算方程,从而建立了钻孔机器人的动力学模型,提出了钻压、钻速等关键参数的计算方法。通过仿真分析了表明,随着流量的增加,钻速/速度和钻孔机器人的牵引力均呈近似线性增加趋势,在空载条件下,钻孔机器人将处于加速状态,直到伸缩缸停止泵送钻孔液为止。在负载条件下,钻孔机器人与机械钻孔速率能快速达到平衡。

关键词：钻孔机器人伸缩式机器人钻孔液驱动压差