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秃疮花异紫堇碱对LPS诱导的牛肺微血管内皮细胞炎症因子和TLR2/MYD88/NF-κB通路的影响

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饲料研究 2024年 96-101页

作者：蒙琦常亮丁姝元周瑶刘盛楠王胜明杨明甘肃省畜牧兽医研究所

试验旨在探究秃疮花异紫堇碱（ICD）对脂多糖（LPS）诱导的牛肺微血管内皮细胞（CPA 47）炎症因子和Toll样受体2/髓样分化因子88/核转录因子-κB (TLR2/MYD88/NF-κB)通路的影响。选取CPA 47分为5组接种于6孔板中，每组设置4孔，对照组... 详细信息

试验旨在探究秃疮花异紫堇碱（ICD）对脂多糖（LPS）诱导的牛肺微血管内皮细胞（CPA 47）炎症因子和Toll样受体2/髓样分化因子88/核转录因子-κB (TLR2/MYD88/NF-κB)通路的影响。选取CPA 47分为5组接种于6孔板中，每组设置4孔，对照组细胞加入1640培养基，LPS组加入脂多糖处理建立炎症模型，ICD高剂量组细胞加入20 mg/L ICD+50μg/L LPS,ICD中剂量组细胞加入15 mg/L ICD+50μg/L LPS,ICD低剂量组细胞加入10 mg/L ICD+50μg/L LPS。分别利用ELISA检测各组的炎性因子含量，实时荧光定量PCR检测TLR2/MYD88/NF-κB通路中关键基因的表达量，免疫印迹法（Western blot）检测上述通路中各蛋白含量。结果显示，与对照组相比，LPS处理组和ICD低剂量组牛肺微血管内皮细胞白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8 (IL-8)和肿瘤坏死因子（TNF-α）含量显著升高（P研究表明，15～20 mg/L ICD可以有效缓解LPS诱导的牛肺微血管内皮细胞的炎症反应，抑制LPS诱导的牛肺微血管内皮细胞TLR2/MYD88/NF-κB炎症通路的激活。

关键词：秃疮花异紫堇碱牛肺微血管内皮细胞脂多糖炎症因子 TLR2/NF-κB/MYD88通路

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基于全基因组重测序分析酃县白鹅保种效果

中国畜牧兽医 2024年第11期 4890-4898页

作者：万伟粲张旭黄璇燕海峰蒋桂韬李闯湖南省畜牧兽医研究所

【目的】酃县白鹅是湖南地区优秀的地方鹅种，为了解酃县白鹅的保种效果，对保种场各家系进行保种工作的评估。【方法】从酃县白鹅保种场的42个家系中各选取1只公鹅，翅静脉采血，提取DNA,进行全基因组重测序。基于保种场42只酃县白鹅... 详细信息

【目的】酃县白鹅是湖南地区优秀的地方鹅种，为了解酃县白鹅的保种效果，对保种场各家系进行保种工作的评估。【方法】从酃县白鹅保种场的42个家系中各选取1只公鹅，翅静脉采血，提取DNA,进行全基因组重测序。基于保种场42只酃县白鹅公鹅的重测序数据，对其群体遗传结构和遗传多样性进行分析与评价。【结果】检测到采样群体的SNPs位点14 270 647个，经数据质控和过滤筛选出13 696 453个SNPs位点。主成分分析（PCA）结果发现，42只公鹅个体可以明显聚为3个亚群；通过群体渗透分析发现，3个亚群之间未发生明显的杂化现象（K=3）。亚群1和亚群3的群体分化指数（Fst值）为0.0842。42只酃县白鹅共检测到832条连续性纯合片段（ROH）,ROH片段长度都集中在0～2 Mb区间；基于ROH得到的近交系数FROH值为0.0130。群体的期望杂合度为0.2918,观测杂合度为0.2968,群体近亲系数（Fis）为0.036,多态信息含量（PIC）为0.266,基因多样性指数（Nei）为0.336。【结论】酃县白鹅保种场的鹅遗传多样性比较丰富，群体近交程度比较低，观测杂合度略高于期望杂合度，并无显著性差异，说明群体处于平衡状态，但部分亚群出现了中度遗传分化，后续保种过程中要使这些亚群进行杂交，以减少酃县白鹅遗传分化的程度。

关键词：酃县白鹅全基因组重测序遗传多样性群体结构

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PPARA基因对绵羊肌内脂肪沉积的影响及其多态性

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华北农学报 2024年第2期39卷 209-218页

作者：付玲娟史金平张全伟刘婷赵德宝马维华马海蛟孟泉禄唐致雄成述儒甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃兰州730070 甘肃农业大学生命科学技术学院甘肃兰州730070 甘肃省临夏州康乐县畜牧兽医中心甘肃临夏731500

为研究PPARA对绵羊肌内脂肪(IMF)沉积的影响及作用机制,寻找绵羊肌内脂肪沉积相关分子标记,以小尾寒羊(STH)和萨寒杂交(STH×SFK)F1群体为研究对象,通过测定其肉品质,利用H&E染色和油红O染色比较2个绵羊群体背最长肌组织学结构及脂滴分... 详细信息

为研究PPARA对绵羊肌内脂肪(IMF)沉积的影响及作用机制,寻找绵羊肌内脂肪沉积相关分子标记,以小尾寒羊(STH)和萨寒杂交(STH×SFK)F1群体为研究对象,通过测定其肉品质,利用H&E染色和油红O染色比较2个绵羊群体背最长肌组织学结构及脂滴分布;利用qRT-PCR和WB技术检测PPARA mRNA水平和蛋白水平在不同群体间的表达差异,并分析PPARA基因与肌内脂肪的相关性;Sanger测序技术检测PPARA基因SNP位点以评估其作为绵羊肌内脂肪沉积相关遗传标记的可能性。结果表明:小尾寒羊剪切力和失水率极显著高于萨寒杂交,但是pH值极显著低于萨寒杂交,大理石花纹评分小尾寒羊低于萨寒杂交群体;组织学染色显示,小尾寒羊肌纤维较粗,排列紧密,肌内脂肪在肌纤维间隙集中分布;萨寒杂交肌纤维较细且结构松散,肌内脂肪在肌细胞间及肌纤维间隙均匀、广泛分布,含量更高;PPARA mRNA表达量小尾寒羊群体显著高于萨寒杂交群体,PPARA蛋白表达量小尾寒羊群体极显著高于萨寒杂交群体;相关性分析显示,PPARA基因表达量与绵羊脂滴面积比及pH值呈极显著负相关,与剪切力和失水率呈极显著正相关,与大理石花纹评分弱相关;Sanger测序结果分析显示,2个绵羊群体PPARA基因第2内含子T49885C、T50007C、G50013A、G50835A、G50942A及G51154C位置上发生碱基突变,但小尾寒羊群体未检测到C49885T突变。SNP遗传多样性分析显示,SNP位点群体纯合度均大于杂合度,在群体中处于中低度多态;除G50835A突变偏离了Hardy-Weinberg平衡,其余SNPs均符合Hardy-Weinberg平衡,遗传基础稳定。研究认为,PPARA基因对绵羊肌内脂肪沉积具有重要影响,可作为绵羊肌内脂肪性状选择的潜在分子遗传标记。

关键词：绵羊肌内脂肪 PPARA 多态性

青贮玉米对湖羊生长性能、瘤胃发酵性能及血清生化指标的影响

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中国饲料 2024年第2期 35-38页

作者：高星梅杜秀花甘肃省康乐县畜牧兽医中心甘肃康乐731500

本研究选择36只体况良好、体重相近的3月龄湖羊为研究对象,随机分为两组,每组3个重复,每个重复6只羊,分别饲喂青贮玉米(试验组)和玉米秸秆(对照组)作为单一粗饲料配制2种日粮,从生长状况、瘤胃发酵情况及血清生化指标等几个方面进行为期... 详细信息

本研究选择36只体况良好、体重相近的3月龄湖羊为研究对象,随机分为两组,每组3个重复,每个重复6只羊,分别饲喂青贮玉米(试验组)和玉米秸秆(对照组)作为单一粗饲料配制2种日粮,从生长状况、瘤胃发酵情况及血清生化指标等几个方面进行为期60d的研究,探讨饲喂青贮玉米对湖羊的影响。结果显示,试验组湖羊的干物质采食量(DMI)和平均日增重(ADG)均显著高于对照组(P 0.05);试验组瘤胃胃液的pH值显著高于对照组8.03%(P 0.05);试验组血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮等血清生化指标均无显著差异(P> 0.05)。结果表明,青贮玉米能提高湖羊生长性能,并具有改善湖羊瘤胃发酵的潜力,具有推广应用价值。

关键词：青贮玉米湖羊生长性能瘤胃发酵血清生化指标

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鄂东大别山区野生豆科牧草资源调查与评价

草业学报 2024年第6期33卷 116-125页

作者：熊军波张鹤山田宏陆姣云吴新江刘洋湖北省农业科学院畜牧兽医研究所湖北武汉430064

为开发利用野生豆科牧草资源,2017-2021年对分布于鄂东大别山区的野生豆科牧草资源现状、属种、植物区系、生活型及饲用价值进行了调查统计与分析。结果表明:鄂东大别山区豆科牧草资源分属于34属77种,以少种属和单种属为主体,占资源总数... 详细信息

为开发利用野生豆科牧草资源,2017-2021年对分布于鄂东大别山区的野生豆科牧草资源现状、属种、植物区系、生活型及饲用价值进行了调查统计与分析。结果表明:鄂东大别山区豆科牧草资源分属于34属77种,以少种属和单种属为主体,占资源总数的91%。资源中包括6个中国特有种,2个中国珍稀濒危种,23个栽培牧草野生种及野生近缘种。区系地理成分以温带和热带为主要分布型,分别占总属种的47%和38%。生活型以多年生草本和灌木为主,占资源总数的70%。资源中饲用品质优良的占79%,其余均在中等以上。

关键词：鄂东大别山区豆科牧草植物区系资源

基于miRNA测序数据解析苏博美利奴羊毛囊发育分子机制

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中国农业科学 2024年第19期 3917-3935页

作者：何军敏毛静艺魏晨任一帆张果平田可川刘桂芬山东省农业科学院畜牧兽医研究所

【背景】羊毛由毛囊（hair follicle,HF）产生并控制，HF结构功能和形态发生是一个复杂的生物过程。细毛羊胚胎期HF发育过程决定了羊毛的产量和品质。苏博美利奴羊是我国自主培育的羊毛细度达17—19μm的精纺用超细毛羊新品种。超细毛... 详细信息

【背景】羊毛由毛囊（hair follicle,HF）产生并控制，HF结构功能和形态发生是一个复杂的生物过程。细毛羊胚胎期HF发育过程决定了羊毛的产量和品质。苏博美利奴羊是我国自主培育的羊毛细度达17—19μm的精纺用超细毛羊新品种。超细毛羊HF形态发生过程中miRNA及其调控机制有待更为深入的研究。【目的】解析超细毛羊早期HF发育中miRNA的分子调控机制对于更好地理解HF形态发生过程以及对细毛羊的育种工作具有重要的指导意义，为解析超细毛羊HF发育分子调控机制和选育优质超细毛羊提供可参考的分子标记。【方法】对相同饲养条件下的苏博美利奴羊进行同期发情和人工授精，授精日被指定为胚胎第0天（E0）。在胚胎期第65天（E65）、85天（E85）、105天（E105）和135天（E135）将妊娠母羊安乐死后进行剖宫产收集胚胎的皮肤组织；在羔羊出生后第7天（D7）和30天（D30）采集左侧肩胛部皮肤组织，每个时期采3个样本。运用miRNA-Seq鉴定毛囊发育不同时期的保守miRNA和Novel miRNA，并构建苏博美利奴羊HF发育不同时期的皮肤组织miRNA文库。对差异表达miRNA(DE-miRNA)进行靶基因预测及生物信息学分析，筛选参与超细毛羊HF发育的关键miRNA和候选基因，并构建miRNA-靶基因调控网络。运用RT-qPCR和双荧光素酶报告基因检测方法验证miR-433-3p与NOTCH1的靶向关系。【结果】构建了苏博美利奴羊HF发育不同时期18个皮肤组织miRNA文库，并筛选出87个DE-miRNA和446个Novel DE-miRNA。对DE-miRNA聚类分析可知毛囊诱导分化阶段（E65、E85、E105）有21个DE-miRNA，其中有5个（oar-miR-23b、oar-miR-133等）是关键候选miRNA；毛囊成熟阶段（E135、D7、D30）有28个DE-miRNA。SOM分析结果表明DE-miRNA可聚为10个Cluster，每个Cluster中miRNA有相似功能。对DE-miRNA和Novel DE-miRNA进行混合预测靶基因并进行功能富集发现靶基因主要富集通路有AMPK、Notch、hedgehog。将DE-mRNA与靶基因结合生物信息学分析构建了与HF发育相关的miRNA-靶基因调控网络。在293T细胞中将NOTCH1野生型和突变型载体与miR-433-3p mimics和mimics-NC共转染，结果表明NOTCH1为miR-433-3p的靶基因。【结论】构建了苏博美利奴羊毛囊发育不同时期miRNA表达谱，分析了miRNA及其靶基因的表达调控关系，并构建了miRNA-靶基因调控网络，进一步了解了miRNA在毛囊发育不同时期的作用及分子机制；为解析超细毛羊毛囊发育分子调控机制和选育优质超细毛羊提供可参考的分子标记。

关键词：毛囊发育苏博美利奴羊 miRNA 靶基因调控网络

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适度规模养牛场粪污综合治理技术

畜牧兽医杂志 2024年第2期43卷 109-111页

作者：何茂昌杨军祥桑国俊董和郭海龙甘肃省畜牧兽医研究所甘肃平凉744000

适度规模养牛场数量多、分散、设施化水平低,是陇东地区肉牛养殖业的中坚力量,但关注度低,存在粪污面源污染、治理难度大的问题。本文结合生产实际,从粪污源头减量、过程控制、末端处理适用技术应用解决污染问题,实现粪污无害化资源化利... 详细信息

适度规模养牛场数量多、分散、设施化水平低,是陇东地区肉牛养殖业的中坚力量,但关注度低,存在粪污面源污染、治理难度大的问题。本文结合生产实际,从粪污源头减量、过程控制、末端处理适用技术应用解决污染问题,实现粪污无害化资源化利用,为当地牛产业良性发展提供技术支持。

关键词：适度规模养牛场粪污生物发酵

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平凉地区肉牛腹泻源病毒性腹泻病毒的分离鉴定

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现代畜牧科技 2024年第10期 18-20页

作者：马相雄丁姝元常亮李敏蒙琦甘肃省庄浪县畜牧兽医中心甘肃庄浪744600 甘肃省畜牧兽医研究所甘肃平凉744000

为分离与鉴定平凉地区肉牛腹泻源病毒,采集5份甘肃省平凉地区某大型规模化肉牛养殖场内疑似感染BVDV的肉牛粪便作为研究病料,经MDBK细胞接种分离病毒、病毒含量测定、琼脂扩散试验、RT-PCR、动物回归试验对病毒进行分离与鉴定。结果可见... 详细信息

为分离与鉴定平凉地区肉牛腹泻源病毒,采集5份甘肃省平凉地区某大型规模化肉牛养殖场内疑似感染BVDV的肉牛粪便作为研究病料,经MDBK细胞接种分离病毒、病毒含量测定、琼脂扩散试验、RT-PCR、动物回归试验对病毒进行分离与鉴定。结果可见,共分离获得2株BVDV,TCID_(50)值分别为10^(-5.88)/0.1 mL、10^(-5.61)/0.1 mL;这2株病毒经RT-PCR可特异性扩增出1条大小为804 bp的目标电泳条带,与BVDV Oregon C24标准阳性血清的琼脂扩散试验能够产生明显的沉淀线,且与BVDV标准抗原形成的沉淀线相连;接种分离获得的2株病毒至动物体内,可表现出典型的BCVD临床症状。该研究成功从平凉地区肉牛养殖场内分离鉴定出2株BVDV毒株,且毒株的致病性较强,与标准毒株的抗原性相同,可导致肉牛产生典型临床症状。

关键词：肉用牛病毒性腹泻分离鉴定

绵羊ZNF521基因多态性与生长性状的关联性分析

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中国畜牧杂志 2024年第9期60卷 107-111页

作者：顾玲荣苟想珍胡文萍毕亚珍尚明玉杨军祥徐建峰张莉中国农业科学院北京畜牧兽医研究所北京100193 甘肃省畜牧兽医研究所甘肃平凉744000 农业农村部畜禽资源(羊)评价利用重点实验室甘肃平凉744000

锌指蛋白521(Zincfinger Protein521,ZNF521)属于C2H2锌指蛋白家族,是生长板软骨形成和软骨内骨化的重要调节因子,影响骨的纵向生长。本研究旨在通过研究ZNF521基因g.31731118 A>G位点多态性与绵羊生长性状的关联性,筛选与绵羊生长性状... 详细信息

锌指蛋白521(Zincfinger Protein521,ZNF521)属于C2H2锌指蛋白家族,是生长板软骨形成和软骨内骨化的重要调节因子,影响骨的纵向生长。本研究旨在通过研究ZNF521基因g.31731118 A>G位点多态性与绵羊生长性状的关联性,筛选与绵羊生长性状相关的潜在分子标记位点。试验采用Illumina OvineSNP 600K BeadChip和Illumina OvineSNP 50K BeadChip芯片检测技术分别对乌珠穆沁羊(n=269)和湖羊群体(n=997)ZNF521基因g.31731118A>G位点进行基因型检测,并分别与2个群体生长性状进行关联性分析。ZNF521基因遗传特征分析发现,g.31731118 A>G位点在乌珠穆沁羊和湖羊中均检测出3种基因型:AA、GA和GG,且在2个群体中均处于中度多态(0.25G位点与乌珠穆沁羊4月龄胸围显著相关,与湖羊6月龄体重和体斜长显著相关。此外,6月龄乌珠穆沁羊体斜长、湖羊管围和十字部高GA基因型均优于GG和AA基因型。综上所述,ZNF521基因与绵羊生长发育相关,g.31731118A>G位点可作为绵羊生长性状的潜在分子标记。

关键词：绵羊 ZNF521基因多态性生长性状关联分析