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赛加羚羊Saiga　tatarica引种区植被特征研究　Ⅰ．植物区系特征及其适宜性评价

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生态学报 1996年第1期16卷 65-70页

作者：刘荣堂甘肃农业大学

通过对甘肃濒危野生动物繁育中心所在地──武威东沙窝及其周围地区植物区系调查，共获２２科、８４属、１１６种植物，以菊科、禾本科、藜科和豆科为主，占６８．９７％。以草本、、强旱生、中温、阳性、沙生等为主要生态型。以亚洲中... 详细信息

通过对甘肃濒危野生动物繁育中心所在地──武威东沙窝及其周围地区植物区系调查，共获２２科、８４属、１１６种植物，以菊科、禾本科、藜科和豆科为主，占６８．９７％。以草本、、强旱生、中温、阳性、沙生等为主要生态型。以亚洲中部成分、地中海－西亚－中亚成分，为主要地理成分。植物类群接近赛加羚羊现代分布区植物类群，而且多数类群可被羚羊采食。

关键词：草地植被赛加羚羊植物区系植被特征药用动物

PBL教学模式在动物育种学课程教学中的应用——以甘肃农业大学为例

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西昌学院学报（自然科学版） 2023年第2期37卷 94-100页

作者：闫尊强张娟丽滚双宝陈国顺甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃兰州730070 陇东学院生命科学与技术学院甘肃庆阳745000

动物育种学课程是动物科学专业的专业基础课,具有知识结构复杂和实践性较强的特点,“以教师讲授为主”的传统授课模式不能满足畜牧业发展对高素质技能型人才的要求,亟须进行教学模式的改革提高该课程的教学质量和学生培养质量。采用PBL(... 详细信息

动物育种学课程是动物科学专业的专业基础课,具有知识结构复杂和实践性较强的特点,“以教师讲授为主”的传统授课模式不能满足畜牧业发展对高素质技能型人才的要求,亟须进行教学模式的改革提高该课程的教学质量和学生培养质量。采用PBL(Problem-BasedLearning)教学模式对甘肃农业大学动物育种学课程进行了教学尝试,统计分析学生的实验成绩、平时成绩、期末成绩及综合成绩,问卷调查学生对PBL教学模式的满意度,评价PBL教学模式在动物育种学课程教学改革中的应用效果。采用PBL教学模式学生的实验成绩、平时成绩、期末成绩与综合成绩均显著高于传统教学模式,PBL教学模式80分以上学生居多,96.67%的学生对PBL教学模式持赞同态度。PBL教学模式效果优于传统教学模式,有助于激发学生的学习兴趣,提高学生对动物育种学课程知识的掌握程度及综合应用水平。

关键词：动物育种学 PBL 教学模式教学改革

成年高原藏羊睾丸小叶内微血管分布和形态特征

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解剖学报 2011年第1期42卷 114-118页

作者：孙英袁莉刚赵海涛甘肃农业大学动物医学院兰州730070

目的探讨成年高原藏羊睾丸小叶微血管构筑特征。方法采用ABS树脂血管铸型技术、扫描电镜观察法、墨汁明胶石蜡切片及常规石蜡切片技术,观察30只成年高原藏羊睾丸小叶微血管的构筑特征。结果睾丸小叶内由向心或离心动脉发出的管间微动脉... 详细信息

目的探讨成年高原藏羊睾丸小叶微血管构筑特征。方法采用ABS树脂血管铸型技术、扫描电镜观察法、墨汁明胶石蜡切片及常规石蜡切片技术,观察30只成年高原藏羊睾丸小叶微血管的构筑特征。结果睾丸小叶内由向心或离心动脉发出的管间微动脉及管间毛细血管穿行于相邻生精小管形成的结缔组织间隙内;管间毛细血管相互交通形成管周毛细血管围绕生精小管之外;在生精小管周围毛细血管间存在不同程度的吻合;小叶内小动脉、管间微动脉、毛细血管前微动脉的血管铸型表面均显示有清晰的、环状排列的平滑肌细胞形成的环状缢痕;管间微动脉、管间毛细血管的铸型表面显示有清晰的卵圆形内皮细胞核的压痕。结论血管铸型结构表明,高原藏羊睾丸小叶的微血管分布具有显著的高海拔低氧适应特征。

关键词：睾丸小叶微血管墨汁明胶石蜡切片扫描电镜藏羊

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空肠弯曲菌肠毒素理化特性的研究

微生物学报 2000年第1期40卷 80-84页

作者：吴润司宏伟甘肃农业大学动物医学系兰州730070

经ＳＤＳＰＡＧＥ分析发现，空肠弯曲菌细胞紧张性肠毒素（Ｃｙｔｏｔｏｎｉｃｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ，ＣＥ）的硫酸胺盐析粗提物除有一条６８ｋＤ的带外，还有一些未分开的小分子物质，而经神经节苷脂ＧＭ１亲和层析后仅有６... 详细信息

经ＳＤＳＰＡＧＥ分析发现，空肠弯曲菌细胞紧张性肠毒素（Ｃｙｔｏｔｏｎｉｃｅｎｔｅｒｏｔｏｘｉｎ，ＣＥ）的硫酸胺盐析粗提物除有一条６８ｋＤ的带外，还有一些未分开的小分子物质，而经神经节苷脂ＧＭ１亲和层析后仅有６８ＫＤ的一条带，即表明６８ｋＤ的蛋白质为ＣＥ的主要成分。ＣＥ不耐热、ｐＨ依赖和对胰酶有抗性。５６ ℃和６０ ℃加热３０ｍｉｎ、１００ ℃加热１５ｍｉｎ即可完全失活。其活性在ｐＨ６－０时最高，在ｐＨ３－０和９－０时均可使其完全丧失活性。在４ ℃保存超过３ｄ后，其活性迅速降低。抗ＬＴ血清能完全抑制ＣＥ的活性。

关键词：空肠弯曲菌细胞紧张性肠毒素理化特性

虹鳟TRIM25基因克隆及其在IHNV感染过程中的表达分析

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农业生物技术学报 2023年第8期31卷 1684-1695页

作者：雷明荃黄进强李永娟吴深基赵璐潘玉财孙同振甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃农业大学理学院

三基序蛋白25(tripartite motif containing 25, TRIM25)是宿主抗病毒免疫应答中发挥重要作用的TRIM蛋白家族成员之一。为了解虹鳟(Oncorhynchus mykiss) TRIM25基因分子特征及其在感染传染性造血器官坏死病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus, IHNV)过程中的表达变化，本研究采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends, RACE)技术获得虹鳟TRIM25基因cDNA全长序列(GenBank No. OL692831)，并对其进行生物信息学分析，同时利用qPCR技术检测TRIM25基因在健康虹鳟不同组织及感染IHNV后不同时间点(0, 6, 12, 24, 48, 72, 96, 120和144 h)肠道、肝脏、脾脏、皮肤、头肾和鳃中的表达变化。结果显示，虹鳟TRIM25基因cDNA全长序列4 745 bp，其开放阅读框2 028 bp，编码675个氨基酸。生物信息学分析表明，TRIM25蛋白分子量为76.04 kD，理论等电点为8.79，不稳定系数为49.2，平均亲水系数为-0.591，属于不稳定亲水蛋白。对TRIM25蛋白结构域分析发现，该蛋白包含RING、B-boxes、B-Box C-terminal domain和PRY-SPRY结构域。同源比对及系统进化树分析表明，虹鳟与大马哈鱼(Oncorhynchus keta)同源性最高(94.96%)且亲缘关系最近，与哺乳动物和两栖动物同源性较低。qPCR检测发现，TRIM25基因在健康虹鳟各组织中均有表达，其在肝脏中的表达量最高，头肾和脑中的表达量次之，皮肤中的表达量最低。感染IHNV后，TRIM25基因在肝脏、头肾、脾脏、肠道和皮肤的表达量均在48 h达到峰值，鳃在96 h表达量达到峰值，各组织在峰值时的表达量与对照组相比差异极显著(P<0.01)，其中以头肾和脾脏表达变化较显著，分别为对照组的5.72和4.33倍。上述结果表明，TRIM25基因可能在虹鳟抗IHNV感染的免疫应答中发挥着重要作用。本研究为深入研究TRIM25基因在鱼类抗病毒免疫调控中的作用提供了基础资料。

关键词：虹鳟三基序蛋白25(TRIM25) 传染性造血器官坏死病毒(IHNV) 基因克隆表达分析

稳定表达兔ANXA2的RK13细胞系的建立及其对RHDV吸附研究

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农业生物技术学报 2023年第2期30卷 350-360页

作者：龙翠琴武小椿岳亚辉张宏燕张立马海云邢小勇温峰琴包世俊甘肃农业大学动物医学院

兔出血症(Rabbit hemorrhagic disease, RHD)是兔(Oryctolagus cuniculus)的一种高致死性传染病，其由兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus, RHDV)引起。膜联蛋白A2(annexin A2, ANXA2)与多种病毒的感染过程密切相关。为探究兔ANXA2在RHDV侵染兔肾细胞(rabbit kidney cell, RK13)过程中的作用，本研究利用PCR扩增获得兔ANXA2基因片段，构建真核表达载体pCD513B-ANXA2，并将其与包装质粒pLP1、pLP2和p LP/VSVG转染至293T细胞，包装出含ANXA2基因的慢病毒颗粒并感染RK13，利用嘌呤霉素筛选稳定过表达ANXA2蛋白的细胞株RK13-513B-ANXA2；应用qPCR和Western blot检测ANXA2基因及其蛋白的表达情况；设计合成siRNA并转染RK13，进而分析基因表达情况；以RHDV感染RK13-513B-ANXA2细胞株2 h后，采用qPCR、免疫荧光(immunological fluorescence assay, IFA)和Western blot检测RHDV吸附量的相对变化。结果表明，利用慢病毒载体包装获得滴度较高的病毒颗粒，其滴度达5.0×107～1.0×108 TU/mL;RK13-513B-ANXA2细胞中ANXA2基因及其蛋白表达量均极显著增加(P<0.01)；过表达ANXA2蛋白的RK13对RHDV的吸附作用明显增加(P<0.01)，干扰ANXA2蛋白表达可显著下调RHDV对RK13的吸附作用(P<0.05)。本研究结果提示ANXA2可能参与RHDV对宿主细胞的感染，为进一步探究RHDV感染宿主细胞的机制提供了参考。

关键词：兔出血症病毒慢病毒载体膜联蛋白A2(ANXA2) 兔肾细胞(RK13)

虹鳟体色相关基因mitfa的克隆和表达分析

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农业生物技术学报 2021年第4期29卷 753-763页

作者：吴深基黄进强李永娟张倩潘玉财王晓谰甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃农业大学理学院

小眼畸形相关转录因子a基因(microphtalmia-associated transcription factor, mitfa)在动物体色形成过程中发挥重要的作用。为探讨mitfa基因在虹鳟(Oncorhynchus mykiss)体色变异中的调控作用,本研究采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends, RACE)技术首次获得了虹鳟mitfa基因的cDNA全长序列,并对其进行了生物信息学分析,同时利用qRT-PCR分析了野生型虹鳟(虹鳟)与黄色突变型虹鳟(金鳟)体色发生不同时期和不同组织中mitfa基因的表达差异。结果显示,虹鳟mitfa基因(GenBank No. MT813117)的cDNA全长序列2 700 bp,其中开放阅读框1 212 bp,编码403个氨基酸,5’UTR 114 bp,3’UTR 1 374 bp;序列分析发现,虹鳟Mitfa蛋白序列与其他鱼类的同源性高于禽类、两栖类以及哺乳类,且基本螺旋-环-螺旋-亮氨酸拉链(basic helix-loop-helix-leucine zipper, b HLHZip)结构域在脊椎动物中高度保守;系统进化分析显示,虹鳟与褐鳟(Salmo trutta)的亲缘关系最近,与其他鱼类亲缘关系次之,与禽类、两栖类以及哺乳类亲缘关系最远;qRT-PCR分析表明,mitfa基因在虹鳟与金鳟胚胎及出膜后各时期均有不同程度的表达,均在受精期、4细胞期、16细胞期和桑葚期有较高的表达且显著高于其他各时期(P<0.05);虹鳟与金鳟相同时期的差异表达结果显示,该基因在受精期、16细胞期、桑葚期、囊胚期、体节期、心跳期、3 dph (days post hatch)、5 dph、7 dph、10 dph、1 M (month post hatch)和12 M背部皮肤中的表达差异极显著(P<0.01);mitfa基因在12月龄虹鳟和金鳟各组织中也均有表达,且都在背部皮肤中的表达量最高,在腹部的皮肤和肌肉、背部肌肉和眼中也有较高表达,其他组织该基因的表达相对较低。本研究结果表明,mitfa基因可能参与虹鳟色素细胞的形成过程,并与其体色变异密切相关。本研究结果为虹鳟体色变异分子调控机制研究及其体色遗传改良提供了基础资料。

关键词：虹鳟体色小眼畸形相关转录因子a基因(mitfa) 克隆表达分析

牦牛PTGES基因克隆及其在发情周期主要生殖器官的表达定位

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农业生物技术学报 2021年第10期29卷 1949-1957页

作者：张晖潘阳阳王萌王靖雷张燕燕高丽青马文斌黄嘉馨余四九崔燕甘肃农业大学动物医学院

前列腺素E合成酶(prostaglandin E synthase, PTGES)是生物合成前列腺素E2 (prostaglandin E2,PGE2)过程中的末端限速酶,前列腺素E可与其受体特异性结合,参与包括动物生殖在内的多种生理过程。为探索PTGES在高原特种经济动物牦牛(Bos gr... 详细信息

前列腺素E合成酶(prostaglandin E synthase, PTGES)是生物合成前列腺素E2 (prostaglandin E2,PGE2)过程中的末端限速酶,前列腺素E可与其受体特异性结合,参与包括动物生殖在内的多种生理过程。为探索PTGES在高原特种经济动物牦牛(Bos grunniens)生殖系统中的表达,预测其潜在生殖功能,本研究以卵泡期、黄体期和妊娠期的牦牛子宫、卵巢及输卵管为实验材料,构建载体,克隆牦牛PTGES基因并进行生物信息学分析;利用qPCR方法检测牦牛PTGES基因在子宫、卵巢和输卵管中的相对表达量;利用免疫组织化学方法检测PTGES蛋白在子宫、卵巢和输卵管的分布。研究成功克隆了牦牛PTGES基因(GenBank No. MW030282),生物信息学分析预测其编码的蛋白质为亲水性非跨膜蛋白。qPCR检测结果显示,PTGES基因在牦牛输卵管、卵巢和子宫中均有表达,但在黄体期卵巢上的表达量显著高于卵泡期卵巢和妊娠期卵巢(P<0.05);在卵泡期输卵管上表达量显著高于黄体期输卵管和妊娠期输卵管(P<0.05);在卵泡期子宫上的表达量显著高于黄体期子宫和妊娠期子宫(P<0.05)。免疫组织化学结果显示:PTGES在输卵管黏膜上皮,卵巢卵泡膜、颗粒层、黄体细胞、生殖上皮,子宫内膜、子宫腺体和子宫浆膜均有表达。结果表明,牦牛发情周期卵巢、输卵管和子宫生理变化过程中PTGES可能发挥着相应的生理功能,对探索牦牛在高寒低氧环境中特殊生理机制具有重要意义。

关键词：牦牛生殖前列腺素E合成酶(PTGES) 发情周期

复方中草药对虹鳟脾脏非特异性免疫指标及免疫相关基因表达的影响

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农业生物技术学报 2022年第8期30卷 1580-1593页

作者：潘玉财黄进强李永娟吴深基赵璐雷明荃孙同振王晓谰甘肃农业大学动物科学技术学院甘肃农业大学理学院

中草药具有丰富的活性物质，具有提高机体免疫力、抗病及无残留等特性，已在水产养殖中被广泛应用。为探讨饲料中添加不同水平的复方中草药(黄芪(Astragalus radix),党参(Codonopsis pilosula),当归(Angelica sinensis),甘草(Glycyrrhiz... 详细信息

中草药具有丰富的活性物质，具有提高机体免疫力、抗病及无残留等特性，已在水产养殖中被广泛应用。为探讨饲料中添加不同水平的复方中草药(黄芪(Astragalus radix),党参(Codonopsis pilosula),当归(Angelica sinensis),甘草(Glycyrrhiza uralensis),麦冬(Ophiopogon japonicus),茯苓(Poria cocos),山楂(Hawthorn),金银花(Lonicera japonica),板蓝根(Isatidis radix)和大青叶(Isatis indigotica Fortune))对虹鳟(Oncorhynchus mykiss)脾脏非特异性免疫及免疫相关基因表达的影响，本研究选取120尾虹鳟为实验对象，随机分为4组，分别在基础饲料中添加0 (对照组)、10、20和30 g/kg复方中草药连续投喂35 d。在投喂第7、21和35 d时取脾脏组织用于非特异性免疫指标的测定，并利用qPCR分析虹鳟脾脏中15个免疫相关基因的表达差异。结果显示，与对照组相比，在投喂的3个时期复方中草药均能显著提高虹鳟脾脏中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase, T-SOD)、过氧化氢酶(catalase, CAT)、溶菌酶(lysozyme,LZM)及酸性磷酸酶(acid phosphatase, ACP)的活性(P<0.05)，其中以20 g/kg组效果最佳；与对照组相比，10、20和30 g/kg组丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量均在投喂的3个时期显著下降(P<0.05)，且30 g/kg组效果最佳。基因表达结果显示，与对照组相比，投喂第35 d时，20 g/kg组能显著诱导脾脏中Toll样受体3 (Toll-like receptor 3, tlr3)、Toll样受体7 (tlr7)、髓样分化因子88 (medullary differentiation factor 88,myd88)、白细胞介素1β (interleukin-1β, il-1β)和细胞核因子κB抑制剂α (nuclear factor kappa B inhibitor alpha, nfkbia)基因的表达(P<0.05)；各处理组肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor-α, tnf-α)基因表达差异不显著，Toll样受体8 (tlr8)在30 g/kg组显著上调(P<0.05)；同时，免疫相关基因干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3, irf3)、干扰素调节因子7 (irf7)、黑色素瘤分化相关蛋白5 (melanoma differentiation-associated protein 5, mda5)、RIG-I样受体2 (RIG-I-like receptor 2, lgp2)、白细胞介素8 (il-8)、干扰素β (interferon-β, ifn-β)、信号转导和转录激活因子1 (signal transducer and activator of transcription 1,stat1)和janus激酶1 (janus kinase 1, jak1)表达量也在20 g/kg组中显著上调(P<0.05)。本研究表明，该复方中草药可以增强虹鳟非特异性免疫能力和免疫相关基因的表达，且饲料中复方中草药建议添加量为20 g/kg。本研究为促进复方中草药作为免疫刺激剂在水产养殖中的合理应用及发展提供了科学依据。

关键词：虹鳟复方中草药非特异性免疫免疫相关基因表达