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基于定量蛋白质组学探讨西黄丸抗乳腺增生的作用机制

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中国药理学通报 2024年第9期40卷 1641-1648页

作者：陶蕊王婧瑞王俊亮马学莉孙娟霞高广淼范琪瑞韩涛甘肃中医药大学中药学教研室甘肃兰州730000 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室甘肃兰州730000

目的基于定量蛋白质组学技术明确西黄丸抗乳腺增生(hyperplasia of mammary glands,HMG)中乳腺组织的差异蛋白并验证,探讨其作用机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组和西黄丸组,每组10只。除空白组外,肌注雌孕激素建立HMG大鼠模型... 详细信息

目的基于定量蛋白质组学技术明确西黄丸抗乳腺增生(hyperplasia of mammary glands,HMG)中乳腺组织的差异蛋白并验证,探讨其作用机制。方法将SD大鼠随机分为空白组、模型组和西黄丸组,每组10只。除空白组外,肌注雌孕激素建立HMG大鼠模型,为期30 d。给药西黄丸14 d后,观察各组大鼠表观形态变化,HE染色观察乳腺组织病理改变,定量蛋白质组学技术筛选各组差异表达蛋白(differentially expressed proteins,DEPs),并进行生物信息学分析和Western blot验证。结果与模型组比较,西黄丸组表观病理形态明显改善,大鼠乳头高度直径明显降低(P组织病理程度明显缓解。定量蛋白质组学鉴定出乳腺组织4299个DEPs,对西黄丸组与空白组相对模型组变化一致的14个DEPs进行生物信息学分析,发现与肌肉系统过程的调节、肌肉收缩调节、DNA复制和DNA复制启动前过程有关。Western blot结果表明,与模型组比较,西黄丸组大鼠乳腺组织ACLY与ALDOC蛋白表达水平明显降低,BIN1蛋白表达水平明显增加(P系统过程的调节、肌肉收缩调节等途径发挥抗HMG作用。

关键词：西黄丸蛋白质组学乳腺增生 BIN1蛋白 ACLY蛋白 ALDOC蛋白

中药十八反在家兔上的毒性试验——中药十八反研究报告之二

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甘肃农大学报 1986年第4期 9-22页

作者：杨致礼王佑之吴成林黄有德王秋婵程雪峰李文范陈怀涛张筱琴杨华春甘肃农大兽医系中兽医教研组甘肃农大兽医系内科教研组甘肃农大兽医系病理教研组甘肃农大兽医系生理教研组甘肃农大兽医系药理教研组

在301只(试验组260只,对照组41只)健康肉用家兔上对中药十八反(藻、戟、遂、芫与甘草组)的刺激作用和毒性进行了试验研究。内容包括临床观察、血液及生化指标测定、病理剖检及组织学检查等.用实验量的四种单味药海藻、大戟、甘遂、芫花... 详细信息

在301只(试验组260只,对照组41只)健康肉用家兔上对中药十八反(藻、戟、遂、芫与甘草组)的刺激作用和毒性进行了试验研究。内容包括临床观察、血液及生化指标测定、病理剖检及组织学检查等.用实验量的四种单味药海藻、大戟、甘遂、芫花及其与甘草配伍后,在260只家兔(其中60只进行了组织学检查)于服药后5、24、48小时观察,临床不显异常变化。病理学及组织学检查的结果,试验组与对照组相比出现了明显差异。血液12项生理生化指标测定,单味组与健康对照组、配伍组与健康对照组分别进行非配对 t 检验,其结果无一定规律性。计96个项目中,28项表现差异显著(P<0.05),13项表现差异非常显著(P<0.01)。试验结果还表明,大戟与甘草配伍后其毒性比单味大戟增强,而甘遂与甘草配伍后其毒性比单味甘遂减弱。

关键词：中药十八反甘草组单味药毒性试验大戟下马仙甘遂肿手花根大戟属病理变化家兔

萝卜硫素对内皮素-1诱导大鼠平滑肌细胞增殖的影响

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中国临床药理学杂志 2024年第3期40卷 363-367页

作者：汪晨净裴淑艳王晓坤孙枫郭忠西北民族大学医学部基础医学院药理学教研室甘肃兰州730030

目的研究萝卜硫素(SFN)对内皮素-1(ET-1)诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及其机制。方法将组织贴块法原代培养的VSMC随机分为对照组(正常培养)、模型组(给予0.1μmol·L^(-1 )ET-1处理)和低、中、高剂量实验组(分别给... 详细信息

目的研究萝卜硫素(SFN)对内皮素-1(ET-1)诱导大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及其机制。方法将组织贴块法原代培养的VSMC随机分为对照组(正常培养)、模型组(给予0.1μmol·L^(-1 )ET-1处理)和低、中、高剂量实验组(分别给予5、10、20μmol·L^(-1 )SFN+0.1μmol·L^(-1) ET-1处理)。用噻唑蓝法检测细胞增殖活力,用实时荧光定量聚合酶链反应法测定增殖及凋亡相关基因mRNA表达水平,用荧光探针2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯法检测活性氧(ROS)相对荧光强度,用蛋白质印迹法测定B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)及p53蛋白的表达水平。结果对照组、模型组和低、中、高剂量实验组的细胞增殖活力分别为0.27±0.02、0.50±0.04、0.40±0.03、0.38±0.03和0.34±0.03,Bcl-2 mRNA表达水平分别为1.57±0.28、1.00±0.00、0.87±0.05、0.75±0.08和0.41±0.18,caspase-3 mRNA分别为0.84±0.10、1.00±0.00、1.33±0.10、1.61±0.15和1.83±0.16,ROS相对荧光强度分别为6.05±1.50、31.45±3.12、30.03±1.85、18.39±5.62和17.18±1.97,Bcl-2蛋白相对表达水平分别为0.65±0.02、0.60±0.02、0.49±0.02、0.48±0.03和0.49±0.01,caspase-3蛋白相对表达水平分别为0.03±0.00、0.25±0.01、0.42±0.01、0.46±0.02和0.64±0.03,p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相对表达水平比值分别为0.97±0.05、1.44±0.04、1.62±0.10、2.18±0.05和2.70±0.05,p53蛋白相对表达水平分别为0.20±0.01、0.30±0.01、0.34±0.02、0.37±0.01和0.42±0.01。模型组的上述指标与对照组比较,中、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论 SFN可抑制ET-1诱导的VSMC增殖,促进VSMC凋亡,其机制可能与SFN抗氧化、激活p38MAPK及p53依赖的细胞凋亡途径有关。

关键词：萝卜硫素增殖内皮素-1 凋亡血管平滑肌细胞

基于UPLC-Q-orbitrap-MS技术探究西黄丸抗乳腺增生的作用机制

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药学学报 2024年第1期59卷 214-224页

作者：王婧瑞陶蕊马学莉王俊亮韩涛甘肃中医药大学药学院甘肃兰州730000 甘肃省中药药理与毒理学重点实验室甘肃兰州730000

基于UPLC-Q-orbitrap-MS与生物网络分析工具系统分析西黄丸改善乳腺组织增生的作用机制。肌注苯甲酸雌二醇和黄体酮建立乳腺增生大鼠模型,采用LC-MS的组织代谢组学探索西黄丸改善乳腺组织增生的关键代谢物和代谢途径。整合生物网络分析... 详细信息

基于UPLC-Q-orbitrap-MS与生物网络分析工具系统分析西黄丸改善乳腺组织增生的作用机制。肌注苯甲酸雌二醇和黄体酮建立乳腺增生大鼠模型,采用LC-MS的组织代谢组学探索西黄丸改善乳腺组织增生的关键代谢物和代谢途径。整合生物网络分析工具对西黄丸调节的关键代谢物进行网络分析,聚焦关键代谢通路,挖掘西黄丸改善乳腺组织增生的潜在靶点。与空白组比,模型组大鼠组织中有49种差异代谢物含量有显著差异(P组织增生的重要通路之一,AGE-RAGE信号通路上的STAT3、MAPK1、EGFR、CASP3、CASP8、PRKCA、JUN等7个蛋白可能为西黄丸改善乳腺组织增生的潜在作用靶点。本文涉及的动物实验操作均遵循甘肃中医药大学动物伦理委员会的规定并通过动物实验伦理审查(批号:2022-705)。

关键词：乳腺增生 UPLC-Q-orbitrap-MS AGE-RAGE信号通路西黄丸

扶金化积丸对环磷酰胺治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠的化疗增敏作用及机制

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中国老年学杂志 2024年第1期44卷 184-188页

作者：夏小军雷旭东段赟陈浩方郭炳涛马骏赵文秀李文基甘肃省肿瘤医院中西医结合肿瘤防治中心甘肃兰州730050 甘肃中医药大学药理教研室

目的探讨扶金化积丸对环磷酰胺治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠化疗增敏的作用及机制。方法选取健康C57BL/6小鼠接种Lewis肺癌瘤株造模。小鼠随机分成正常组、荷瘤对照组、扶金化积丸组、环磷酰胺组、扶金化积丸+环磷酰胺组。各组药物干预后,检... 详细信息

目的探讨扶金化积丸对环磷酰胺治疗Lewis肺癌荷瘤小鼠化疗增敏的作用及机制。方法选取健康C57BL/6小鼠接种Lewis肺癌瘤株造模。小鼠随机分成正常组、荷瘤对照组、扶金化积丸组、环磷酰胺组、扶金化积丸+环磷酰胺组。各组药物干预后,检测荷瘤小鼠瘤重、瘤体体积、计算抑瘤率及器官指数。全自动血液分析仪进行血细胞计数及血红蛋白浓度检测。酶联免疫吸附试验检测血清中肿瘤坏死因子-α、白细胞介素2、γ干扰素的含量。苏木素-伊红染色观察瘤组织病理学改变。免疫组化法检测基质金属蛋白酶9、核因子κB的表达。结果与环磷酰胺组比较,扶金化积丸+环磷酰胺组瘤瘤重、瘤体体积显著减小(P组织核固缩较多,有明显坏死及出血现象,出现细胞凋亡;基质金属蛋白酶9、核因子κB表达降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论扶金化积丸可增强环磷酰胺对Lewis肺癌荷瘤小鼠的抑瘤作用,其机制与增强机体免疫有关。

关键词：扶金化积丸环磷酰胺 Lewis肺癌免疫调节

8-型磷酸二酯酶抑制剂PF-04957325对冈田酸诱导阿尔茨海默病小鼠认知障碍的改善作用及机制

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中国药理学通报 2024年第9期40卷 1719-1726页

作者：吕玉丽郭天洋仇念壮张汉霆王浩山东第一医科大学药理学研究所山东泰安271016 青岛大学药学院药理教研室山东青岛266073

目的探讨磷酸二酯酶8(phosphodiesterase 8,PDE8)抑制剂PF-04957325对冈田酸(okadaic acid,OA)诱导阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)小鼠学习记忆、焦虑、抑郁的影响,并对其机制进行初步探讨。方法选取21只2月龄雄性C57BL/6J小鼠进行实验,随机分为对照组、AD模型组、PDE8抑制剂组(0.1 mg·kg^(-1))。模型组和PDE8抑制剂组小鼠双侧海马定位注射OA(每侧50 ng)诱导AD模型,注射OA 2 d后,PDE8抑制剂组给予0.1 mg·kg^(-1)抑制剂,AD模型组和对照组给予等剂量溶剂,共给药21 d。给予抑制剂d 13,对小鼠学习记忆能力及焦虑抑郁行为进行相关行为学检测,HE染色观察小鼠海马DG、CA1、CA3区神经细胞形态,Western blot检测小鼠海马内不同位点磷酸化Tau蛋白水平以及PDE8/cAMP/CREB通路相关蛋白的表达。结果与对照组相比,AD模型组Y迷宫轮替比、新物体识别指数、被动回避逃避潜伏期明显缩短(P组进入旷场中央区次数及在中央区停留时间明显减少(P组小鼠海马DG、CA1、CA3区表现出核仁固缩、神经元排列不整齐,给予PF-04957325可缓解小鼠海马神经细胞的损伤。与对照组相比,AD模型组小鼠海马中Tau蛋白Ser199、Ser396和Ser202位点的磷酸化水平明显升高(P<0.01)、PDE8A及PDE8B蛋白表达量明显增加(P<0.01)、p-PKA/PKA和BDNF蛋白表达量降低(P<0.05),给予PF-04957325后Tau蛋白Ser396和Ser202位点的磷酸化水平明显降低(P<0.01)、PDE8A和PDE8B蛋白表达量明显降低(P<0.01)、p-PKA/PKA、p-CREB/CREB和BDNF蛋白表达量明显升高(P<0.01)。结论PDE8抑制剂PF-04957325能够提高AD小鼠的学习记忆能力、降低认知功能障碍,恢复Tau蛋白功能,减轻AD小鼠海马内神经元细胞的损害,具有改善AD的作用。作用机制可能与激活PDE8/cAMP/CREB通路、抑制Tau蛋白磷酸化有关。

关键词：磷酸二酯酶 PDE8抑制剂阿尔茨海默病学习记忆 Tau蛋白冈田酸

秃疮花异紫堇碱对LPS诱导的牛肺微血管内皮细胞炎症因子和TLR2/MYD88/NF-κB通路的影响

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饲料研究 2024年 96-101页

作者：蒙琦常亮丁姝元周瑶刘盛楠王胜明杨明甘肃省畜牧兽医研究所

试验旨在探究秃疮花异紫堇碱（ICD）对脂多糖（LPS）诱导的牛肺微血管内皮细胞（CPA 47）炎症因子和Toll样受体2/髓样分化因子88/核转录因子-κB (TLR2/MYD88/NF-κB)通路的影响。选取CPA 47分为5组接种于6孔板中，每组设置4孔，对照组... 详细信息

试验旨在探究秃疮花异紫堇碱（ICD）对脂多糖（LPS）诱导的牛肺微血管内皮细胞（CPA 47）炎症因子和Toll样受体2/髓样分化因子88/核转录因子-κB (TLR2/MYD88/NF-κB)通路的影响。选取CPA 47分为5组接种于6孔板中，每组设置4孔，对照组细胞加入1640培养基，LPS组加入脂多糖处理建立炎症模型，ICD高剂量组细胞加入20 mg/L ICD+50μg/L LPS,ICD中剂量组细胞加入15 mg/L ICD+50μg/L LPS,ICD低剂量组细胞加入10 mg/L ICD+50μg/L LPS。分别利用ELISA检测各组的炎性因子含量，实时荧光定量PCR检测TLR2/MYD88/NF-κB通路中关键基因的表达量，免疫印迹法（Western blot）检测上述通路中各蛋白含量。结果显示，与对照组相比，LPS处理组和ICD低剂量组牛肺微血管内皮细胞白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8 (IL-8)和肿瘤坏死因子（TNF-α）含量显著升高（P组相比，ICD高、中剂量组中IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α含量显著降低（P<0.05）,TLR2、NF-κB、MYD88的mRNA表达量和蛋白含量显著降低（P<0.05）。研究表明，15～20 mg/L ICD可以有效缓解LPS诱导的牛肺微血管内皮细胞的炎症反应，抑制LPS诱导的牛肺微血管内皮细胞TLR2/MYD88/NF-κB炎症通路的激活。

关键词：秃疮花异紫堇碱牛肺微血管内皮细胞脂多糖炎症因子 TLR2/NF-κB/MYD88通路

穿心莲内酯对糖尿病大鼠胰岛素抵抗、菌群失调及Notch/锌指蛋白转录因子1信号通路影响的研究

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中国糖尿病杂志 2024年第7期32卷 540-545页

作者：武莉冯吉波王延茹李锦平山西医科大学汾阳学院药理教研室汾阳032200

目的探讨穿心莲内酯对DM大鼠IR、菌群失调及Notch/锌指蛋白转录因子1(Snail1)信号通路的影响。方法选取70只SPF级Wistar雄性大鼠,其中30只进行穿心莲内酯LD50试验,确定致死量后选取50 mg/kg进行给药及观察,其余40只中10只作为空白对照... 详细信息

目的探讨穿心莲内酯对DM大鼠IR、菌群失调及Notch/锌指蛋白转录因子1(Snail1)信号通路的影响。方法选取70只SPF级Wistar雄性大鼠,其中30只进行穿心莲内酯LD50试验,确定致死量后选取50 mg/kg进行给药及观察,其余40只中10只作为空白对照组(NC),30只建立DM模型,共28只建模成功,分为T2DM组(n=9)、二甲双胍灌胃组(Met,n=9)及穿心莲内酯灌胃组(And,n=10)。NC、T2DM组不做处理,干预14 d后观察各组变化。结果与NC组比较,T2DM、Met、And组胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、拟杆菌门、厚壁菌门丰度水平、Notch、Snail1 mRNA及蛋白表达、阳性表达率升高(P组比较,Met、And组乳酸杆菌、双歧杆菌丰度水平升高(P<0.05),HOMA-IR、拟杆菌门、厚壁菌门丰度水平、Notch、Snail1 mRNA及蛋白表达、阳性表达率降低(P<0.05)。结论 DM大鼠经穿心莲内酯干预后IR缓解,菌群失调改善,Notch/Snail1信号通路受抑制。

关键词：穿心莲内酯糖尿病胰岛素抵抗菌群失调 Notch/锌指蛋白转录因子1信号通路

青贮玉米对湖羊生长性能、瘤胃发酵性能及血清生化指标的影响

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中国饲料 2024年第2期 35-38页

作者：高星梅杜秀花甘肃省康乐县畜牧兽医中心甘肃康乐731500

本研究选择36只体况良好、体重相近的3月龄湖羊为研究对象,随机分为两组,每组3个重复,每个重复6只羊,分别饲喂青贮玉米(试验组)和玉米秸秆(对照组)作为单一粗饲料配制2种日粮,从生长状况、瘤胃发酵情况及血清生化指标等几个方面进行为期... 详细信息

本研究选择36只体况良好、体重相近的3月龄湖羊为研究对象,随机分为两组,每组3个重复,每个重复6只羊,分别饲喂青贮玉米(试验组)和玉米秸秆(对照组)作为单一粗饲料配制2种日粮,从生长状况、瘤胃发酵情况及血清生化指标等几个方面进行为期60d的研究,探讨饲喂青贮玉米对湖羊的影响。结果显示,试验组湖羊的干物质采食量(DMI)和平均日增重(ADG)均显著高于对照组(P 组湖羊F/G均低于对照组(P> 0.05);试验组瘤胃胃液的pH值显著高于对照组8.03%(P 0.05);试验组血清中总蛋白、白蛋白、球蛋白、尿素氮等血清生化指标均无显著差异(P> 0.05)。结果表明,青贮玉米能提高湖羊生长性能,并具有改善湖羊瘤胃发酵的潜力,具有推广应用价值。

关键词：青贮玉米湖羊生长性能瘤胃发酵血清生化指标