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胆管癌细胞外泌体对自然杀伤细胞功能影响

中华肿瘤防治杂志 2024年第11期31卷 670-676页

作者：王新月王蔚琛张帆曹璋任乐彬王楠胡凤爱刘乃国高洪莲周洁柏雪莲滨州医学院附属医院医学研究中心山东滨州256603 滨州医学院附属医院检验科山东滨州256603 滨州医学院附属医院肝胆外科山东滨州256603 滨州医学院附属医院病理科山东滨州256603 滨州医学院附属医院产前诊断中心山东滨州256603

目的探究胆管癌细胞来源的外泌体(RBE-Exos)对自然杀伤(NK)细胞功能的影响及其内在机制。方法采用免疫组化染色对比分析NK细胞在胆管癌组织和癌旁组织中的浸润数量;通过超速离心法从胆管癌细胞中分离出外泌体,透射电镜(TEM)观察RBE-Exo... 详细信息

目的探究胆管癌细胞来源的外泌体(RBE-Exos)对自然杀伤(NK)细胞功能的影响及其内在机制。方法采用免疫组化染色对比分析NK细胞在胆管癌组织和癌旁组织中的浸润数量;通过超速离心法从胆管癌细胞中分离出外泌体,透射电镜(TEM)观察RBE-Exos的形态特征,蛋白质印迹实验鉴定RBE-Exos的蛋白标志物;纳米颗粒跟踪分析仪(NTA)检测RBE-Exos粒径分布。NK-92细胞与RBE-Exos共培养后,荧光染色示踪RBE-Exos进入细胞;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和蛋白质印迹实验检测黏附分子的表达水平。LDH法检测NK-92细胞的杀伤功能变化。结果免疫组化染色显示,与癌旁组织相比,表达CD56(t=2.977,P=0.008)和NKp46(t=4.530,P<0.001)特异性标志分子的NK细胞在癌组织中的浸润数量减少。RBE-Exos电镜下呈酒窝或杯状,特异性表达CD63和HSP70。NTA结果显示RBE-Exos平均直径为(102.90±7.00)nm。荧光染色显示,培养24 h后RBE-Exos进入NK-92细胞。RBE-Exos处理后,NK-92细胞失去了正常的聚团现象而呈现分散的状态。qRT-PCR结果显示,RBE-Exos处理组黏附分子CD11a(t=4.999,P=0.038)、CD18(t=9.225,P=0.012)和CD54(t=12.050,P=0.007)在转录水平上的表达较PBS组均降低。蛋白质印迹实验结果表明,RBE-Exos处理组较PBS组黏附分子CD11a(t=5.140,P=0.007)、CD18(t=7.177,P=0.002)和CD54(t=8.713,P<0.001)蛋白表达均减少。LDH检测显示,RBE-Exos减弱NK-92细胞对靶细胞的杀伤功能(20∶1,t=3.975,P=0.017;10∶1,t=5.776,P=0.005)。结论胆管癌可能通过释放外泌体抑制NK细胞黏附分子表达从而抑制其在肿瘤部位的浸润。

关键词：胆管癌外泌体自然杀伤细胞肿瘤微环境免疫逃逸黏附分子

万古霉素联合哌拉西林钠他唑巴坦钠致重症感染成年患者急性肾损伤的临床特征及危险因素研究

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药物不良反应杂志 2024年第8期26卷 460-466页

作者：戴红因脱鸣富陈赫军张媛媛张亚玲多文博甘肃医学院附属医院质控科平凉744000 甘肃医学院附属医院药剂科平凉744000 衡水市人民医院药学部衡水053000 甘肃医学院附属医院人事科平凉744000

目的探讨万古霉素联合哌拉西林钠他唑巴坦钠(VPT)致重症感染成年患者急性肾损伤(AKI)的临床特征及危险因素。方法收集甘肃医学院附属医院和河北省衡水市人民医院2022年1月至2023年8月重症感染成年住院患者中的VPT相关AKI患者的临床资料(... 详细信息

目的探讨万古霉素联合哌拉西林钠他唑巴坦钠(VPT)致重症感染成年患者急性肾损伤(AKI)的临床特征及危险因素。方法收集甘肃医学院附属医院和河北省衡水市人民医院2022年1月至2023年8月重症感染成年住院患者中的VPT相关AKI患者的临床资料(AKI组),对AKI的发生时间、严重程度分期和预后等进行描述性统计分析。从同期使用VPT未发生AKI的患者中按照与AKI组1∶1的比例以随机数字法抽取对照组患者。收集2组患者的一般资料、疾病状况、基线实验室检查结果、VPT用药情况、并用药物等信息,对VPT致AKI发生的影响因素进行单因素分析和多因素logistic回归分析。结果共有1-547例重症感染成年患者使用了VPT治疗,其中175例(11.3%)患者发生AKI。175例AKI患者中男性81例(46.3%),女性94例(53.7%);年龄(55±22)岁;从VPT治疗至AKI发生的时间为(4±1)d,AKI分期为1、2和3期者分别为97例(55.4%)、54例(30.9%)和24例(13.7%)。175例患者中169例(96.6%)在停药后肾功能逐渐恢复,6例(3.4%)需要持续肾脏替代治疗。多因素logistic回归分析结果显示,万古霉素血浆谷浓度>20mg/L[比值比(OR)=2.105,95%置信区间(CI):1.427~3.105,P=0.022]、万古霉素疗程≥11 d(OR=1.518,95%CI:1.232~1.871,P=0.014)、哌拉西林钠他唑巴坦钠疗程≥14 d(OR=1.826,95%CI:1.152~2.894,P=0.029)和并用血管活性药物时间较长(OR=3.315,95%CI:1.428~7.695,P=0.005)是VPT相关AKI发生的独立危险因素。结论严重感染的成年患者VPT相关AKI多发生于联合治疗的1周内,严重程度多为1期和2期。万古霉素血浆谷浓度>20mg/L、较长的VPT疗程及并用血管活性药物时间较长可增加VPT相关AKI的发生风险。

关键词：万古霉素哌拉西林他唑巴坦急性肾损伤危险因素

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1例蓝氏贾第鞭毛虫感染的诊断

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2024年第2期42卷 272-274,278页

作者：闵向阳冯萌赵旭鸿翁文浩李汉华同济大学附属杨浦医院检验科上海200090 复旦大学上海医学院基础医学院上海200032 上海市儿童医院上海交通大学医学院附属儿童医院检验科上海200062

患者,男,40岁,上海市居民。2018年7月因“急性腹泻”就诊于同济大学附属杨浦医院急诊内科。患者自述水样便腹泻1 d。患者发病前1个月有巴拿马旅行史,无饮生水和食生肉史。血常规检查结果C反应蛋白升高(16.17 mg/L),其余指标正常,提示感... 详细信息

患者,男,40岁,上海市居民。2018年7月因“急性腹泻”就诊于同济大学附属杨浦医院急诊内科。患者自述水样便腹泻1 d。患者发病前1个月有巴拿马旅行史,无饮生水和食生肉史。血常规检查结果C反应蛋白升高(16.17 mg/L),其余指标正常,提示感染。患者粪样涂片镜检查见蓝氏贾第鞭毛虫包囊和滋养体。间接免疫荧光试验检测结果显示,蓝氏贾第鞭毛虫滋养体被患者血清(1∶50)识别,虫体表面有较强的荧光染色。提取患者粪样DNA,PCR扩增出147 bp的蓝氏贾第鞭毛虫特异性18S核糖体基因片段,该片段序列与蓝氏贾第鞭毛虫集聚体A(GenBank登录号:KY706490)的序列一致性为100%,在邻接法构建的系统进化树上与蓝氏贾第鞭毛虫集聚体A聚在同一分支上。结合患者临床表现和相关检查结果,诊断患者为蓝氏贾第鞭毛虫感染。临床给予患者甲硝唑(每日20 mg/kg,分3次口服,连服7 d)治疗。2周后复查血常规和粪便常规,均恢复正常,患者病情好转。

关键词：蓝氏贾第鞭毛虫感染旅行者腹泻 18S核糖体基因间接荧光抗体试验

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托珠单抗和英夫利昔单抗在儿童患者中药物不良事件信号的挖掘与评价

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中国临床药理学杂志 2024年第5期40卷 732-736页

作者：谭玥戈宁宁彭净邱文爽张欣李兰芳济宁医学院附属医院临床药学科山东济宁272029 济宁医学院附属医院检验科山东济宁272029 济宁医学院附属医院药学部山东济宁272029 济宁医学院附属医院药剂科山东济宁272029

目的分析托珠单抗与英夫利昔单抗儿科临床应用药物不良事件的发生风险。方法收集美国食品药品监督管理局不良事件报告系统数据库中2013年第一季度至2023年第一季度儿童人群的托珠单抗与英夫利昔单抗的不良事件(AE)报告数据。用报告比值... 详细信息

目的分析托珠单抗与英夫利昔单抗儿科临床应用药物不良事件的发生风险。方法收集美国食品药品监督管理局不良事件报告系统数据库中2013年第一季度至2023年第一季度儿童人群的托珠单抗与英夫利昔单抗的不良事件(AE)报告数据。用报告比值比(ROR)法和比例报告比值比(PRR)法进行AE风险信号挖掘,并按国际医学用语词典的首选系统器官分类和首选术语(PT)对AE进行分类统计分析。结果数据经提取和清洗后纳入以托珠单抗为怀疑药物的AE报告1052份,阳性PT信号198个,以英夫利昔单抗为怀疑药物的AE报告9139份,阳性PT信号387个。分析提示2种药物比较强的阳性风险信号均集中在胃肠系统疾病、感染及侵染类疾病、实验室检查、肌肉骨骼及结缔组织疾病、血液、血管及淋巴系统疾病。英夫利昔单抗风险信号主要集中在胃肠系统疾病、感染及侵染类疾病,而托珠单抗的风险信号主要集中在肌肉骨骼肌系统。结论儿童临床应用这2种药物均对多系统有影响,托珠单抗可能对生长发育有影响,英夫利昔单抗对儿童胃肠道有影响。

关键词：托珠单抗英夫利昔单抗药物不良事件数据信号挖掘

DNase1L3分泌减少和相关抗体诱发散发性SLE患者NET降解障碍

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细胞与分子免疫学杂志 2024年第1期40卷 43-50页

作者：黄建军毛桐俊张军李志武其文皖南医学院第一附属医院检验科安徽芜湖241001 皖南医学院第一附属医院风湿免疫科安徽芜湖241001

目的探讨DNA酶1(DNase1)和DNA酶1样分子3(DNase1L3)活性改变与散发性系统性红斑狼疮(SLE)患者人群中中性粒细胞胞外诱捕网(NET)降解受损相关性及发生机制。方法募集46例散发性SLE患者和30名正常个体,采用ELISA检测DNase1、 DNase1L3... 详细信息

目的探讨DNA酶1(DNase1)和DNA酶1样分子3(DNase1L3)活性改变与散发性系统性红斑狼疮(SLE)患者人群中中性粒细胞胞外诱捕网(NET)降解受损相关性及发生机制。方法募集46例散发性SLE患者和30名正常个体,采用ELISA检测DNase1、 DNase1L3及相应自身抗体,免疫沉淀法分离样本DNase1和DNase1L3,改进的免疫荧光法检测NET和酶降解活性,酶联免疫斑点实验(ELISPOT)、 Western blot法和反转录PCR分析外周血单个核细胞(PBMC)分泌DNase1L3能力。结果H3-dsDNA和Ela-dsDNA两种复合物在SLE人群中的水平显著升高;低密度中性粒细胞(LDG)在SLE人群中的水平显著高于正常人群,LDG与H3-dsDNA和Ela-dsDNA两种NET复合物具有显著正相关性。SLE患者血浆体外降解NET的能力显著低于正常人群;DNase1和DNase1L3不同比例的综合降解实验显示DNase1L3降低是影响NET残留升高的关键;SLE患者人群DNase1L3自身抗体也显著高于正常人群;SLE患者PBMC分泌DNase1L3的能力相对正常人群减退。结论 DNase1L3分泌减少和相关自身抗体的存在是SLE人群NET降解能力减退的主要因素,为SLE患者病情监测和治疗提供新的方向。

关键词： DNase1L3酶系统性红斑狼疮(SLE) 低密度中性粒细胞自身抗体

表面增强拉曼散射技术在生物医学检测中的研究及应用

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中华检验医学杂志 2024年第3期47卷 314-322页

作者：印晓静任传利韩崇旭杨潘周林府伟灵张阳扬州大学临床医学院/江苏省苏北人民医院医学检验科重庆大学附属肿瘤医院放射生物中心陆军军医大学第一附属医院检验科

拉曼光谱在检验医学领域的应用正在不断进步和发展, 基于拉曼光谱技术的生物传感平台为疾病精准分子诊断提供了一种新的手段, 特别是表面增强拉曼散射(SERS)技术作为一种快速无损的检测方法, 具有样品制备简单、受水的干扰小、实时检测... 详细信息

拉曼光谱在检验医学领域的应用正在不断进步和发展, 基于拉曼光谱技术的生物传感平台为疾病精准分子诊断提供了一种新的手段, 特别是表面增强拉曼散射(SERS)技术作为一种快速无损的检测方法, 具有样品制备简单、受水的干扰小、实时检测等优点, 在医学检验领域显示出巨大的应用潜力。同时, 随着SERS与其他技术包括电化学、纳米新材料、微流控、生物芯片、DNA纳米机器、人工智能和机器学习等技术的集成结合, 其在医学检验领域将发挥越来越重要的作用。相信随着对SERS研究的不断深入以及多个学科领域之间的交叉融合, 其在生物医学检测领域将得到广泛应用, 并有望成为下一代精准诊断的重要技术平台。

关键词：光谱分析, 拉曼肿瘤诊断病原体检测生物分子检测

^(18)氟-氟代脱氧葡萄糖正电子发射体层摄影/CT显像联合MRI高分辨成像在局灶性皮质发育不良合并难治性癫痫中的诊断价值

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中华神经科杂志 2024年第4期57卷 326-332页

作者：党娜孙英张谷青董有文艾慧芳济宁医学院附属医院医学影像科济宁272001 济宁医学院附属医院妇产科济宁272001

目的探讨^(18)氟-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)正电子发射体层摄影(PET)/CT与MRI高分辨成像在局灶性皮质发育不良(FCD)合并难治性癫痫患者中的诊断价值及显像特点。方法回顾性分析2017年1月至2022年12月于济宁医学院附属医院就诊的42例FC... 详细信息

目的探讨^(18)氟-氟代脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)正电子发射体层摄影(PET)/CT与MRI高分辨成像在局灶性皮质发育不良(FCD)合并难治性癫痫患者中的诊断价值及显像特点。方法回顾性分析2017年1月至2022年12月于济宁医学院附属医院就诊的42例FCD合并难治性癫痫患者的临床资料,所有患者术前均行头颅^(18)F-FDG PET/CT显像及MRI高分辨成像,并对图像进行PET/MRI异机融合。采用卡方检验、Kappa一致性检验比较PET/CT、MRI、PET/MRI异机融合对患者癫痫灶的定位效能;根据患者性别、病灶部位、癫痫灶病理类型、癫痫发作类型、疗效进行分组,采用独立样本t检验、方差分析比较不同亚组间FCD合并难治性癫痫患者的最大标准摄取值(SUVmax)、放射性分布不对称指数(AI)之间的差异。结果在42例患者中,MRI、PET/CT、PET/MRI异机融合检查的阳性率分别为85.7%(36/42)、95.2%(40/42)、100.0%(42/42),致痫灶定侧率分别为71.4%(30/42)、92.9%(39/42)、95.2%(40/42),定位率分别为57.1%(24/42)、81.0%(34/42)、88.1%(37/42)。MRI与PET/CT对致痫灶的定侧率及定位率差异(χ^(2)=6.574、5.570;P=0.010、0.018)及与PET/MRI异机融合的病灶阳性率、致痫灶定侧率及定位率差异(χ^(2)=6.385、8.571、10.118;P=0.012、0.003、0.001)均有统计学意义。MRI与PET/CT的病灶阳性率及PET/CT与PET/MRI异机融合的病灶阳性率、致痫灶定侧率及定位率差异均无统计学意义(χ^(2)=2.184、2.024、0.210、0.819;P=0.139、0.155、0.647、0.365)。将PET/CT、PET/MRI异机融合显像对致痫灶的定位情况行Kappa一致性检验,得出Kappa=0.721,提示两者在致痫灶定位上较为一致。颞叶型癫痫患者的SUVmax值低于、AI值高于颞叶外型患者(分别为7.4±1.3比9.6±1.6、15.5±2.6比12.9±2.4;t=5.154、6.083;P=0.001、0.001)。疗效良好组(根据Engel疗效分级系统,Ⅰ~Ⅱ级为疗效良好)患者的SUVmax值高于、AI值低于疗效不佳组(Engel疗效分级系统,Ⅲ~Ⅳ级为疗效不佳)患者(分别为9.5±1.9比7.9±2.1、13.5±3.3比14.8±3.0;t=2.789、3.722;P=0.042、0.029)。不同性别、病理类型、发作类型患者间的SUVmax值、AI值差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论不同类型FCD合并难治性癫痫患者的影像学显像特征存在差异,PET/MRI异机融合在FCD合并难治性癫痫患者中的诊断效能优于MRI,且与PET/CT在致痫灶定位上较为一致。

关键词：局灶性皮质发育不良癫痫,难治性正电子发射断层显像术葡萄糖磁共振成像

姜黄素激活TGF-β1/Smad2通路保护关节软骨细胞损伤实验研究

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中国中西医结合杂志 2024年第1期44卷 70-76页

作者：宋亚丽秦凯丽来晓炜宋秀珍王晨波长治医学院附属和平医院风湿免疫科山西046012 长治医学院附属和平医院检验科山西046012

目的探讨姜黄素对关节软骨中转化生长因子-β1/信号转导蛋白Smad(TGF-β1/Smad2)通路的调节作用,及对软骨细胞增殖、凋亡、细胞外基质(ECM)合成和降解的影响。方法将细胞分成对照组,模型组,姜黄素组,TGF-β抑制剂组和姜黄素+抑制剂组,共... 详细信息

目的探讨姜黄素对关节软骨中转化生长因子-β1/信号转导蛋白Smad(TGF-β1/Smad2)通路的调节作用,及对软骨细胞增殖、凋亡、细胞外基质(ECM)合成和降解的影响。方法将细胞分成对照组,模型组,姜黄素组,TGF-β抑制剂组和姜黄素+抑制剂组,共5组。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测细胞活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡,采用Western Blot检测细胞中B细胞淋巴瘤2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TGF-β1、Smad2、磷酸化Smad2(p-Smad2)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、Ⅱ型胶原蛋白(COL2α1)的蛋白表达,qRT-PCR检测MMP-13、COL2α1 mRNA表达。结果姜黄素对白介素1β(IL-1β)诱导构建的骨关节炎(OA)细胞模型的最佳干预量为10μmol/L。与对照组比较,模型组细胞增殖能力下降(P<0.05),凋亡率上升(P<0.05),Bcl-2、TGF-β1、p-Smad2蛋白表达均下调(P<0.05),COL2α1 mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05),Bax蛋白、MMP-13 mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05)。与模型组比较,姜黄素组细胞增殖能力上升(P<0.05),凋亡率下降(P<0.05),Bcl-2、TGF-β1、Smad2蛋白表达均上调(P<0.05),COL2α1 mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05),Bax蛋白、MMP-13 mRNA和蛋白表达均下调(P<0.05),TGF-β抑制剂处理加重了模型组细胞的损伤。与TGF-β抑制剂组比较,姜黄素+抑制剂组数据变化呈相反结果(P<0.05)。结论姜黄素能改善IL-1β诱导的关节软骨细胞损伤,减轻细胞凋亡,进而抑制ECM降解,其机制可能与激活TGF-β1/Smad2通路有关。

关键词：骨关节炎姜黄素转化生长因子-β1/信号转导蛋白Smad通路细胞凋亡细胞外基质降解

miR-515-5p靶向ITLN2对子宫内膜基质细胞增殖、迁移和侵袭的影响

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中华生殖与避孕杂志 2024年第1期44卷 44-50页

作者：刘庄孙颖王钦张琳李泽武济宁医学院附属医院生殖医学科济宁272029 济宁医学院附属医院麻醉科济宁272029

目的探讨微小RNA-515-5p(miR-515-5p)是否可靶向内凝集素2(lectin 2,ITLN2)影响子宫内膜异位症(endometriosis,EMT)子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)的增殖、迁移和侵袭。方法收集2020年12月至2021年12月期间在济宁医学院附属医院生殖医学科就诊治疗的24例EMT患者的在位内膜和异位内膜组织及18例行腹腔镜手术的非EMT患者的正常内膜组织。RT-qPCR检测内膜组织miR-515-5p、ITLN2 mRNA相对表达量;Western blotting法检测内膜组织中ITLN2蛋白表达量。原代分离、培养EMT患者的ESCs,利用Lipofectamine 2000试剂转染ESCs,并将其分为空白组、miR-515-5p抑制剂组、miR-515-5p抑制剂阴性对照(negative control,NC)组,CCK-8法检测细胞增殖情况;划痕愈合和Transwell实验分别评估细胞迁移、侵袭能力;双荧光素酶报告基因检测miR-515-5p和ITLN2的靶向关系;RT-qPCR技术检测各组细胞miR-515-5p、ITLN2 mRNA相对表达量;Western blotting技术检测ITLN2、白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6及肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白相对表达量。结果EMT患者在位和异位子宫内膜组织miR-515-5p相对表达量显著高于正常子宫内膜组织(均P<0.001),ITLN2 mRNA相对表达量显著低于正常子宫内膜组织,异位子宫内膜组织ITLN2 mRNA相对表达量显著低于在位子宫内膜组织(均P<0.001),EMT患者异位子宫内膜组织ITLN2蛋白质水平显著低于EMT在位和正常子宫内膜组织(均P<0.001),EMT患者在位子宫内膜组织ITLN2蛋白质水平显著低于正常子宫内膜组织(P<0.001)。miR-515-5p抑制剂组细胞存活率[(54.71±2.78)%]、划痕愈合率[(38.31±3.78)%]及侵袭数[(286.67±25.15)个]、miR-515-5p相对表达量、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白相对表达量均显著低于空白组[(100.00±0.00)%,P<0.001;(84.08±5.14)%,P<0.001;(515.67±22.19)个,P<0.001;P<0.001;P=0.012;P=0.010;P<0.001],ITLN2 mRNA和蛋白相对表达量均显著高于空白组(P<0.001;P<0.001)。经生物信息学分析和双荧光素酶报告基因检测,ITLN2为miR-515-5p的潜在靶基因。结论降低miR-515-5p水平可抑制EMT患者ESCs增殖、迁移和侵袭,这可能与靶向提高ITLN2表达进而降低炎症因子水平有关。

关键词：子宫内膜异位症微小RNA-515-5p 内凝集素2 子宫内膜基质细胞增殖迁移侵袭