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脑膜炎奈瑟菌血清抗体多重体外杀菌试验方法的建立

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微生物学免疫学进展 2025年

作者：乔瑞洁杨田瑶周宇晨王艺璇任浩锋蔡晓楠魏开琦刘方蕾罗树权兰州生物制品研究所有限责任公司第一研究室甘肃省疫苗技术创新中心

目的建立脑膜炎奈瑟菌（简称脑膜炎球菌）多重体外杀菌试验（serumbactericidalassay，SBA），用于ACW135Y群四价脑膜炎球菌疫苗免疫血清SBA滴度的高通量检测。方法筛选A、C、W135、Y群脑膜炎球菌对8种抗生素的抗性；对筛选得到的抗性... 详细信息

目的建立脑膜炎奈瑟菌（简称脑膜炎球菌）多重体外杀菌试验（serumbactericidalassay，SBA），用于ACW135Y群四价脑膜炎球菌疫苗免疫血清SBA滴度的高通量检测。方法筛选A、C、W135、Y群脑膜炎球菌对8种抗生素的抗性；对筛选得到的抗性菌株进行抗性诱导，使其对某种抗生素抗性逐渐提高；然后对筛选得到的抗性菌株进行抗性范围的确认；最后根据实际需求确定各抗生素工作浓度范围。比较使用正常菌株和抗性菌株时质控血清的杀菌滴度。结果初筛后确认了A群对红霉素的抗性、C群对硫酸链霉素的抗性、W135群对甲氧苄氨嘧啶的抗性以及Y群对壮观霉素的抗性，并分别命名为AH、CD、WC和YB；抗性诱导过程中，AH在抗生素质量浓度0.16 μg/mL时，不再继续生长，所以终止诱导；其余3株均在抗生素质量浓度为60.00 μg/mL时达到所需抗性，终止诱导。AH的抗性质量浓度范围为0.08～0.40 μg/mL；CD抗性质量浓度范围为60.00～240.00μg/mL；WC抗性质量浓度范围为8.00～240.00 μg/mL；YB抗性质量浓度范围为32.00～480.00 μg/mL。最终确定抗生素H、D、C、B的工作质量浓度分别为0.18 μg/mL、100.00 μg/mL、30.00 μg/mL和120.00μg/mL。分析质控血清检测结果显示，靶细菌在抗性诱导以后，对A、C、W135、Y群杀菌滴度的差异均无统计学意义（P=0.408 9、0.432 6、0.203 0、0.431 0）。结论获得了含抗生素抗性的SBA用靶细菌，建立了脑膜炎球菌多重SBA。

关键词：脑膜炎奈瑟菌体外杀菌试验抗性菌株细菌的抗生素抗性诱导

牦牛肉膨化薯片配方工艺优化及其食用品质分析

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高原农业 2025年第1期9卷 112-124页

作者：刘洋迟明张艳珍王菲白家瑞青海省轻工业研究所有限责任公司青海西宁810000

本研究旨在探究牦牛肉膨化薯片的最佳工艺配方,考察牦牛肉添加量、青稞粉添加量、大豆分离蛋白添加量对薯片感官评分、硬度、酥性和脆性的影响。通过单因素试验结合响应面方差分析优化其最佳工艺配方,并对成品薯片进行电子舌味觉分析、... 详细信息

本研究旨在探究牦牛肉膨化薯片的最佳工艺配方,考察牦牛肉添加量、青稞粉添加量、大豆分离蛋白添加量对薯片感官评分、硬度、酥性和脆性的影响。通过单因素试验结合响应面方差分析优化其最佳工艺配方,并对成品薯片进行电子舌味觉分析、理化指标、微生物指标及营养成分检测。研究结果表明,各因素对薯片的影响顺序为大豆分离蛋白添加量>牦牛肉添加量>青稞粉添加量,最佳工艺参数为牦牛肉添加量20%、青稞粉添加量5%、大豆分离蛋白添加量13%。此时薯片品质最佳,实际感官评分为96.7。成品薯片具有良好的食用品质,薯片色泽金黄,兼具牦牛肉和青稞粉的香气,组织形态完整,口感酥脆,味觉方面具有明显的鲜味、咸味和苦味,蛋白质含量为27 g/100 g(45%营养素参考值NRV)≥20%NRV,满足高蛋白食品的声称要求,其他营养成分指标均属于正常范畴,理化指标及微生物指标均符合国家标准。

关键词：牦牛肉膨化薯片响应面食用品质高蛋白

参葛补肾胶囊及其多糖黄酮对幼龄小鼠性早熟的影响

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中国实验方剂学杂志 2025年第1期 95-103页

作者：孙虹雷帆李成功胡时先王卫华任宾郝娟罗睿杜力军中国医学科学院中国协和医学院药用植物研究所清华大学生命科学学院新疆华春生物药业有限责任公司药业研发中心清华大学药学技术中心

目的：探讨参葛补肾胶囊（简称参葛补肾）对正常3周龄小鼠性发育的作用。方法：实验共分2部分：第1部分将小鼠分为4组，正常组及参葛补肾低、中、高剂量组（给药剂量分别为234.7、469.4、938.7 mg·kg-1）。第2部分小鼠共分4组，分别为... 详细信息

目的：探讨参葛补肾胶囊（简称参葛补肾）对正常3周龄小鼠性发育的作用。方法：实验共分2部分：第1部分将小鼠分为4组，正常组及参葛补肾低、中、高剂量组（给药剂量分别为234.7、469.4、938.7 mg·kg-1）。第2部分小鼠共分4组，分别为正常组，太子参多糖组、总黄酮组、参葛补肾组，给药剂量均为469.4 mg·kg-1。给药7 d观察雌性小鼠的阴道开口及雄性小鼠的睾丸下降阴囊数及其卵巢和睾丸脏器系数等，给药4周后雌雄合笼2 d，观察雌鼠受孕率，孕鼠生产后继续给药母鼠4周，观察子鼠阴道开口数睾丸下降阴囊数及其卵巢和睾丸脏器系数等。采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清性激素，采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测下丘脑促性腺激素释放激素蛋白（GnRH）和生长激素蛋白（GH）的表达。结果：与正常组比较，参葛补肾给药7 d，对各组雌性小鼠的阴道开口及雄性小鼠的睾丸下降影响差异无统计学意义，给药4周参葛补肾低剂量组雌鼠的受孕率明显下降（P<0.05），其他影响差异无统计学意义。3剂量对卵巢睾丸脏器系数均影响无统计学意义，对下丘脑GnRH及GH表达作用差异无统计学意义，参葛补肾的主要组成太子参多糖给药7 d雌性小鼠阴道开口数明显减少（P<0.05），给药4周时未孕雌鼠血清雌二醇水平明显下降（P<0.05），但对雌雄鼠下丘脑GnRH、GH蛋白表达影响均差异无统计学意义；对子代小鼠在阴道开口和睾丸下降等性早熟指标均无明显影响。结论：参葛补肾对幼年小鼠性早熟无明显促进作用，对成年鼠受孕率及其子鼠性发育无明显影响。

关键词：参葛补肾胶囊太子参多糖总黄酮性早熟幼龄小鼠雌二醇睾酮

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发芽青稞营养成分及功能特性研究进展

食品工业科技 2025年第02期46卷 403-411页

作者：范雨婷王可心张海霞马萍李婧吴晶谈有金王健斌贺晓艳杜双奎西北农林科技大学食品科学与工程学院青海天佑德科技投资管理集团有限公司青海新丁香粮油有限责任公司青海省乡村产业发展指导中心粮油功能化加工陕西省高校工程研究中心

青稞是我国主要分布于西部高原地区极具特色的优势作物，具有耐寒、耐旱、适应性强、高产早熟等优点。发芽作为一种可以提高植物种子营养成分与生物活性成分利用度的方法，在人民健康意识普遍提高的当下受到了越来越多的关注。相比于未... 详细信息

青稞是我国主要分布于西部高原地区极具特色的优势作物，具有耐寒、耐旱、适应性强、高产早熟等优点。发芽作为一种可以提高植物种子营养成分与生物活性成分利用度的方法，在人民健康意识普遍提高的当下受到了越来越多的关注。相比于未发芽青稞，发芽青稞不仅具有更高的营养价值，也具有更良好的生物活性，在食品、医药等相关领域具有良好的应用前景。本文综述了青稞发芽后营养组分和功能成分的变化，发芽有效提高了青稞中的膳食纤维、多种必需氨基酸、ω-6、ω-3脂肪酸、维生素、γ-氨基丁酸等含量，降低了淀粉、脂肪含量。重点综述了发芽青稞抗氧化、抗菌、调节血糖、调节血压等功能特性的研究进展，旨在为发芽青稞的开发利用提供参考。

关键词：青稞发芽营养成分功能特性应用

重组人溶菌酶滴眼液在兔眼房水中的药物含量分析

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中国新药杂志 2019年第15期28卷 1881-1888页

作者：史瑾翟宁宁李晓颖杨小琳赵金礼陕西慧康生物科技有限责任公司西安710054

目的:重组人溶菌酶(rhLYZ)滴眼液经家兔干眼模型的药效学实验后,测定分析兔眼房水中重组人溶菌酶的含量,综合判断rhLYZ进入房水的可能性。方法:通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDSPAGE)、免疫印迹法(Western blotting)和反相高效液相色谱... 详细信息

目的:重组人溶菌酶(rhLYZ)滴眼液经家兔干眼模型的药效学实验后,测定分析兔眼房水中重组人溶菌酶的含量,综合判断rhLYZ进入房水的可能性。方法:通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDSPAGE)、免疫印迹法(Western blotting)和反相高效液相色谱法(RP-HPLC),分别对兔眼房水中的rhLYZ进行定性分析及定量检测。结果:经3种方法对测定结果的比对及综合分析,用药组兔眼房水中,准确定性和定量检测到rhLYZ的样本仅有2个(n=18)。结论:经滴眼,在干眼的治疗过程中,初步判断rh LYZ基本在眼表发挥作用,通过眼表进入房水的可能性较低,或进入房水的量甚微,在药物代谢实验中需采用更为灵敏的方法进行检测分析。

关键词：兔房水重组人溶菌酶 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳免疫印迹反相高效液相色谱法

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鼓槌石斛的种源鉴定及种植情况

北方园艺 2018年第10期 149-156页

作者：高燕李桂琳周侯光罗凯姜艳李泽生云南省德宏热带农业科学研究所云南瑞丽678600 瑞丽金润生物科技有限责任公司云南瑞丽678600

课题组通过实地考察,总结了鼓槌石斛种源的纯正性及种源鉴定,并对现有资源及种植产业发展现状和种植技术进行了调查总结。现有的种源鉴定主要还是形态学等生物学特性鉴定,包括植株形态、生长环境、花的结构。结果表明:历经20年的发展,... 详细信息

课题组通过实地考察,总结了鼓槌石斛种源的纯正性及种源鉴定,并对现有资源及种植产业发展现状和种植技术进行了调查总结。现有的种源鉴定主要还是形态学等生物学特性鉴定,包括植株形态、生长环境、花的结构。结果表明:历经20年的发展,云南鼓槌石斛人工栽培面积达733.1hm^2,投产面积达722.1hm^2,产鲜花1 198.21t,实现产值2 396.4万元,产鲜茎13 309.7t,实现产值15 962.4万元。该研究结果将为鼓槌石斛优良品种选育,鼓槌石斛产业的健康、可持续发展提供技术支撑。

关键词：鼓槌石斛种源鉴定种植调查产业发展

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重组人溶菌酶活性检测方法研究

中国新药杂志 2019年第9期28卷 1070-1074页

作者：李晓颖高恩杨金芳李敏杨小琳赵金礼陕西慧康生物科技有限责任公司西安710054

目的:本研究旨在以分光光度法为基础,建立重组人溶菌酶原料药和重组人溶菌酶滴眼液的活性检测方法,并对其进行方法学研究。用于重组人溶菌酶原料药和滴眼液的质量控制。方法:依据卫生部药品标准,采用分光光度法,对重组人溶菌酶活性检测... 详细信息

目的:本研究旨在以分光光度法为基础,建立重组人溶菌酶原料药和重组人溶菌酶滴眼液的活性检测方法,并对其进行方法学研究。用于重组人溶菌酶原料药和滴眼液的质量控制。方法:依据卫生部药品标准,采用分光光度法,对重组人溶菌酶活性检测方法的专属性、耐用性、精密度、线性范围以及准确性进行了验证。通过对重组人溶菌酶滴眼液进行同一时间不同样品不同底物,不同时间不同样品不同底物活性测定,确定重组人溶菌酶滴眼液的活性范围。结果:实验结果显示该活性检测方法专属性、耐用性、重复性、中间精密度、线性、准确度均良好。48 h耐用性(标准偏差为1 394. 4,RSD%为0. 95%);重复性(标准偏差为1 472. 0,RSD%为0. 99%),中间精密度(标准偏差1 000. 0,RSD%为0. 68%);检测下限为0. 625μg·m L^(-1),在5～25μg·m L^(-1)浓度范围内线性(标准曲线为y=0. 007 7x+0. 068 5,R^2=0. 991 1);准确性(回收率100. 7%～109. 6%,标准偏差为0. 032 2,RSD%为3. 05%);连续3批重组人溶菌酶原料活性分别为152 500,153 500和150 800 U·mg^(-1); 3批重组人溶菌酶滴眼液活性分别为142 000,140 000和133 000 U·mg^(-1)。连续3批重组人溶菌酶冻干粉和3批重组人溶菌酶滴眼液活性均稳定。结论:本方法可用于重组人溶菌酶原料药及重组人溶菌酶滴眼液的生物学活性测定。

关键词：重组人溶菌酶活性检测方法验证

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重组人源性胶原蛋白的制备及表征

生物工程学报 2019年第2期35卷 319-326页

作者：侯增淼李晓颖李敏杨金芳杨小琳赵金礼陕西慧康生物科技有限责任公司陕西西安710054

为了获得可实现工业化生产的重组人源性胶原蛋白,根据人I型胶原蛋白Gly-X-Y序列,优选亲水性的Gly-X-Y胶原肽段设计人源性胶原蛋白氨基酸序列及对应的核苷酸序列,利用酶切技术构建pPIC9K-COL表达载体,电转化毕赤酵母获得人源性胶原蛋白... 详细信息

为了获得可实现工业化生产的重组人源性胶原蛋白,根据人I型胶原蛋白Gly-X-Y序列,优选亲水性的Gly-X-Y胶原肽段设计人源性胶原蛋白氨基酸序列及对应的核苷酸序列,利用酶切技术构建pPIC9K-COL表达载体,电转化毕赤酵母获得人源性胶原蛋白毕赤酵母工程菌,并对其进行发酵罐发酵、纯化及鉴定。结果显示,获得表达量达4.5 g/L,纯度大于95%的人源性胶原蛋白,经氨基酸N端测序、分子量测定、氨基酸分析及胶原酶降解试验,确定获得的蛋白与理论的人源性胶原蛋白一级结构一致;同时胶原经冷冻干燥后进行扫描电镜分析及细胞毒性试验,确定人源性胶原蛋白冻干品具有多孔纤维网状结构及优良的细胞相容性,预示其具备作为生物医学材料的潜质。

关键词：胶原蛋白人源性毕赤酵母生物材料

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考虑合环调电约束的配电网快速重构方法

电力系统保护与控制 2019年第16期47卷 159-165页

作者：李文云曹敏李坤王丰凌万水钱祥华王金芹刘红文云南电网有限责任公司电力科学研究院云南昆明650217 云南电网有限责任公司瑞丽供电局云南瑞丽678600 上海金智晟东电力科技有限公司上海200233

为解决10 kV配电网合环调电过程针对合解环开关最优选择问题,提出了以网络损耗为目标,以合解环网络的线路功率限值、电压限值和保护限值为约束条件进行网络重构的方法。该方法采用快速改进遗传算法按开关状态进行二进制染色体编码,利用... 详细信息

为解决10 kV配电网合环调电过程针对合解环开关最优选择问题,提出了以网络损耗为目标,以合解环网络的线路功率限值、电压限值和保护限值为约束条件进行网络重构的方法。该方法采用快速改进遗传算法按开关状态进行二进制染色体编码,利用合环后网络的计算结果,构建针对基因染色体品质编码库,以校核下一代基因染色体编码,加速了算法过程。同时利用分布系数法计算解环后网络的潮流状态,避免了再次潮流计算。测试算例验证了算法的有效性,为合环调电安全实施提供了保证。

关键词：配电网合环调电网络重构遗传算法