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基于主成分分析、正交偏最小二乘判别分析及加权逼近理想解排序-灰色关联度融合模型评价不同产地珠子参质量

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中草药 2024年第9期55卷 3116-3126页

作者：李海燕王慧然那丽莎金春花王加良牡丹江医学院附属红旗医院药学部牡丹江医学院

目的采用HPLC法对珠子参Panax japonicus中多指标成分进行定量检测,建立主成分分析（principal component analysis,PC A）、正交偏最小二乘判别分析（orthogonal partial least-squares discrimination analysis,OPL S-DA）及加权逼近理想解排序-灰色关联度（technique for order preference by similarity to an ideal solution-grey relation analysis,TOPSIS-GRA）融合模型对不同产地珠子参进行质量评价,以提高珠子参药材整体质量控制水平。方法采用外标法测定珠子参中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb2、人参皂苷Rd2、竹节参皂苷V、楤木皂苷A、竹节参皂苷IVa、越南参皂苷R4、齐墩果酸、镰叶芹醇、豆甾醇和β-谷甾醇含量,定量检测条件为Agilent Eclipse Plus C18色谱柱,流动相乙腈-0.2%磷酸梯度洗脱,检测波长205 nm,柱温30℃。以珠子参中13种成分含量为变量,通过PCA降维获得主成分并实现对样品分组,在样品分组基础上采用OPLS-DA挖掘影响珠子参质量的差异性标志物。建立加权TOPSIS-GRA融合模型对不同产地珠子参综合质量进行评价。结果珠子参中13种成分在各自范围内线性关系良好（r>0.999）,平均加样回收率为96.76%～100.06%（RSD<2.0%）,精密度、稳定性和重复性试验结果符合《中国药典》 2020年版规定。PCA结果显示前2个主成分特征值分别为9.757和1.976,累积方差贡献率为90.255%,15批珠子参聚为3组,呈现一定产地差异;OPLS-DA结果显示竹节参皂苷Ⅳa、竹节参皂苷V、人参皂苷Rd2、β-谷甾醇、楤木皂苷A和人参皂苷Re是影响珠子参质量的差异性标志物。加权TOPSIS-GRA融合模型结果显示15批珠子参样品的平均相对贴近度（γi）为0.261 3～0.743 2,珠子参产品质量存在一定产地差异,同一产地差异较小,不同产地产品质量差异较大,同时聚类结果与PCA结果一致。结论建立的HPLC多指标成分定量控制方法操作便捷、结果准确,可用于珠子参中13种成分的同步检测;PCA、OPLS-DA及加权TOPSIS-GRA融合模型合理可靠,可用于不同产地珠子参质量评价。

关键词：珠子参高效液相色谱法主成分分析 OPLS-DA 加权TOPSIS 灰色关联度分析质量评价三七皂苷R1 人参皂苷Rg1 人参皂苷Re 人参皂苷Rb2 人参皂苷Rd2 竹节参皂苷Ⅴ 楤木皂苷A 竹节参皂苷Ⅳa 越南参皂苷R4 齐墩果酸镰叶芹醇豆甾醇 β-谷甾醇

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新型“硬核软膜”结构纳米缓释制剂对瑞戈非尼的载药实验研究

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中国药学杂志 2024年第4期59卷 311-323页

作者：刘丹王宏远王晶华范兴君王强刘佳维佟雷翟凤国于凤波牡丹江医学院黑龙江牡丹江157011

目的建立的一种新型的、以聚丁二酰亚胺(polysuccinimide,PSI)与羟基磷灰石(hydroxyapatite,HAP)为基本构成成分的纳米缓释递药系统PSI-HAP,并对抗肿瘤药物瑞戈非尼的载药释药能力进行研究。方法本实验合成了制剂所需辅料HAP与PSI;建立... 详细信息

目的建立的一种新型的、以聚丁二酰亚胺(polysuccinimide,PSI)与羟基磷灰石(hydroxyapatite,HAP)为基本构成成分的纳米缓释递药系统PSI-HAP,并对抗肿瘤药物瑞戈非尼的载药释药能力进行研究。方法本实验合成了制剂所需辅料HAP与PSI;建立了紫外分光光度法对瑞戈非尼的含量进行检测;采用单因素结合响应面曲线法(box-behnken design,BBD)对不同方式制备的瑞戈非尼纳米缓释递药系统的处方与工艺进行考察;对制剂的载药与释药能力、制剂形态,Zeta电位与粒径等制剂学性质进行了考察。采用荧光染料尼罗红对载药PSI-HAP纳米粒进行标记,通过小动物活体成像技术观察纳米粒在小鼠体内的分布情况。结果经紫外扫描确定瑞戈非尼检测波长为264 nm,标准曲线为A=94.461ρ+0.0304,r^(2)=0.9998,精密度准确度实验显示,瑞戈非尼在0.002~0.02 mg·mL^(-1)内线性关系良好;BBD确定采用乳液法制备瑞戈非尼PSI-HAP制剂处方为药物浓度7.28 mg·mL^(-1),HAP与药物质量比为0.63,PSI与HAP质量比为3.93;体外释放实验结果显示,该递药系统具备pH敏感性,在pH值大于7时,药物会得到较为完全的释放。扫描电镜(SEM)结果显示,制剂粒径在300 nm上下,Zeta电位为负,与人体生物膜荷电性相同。体内分布实验结果显示,PSI-HAP制剂可显著延长制剂在动物体内的滞留时间。结论本实验建立的新型纳米递药系统的制备工艺极其简单,易于灭菌,无需高压、挤压、过滤等工艺即可制备出粒径均一的纳米粒子,药物释放平稳且具备pH敏感性,PSI与纳米HAP都具备抗肿瘤细胞增殖的作用,非常适用于抗肿瘤药物的体内递送。

关键词： “硬核软膜”结构纳米缓释瑞戈非尼 pH敏感单因素结合响应面曲线法

儿童肾母细胞瘤相关的易感综合征筛查与相应的肾母细胞瘤治疗进展

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中华小儿外科杂志 2024年第2期45卷 164-169页

作者：孙中文王富强徐青雨王慧智池成涛马志牡丹江医学院牡丹江157011 河南宏力医院心胸外科新乡453499 牡丹江医学院附属红旗医院小儿外科牡丹江157011 牡丹江医学院附属红旗医院妇产科牡丹江157011

肾母细胞瘤是儿童最常见的恶性肿瘤之一,约占儿童肿瘤的7%。其中10%~17%的肾母细胞瘤与肿瘤易感综合征(cancer predisposition syndrome,CPS)有关,此类肾母细胞瘤发病更早,恶性度及双侧发病率更高。目前非易感型综合征的肾母细胞瘤的治... 详细信息

肾母细胞瘤是儿童最常见的恶性肿瘤之一,约占儿童肿瘤的7%。其中10%~17%的肾母细胞瘤与肿瘤易感综合征(cancer predisposition syndrome,CPS)有关,此类肾母细胞瘤发病更早,恶性度及双侧发病率更高。目前非易感型综合征的肾母细胞瘤的治疗生存率可达90%以上,治疗方案包括手术及联合放化疗,而易感型综合征肾母细胞瘤治愈成功率较低,为了保留肾单位、改善预后,其治疗也各不相同。与肾母细胞瘤相关的CPS有WAGR综合征、Denys-Drash综合征和Beckwith-Wiedemann综合征等。目前国内医师缺少对肾母细胞瘤相关的易感综合征预防及诊断的认识,本文通过回顾相关文献,对肾母细胞瘤相关的易感综合征的筛查和相应的肾母细胞瘤治疗方法进行综述。

关键词：肾母细胞瘤综合征筛查治疗

基于NF-κB/CREB/RUNX2通路探讨蒲公英水提物对肾结石大鼠肾脏的保护作用

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中草药 2024年第14期55卷 4796-4802页

作者：闫本纯李宏伟郭青鑫房小淇代启杨南锡浩张智慧邸彦橙田河牡丹江医学院附属红旗医院泌尿外科黑龙江牡丹江157000 牡丹江医学院第一临床医学院黑龙江牡丹江157011

目的基于核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)/环磷酸腺苷应答元件结合蛋白(cyclic adenosine monophosphate response element blinding protein,CREB)/核心结合蛋白因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX2)通路探讨蒲公英水提物对肾结石大鼠肾脏的保护作用。方法通过向饮用水中加入2%氯化铵、1%乙二醇制备肾结石大鼠,将造模大鼠随机分为模型组、蒲公英水提物(低、高剂量100、200 mg/kg)组、排石颗粒(100 mg/kg)组和蒲公英水提物(200 mg/kg)+NF-κB激活剂(佛波酯,5 mg/kg)组,并以正常大鼠为对照组。给予药物干预后,检测大鼠肾功能指标[尿素氮(urea nitrogen,BUN)、血肌酐(blood creatinine,Scr)]、尿生化指标(尿蛋白、Ca^(2+))、肾脏指数、血清中炎性因子[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6、IL-1β)]、肾组织中氧化应激指标[丙二醛(malondialdehyde,MDA)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)]水平;采用苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织病理变化;TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡情况;Western blotting检测肾组织中NF-κB/CREB/RUNX2通路相关蛋白表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中BUN、Scr、尿蛋白、Ca^(2+)、IL-6、IL-1β水平以及肾脏指数、肾组织MDA水平、细胞凋亡率、肾组织p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-CREB/CREB、RUNX2表达均显著升高(P<0.05),肾组织SOD活性显著降低(P<0.05)。与模型组比较,蒲公英水提物各剂量组和排石颗粒组血清中BUN、Scr、尿蛋白、Ca^(2+)、IL-6、IL-1β水平以及肾指数、肾组织MDA水平、细胞凋亡率、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-CREB/CREB、RUNX2表达显著降低(P<0.05),肾组织SOD活性显著升高(P<0.05)。给予NF-κB激活剂后,蒲公英水提物对以上指标的作用均被显著逆转(P<0.05)。结论蒲公英水提物可通过调节NF-κB/CREB/RUNX2通路保护肾结石大鼠肾脏。

关键词：蒲公英水提物芦丁总黄酮 NF-κB/CREB/RUNX2通路肾结石肾脏

松茸多糖对1-甲基-4-苯基-吡啶离子诱导PC12细胞损伤的影响

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解剖学报 2024年第1期55卷 49-54页

作者：吕海燕沈西雅赵富生朱梅牡丹江医学院基础医学院组织学与胚胎学教研室黑龙江牡丹江157011

目的探讨松茸多糖(TMP)对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP^(+))诱导PC12细胞损伤的保护作用机制。方法选用MPP+体外构建PC12细胞帕金森病(PD)模型,将PC12细胞随机分为5组:对照组(Ctrl)、模型组(MDL)、TMP高浓度(250μg/L)组(TMP-H)、TMP中浓... 详细信息

目的探讨松茸多糖(TMP)对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP^(+))诱导PC12细胞损伤的保护作用机制。方法选用MPP+体外构建PC12细胞帕金森病(PD)模型,将PC12细胞随机分为5组:对照组(Ctrl)、模型组(MDL)、TMP高浓度(250μg/L)组(TMP-H)、TMP中浓度(50μg/L)组(TMP-M)和TMP低浓度(10μg/L)组(TMP-L),每组3个复孔。TMP处理PC12细胞24 h后,250μmol/L MPP+诱导PC12细胞24 h制备PD细胞模型。用CCK-8法检测各组PC12细胞的细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)法检测各组PC12细胞的LDH释放量,荧光显微镜摄片检测线粒体活性,Image J 1.53 r软件计算线粒体网络分支平均长度及网络分支数,JC-1法检测线粒体膜电位,Western blotting检测蛋白Bcl-2/Bax比值。结果与Ctrl组相比,MDL组PC12细胞存活率下降,LDH释放水平升高,线粒体膜电位(ΔΨm)及Bcl-2/Bax比值下降(均P<0.05);加入不同浓度的TMP后,与MDL组相比,TMP-H组和TMP-M组细胞存活率均上升,LDH释放水平降低,ΔΨm及Bcl-2/Bax比值增高(P<0.05),线粒体活性增加,线粒体网络分支平均长度及网络分支数量增多,拮抗膜电位降低(P<0.05),其中TMP-H组在拮抗膜电位的降低作用中更为明显。结论TMP对MPP+所致的PC12细胞损伤具有保护作用,可能是通过提高细胞存活率,降低LDH释放量,拮抗线粒体膜电位的降低,修复线粒体网络形态,从而减少细胞凋亡而实现的。

关键词：松茸多糖线粒体膜电位帕金森病 PC12细胞免疫印迹法

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脊髓损伤神经调控重建脊髓中继环路

中国矫形外科杂志 2024年第13期32卷 1204-1209页

作者：李艺李文媛王淑影王莹牡丹江医学院解剖教研室黑龙江牡丹江157011

脊髓损伤(spina cord injury,SCI)破坏大脑和脊髓中神经环路间的信号传递,造成永久性运动、感觉丧失及自主神经功能障碍等。位于脊髓损伤灶上端和下端大多数神经环路在解剖学上保持完整,上述环路可通过脊髓中继神经环路传递下行运动信... 详细信息

脊髓损伤(spina cord injury,SCI)破坏大脑和脊髓中神经环路间的信号传递,造成永久性运动、感觉丧失及自主神经功能障碍等。位于脊髓损伤灶上端和下端大多数神经环路在解剖学上保持完整,上述环路可通过脊髓中继神经环路传递下行运动信号。因此,重建中继性神经环路是最具前途的治疗策略之一。其中神经调控技术能够利用残余大脑、脑干和脊髓神经元重建脊髓中继神经环路,改善SCI后神经功能障碍。为了解神经调控技术重建SCI后中继神经环路的最新进展,本文针对SCI后大脑皮质、脑干和脊髓的中继神经环路重建进行综述,进一步讨论SCI后相关神经环路神经调控的潜在机制及其意义。

关键词：神经调控脊髓损伤神经环路功能整合中继通路

异钩藤碱调节EGFR/FAK信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和5-FU耐药性的影响

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药物评价研究 2024年第6期47卷 1267-1274页

作者：李海燕栗昭生赵龙金春花张鼐鹏牡丹江医学院附属红旗医院药学部牡丹江医学院第一临床医学院牡丹江医学院附属红旗医院神经内科牡丹江医学院附属红旗医院普外二科

目的探讨异钩藤碱调节表皮生长因子受体（EGFR）/局部黏着斑激酶（FAK）信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药性的影响。方法取对数生长期的HepG2细胞，分为对照组，异钩藤碱低、中、高浓度(32.5、65.0、130.0μmol... 详细信息

目的探讨异钩藤碱调节表皮生长因子受体（EGFR）/局部黏着斑激酶（FAK）信号通路对肝癌细胞增殖、迁移和5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药性的影响。方法取对数生长期的HepG2细胞，分为对照组，异钩藤碱低、中、高浓度(32.5、65.0、130.0μmol·L-1)组，异钩藤碱(130μmol·L-1)+EGFR激活剂NSC228155(2μmol·L-1)组；对数生长期的5-FU耐药肝癌细胞系HepG2/5-FU分为对照组、异钩藤碱(130μmol·L-1)组、5-FU(60μmol·L-1)组、异钩藤碱(130μmol·L-1)+5-FU(60μmol·L-1)组、异钩藤碱(130μmol·L-1)+5-FU(60μmol·L-1)+NSC228155(2μmol·L-1)组。给药处理24 h，对照组不给药。EdU染色、CCK-8检测HepG2或HepG2/5-FU细胞增殖；划痕实验检测HepG2或HepG2/5-FU细胞迁移；Western blotting检测细胞中细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、迁移侵袭增强子因子1（MIEN1）、P-糖蛋白（P-gp）、p-EGFR、p-FAK蛋白表达。结果与对照组相比，异钩藤碱低、中、高浓度组EdU阳性率、吸光度(A450)值、划痕愈合率、CyclinD1、MIEN1、p-EGFR、p-FAK蛋白表达显著降低，且呈浓度相关性（P<0.05）；与异钩藤碱130.0μmol·L-1组相比，异钩藤碱+NSC228155组HepG2细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、 CyclinD1、 MIEN1、 p-EGFR、 p-FAK蛋白表达显著升高（P<0.05）。与对照组相比，5-FU组HepG2/5-FU细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK蛋白表达显著降低（P<0.05）；与异钩藤碱组、5-FU组相比，异钩藤碱+5-FU组HepG2/5-FU细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK蛋白表达降低（P<0.05）；与异钩藤碱+5-FU组相比，异钩藤碱+5-FU+NSC228155组HepG2/5-FU细胞EdU阳性率、A450值、划痕愈合率、P-gp、p-EGFR、p-FAK蛋白显著上调（P<0.05）。结论异钩藤碱抑制HepG2细胞增殖、迁移及降低5-FU耐药性的机制可能与阻断EGFR/FAK通路有关。

关键词：异钩藤碱肝癌表皮生长因子受体/局部黏斑激酶(EGFR/FAK)通路增殖迁移 5-FU耐药性 P-糖蛋白(P-gp)

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复合改性大豆分离蛋白乳液冻融稳定性研究

粮食与油脂 2024年第6期37卷 49-54页

作者：李少康武琼琼袁雪春藏小丹牡丹江医学院黑龙江牡丹江157000

以大豆分离蛋白为原料,利用超声波协同木瓜蛋白酶对大豆分离蛋白进行改性,并利用高速均质机将改性后的产物制备成O/W型乳状液。以乳化活性指数为指标,在单因素试验基础上通过正交试验确定最佳改性条件。结果表明:最佳改性条件为料液比为... 详细信息

以大豆分离蛋白为原料,利用超声波协同木瓜蛋白酶对大豆分离蛋白进行改性,并利用高速均质机将改性后的产物制备成O/W型乳状液。以乳化活性指数为指标,在单因素试验基础上通过正交试验确定最佳改性条件。结果表明:最佳改性条件为料液比为7∶100(g/mL)、酶添加量6000 U/g(以大豆分离蛋白质量计)、水解时间1.5 h。在此条件下得到的改性大豆分离蛋白与木瓜蛋白酶改性大豆分离蛋白相比,乳化性提高了4.567%,经过3次冻融循环后,其乳状液分层系数和出油率明显下降。

关键词：大豆分离蛋白木瓜蛋白酶超声波技术乳化性冻融稳定性

茯苓酸对肾癌细胞上皮间质转化和免疫逃逸的影响

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南开大学学报（自然科学版） 2024年第2期57卷 22-27页

作者：李伟博何春艳张玲玲王静邸彦橙牡丹江医学院附属红旗医院泌尿外科黑龙江牡丹江157011 牡丹江医学院基础医学院黑龙江牡丹江157011

选取786-O细胞随机分为空白组、茯苓酸组、CXCL12组、CXCL12-CXCR4抑制剂-AMD3100组、茯苓酸+CXCL12组、茯苓酸+AMD3100组,CCK-8检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移、侵袭;免疫荧光检测EMT相关因子-E-钙粘素(E-Cadherin)、锌指转录因子... 详细信息

选取786-O细胞随机分为空白组、茯苓酸组、CXCL12组、CXCL12-CXCR4抑制剂-AMD3100组、茯苓酸+CXCL12组、茯苓酸+AMD3100组,CCK-8检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移、侵袭;免疫荧光检测EMT相关因子-E-钙粘素(E-Cadherin)、锌指转录因子(Snail)、N-钙黏素(N-Cadherin)的表达;与CD8+T细胞共培养,Elisa检测上清液中免疫逃逸相关因子-白细胞介素(IL)-4和IL-10、干扰素(IFN)-γ水平;Western blot检测CXCL12、CXCR4、CXCR7及免疫逃逸蛋白PD-L1表达.探讨茯苓酸调节CXCL12-CXCR4/CXCR7信号通路对肾癌细胞上皮间质转化(EMT)和免疫逃逸的影响.结果显示与空白组相比,茯苓酸组细胞增殖率、迁移、侵袭数、Snail、N-Cadherin IOD值、IL-10水平、CXCL12、CXCR4、CXCR7以及PD-L1表达显著降低,E-Cadherin IOD值、IFN-γ、IL-4水平显著增加(P<0.05);与茯苓酸组相比,茯苓酸+CXCL12组细胞增殖率、迁移、侵袭数、Snail、N-Cadherin IOD值、IL-10水平、CXCL12、CXCR4、CXCR7以及PD-L1表达显著增加,E-Cadherin IOD值、IFN-γ、IL-4水平显著降低(P<0.05);与CXCL12组相比,茯苓酸+CXCL12组细胞增殖率、迁移、侵袭数、Snail、N-Cadherin IOD值、IL-10水平、CXCL12、CXCR4、CXCR7以及PD-L1表达显著降低,E-Cadherin IOD值、IFN-γ、IL-4水平显著增加(P<0.05);与茯苓酸组、AMD3100组相比,茯苓酸+AMD3100组细胞增殖率、迁移、侵袭数、Snail、N-Cadherin IOD值、IL-10水平、CXCL12、CXCR4、CXCR7以及PD-L1表达显著降低,E-Cadherin IOD值、IFN-γ、IL-4水平显著增加(P<0.05).表明茯苓酸可调节CXCL12-CXCR4/CXCR7信号通路阻止肾癌细胞免疫逃逸及EMT.

关键词：茯苓酸 CXCL12-CXCR4/CXCR7信号通路肾癌细胞免疫逃逸上皮间质转化